5 : 1的 二氯甲烧-甲醇作为展开剂，W体积比10 : 90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105°C加热 3 - 5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1 - 35、流份36 - 85、流份86 - 104、流份 105 - 115、流份 116 - 132、流份 133 - 144、流份 145 - 157、流份 158 - 163、流份 164 - 170、 流份 171 - 182、流份 183 - 188、流份 189 - 195、流份 196 - 204、流份 205 - 208、流份 209 -234、流份235 - 260,得到化.1-Fr. 16个组份；将组份化.2经Se地adexLH-20凝胶柱色谱， 甲醇洗脱，每7mL为一流份，收集35个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254 薄层板，W体积比8 : 1的二氯甲烧-丙酬作为展开剂，W体积比10 : 90的硫酸-乙醇 溶液作为显色剂，l〇5°C加热3 - 5min)，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份5 - 18、流份 19 - 32、流份33 - 35,得到3个亚组份化.2-1，化.2-2,化.2-3 ;将亚组份化.2-1经开放0DS 柱色谱，用体积比60 : 40、体积比65 : 35、体积比70 : 30、体积比75 : 25的甲醇-水作 洗脱液进行梯度洗脱，收集体积比60 : 40甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬F、收集体积比65 : 35甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬C、收集体积比70 : 30甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬D、收集 体积比75 : 25甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬G。
[0017] 实施例4
[0018]本发明在具体实施中，具有神经保护作用的异戊締基化黄酬类化合物还可由小叶 莲化g为原料，W2化、体积比为75%的乙醇加热回流提取3次，提取溫度为90°C，每次提取 时间为2小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于2.化的蒸馈水中，依次W石油 酸、二氯甲烧、乙酸乙醋、正下醇萃取3次，每次2.化，时间为2小时；将乙酸乙醋萃取部位 经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为 100:0、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、 100:100、100:200、0:100的石油酸-丙酬混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用10.化洗脱 液，流速为12mLmin1，每400mL为一流份，收集260个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分 析，用GF254薄层板，分别W体积比1 : 1的石油酸-丙酬和体积比5 : 1的二氯甲烧-甲 醇作为展开剂，W体积比10 : 90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105°C加热3-5min，根据 薄层色谱检测结果，分别合并流份1 - 35、流份36 - 85、流份86 - 104、流份105 - 115、流份 116 - 132、流份 133 - 144、流份 145 - 157、流份 158 - 163、流份 164 - 170、流份 171 - 182、 流份 183 - 188、流份 189 - 195、流份 196 - 204、流份 205 - 208、流份 209 - 234、流份 235 -260,得到化.1-Fr. 16个组份；将组份化.2经Se地adexLH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，每 6mL为一流份，收集35个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，W体 积比8 : 1的二氯甲烧-丙酬作为展开剂，W体积比10 : 90的硫酸-乙醇溶液作为显色 剂，105°C加热3 - 5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份5 - 18、流份19 - 32、流份 33 - 35,得到3个亚组份化.2-1，化.2-2,化.2-3 ;将亚组份化.2-1经开放ODS柱色谱，用 体积比60 : 40、体积比65 : 35、体积比70 : 30、体积比75 : 25的甲醇-水作洗脱液进 行梯度洗脱，收集体积比60 : 40甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬F、收集体积比65 : 35甲 醇-水洗脱液得桃儿屯酬C、收集体积比70 : 30甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬D、收集体积 比75 : 25甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬G。
[0019] 本发明方法稳定可靠，易操作，所得产物经鉴定为具有保护神经作用的桃儿屯酬 C(SinoflavonoidC)、桃儿屯酬D(SinoflavonoidD)、桃儿屯酬F(SinoflavonoidF)、桃儿 屯酬G(SinoflavonoidG)，并具有保护神经的活性，有关试验资料如下：
[0020] 经过核磁共振光谱（iH-NMR、"C-NMR、HSQC、HMBC)及高分辨质谱（HR-ESI-M巧光谱 技术鉴定，其中：
