比70 : 30、体积比75 : 25的甲醇-水作洗脱液进 行梯度洗脱，收集体积比60 : 40甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬F、收集体积比65 : 35甲 醇-水洗脱液得桃儿屯酬C、收集体积比70 : 30甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬D、收集体积 比75 : 25甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬G。3. 根据权利要求2所述的具有神经保护作用的异戊締基化黄酬类化合物的制备方法， 其特征在于，小叶莲9kg为原料，W1化、体积比为95%的乙醇加热回流提取3次，提取溫度 为95°C，每次提取时间为1. 5小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于3.化的蒸 馈水中，依次W石油酸、二氯甲烧、乙酸乙醋、正下醇萃取3次，每次3.化，时间为1. 5小时； 将乙酸乙醋萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10、 100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100的石油酸-丙酬混合溶剂进行梯度洗脱， 每一梯度用1化洗脱液，流速为ISmLmin1，每SOOmL为一流份，收集260个流份，各个流份 经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别W体积比1 : 1的石油酸-丙酬和体积 比5 : 1的二氯甲烧-甲醇作为展开剂，W体积比10 : 90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂， 105°C加热3 - 5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1 - 35、流份36 - 85、流份86 -104、流份 105 - 115、流份 116 - 132、流份 133 - 144、流份 145 - 157、流份 158 - 163、流份 164 - 170、流份 171 - 182、流份 183 - 188、流份 189 - 195、流份 196 - 204、流份 205 - 208、 流份209 - 234、流份235 - 260,得到化.I-Fr. 16个组份；将组份化.2经Se地adexLH-20 凝胶柱色谱，甲醇洗脱，每IOmL为一流份，收集35个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测 分析，用GF254薄层板，W体积比8 : 1的二氯甲烧-丙酬作为展开剂，W体积比10 : 90 的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105°C加热3 - 5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流 份5 - 18、流份19 - 32、流份33 - 35,得到3个亚组份化.2-1，化.2-2,化.2-3 ;将亚组份 化.2-1经开放ODS柱色谱，用体积比60 : 40、体积比65 : 35、体积比70 : 30、体积比75 : 25的甲醇-水作洗脱液进行梯度洗脱，收集体积比60 : 40甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬F、 收集体积比65 : 35甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬C、收集体积比70 : 30甲醇-水洗脱液得 桃儿屯酬D、收集体积比75 : 25甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬G。4. 根据权利要求2所述的具有神经保护作用的异戊締基化黄酬类化合物的制备方 法，其特征在于，W小叶莲6kg为原料，W1化、体积比为95 %的乙醇加热回流提取3次， 提取溫度为95°C，每次提取时间为1.5小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬 于3.化的蒸馈水中，依次W石油酸、二氯甲烧、乙酸乙醋、正下醇萃取3次，每次3.化，时 间为1. 5小时；将乙酸乙醋萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、 100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100 的石油酸-丙酬混合溶 剂进行梯度洗脱，每一梯度用9.IL洗脱液，流速为IOmLmin1，每350mL为一流份，收集260 个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别W体积比1 : 1的石油 酸-丙酬和体积比5 : 1的二氯甲烧-甲醇作为展开剂，W体积比10 : 90的硫酸-乙醇 溶液作为显色剂，l〇5°C加热3 - 5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1 - 35、流份 36 - 85、流份 86 - 104、流份 105 - 115、流份 116 - 132、流份 133 - 144、流份 145 - 157、流份 158 - 163、流份 164 - 170、流份 171 - 182、流份 183 - 188、流份 189 - 195、流份 196 - 204、 流份205 - 208、流份209 - 234、流份235 - 260,得到化.I-Fr. 16个组份；将组份化.2经 Se地adexLH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，每5血为一流份，收集35个流份，各个流份经硅胶 薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，W体积比8 : 1的二氯甲烧-丙酬作为展开剂，W体 积比10 : 90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105°C加热3-5min，根据薄层色谱检测结果， 分别合并流份5 - 18、流份19 - 32、流份33 - 35,得到3个亚组份化.2-1，化.2-2,化.2-3 ; 将亚组份化.2-1经开放ODS柱色谱，用体积比60 : 40、体积比65 : 35、体积比70 : 30、 体积比75 : 25的甲醇-水作洗脱液进行梯度洗脱，收集体积比60 : 40甲醇-水洗脱液 得桃儿屯酬F、收集体积比65 : 35甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬C、收集体积比70 : 30甲 醇-水洗脱液得桃儿屯酬D、收集体积比75 : 25甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬G。5. 根据权利要求2所述的具有神经保护作用的异戊締基化黄酬类化合物的制备方 法，其特征在于，W小叶莲8kg为原料，W2化、体积比为85 %的乙醇加热回流提取3次， 提取溫度为92°C，每次提取时间为1.5小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于2.