复区随机设 置五个处理区，分别为VdAL处理1区、VdAL处理2区、VdAL处理3区、VdAL处理4区和对 照处理区，每个处理区的面积均为0. 1亩。
[0204] 在VdAL处理1区的黄瓜品种津杂1号的开花初期和第一次处理后第15天分别按 照下述方式喷施VdAL:采用顶喷（人工喷施）的方式对黄瓜叶片喷施实施例1的稀释300 倍的VdAL每亩喷施45-50kg，得到稀释300倍的VdAL处理的黄瓜，将第1次喷施维达利安 喷施当天记为喷施第0天。喷施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高溫时段；喷施时严禁与 药物及肥料混合；喷施后若2小时内下雨需要补喷施一次。 阳205] 按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释300倍的VdAL替换为稀释600倍的VdAL 对VdAL处理2区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释600倍的VdAL处理的黄瓜。 阳206] 按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释300倍的VdAL替换为稀释900倍的VdAL 对VdAL处理3区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释900倍的VdAL处理的黄瓜。 阳207] 按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释300倍的VdAL替换为稀释2000倍的VdAL 对VdAL处理4区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释2000倍的VdAL处理的黄瓜。 阳20引按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释300倍的VdAL替换为清水对对照处理区 进行处理，其他步骤均不变，得到未处理的黄瓜。 阳209] 在喷施第20天，统计黄瓜的结果情况，结果发现，维达利安可W提高黄瓜的座果 率、促进黄瓜的膨大，提高黄瓜产量（图3)，表明，维达利安可W促进黄瓜的营养生长和生 殖生长。在喷施第20天，观察黄瓜的长势，结果发现，维达利安处理的黄瓜的长势好于未处 理的黄瓜的长势（图4)，表明，维达利安可W促进黄瓜的营养生长。在喷施第45天，观察黄 瓜的衰老情况，结果发现，未处理的黄瓜的衰老情况比维达利安处理的黄瓜的衰老情况严 重（图5)，表明，维达利安可W延缓黄瓜的衰老。
[0210] 2、维达利安可W提高圣女果的座果率、提高产量 悦11] 田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设 置两个处理区，分别为VdAL处理区和对照处理区，每个处理区的面积均为1亩。 阳21引在VdAL处理区的圣女果品种京丹2号的开花期按照下述方式VdAL喷施1次：采 用顶喷（人工喷施）的方式对圣女果叶片喷施实施例1的稀释2000倍的VdAL每亩喷施 45-50kg，得到稀释2000倍的VdAL处理的圣女果，将维达利安喷施当天记为处理第0天。喷 施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高溫时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2 小时内下雨需要补喷施一次。
[0213] 按照VdAL处理区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进 行处理，其他步骤均不变，得到未处理的圣女果。
[0214] 在处理第7-10天，观察圣女果的结果情况，结果发现，维达利安可W提高圣女果 的座果率，提高圣女果产量（图6)，表明，维达利安可W促进圣女果的生长。
[0215] 3、维达利安可W促进草替的生长
[0216] 田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设 置两个处理区，分别为VdAL处理区和对照处理区，每个处理区的面积均为1亩。
[0217] 在VdAL处理区的草替品种为丰香的开花期期按照下述方式VdAL喷施I次：采 用顶喷（人工喷施）的方式对草替叶片喷施实施例1的稀释2000倍的VdAL每亩喷施 45-50kg，得到稀释2000倍的VdAL处理的草替，将维达利安喷施当天记为处理第0天。喷 施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高溫时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2 小时内下雨需要补喷施一次。
[0218] 按照VdAL处理区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进 行处理，其他步骤均不变，得到未处理的草替。
[0219] 在处理第7-10天，观察草替的生长情况，结果发现，维达利安可W促进草替的营 养生长（图7)。
[0220] 4、维达利安可W促进甜瓜的生长 阳221] 田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设 置两个处理区，分别为VdAL处理区和对照处理区，每个处理区的面积均为1亩。
