胺1在溶剂如1，4-二噁烷中，在碘化铜（I)，碳酸钾或碳酸铯，螯合1，2-二氨基化合物如 N，N'_二甲基乙二胺或反式-1，2-二氨基-环己烷或螯合0酮酸酯化合物如2-异丁酰 基-环己酮存在下，在升高的温度，优选通过微波加热，反应，从而形成内酰胺取代的杂环 化合物3和5,如方案la和方案lb中所述（步骤a)。氨基化合物4或6 (已知的或可以容 易地通过本领域已知的方法制备的化合物）与取代的吡啶化合物3反应，在与用于步骤a 的条件类似的条件（伯氨化合物4或6优选的条件）下（步骤b)，或通过使用'Buchwald' 条件，例如使用催化剂如Pd (OAc) 2和螯合配体如Xanphos，在碱如t-BuONa存在下，在溶剂 如二卩恶烷中，在升高的温度（仲氨化合物4或6优选的条件），从而提供化合物5或7。然 后可以通过以下方式将具有作为保护基的R m(例如Boc基团）的化合物5转化为化合物7 : 除去保护基Rm并且与合适的活化的羧基或磺酰基化合物反应（步骤c，d ;方案la和lb)。
[0182] 方案 la
[0184] X 是卤素或 0S02CF3
[0185] R1M是合适的保护基 [0186]方案 lb
[0187]
[0188] X 是卤素或 0S02CF3
[0189] R101是合适的保护基或A-R 12
[0190] 氨基甲酸酯101(方案2a)与多磷酸在升高的温度（例如100-180°C )反应以 形成3, 4-二氢-2H-异喹啉-1-酮衍生物102 (步骤a)。三氟乙酰胺103可以通过用多 聚甲醛在浓硫酸和乙酸的混合物中优选在大约室温处理环化成1_(3, 4-二氢-1H-异喹 啉-2-基）-2, 2, 2-三氟-乙酮化合物104(步骤b)。通过用例如氢氧化钾在溶剂如乙醇中在 大约室温的温度处理除去三氟乙酰基给出四氢-异喹啉化合物105 (步骤c)。四氢-异喹啉 化合物105例如用亚碘酰苯和溴化钾优选在水中的氧化给出3, 4-二氢-2H-异喹啉-1-酮 化合物102 (步骤d)。异吲哚-1，3-二酮化合物106 (方案2b)与格氏试剂R:MgX在溶剂如 THF中优选在大约0°C的反应给出加合物107 (步骤e)。随后用三乙基硅烷和三氟化硼醚合 物在溶剂如二氯甲烷中并在优选在_25°C至RT之间的温度范围处理给出异吲哚酮化合物 108 (步骤f)。将甲氧基苄基保护基引入到异吲哚酮化合物109中（例如通过用双（三甲基 甲硅烷基）氨基钠和1-溴甲基-4-甲氧基-苯在THF中在0°C至RT之间处理）给出保护 的化合物11〇(步骤g);类似地，可以将甲氧基苄基保护基引入到化合物108中。带有另外 的甲氧基苄基保护基的化合物108或化合物110用碱如氢化钠在溶剂如THF中然后用烷基 卤，甲磺酸酯或甲苯磺酸酯优选在RT至溶剂的回流温度之间的处理给出具有结构上不同 或结构上相同的R 1和R2基团的化合物111 (步骤h)。备选地，带有另外的甲氧基苄基保护 基的化合物108或化合物110用碱如NaH，LDA或LiHMDS在溶剂如DMF，四氢呋喃或1，2-二 甲氧基乙烷中然后用一种或顺次用两种不同烷基卤，甲磺酸酯或甲苯磺酸酯优选在_78°C 至溶剂的回流温度之间的处理给出具有结构上不同或结构上相同的R 1和R2基团的化合物 Ill(步骤h)。保护基的除去，例如通过用三氟乙酸在升高的温度处理给出异吲哚酮化合物 112 (步骤i)。备选地（方案2c)，其中R1和R2是烷基的化合物114可以通过以下方式获得 自氰基化合物113和合适的Grignard试剂：顺序地加入两种不同的试剂或加入过量的单独 的Grignard试剂（以获得具有相同R 1和R2的化合物），优选在四异丙醇钛存在下，在溶剂 如THF中，优选在0°C至RT的温度范围（步骤k)。其中R 1 = H而R 2是烷基的化合物114 可以通过以下方式获得自氰基化合物113和合适的Grignard试剂：在溶剂如THF中，优选 在0°C至RT的温度范围（步骤k)，继之以在例如甲醇中在RT附近用硼氢化钠还原形成的 亚胺（步骤k)。化合物114通过以下方式进行闭环：在溶剂如DMF中，在碱如iPr 2NEt存在 下，优选在约l〇〇°C至150°C的温度范围，在高压釜中，在一氧化碳存在下，与催化剂如二氯 [1，1'_双（二苯基膦基）-二茂铁]钯（II)反应（步骤1)。
[0191] 方案 2a
[0192]
[0197] 卤素或三氟甲磺酸基取代的化合物8可以通过以下方式制备：使用如方案1中所 述的条件，将氨基化合物4与二-卤代或二-三氟甲磺酸基取代的吡啶2反应（方案3)(步 骤a)。