化的蒸馈水中，依次W石油酸、二氯甲烧、乙酸乙醋、正下醇萃取3次，每次2.化，时间为 1.5小时；将乙酸乙醋萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、 100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100 的石油酸-丙酬混合溶剂进行 梯度洗脱，每一梯度用11.化洗脱液，流速为13mLmin1，每450mL为一流份，收集260个 流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别W体积比1 : 1的石油 酸-丙酬和体积比5 : 1的二氯甲烧-甲醇作为展开剂，W体积比10 : 90的硫酸-乙醇 溶液作为显色剂，l〇5°C加热3 - 5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1 - 35、流份 36 - 85、流份 86 - 104、流份 105 - 115、流份 116 - 132、流份 133 - 144、流份 145 - 157、流份 158 - 163、流份 164 - 170、流份 171 - 182、流份 183 - 188、流份 189 - 195、流份 196 - 204、 流份205 - 208、流份209 - 234、流份235 - 260,得到化.I-Fr. 16个组份；将组份化.2经 Se地adexLH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，每7血为一流份，收集35个流份，各个流份经硅胶 薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，W体积比8 : 1的二氯甲烧-丙酬作为展开剂，W体 积比10 : 90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105°C加热3-5min)，根据薄层色谱检测结果， 分别合并流份5 - 18、流份19 - 32、流份33 - 35,得到3个亚组份化.2-1，化.2-2,化.2-3 ; 将亚组份化.2-1经开放ODS柱色谱，用体积比60 : 40、体积比65 : 35、体积比70 : 30、 体积比75 : 25的甲醇-水作洗脱液进行梯度洗脱，收集体积比60 : 40甲醇-水洗脱液 得桃儿屯酬F、收集体积比65 : 35甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬C、收集体积比70 : 30甲 醇-水洗脱液得桃儿屯酬D、收集体积比75 : 25甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬G。6. 根据权利要求2所述的具有神经保护作用的异戊締基化黄酬类化合物的制备方法， 其特征在于，W小叶莲7kg为原料，W2化、体积比为75%的乙醇加热回流提取3次，提取 溫度为90°C，每次提取时间为2小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于2.化的 蒸馈水中，依次W石油酸、二氯甲烧、乙酸乙醋、正下醇萃取3次，每次2.化，时间为2小时； 将乙酸乙醋萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10、 100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100的石油酸-丙酬混合溶剂进行梯度洗脱， 每一梯度用10.化洗脱液，流速为12mLmin1，每400mL为一流份，收集260个流份，各个流 份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别W体积比1 : 1的石油酸-丙酬和体积 比5 : 1的二氯甲烧-甲醇作为展开剂，W体积比10 : 90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂， 105°C加热3 - 5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1 - 35、流份36 - 85、流份86 -104、流份 105 - 115、流份 116 - 132、流份 133 - 144、流份 145 - 157、流份 158 - 163、流份 164 - 170、流份 171 - 182、流份 183 - 188、流份 189 - 195、流份 196 - 204、流份 205 - 208、流 份209 - 234、流份235 - 260,得到化.I-Fr. 16个组份；将组份化.2经Se地adexLH-20凝胶 柱色谱，甲醇洗脱，每6mL为一流份，收集35个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用 GF254薄层板，W体积比8 :I的二氯甲烧-丙酬作为展开剂，W体积比10 : 90的硫酸-乙 醇溶液作为显色剂，l〇5°C加热3 - 5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份5 - 18、流 份19 - 32、流份33 - 35,得到3个亚组份化.2-1，化.2-2,化.2-3 ;将亚组份化.2-1经开 放ODS柱色谱，用体积比60 : 40、体积比65 : 35、体积比70 : 30、体积比75 : 25的甲 醇-水作洗脱液进行梯度洗脱，收集体积比60 : 40甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬F、收集体 积比65 : 35甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬C、收集体积比70 : 30甲醇-水洗脱液得桃儿屯 酬D、收集体积比75 : 25甲醇-水洗脱液得桃儿屯酬G。7.权利要求1所述的具有神经保护作用的异戊締基化黄酬类化合物桃儿屯酬C、桃儿 屯酬D、桃儿屯酬F、桃儿屯酬G在制备防治神经退行性疾病的药物中的应用。
【专利摘要】本发明涉及具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法及应用，有效解决制备具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物，实现制备防治神经退行性疾病的药物问题，小叶莲用乙醇加热回流提取，减压回收乙醇，混悬于蒸馏水中，用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，用石油醚-丙酮梯度洗脱，收集260个流份，合并成16个组份；将组份Fr.2经凝胶柱色谱，甲醇洗脱，收集35个流份，合并得到的亚组份Fr.2-1经开放ODS柱色谱，用甲醇-水洗脱，收集洗脱液得桃儿七酮F、桃儿七酮C、桃儿七酮D、桃儿七酮G，本发明制备的桃儿七酮C、桃儿七酮D、桃儿七酮F、桃儿七酮G具有保护神经的作用。
【IPC分类】C07D311/64, C07D493/04, A61P25/28
【公开号】CN105198854
【申请号】CN201510601309
【发明人】孙彦君, 裴莉昕, 张艳丽, 徐学琴, 王俊敏, 高美玲, 郝志友, 纪宝玉, 陈辉
【申请人】河南中医学院
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2015年9月21日