蛋白质VdAL在提高植物产量和促进植物生长中的应用_2

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42a(+)。
[0053] 上述与VdAL相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用中,所 述微生物可为酵母、细菌、藻或真菌,如大肠杆菌。所述大肠杆菌可为大肠杆菌JM109。
[0054] 上述与VdAL相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用中,所 述转基因植物细胞系、转基因植物组织和转基因植物器官均不包括繁殖材料。 阳化5] 在本发明的一个实施方式中,VdAL的编码基因通过含有VdAL的编码基因的表达 盒的重组载体导入大肠杆菌JM109中得到重组微生物。所述重组载体为将载体祀T42a(+) 的NdeI和化nl识别位点间的序列替换为序列表中序列2的第1-894位核巧酸所示的DNA 分子(即VdAL基因),得到的重组载体。所述重组载体表达序列I所示的VdAL。所述重组 微生物表达序列1所示的VdAL。
[0056] 上述与VdAL相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用中,所 述调控植物生长可为促进植物生长。
[0057] 为解决上述技术问题,本发明还提供了一种提高植物产量和/或促进植物生长的 方法。
[0058]本发明所提供的提高植物产量和/或促进植物生长的方法,包括对目的植物施用VdAL所述生物材料或生物制剂,提高所述目的植物产量和/或促进所述目的植物生长;所 述生物制剂的活性成分为VdAL或所述生物材料。
[0059] 上述方法中,所述生物制剂可按照方法1)制备,所述方法1)为:培养所述重组微 生物,使VdAL的编码基因表达,得到所述生物制剂。 W60] 上述方法中,所述方法1)具体可为如下11)和12):
[0061] 11)培养所述重组微生物,使所述编码基因表达,得到表达所述蛋白质的重组微生 物培养物;
[0062] 12)破碎所述微生物培养物中的菌体,得到所述生物制剂。
[0063] 上述方法中,所述方法1)还可包括对所述生物制剂进行干燥。
[0064] 上述方法中,所述编码基因可为BI)所述核酸分子。 阳〇化]在本发明的一个实施方式中,所述重组微生物为将含有VdAL的编码基因的表 达盒的重组载体导入大肠杆菌JM109中得到的重组微生物。所述重组载体为将载体 pET42a(+)的NdeI和化nl识别位点间的序列替换为序列2的第1-894位核巧酸所示的DNA 分子(即VdAL基因),得到的重组载体。所述重组载体表达序列1所示的VdAL。所述重组 微生物表达序列1所示的VdAL。
[0066] 上述方法中,所述对目的植物施用VdAL所述生物材料或生物制剂具体可为对所 述目的植物叶片施用VdAL所述生物材料或所述生物制剂,如对目的植物喷施VdAL所述 生物材料或所述生物制剂,也可用VdAL所述生物材料或所述生物制剂处理所述目的植物 的种子,如用VdAL所述生物材料或所述生物制剂的液体制剂对所述目的植物的种子进行 浸种。VdAL所述生物材料或所述生物制剂的液体制剂可为直接用清水溶解或悬浮 述生物材料或所述生物制剂得到的液体。对目的植物施用VdAL所述生物材料或生物制剂 的量可W根据所述目的植物的种类和/或生长时期确定。
[0067] 为解决上述技术问题,本发明还提供了所述生物制剂在提高植物产量和/或调控 植物生长中的应用。
[0068] 为解决上述技术问题,本发明还提供了所述生物制剂。在本发明中,所述生物制剂 的名称为维达利安。
[0069]本发明中,所述植物为双子叶植物或单子叶植物。所述双子叶植物可为锦葵科植 物、葫芦科植物、茄科植物、十字花科植物、菩薇科植物或豆科植物。所述锦葵科植物可为棉 花。所述葫芦科植物可为西瓜、黄瓜或甜瓜。所述茄科植物可为番茄、圣女果或茄科。所述 十字花科植物可为青梗菜。所述菩薇科植物可为草替。所述豆科植物可为大豆。
