cdforC2化A，385. 1287)， 确定分子式为〔2化。07。IR(邸r，cm1)显示该化合物具有游离径基（3412cm1)，缔合幾基 (1654cm1)，苯环（1597cm1)。UV(Amax)显示该化合物具有黄酬醇骨架（260,339皿)。 电NMR巧00MHz，DMS0-de)显示两组芳香质子偶合系统信号5 6.20(1H，s)、6.35(1H，s)、 6.87(lH，d，J= 8. 2Hz)、6. 73(lH，d，J= 8. 2Hz)分别归属于黄酬母核的A环和B环，提 示结构中分别存在一个1，2, 3, 4-四取代和1，2, 3, 5-四取代苯环结构。由2组亚甲基质 子信号5 2.62 (2H，t，J= 6.7Hz)、1.71 (2H，t，J= 6.7Hz)，2个与季碳相连的甲基质子信 号51. 30化H，s)，表明结构中存在1个2, 2-二甲基-二氨化喃环。1个甲氧基质子信 号 5 3. 57(3H，s)。S个酪径基质子信号 5 12. 63(lH，s)、10. 83(lH，s)、9. 19(lH，s)，其中 5 12. 63(lH，s)为与幾基缔合的5位酪径基质子信号。"CNMR(125MHz，DMS0-de)显示含 有26个碳原子，除了 1个甲氧基的碳信号5 60. 2,1组2, 2-二甲基-二氨化喃环的碳信 号5 20. 1、31.8、73.9、26. 5(X2)之外，还给出12个芳香碳信号，1个幾基碳信号5 178.0， 两个与氧相连的締碳信号5 158. 3、138. 9,W上碳谱数据进一步表明化合物III为异戊締 基化黄酬醇衍生物。HMBC谱中，由亚甲基质子信号5 2.62(2H，t，J= 6. 7Hz，H-l"')与 5 120.2(C-1' )、121.l(C-2' )、142.0(C-3')的远程相关，表明 2,2-二甲基-二氨化喃 环连接在C-2'和C-3'位。通过5 3. 57(3H，s)与5 138.9(C-3)的远程相关，表明未归属 的甲氧基连接在C-3位。将化合物III的古NMR、"CNMR信号通过服QC、HMBC谱进行归属 (见表 3)。因此化合物III的结构为 2' ,3' -(2, 2-dimeth}ddihy化opyrano)-5, 7, 4'-t ;rihy^ox5f-3-metho巧flavone，命名为桃儿屯酬F(sinoflavonoidF)。
[0032]
[0033]表 3.NMR巧OOMHz,DMS〇-d6)assignmentsforIII.
[0034]
[0035] 化合物IV，黄色粉末，盐酸-儀粉反应呈阳性，提示可能为黄酬类化合物。 HR-ESI-MS给出准分子离子峰m/z 453. 1910[M +田+ (calcd for〔26&907,453. 1913)， 确定分子式为〔2品807。IR(邸r，cm 1)显示该化合物具有游离径基（3429cm 1)，缔合幾基 (1652cm1)，苯环（1605cm1)。UV( A max)显示该化合物具有黄酬醇骨架（262, 339皿)。古 NMR巧00MHz，DMS0-de)显示两组芳香质子偶合系统信号5 6.41(lH，s)、6.87(lH，d，J = 8. 2化）、6. 73(lH，d，J=8. 2Hz)分别归属于黄酬母核的A环和B环，提示结构中分别存 在一个五取代和1，2,3,4-四取代苯环结构。由四组亚甲基质子信号52.61(2H，t，J = 6. 6Hz)、1.81(2H，t, J=6. 6Hz)、2. 61(2H，t, J=6. 6Hz)、1.70(2H，t, J=6.細Z)，四个季 碳上的甲基质子信号5 1. 30(12H，s)，表明结构中存在2个2, 2-二甲基-二氨化喃环。1 个甲氧基质子信号5 3. 58(3H，s)。两个酪径基质子信号5 12.98(1H，s)、9. 18(lH，s)，其 中5 12. 98(lH，s)为与幾基缔合的5位酪径基质子信号。"CNMR(125MHz，DMS0-de)显 示含有26个碳原子，除了 1个甲氧基的碳信号5 60. 