一种极长链霉菌菌株sl01、其微生物菌剂及其应用_2

文档序号:8375861阅读:来源:国知局
生殖生长等有明显 的促进作用,实验证明,本发明微生物菌剂可分别提高棉花的籽棉亩单产25. 8 %,皮棉亩单 产 25. 1%。 (3) 绿色无公害:本发明微生物菌剂是由极长链霉菌、部分培养基和基质组成,均为无 毒无公害物质,在棉花生产中使用具有无毒、无污染、无残留的优点,是环境友好型产品,克 服了传统化学药剂防治棉花枯萎病带来的环境危害及病原菌抗药性,符合我国绿色生产的 要求,并且制备工艺简单,成本低,具有很好的生态和社会效益,开发应用前景广阔。
【附图说明】
[0017] 图1为极长链霉菌SL01对棉花枯萎菌皿内对峙图。
[0018] 图2为极长链霉菌SL01对棉花炭疽菌皿内对峙图。
[0019] 图3为极长链霉菌SL01对棉花枯萎菌菌丝的抑制作用(图A为被抑制菌丝,图B 为正常菌丝)。
[0020] 图4为极长链霉菌SL01对棉花炭疽菌菌丝的抑制作用(图A为被抑制菌丝,图B 为正常菌丝)。
[0021] 图5为极长链霉菌SL01的扫描电镜图。
[0022] 图6为极长链霉菌菌株SL01系统发育树。
[0023] 图7为极长链霉菌SL01的微生物发酵粉剂。
[0024] 图8为极长链霉菌SL01对棉花枯萎菌分生孢子萌发的抑制作用(图A为SL01发 酵液处理24h分生孢子萌发情况;图B为对照24h分生孢子萌发情况)。
【具体实施方式】
[0025] 下面结合实施例对本发明进一步加以说明。
[0026] 实施例1 :极长链霉菌菌株SL01的获得及抑菌谱测定
[0027] 采集自陕西泾阳棉花地块的土壤,用平板稀释法分离获得一株菌落为玫瑰红色的 菌株,经纯化后,以棉花黄萎菌、棉花枯萎菌、西瓜枯萎菌、番茄叶霉菌、番茄灰霉菌、苹果腐 烂菌、苹果炭疽菌、粉红聚端孢菌8种病原菌为靶标,测定SL01的抑菌谱,由表1及图1~ 图4可知,极长链霉菌菌株SL01抑菌谱较广,对上述8种病原真菌都具有较强的拮抗作用, 其拮抗作用均在69. 0%以上,特别对棉花枯萎菌的抑制作用最强(77. 76% )。 表1极长链霉菌SL01对不同病原真菌的抑制作用
【主权项】
1. 一种极长链霉菌(Streptomyceslongissimus)菌株SL01,其特征在于,所述菌株 SLOl保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其简称为CGMCC,保藏编号 为CGMCCNo. 9543,保藏日期为2014年8月25日。
2. 根据权利要求1所述极长链霉菌菌株SLOl,其特征在于,所述菌株SLOl的16SrDNA 部分序列的GenBank登录号为KM670435。
3. 根据权利要求1或2所述的极长链霉菌菌株SLOl在抑制棉花枯萎菌、棉花黄萎菌、 西瓜枯萎菌、番茄叶霉菌、番茄灰霉菌、苹果腐烂菌、棉花炭疽菌和粉红聚端孢菌中的一种 或多种植物病原真菌中的应用。
4. 一种微生物菌剂,其特征在于,包括权利要求1或2所述极长链霉菌菌株SLOl。
5. 根据权利要求4所述的微生物菌剂,其特征在于,所述极长链霉菌菌株SLOl总活菌 数不低于lX108cfu/g。
6. -种如权利要求4或5所述的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: (1) 活化菌株:将保存的极长链霉菌SLOl划线转接到高氏平板中,置于培养箱28~ 30°C恒温培养4~6天; (2) 制备种子液:将步骤(1)中制备的极长链霉菌SLOl的菌落接种到高氏液体培养 基中,在28~30°C,120~180rpm摇床振荡培养48~96h,调节浓度至IX107cfu/mL~ 9X107cfu/mL,得到种子液; (3) 制备微生物菌剂:将步骤(2)中制备的种子液,以种子液体积数与基质质量比为 20~30%接种量与基质混合均匀,28~30°C,相对湿度20~30%,发酵培养8~10天后, 即得微生物菌剂初产物,测定其含菌量并干燥,即得微生物菌剂。