[0070]本发明中,所述产量可为经济产量,即栽培目的所需要的产品收获量。如禾谷类 的种子,棉花的巧棉或皮棉,青梗菜的植株,西瓜、番茄、黄瓜、圣女果、草替、甜瓜、甜椒的果 实。所述产量可W重量来体现。
[0071] 在生产中,所述促进植物的生长最终可表现为作物产量的增加。如棉花、西瓜、小 麦、番茄、青梗菜、黄瓜、圣女果、草替、甜瓜、甜椒或大豆产量的增加。
[0072] 本发明中,所述促进植物的生长可为促进所述植物的营养生长和/或生殖生长, 如促进所述植物果实的生长。所述营养生长具体可体现在促进种子发芽、促进植株生长、促 进果实生长、提高座果数目和/或延缓植株衰老。在本发明的实施例中,所述促进植物的营 养生长具体体现在W下几个方面:提高棉花发芽率、单株成铃数、亩总铃数和单铃重;提高 西瓜单株结果数;提高小麦发芽率,促进小麦植株生长;提高番茄单株结果数;促进青梗菜 植株生长;提高黄瓜座果数目,促进黄瓜果实膨大,促进黄瓜植株生长,延缓黄瓜植株衰老; 提高圣女果座果数目;促进草替植株生长;促进甜瓜植株生长;促进甜椒植株生长;促进大 豆的出苗和植株的生长。所述促进植物的生殖生长具体体现为提高棉花、西瓜、番茄、黄瓜 和圣女果的座果数目。
[0073] 本发明中,VdAL或所述生物制剂对不同植物的作用可因VdAL或所述生物制剂浓 度的不同而出现不同的结果。在施用VdAL或所述生物制剂时,VdAL或所述生物制剂的浓 度可W根据作物或其品种W及施用VdAL或所述生物制剂的目的(如促进种子发芽或提高 生物产量等)调节VdAL或所述生物制剂的浓度。
[0074] 在本发明的实施例中,所述生物制剂稀释7500倍得到的液体可W促进棉花的发 芽;所述生物制剂稀释3000-5000倍得到的液体可W提高棉花的霜前花产量和总产量W及 每亩植株数、单株成铃数、亩总铃数、衣分和亩产量。所述生物制剂稀释2000倍得到的液体 可W促进西瓜结果,提高西瓜产量。所述生物制剂稀释5000-10000倍得到的液体可W促 进小麦种子的发芽;所述生物制剂稀释5000-20000倍得到的液体可W提高小麦产量。所 述生物制剂稀释1000倍得到的液体可W促进番茄结果,提高番茄产量。所述生物制剂稀释 2000-4000倍得到的液体可W提高青梗菜的产量。所述生物制剂稀释300-2000倍得到的液 体可W提高黄瓜的座果率、促进黄瓜的膨大,提高黄瓜产量,促进黄瓜植株的顶端生长,延 缓黄瓜植株的衰老。所述生物制剂稀释2000倍得到的液体可W提高圣女果的座果率。所述 生物制剂稀释2000倍得到的液体可W促进草替、甜瓜植株的生长。所述生物制剂稀释1000 倍得到的液体可W促进甜椒植株的生长。所述生物制剂稀释3000-5000倍得到的液体可W 促进大豆的出苗与生长。
[00巧]实验证明,本发明中WVdAL为活性成分的维达利安生物制剂(VdAL)可W促进多 种植物种子发芽、植株生长、果实生长、提高座果数目,并可延缓植株衰老:
[0076] 1、稀释7500倍的VdAL处理棉花种子后棉花的平均发芽率为清水处理棉花种子 后棉花的平均发芽率的1. 08倍。用稀释3000倍的VdAL处理鲁30号,霜前花产量提高 19. 48%,总产量提高17. 04% ;用稀释5000倍的VdAL进行处理时,鲁30号霜前花产量提 高21. 25%,总产量提高20. 00%,616霜前花产量提高19. 06%,总产量提高19. 69%,鲁25 号霜前花产量提高16. 37%,总产量提高17.60%。用稀释3000倍的VdAL处理时,单株成 铃数、亩总铃数、衣分和亩产量增加率分别为4. 5%、1. 98%、0. 24%和1. 76% ;用稀释5000 倍的VdAL处理时,单株成铃数、亩总铃数、单铃重、衣分和亩产量增加率分别为3. 41 %、 4. 41%、1. 9%、0. 49%和 5. 22%。
[0077] 2、稀释2000倍的V化A处理西瓜后单株结果数提高18. 2%,产量提高33.4%。