2,两组2, 2-二甲基-二氨化喃环 的碳信号 5 15. 7、30. 9、76. 2、26. 3(X2)，20. 1、31.8、73. 9、26. 5(X2)之夕F，还给出 12 个芳香碳信号，1个幾基碳信号5178.2,两个与氧相连的締碳信号5158. 2、138.7，W 上碳谱数据进一步表明化合物IV为异戊締基化黄酬醇衍生物。HMBC谱中，通过亚甲基 质子信号5 2.61(2H，t，J= 6.細z，H-l")和2.61(2H，t，J= 6.細z，H-l"')分别与 5 159. 8(C-7)、104. 3(C-6)、158. 5(C-5)和 121.07(01' )、120. 2 (C_2' )、142. 0 (C_3') 的HMBC相关，结合5位酪径基的存在，表明两个2, 2-二甲基-二氨化喃环分别连接在C-6、 C-7和C-2'、C-3'位。通过5 3. 58(3H，s)与5 138. 7(C-3)的远程相关，表明未归属的甲 氧基连接在C-3位。将化合物IV的iHNMR、"CNMR信号通过服QC、HMBC谱进行归属（见 表4)。因此化合物IV的结构为6, 7,bis-2' ,3' -(2, 2-dimeth}ddihy化opyrano)-5, 4'-dihy^ox}f-3-metho巧flavone，命名为桃儿屯酬G(sinoflavonoidG)。
[0036]
[0037]表 4.NMR巧OOMHz,DMS〇-d6)assignmentsforIV.
[0038]
[0039]
[0040] 本发明方法稳定可靠，其提取分离的化合物I-IV经过核磁共振光谱Ch-nmr、 "C-NMR、HSQC、HMBC)及高分辨率质谱（HR-ESI-M巧等光谱学技术进行鉴定，其分别为 桃儿屯酬C、桃儿屯酬D、桃儿屯酬F、桃儿屯酬G(sinoflavonoidC、sinoflavonoidD、 sinoflavonoidF、sinoflavonoidG)。
[0041] 经试验，运些异戊締基化黄酬提高6-OHDA诱导的人神经母细胞瘤细胞甜-SY5Y的 存活力，具有神经保护作用，有关实验资料如下：
[004引 1.实验材料
[0043]人神经母细胞瘤细胞甜-SY5Y购自AmericanTypeQiltureCollection(ATCC); 胎牛血清购自Gibco公司；DMEM培养液、6-径基多己胺化-hy化oxydopamine, 6-OHDA)、四 甲基偶氮挫盐均购自SigmaCompany。
[0044] 2.细胞培养
[004引SH-SY5Y细胞培养于含有10%经加热灭活的胎牛血清、10011/1止青霉素、100^邑/ mL链霉素、1 %谷氨酷胺的1640培养基中，将培养瓶置于37°C，5%C02饱和湿度培养箱培 养，每2~3天换培养液一次。当细胞生长到足W覆盖瓶底壁的大部分表面时，用0. 125% 膜蛋白酶消化，传代。
[004引 3.测试方法
[0047] 对数生长期细胞培养于96孔培养板内，每孔100yL(含4000个肿瘤细胞），置 37°C、5%C〇2溫箱中培养。培养至24小时后，给药组加入测试化合物的稀释液，每组设五 个平行孔，解育2小时后，每孔中加入6-0HDA，使最终浓度达到100yM。对照组加入与给药 组等体积的溶剂。置37°C、5%C02溫箱中培养。24小时后，每孔加入M1T溶液（培养基配 置），使最终浓度达到0. 5mg/血。37°C，5 % %培养箱内解育4小时，弃去上清液，每孔加 入DMS0150yL溶解甲營颗粒，轻度振荡溶解。用酶标仪，在检测波长570nm条件下测定光 密度值（0D)，用下面公式计算细胞的存活率（CellViability,CV% )，重复测试3次，取平 均值为最终结果。
[0048]
[0049] 4.实验结果