7. 根据权利要求6所述的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: (1) 活化菌株:将保存的极长链霉菌SLOl划线转接到高氏平板中,置于培养箱28°C恒 温培养5天; (2) 制备种子液:将步骤(1)中制备的极长链霉菌SLOl的菌落接种到高氏液体培养 基中,28 °C,150rpm摇床振荡培养72h,调节浓度至IO7Cfu/mL,得到种子液,其中,所述高 氏液体培养基由可溶性淀粉 20g,KNO3lg,K2HPO4 0? 5g,MgSO4 ? 7H20 0? 5g,NaCl0? 5g, FeSO4 ? 7H20 0?Olg,自来水补足至lOOOmL,pH调至7. 2~7. 4,在I. 05kg/cm2蒸气压力下, 灭菌20min制备而成; (3) 制备微生物菌剂:将步骤(2)中制备的种子液,以种子液体积数与基质质量比为 25%接种量与基质混合均匀,28°C,相对湿度25%,发酵培养9天后,即得微生物菌剂初产 物,测定其含菌量并干燥,即得微生物菌剂,其中,所述基质由85%大米粉、12%玉米秸杆、 3%小米粉,在1.051^/〇11 2蒸气压力下,灭菌2〇111;[11制备而成。
8. 根据权利要求4或5所述的微生物菌剂在防治棉花枯萎病中的应用。
9. 根据权利要求8所述的微生物菌剂在防治棉花枯萎病中的应用,其特征在于,在室 内防治中,将所述微生物菌剂初产物调节浓度至2X106Cfu/mL~2X107cfu/mL,均匀喷洒 植株叶片至泾流或IOmL/株灌根处理。
10. 根据权利要求8所述的微生物菌剂在防治棉花枯萎病中的应用,其特征在于,在 大田防治中,按照微生物发酵粉剂与土壤的质量比为1 : 100充分混匀,在棉花播种时,按 IOg/颗棉花种子的量拌种施用。
【专利摘要】一种极长链霉菌菌株SLO1、其微生物菌剂及其应用,所述菌株SLO1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其简称为CGMCC,保藏编号为CGMCC No.9543,保藏日期为2014年8月25日。本发明还包括含有该极长链霉菌的微生物菌剂及其该极长链霉菌在抑制多种植物病原真菌中的应用,含有该极长链霉菌的微生物菌剂在防治棉花枯萎病中的应用。本发明极长链霉菌菌株SLO1对棉花枯萎菌的拮抗作用显著,SLO1发酵液盆栽防效可达75.24%;本发明微生物菌剂制备工艺简单,成本低,与棉花种子拌种能够有效抑制棉花枯萎病的发生,符合我国绿色生产的要求,属于环境友好型产品,并且具有很好的生态和社会效益,开发应用前景广阔。实验证明,该微生物菌剂大田单次使用处理150d后,其防效均在50.0%以上,可分别提高棉花的籽棉亩单产25.8%,皮棉亩单产25.1%。CGMCC No.954320140825
【IPC分类】A01N63-00, A01P3-00, C12N1-20, C12R1-465
【公开号】CN104694429
【申请号】CN201510094922
【发明人】王阳, 宗兆锋, 甘良
【申请人】西北农林科技大学
【公开日】2015年6月10日
【申请日】2015年3月3日
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