[0198] 方案3
[0199]
[0200] X是园素或 0S02CF3
[0201] Rm是合适的保护基或A-R12
[0202] 还是本发明的实施方案的是制备如上所定义的式（I)的化合物的方法，所述方法 包括：
[0203] a)式（II)的化合物在式（III)的化合物存在下的反应；
[0204]
[0205]或
[0206] b)式（IV)的化合物在式（V)的化合物存在下的反应；
[0207]
[0208]其中 R1，R2,R3,R4,R5,R6,R7,R8,R9,R10，R11，R12,R13,R14,A，m，n和 p是如本文中所 述的，并且X在步骤a)中是卤素或三氟甲磺酸基并且在步骤b)中是卤素。
[0209] 特别地，在步骤a)中，在碘化铜（I)，碳酸钾或碳酸铯，螯合1，2-二氨基化合物如 N，N'_二甲基乙二胺或反式-1，2-二氨基-环己烷或螯合0酮酸酯化合物如2-异丁酰 基-环己酮存在下，在升高的温度，优选通过微波加热，并且在溶剂如1，4-二卩恶烷中。
[0210] 特别地，在步骤b)，在碱如三乙胺存在下，在溶剂如二氯甲烷中，在-10°C至RT的 温度。
[0211] 同样是本发明的目的的是如本文所述的根据式（I)的化合物，其用作治疗活性物 质。
[0212] 同样是本发明目的的是一种药物组合物，其包含如本文所述的根据式（I)的化合 物和治疗惰性载体。
[0213] 本发明还涉及如本文所述的根据式（I)的化合物用于治疗或预防慢性肾病，充血 性心力衰竭，高血压，原发性醛固酮症和库欣综合征的用途。
[0214] 本发明还涉及如本文所述的根据式（I)的化合物用于治疗或预防糖尿病肾病的 用途。
[0215] 本发明还涉及如本文所述的根据式（I)的化合物用于治疗或预防肾或心脏纤维 化的用途。
[0216] 本发明还涉及如本文所述的根据式（I)的化合物用于治疗或预防慢性肾病的用 途。
[0217] 本发明还涉及如本文所述的根据式（I)的化合物用于治疗或预防充血性心力衰 竭的用途。
[0218] 本发明还涉及如本文所述的根据式（I)的化合物用于治疗或预防高血压的用途。
[0219] 本发明还涉及如本文所述的根据式（I)的化合物用于治疗或预防原发性醛固酮 症的用途。
[0220] 本发明的特别的实施方案是如本文所述的根据式（I)的化合物，所述化合物用于 治疗或预防慢性肾病，充血性心力衰竭，高血压，原发性醛固酮症和库欣综合征。
[0221] 本发明的特别的实施方案还是如本文所述的根据式（I)的化合物，所述化合物用 于治疗或预防糖尿病肾病。
[0222] 本发明的另一个特别的实施方案是如本文所述的根据式（I)的化合物，所述化合 物用于治疗或预防肾或心脏纤维化。
[0223] 本发明的特别的实施方案还是如本文所述的根据式（I)的化合物，所述化合物用 于治疗或预防慢性肾病。
[0224] 本发明的特别的实施方案还是如本文所述的根据式（I)的化合物，所述化合物用 于治疗或预防充血性心力衰竭。
[0225] 本发明的特别的实施方案还是如本文所述的根据式（I)的化合物，所述化合物用 于治疗或预防高血压。
[0226] 本发明的特别的实施方案还是如本文所述的根据式（I)的化合物，所述化合物用 于治疗或预防原发性醛固酮症。
[0227] 本发明还涉及如本文所述的根据式（I)的化合物在制备药物中的用途，所述药物 用于治疗或预防慢性肾病，充血性心力衰竭，高血压，原发性醛固酮症和库欣综合征。
[0228] 本发明还涉及如本文所述的根据式（I)的化合物在制备药物中的用途，所述药物 用于治疗或预防糖尿病肾病。
[0229] 本发明还涉及如本文所述的根据式（I)的化合物在制备药物中的用途，所述药物 用于治疗或预防肾或心脏纤维化。
[0230] 本发明的实施方案还是如本文所述的根据式（I)的化合物在制备药物中的用途， 所述药物用于治疗或预防慢性肾病。
[0231] 本发明的实施方案还是如本文所述的根据式（I)的化合物在制备药物中的用途， 所述药物用于治疗或预防充血性心力衰竭。
[0232] 本发明的实施方案还是如本文所述的根据式（I)的化合物在制备药物中的用途， 所述药物用于治疗或预防高血压。
[0233] 本发明的实施方案还是如本文所述的根据式（I)的化合物在制备药物中的用途， 所述药物用于治疗或预防原发性醛固酮症。
[0234] 本发明的目的还是一种用于治疗或预防慢性肾病，充血性心力衰竭，高血压，原发 性醛固酮症和库欣综合征的方法，所述方法包括给药有效量的如本文所述的根据式（I)的 化合物。