[0078]3、稀释1000倍的VdLA、稀释2000倍的VdAL稀释5000倍的VdLA、稀释10000倍 的VdAL处理小麦种子后,发芽速率约分别加快了 2倍、9倍、12倍和11倍。稀释5000倍 的VdAL稀释10000倍的VdAL处理的小麦种子的发芽率分别提高了 2. 48%和4. 40%。稀 释5000倍的VdAL和稀释10000倍的VdAL浸种后,小麦单株鲜重分别提高了 15. 32%和 27. 03%。稀释5000倍的VdAL稀释10000倍的VdAL稀释20000倍的VdAL处理小麦后, 产量分别提高了 1. 94%、8. 13%、5. 23%。稀释5000倍的VdAL处理小麦后,有效穗数增加 了 1. 5 %,穗粒数增加了 0. 5 % ;稀释10000倍的VdAL有效穗数增加了 7 %,穗粒数增加了 3. 5 % ;稀释20000倍的VdAL有效穗数增加了 2. 3 %,穗粒数增加了 3. 7 %。
[0079] 4、稀释1000倍的VdAL和稀释3000倍的VdAL处理番茄后,番茄的单株结果数分 别提高了 4. 8%和21. 3%。
[0080] 5、稀释2000倍的VdAL稀释2500倍的VdAL稀释3000倍的VdAL和稀释4000倍 的VdAL处理青梗菜后,50株青梗菜鲜重分别提高了 54. 8 %、71. 0 %、100. 6 %和103. 7 %。
[0081] 6、VdAL还可W提高黄瓜的座果率、促进黄瓜的膨大,提高黄瓜产量,促进黄瓜植 株的生长,延缓黄瓜植株的衰老;VdAL还可W提高圣女果的座果率;促进草替、甜瓜、甜椒 植株的生长;促进大豆的出苗与生长,稀释5000倍的VdAL浸种后,大豆单株鲜重提高了 16. 91%,大豆地上部分单株鲜重提高了 28. 30%。
[0082] 实验证明,本发明的蛋白质VdAL及其生物制剂可W促进植物生长提高植物产量。
【附图说明】
[0083] 图1为维达利安外观及维达利安中VdAL的western-blot检测结果。其中,A为 维达利安外观;B为维达利安中VdAL的western-blot检测结果,风机表示在样品干燥过程 中进入出风口部位的较细粉末,主塔表示在样品干燥过程中的正常粉末。
[0084] 图2为维达利安可W促进西瓜的营养生长。其中,CK表示未处理的西瓜,VdAL表 示维达利安处理的西瓜。
[00化]图3为维达利安可W促进黄瓜座果与膨大。其中,CK表示未处理的黄瓜,300表示 稀释300倍的VdAL处理的黄瓜,600表示稀释600倍的VdAL处理的黄瓜,900表示稀释900 倍的VdAL处理的黄瓜。
[0086] 图4为不同处理的黄瓜的长势。其中,CK表示未处理的黄瓜,300表示稀释300倍 的VdAL处理的黄瓜。
[0087] 图5为不同处理的黄瓜的衰老情况。其中,CK表示未处理的黄瓜,2000X表示稀 释2000倍的VdAL处理的黄瓜。
[008引 图6为不同处理的圣女果的座果情况。其中,CK表不未处理的圣女果,2000X表 示稀释2000倍的VdAL处理的圣女果。
[0089] 图7为不同处理的草替。其中,CK表示未处理的草替,2000X表示稀释2000倍的 VdAL处理的草替。
[0090] 图8为不同处理的甜瓜。其中,CK表示未处理的甜瓜,2000X表示稀释2000倍的 VdAL处理的甜瓜。
[0091] 图9为不同处理的甜椒。其中,CK表示未处理的甜椒,1000 X表示稀释1000倍的 VdAL处理的甜椒。
[0092] 图10为不同处理的大豆种子的发芽情况。其中,CK表示未处理的大豆种子,1000 表示稀释1000倍的VdAL处理的大豆种子,3000表示稀释3000倍的VdAL处理的大豆种子, 5000表示稀释5000倍的VdAL处理的大豆种子,10000表示稀释10000倍的VdAL处理的大 豆种子,20000表示稀释20000倍的VdAL处理的大豆种子。
[0093] 图11为不同处理的大豆幼苗生长状况。其中,CK表示未处理的大豆幼苗,5000X 表示稀释5000倍的VdAL处理的大豆幼苗。
【具体实施方式】
[0094] 下面结合【具体实施方式】对本发明进行进一步的详细描述,给出的实施例仅为了阐 明本发明,而不是为了限
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