[0050] 检测结果显示，采用lOOyM6-0HDA处理甜-SY5Y细胞2地后，可导致细胞活力显 著下降（P<0. 05)，存活细胞数约为正常组的49%。而预先给予lOiiM的异戊締基化黄酬类 化合物sinofl曰vonoidC、sinofl曰vonoidD、sinofl曰vonoidF和sinofl曰vonoidG处理， 提高6-OHDA诱导的人神经母细胞瘤细胞甜-SY5Y的存活力，结果见T油le5。
[0051]T油le5.化合物I-IV对SH-SY5Y细胞的存活率
[0052]
[0053] 本发明通过多次反复的实验证实，异戊締基化黄酬类化合物由于黄酬母核及其所 连异戊締基化基团的位置、数目、种类的不同，其神经保护活性会存在很大的差异，由上述 实验表明，本发明制备出的桃儿屯酬C(sinoflavonoidC)、桃儿屯酬D(sinoflavonoidD)、 桃儿屯酬F(sinoflavonoidF)、桃儿屯酬G(sinoflavonoidG)具有神经保护作用，具有防 治神经退行性疾病的前景，是防治神经退行性疾病药物上的创新，经济和社会效益显著。
【主权项】
1. 一种具有神经保护作用的异戊締基化黄酬类化合物，其特征在于，该类化合物是从 小叶莲药材中分离得到的桃儿屯酬C、桃儿屯酬D、桃儿屯酬F、桃儿屯酬G，分子结构式分别 为：2. 权利要求1所述的具有神经保护作用的异戊締基化黄酬类化合物的制备方法，其特 征在于，W小叶莲6 - 9kg为原料，W2 - 5倍原料重量、体积比为75% - 95%的乙醇加热回 流提取3次，提取溫度为90 - 95°C，每次提取时间为1. 5 - 2小时，减压回收乙醇，得浸膏状 乙醇提取物，混悬于2 - 3.化的蒸馈水中，依次W石油酸、二氯甲烧、乙酸乙醋、正下醇萃取 3次，每次2 - 3.化，时间为1. 5 - 2小时；将乙酸乙醋萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体 积比为 100:0、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100 的 石油酸-丙酬混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用9. 1 - 1化洗脱液，流速为10 -ISmLmin1， 每350 -SOOmL为一流份，收集260个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254 薄层板，分别W体积比1 : 1的石油酸-丙酬和体积比5 : 1的二氯甲烧-甲醇作为展开 剂，W体积比10 : 90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105°C加热3 - 5min，根据薄层色谱检 测结果，分别合并流份1 - 35、流份36 - 85、流份86 - 104、流份105 - 115、流份116 - 132、 流份 133 - 144、流份 145 - 157、流份 158 - 163、流份 164 - 170、流份 171 - 182、流份 183 -188、流份 189 - 195、流份 196 - 204、流份 205 - 208、流份 209 - 234、流份 235 - 260,得到 化.I-Fr. 16个组份；将组份化.2经Se地adexLH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，每5 - 10血 为一流份，收集35个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，W体积 比8 : 1的二氯甲烧-丙酬作为展开剂，W体积比10 : 90的硫酸-乙醇溶液作为显色 剂，105°C加热3 - 5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份5 - 18、流份19 - 32、流份 33 - 35,得到3个亚组份化.2-1，化.2-2,化.2-3 ;将亚组份化.2-1经开放ODS柱色谱，用 体积比60 : 40、体积比65 : 35、体积