[0235] 本发明的目的还是一种用于治疗或预防糖尿病肾病的方法，所述方法包括给药有 效量的如本文所述的根据式（I)的化合物。
[0236] 本发明的目的还是一种用于治疗或预防肾或心脏纤维化的方法，所述方法包括给 药有效量的如本文所述的根据式（I)的化合物。
[0237] 本发明的实施方案还是一种用于治疗或预防慢性肾病的方法，所述方法包括给药 有效量的如本文所述的根据式（I)的化合物。
[0238] 本发明的实施方案还是一种用于治疗或预防充血性心力衰竭的方法，所述方法包 括给药有效量的如本文所述的根据式（I)的化合物。
[0239] 本发明的实施方案还是一种用于治疗或预防高血压的方法，所述方法包括给药有 效量的如本文所述的根据式（I)的化合物。
[0240] 本发明的实施方案还是一种用于治疗或预防原发性醛固酮症的方法，所述方法包 括给药有效量的如本文所述的根据式（I)的化合物。
[0241] 本发明的实施方案还是根据所述方法中的任一种制备的如本文所述的式（I)化 合物。
[0242] 测试稈序
[0243] 本文中发明人确定G-402细胞系作为宿主细胞来异位表达（瞬时地或稳定 地）CYP11家族的酶的用途。特别地，发明人开发了异位表达人CYP11B1，人CYP11B2,人 CYP11A1，猕猴（cynmolgus) CYP11B1或猕猴CYP11B2酶活性的稳定G-402细胞。重要地，确 定的细胞系G-402表达对于CYP11家族的活性重要的辅因子（皮质铁氧还蛋白和皮质铁氧 还蛋白还原酶）并且在这些细胞中没有检测到CYP11家族（与H295R细胞相比）的相关酶 活性。因此G-402细胞系独特地适于作为用于异位表达来自CYP11家族的酶的宿主细胞。
[0244] G-402细胞可以获自ATCC(CRL_1440)并且原本来源于肾成平滑肌瘤。
[0245]表达质粒含有在合适的启动子（CMV-启动子）和合适的耐药标记（新霉素）的 控制下用于人/猕猴（cyno)CYPllBl或CYP11B2的0RF。使用标准技术将表达质粒转染到 G-402细胞中，然后选择这些细胞用于表达给定的耐药标记。然后选择个体细胞-克隆并使 用11-脱氧皮质酮（CypllB2)或11-脱氧皮质醇（CypllBl)作为底物对于显示所需酶活性 进行评估。
[0246] 表达CYP11构成物的G-402细胞如上所述建立并在37°C、在5% C02/95%空气的 气氛下保持在含有10%FCS和400 μg/ml G418(遗传霉素（Geneticin))的改良的McCoy's 5a培养基，ATCC目录号（Catalog No.) 30-2007中。细胞酶测试在含有2. 5 %炭处理的FCS 和适宜浓度的底物（0. 3-10uM 11-脱氧皮质酮，11-脱氧皮质醇或皮质酮）的DMEM/F12培 养基中进行。对于测试酶活性，将细胞接种到96孔板上并温育16h。然后将上清液的等分 试样转移并分析预期产物（对于CYP11B2为醛固酮；对于CYP11B1为皮质醇）的浓度。这 些类固醇的浓度可以使用分析醛固酮或皮质醇的来自CisBio的HTRF测试确定。
[0247] 对产生的类固醇的释放的抑制可以用作在细胞酶测试期间加入的测试化合物的 各个酶抑制的度量。化合物对酶活性的剂量依赖性抑制通过将加入的抑制剂浓度（x-轴） 相对于测量的类固醇/产物水平（y-轴）作图计算。然后通过使用最小二乘法将以下4-参 数S形函数（Morgan-Mercer-Flodin(MMF)模型）拟合到原始数据点计算抑制：
[0248]
[0249] 其中，A是最大y值，B是使用XLFit确定的EC50因子，C是最小y值并且D是斜 率值。
[0250] 最大值A对应于在不存在抑制剂时产生的类固醇的量，值C对应于当酶被完全抑 制时检测到的类固醇的量。
[0251] 本文中请求保护的化合物的EC50值用所述的基于G402的测试系统测定。CypllB2 酶活性在1 yM脱氧皮质酮和各种量的抑制剂存在下测定；CypllBl酶活性在1 yM脱氧皮 质醇和各种量的抑制剂存在下测定。
[0252]
[0253]
[0254] 如本文所还的式U)化甘物及共约用盐现酷具有在U.OOOOOluM至lOOOuM之间 的EC5。(CYP11B2)值，特别的化合物具有在0? 00005uM至500uM之间的EC5。(CYP11B2)值， 更特别的化合物具有在〇. 〇〇〇5uM至50uM之间的EC5。(CYP11B2)值，再特别的化合物具有在 0. 0005uM至5uM之间的EC5(](C