[0021] 化合物I，黄色粉末，盐酸-儀粉反应呈阳性，提示可能为黄酬类化合物。 HR-ESI-MS给出准分子离子峰m/z475. 1731[M+ 化]+(calcdforCze&A化，475. 1733)， 确定分子式为〔2品8〇7。IR(邸r，cm1)显示该化合物具有游离径基（3373cm1)，缔合幾基 (1651cmi)，苯环（1613cmi)。UV(Amax)显示该化合物具有黄酬醇骨架（263,344nm)。 电NMR巧00MHz，DMS0-de)显示两组芳香质子偶合系统信号5 6.30(lH，s)、6.85(lH，d，J =8.甜z)、6. 73(lH，d，J= 8.甜Z)分别归属于黄酬母核的A环和B环，提示结构中分 别存在一个1，2, 3, 4-四取代和五取代苯环结构。由一个締氨质子信号5 5. 04(lH，tJ =6.9化），两个与季碳相连的甲基质子信号5 1.54(3&3)、1.48(3&3)，一个亚甲基质 子信号5 3.23(2&(1，1 = 6.9化），提示结构中存在一个异戊締基取代。由2组亚甲基 质子信号5 2. 59(2H，t，J= 6. 7Hz)、1.72(2H，t，J= 6. 7Hz)，两个季碳上的甲基质子信 号51. 30化H，s)，表明结构中存在1个2, 2-二甲基-二氨化喃环。1个甲氧基质子信 号 5 3. 57(3H，s)。S个酪径基质子信号 5 12. 58(lH，s)、10. 79(lH，s)、9. 18(lH，s)，其中 5 12. 58(1H，s)为与幾基缔合的5位酪径基质子信号。"CNMR(125MHz，DMSO-de)显示含有 26个碳原子，除了 1个甲氧基的碳信号5 60. 6, 一组异戊締基碳信号5 25. 8、17. 8、131. 3、 122. 6、21. 4,1 组 2, 2-二甲基-二氨化喃环的碳信号 5 20. 5、32. 2、74. 3、26. 8(X2)之外， 还给出12个芳香碳信号，1个幾基碳信号5 178. 6,两个与氧相连的締碳信号5 158.8、 139. 1，W上碳谱数据进一步表明化合物I为异戊締基化黄酬醇衍生物。HMBC谱中，由亚甲 基质子信号 5 3. 23(2H，d，J= 6. 9Hz，H-l")与 5161.9(C-7)、106. 3(C-8)、154. 5(C-9) 的远程相关，表明异戊締基分别连接在C-8位。通过亚甲基质子信号5 2.59(2H，t，J= 6.7Hz，H-l"')与 5120.8(C-1' )、121.2(C-2' )、142.3(C-3')的HMBC相关，表明 2,2-二甲基-二氨化喃环连接在(：-2'和（：-3'位。通过5 3.57(3&3)与5 139.1((：-3) 的远程相关，表明未归属的甲氧基连接在C-3位。将化合物I的iHNMR、"CNMR信号通过 服QC、HMBC谱进行归属（见表1)。因此化合物I的结构为8-(3-methy化ut-2-enyl)-2'， 3' -(2, 2-dime1:h5ddihy化opyrano)-5, 7, 4' -trihy化oxy-3-metho:xyflavone，命名为桃儿 屯酬C(sinoflavonoidC)。
[0022]
[0023] 桃儿毛丽C(sinoflavonoidC)
[0024]表 1.NMR巧00MHz，DMS0-d6)assignmentsforI.
[00巧]
[0026] 化合物II，黄色粉末，盐酸-儀粉反应呈阳性，提示可能为黄酬类化合物。 HR-ESI-MS给出准分子离子峰m/z475. 1737[M+ 化]+(calcdforCze&A化，475. 1733)， 确定分子式为〔2品8〇7。IR(邸r，cm1)显示该化合物具有游离径基（3392cm1)，缔合幾基 (1647cm1)，苯环（1614cm1)。UV(Amax)显示该化合物具有黄酬醇骨架（262,327皿)。 电NMR巧00MHz，DMS0-de)显示两组芳香质子偶合系统信号5 6.42(lH，s)、6.85(lH，d，J =8.2Hz)、6. 73 (lH，d，J= 8.2Hz)分别归属于黄酬母核的A环和B环，提示结构中分 别存在一个1，2, 3, 4-四取代和五取代苯环结构。由一个締氨质子信号5 5. 15(lH，tJ =7.mz)，两个与季碳相连的甲基质子信号5 1. 71 (3H，S)、1. 61 (3H，S)，一个亚甲基质 子信号5 3.22(2H，d，J= 7. 1化），提示结构中存在一个异戊締基取代。由2组亚甲基 质子信号5 2.60 (2H，t，J= 6.7Hz)、1.71 (2H，t，J= 6.7Hz)，两个季碳上的甲基质子信 号51. 30化H，s)，表明结构中存在1个2, 2-二甲基-二氨化喃环。1个甲氧基质子信 号 5 3. 56(3H，s)。S个酪径基质子信号 5 12. 89(lH，s)、10. 87(lH，s)、9. 20(lH，s)，其中 5 12. 89(lH，s)为与幾基缔合的5位酪径基质子信号。"CNMR(125MHz，DMS0-de)显示含有 26个碳原子，除了 1个甲氧基的碳信号5 60. 2, 一组异戊締基碳信号5 25. 5、17. 7、130. 7、 122.1、20.9，l组2,2-二甲基-二氨化喃环的碳信号 5 20.1、31.8、73.9、26.4(X2)之外， 还给出12个芳香碳信号，1个幾基碳信号5 178.0,两个与氧相连的締碳信号5 158.06、 138. 8,W上碳谱数据进一步表明化合物II为异戊締基化黄酬醇衍生物。HMBC谱中，由亚甲 基质子信号 5 3. 22(2H，d，J= 7. )与 5161.9(C-7)、110. 7(C-6)、158. 13(C-5) 的远程相关，表明异戊締基分别连接在C-6位。通过亚甲基质子信号5 2.60(2H，t，J= 6.7Hz，H-l"')与 5120.3(C-1' )、121.1(C-2' )、142.0(C-3')的HMBC相关，表明 2,2-二甲基-二氨化喃环连接在(：-2'和（：-3'位。通过5 3.56(3&3)与5 138.8((：-3) 的远程相关，表明未归属的甲氧基连接在C-3位。将化合物II的iHNMR、"CNMR信号通过 服QC、HMBC谱进行归属（见表2)。因此化合物II的结构为6-(3-methy化ut-2-enyl)-2' ,3' -(2,2-dimethyldihydropyr3no)-5,7,4' -trihydroxy-3-methoxyf1 曰vone，命名为桃 儿屯酬D(sinoflavonoidD)。
[0027]
[0028]表 2.NMR巧OOMHz,DMS〇-d6)assignmentsforII.
[0029]
[0030]
[0031] 化合物III，黄色粉末，盐酸-儀粉反应呈阳性，提示可能为黄酬类化合物。 HR-ESI-MS给出准分子离子峰m/z385. 1262[M+ 田+(cal