脐带间充质干细胞的培养皿的制作方法

本实用新型涉及培养皿，具体地说涉及一种脐带间充质干细胞的培养皿。

背景技术：

现有的脐带间充质干细胞的分离主要是采用组织块贴壁培养法，具体是将脐带组织表面消毒杀菌，去除脐带内的血管和凝血，然后将洗净的脐带组织剪碎成2-4mm²左右大小，整齐排列于细胞培养瓶或培养皿内，静置一段时间时脐带组织块牢牢粘附于培养瓶上，加入一定体积的体积的培养液静置于细胞培养孵箱内。因为脐带间充质有贴壁生长的特性，会从组织块边缘游离出来贴附在培养瓶内壁上生长。

脐带间充质干细胞的贴壁过程往往需要静置一周左右的时间，因此在加入培养液时需要加入足量的培养液。然而脐带组织块在足量培养液中静置培养的过程中，其边缘渐渐无法紧密贴附于培养瓶上，甚至会整块脱离培养瓶，漂浮于培养液中。这种现象在第一次换培养液时更明显，大部分组织块都会在第一次换培养液的过程中脱离培养瓶。脐带组织块在贴壁培养过程中，仅下表面与培养瓶接触，上表面和四周都不能与培养瓶接触，导致接触面积小。组织块贴壁不牢和接触面积小直接影响到了脐带间充质干细胞的贴壁。此方法的缺点就是组织块出细胞率低，出细胞数量少，换培养液不方便，培养周期长等。

技术实现要素：

本实用新型要解决的技术问题是提供一种组织块出细胞率较高，出细胞数量多，方便更换培养液，减少培养周期的脐带间充质干细胞的培养皿。

为了解决上述技术问题，本实用新型的技术方案为：一种脐带间充质干细胞的培养皿，包括培养皿底、培养板和培养皿上盖，所述培养板四周边缘对称位置设有4个卡扣；所述培养板边缘两两所述卡扣之间设有换液孔；所述培养板上均匀设有多个小孔；所述培养板的底部设有四个底脚；所述培养板中间设有突起；所述培养板通过所述卡扣和底脚固定在所述培养皿底上。

优选地，所述培养板的厚度为1mm、直径为8.5cm。

优选地，所述小孔直径为2mm。

优选地，所述小孔与小孔之间距离为5mm。

优选地，所述培养板与培养皿底的间隙5mm。

优选地，所述突起高为1cm、宽为0.5cm、厚为0.2cm。

优选地，所述换液孔为半圆形，半径为0.5cm。

本实用新型的有益效果是：本实用新型使用过程中，通过将脐带组织卡在培养板的小孔中，可以使脐带组织块固定，并紧密的与培养板接触；脐带组织块和培养板的上下两面接触，增加了接触面积；通过换液孔，可方便的更换培养液，而不用担心脐带组织块会漂浮起来；这种培养体系方便使用显微镜进行观察，当脐带间充质干细胞在培养板上贴壁生长到足够数量后，可用胰酶消化，收集消化液离心，就可收集脐带间充质干细胞。用缓冲液冲洗过的培养板还可继续培养；通过这种连续培养，可获得数量更多的脐带间充质干细胞。

附图说明

图1为本实用新型脐带间充质干细胞的培养皿的培养皿底、培养板和培养皿上盖的结构爆炸图；

图2为本实用新型脐带间充质干细胞的培养板的俯视图；

图3为图2的A-A剖视图。

具体实施方式

下面结合附图对本实用新型的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本实用新型，但并不构成对本实用新型的限定。此外，下面所描述的本实用新型各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。

如图1至图3所示，本实用新型一种脐带间充质干细胞的培养皿，它包括培养皿底1、培养板2和培养皿上盖3三部分，其中培养皿底1(直径8.8cm)和培养皿上盖3(直径9cm)和普通的细胞培养皿一样；培养板2为聚苯乙烯，材料表面经过真空等离子贴壁表面处理技术处理；培养板2的厚度为1mm直径为8.5cm；便于与培养皿底1配合使用；在培养板2四周边缘对称位置设有4个卡扣21；卡扣21为倾斜培养板2面设置；培养板2的底部设有四个底脚24；培养板2通过卡扣21和底脚24固定在培养皿底1上；具体是将卡扣21卡在培养皿底1的口部边缘往培养皿底部稍稍下压，卡扣21受弹性形变而固定在培养皿底1边缘，底脚24起支撑的作用而固定；培养板2边缘两两卡扣21之间设有换液孔22；换液孔22为半圆形，半径为0.5cm，方便换培养液；培养板2上均匀设有多个小孔23；小孔23直径为2mm；小孔23与小孔23之间距离为5mm；在培养板2中间设有突起4；突起4高度为1cm、宽为0.5cm、厚为0.2cm，方便提起整块培养板。

本实用新型具体是这样进行的，使用时，将洗净的脐带组织剪碎成2-4mm²左右大小，将剪碎的组织块用注射器针头塞进培养板的小孔23中，使组织块卡在小孔23中并从两端冒出；将所有的小孔23填满后，将培养板2放入培养皿底1培养板与培养皿底间隙5mm；加入培养液静置培养。

通过将脐带组织卡在培养板的小孔中，可以使脐带组织块固定，并紧密的与培养板接触；脐带组织块和培养板的上下两面接触，增加了接触面积；通过换液孔，可方便的更换培养液，而不用担心脐带组织块会漂浮起来；这种培养体系方便使用显微镜进行观察，当脐带间充质干细胞在培养板上贴壁生长到足够数量后，可用胰酶消化，收集消化液离心，就可收集脐带间充质干细胞。用缓冲液冲洗过的培养板还可继续培养。通过这种连续培养，可获得数量更多的脐带间充质干细胞。

以上结合附图对本实用新型的实施方式作了详细说明，但本实用新型不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本实用新型原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本实用新型的保护范围内。