[0222] 在VdAL处理区的超级翠宝香甜瓜品种的苗期按照下述方式VdAL喷施1次：采 用顶喷（人工喷施）的方式对甜瓜叶片喷施实施例1的稀释2000倍的VdAL每亩喷施 45-50kg，得到稀释2000倍的VdAL处理的甜瓜，将维达利安喷施当天记为处理第0天。喷 施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高溫时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2 小时内下雨需要补喷施一次。 阳223] 按照VdAL处理区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进 行处理，其他步骤均不变，得到未处理的甜瓜。 阳224] 在处理第30天，观察甜瓜的生长情况，结果发现，维达利安可W促进甜瓜的营养 生长（图8)。 阳2巧]5、维达利安可W促进甜椒的生长 阳226] 田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设 置两个处理区，分别为VdAL处理区和对照处理区，每个处理区的面积均为1亩。
[0227] 在VdAL处理区的甜椒品种眷优816的开花期按照下述方式VdAL喷施1次：采用顶 喷（人工喷施）的方式对甜椒叶片喷施实施例1的稀释1000倍的VdAL每亩喷施45-50kg， 得到稀释1000倍的VdAL处理的甜椒，将维达利安喷施当天记为处理第0天。喷施时间在 早晨或傍晚，最好避开正午高溫时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2小时内下 雨需要补喷施一次。
[0228] 按照VdAL处理区的处理方法，将稀释1000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进 行处理，其他步骤均不变，得到未处理的甜椒。
[0229] 在处理第7-10天，观察甜椒的生长情况，结果发现，喷施维达利安后，甜椒长势巧 壮、叶片深绿（图9)，表明维达利安可W促进甜椒的营养生长。
[0230] 6、维达利安可W促进大豆的出苗与生长 阳231] 将大豆品种中华大豆王种子分别在实施例1的稀释1000倍的VdAL稀释3000倍 的VdAL稀释5000倍的VdAL稀释10000倍的VdAL稀释20000倍的VdAL和清水中浸种24小时，然后在托盘（托盘中铺有两层用无菌水浸湿的无菌滤纸）中于25°C下催芽72小 时，统计大豆种子发芽率。每种处理100粒种子，实验重复=次。
[0232] 结果显示（图10)，稀释3000倍的VdAL和稀释5000倍的VdAL大豆种子后，发芽 率均有提高。表明，维达利安可W促进大豆种子的发芽。 阳233] 实验二：
[0234] 将大豆品种中华大豆王种子分别在实施例1的稀释5000倍的VdAL和清水中浸种 24小时，然后播种于±壤中，将播种当天记为播种第1天，在播种第20天将大豆幼苗从±壤 中取出，称量大豆幼苗鲜重（图11)。 阳235] 结果显示，用稀释5000倍的VdAL和清水处理的大豆的单株鲜重分别为 1. 59 + 0. 3g和1. 36 + 0. 3g，稀释5000倍的VdAL浸种后，大豆单株鲜重提高了 16. 91 % ; 用稀释5000倍的VdAL和清水处理的大豆的地上部分单株鲜重分别为1. 36 + 0. 3g和 1. 06 + 0. 3g，稀释5000倍的VdAL浸种后，大豆地上部分单株鲜重提高了 28. 30%，显著高于 清水处理的大豆的地上部分单株鲜重。表明，维达利安可W促进大豆的营养生长。
【主权项】
1. 蛋白质在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用；所述蛋白质为如下Al)或 A2)或 A3): Al)氨基酸序列为序列1的蛋白质； A2)在序列1的氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基 得到的具有相同功能的由Al)衍生的蛋白质； A3)在Al)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。2. 与权利要求1所述蛋白质相关的生物材料在提高植物产量和/或调控植物生长中的 应用； 所述生物材料，为下述BI)至B20)中的任一种： BI)编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子； B2)含有BI)所述核酸分子的表达盒； B3)含有BI)所述核酸分子的重组载体； B4)含有B2)所述表达盒的重组载体； B5)含有BI)所述核酸分子的重组微生物； B6)含有B2)所述表达盒的重组微生物； B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物； B8)含有B4)所述重组载体的重组微生物； B9)含有BI)所述核酸分子的转基因植物细胞系； B10)含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系； B11)含有B3)所述重组载体的转基因植物细胞系； B12)含有B4)所述重组载体的转基因植物细胞系； B13)含有BI)所述核酸分子的转基因植物组织； B14)含有B2)所述表达盒的转基因植物组织； B15)含有B3)所述重组载体的转基因植物组织； B16)含有B4)所述重组载体的转基因植物组织； B17)含有BI)所述核酸分子的转基因植物器官； B18)含有B2)所述表达盒的转基因植物器官； B19)含有B3)所述重组载体的转基因植物器官； B20)含有B4)所述重组载体的转基因植物器官。3. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于：B1)所述核酸分子为如下bl)或b2)或 b3)的基因： bl)核苷酸序列是序列表中序列2的cDNA分子或DNA分子； b2)与bl)限定的核苷酸序列具有75%或75%以上同一性，且编码权利要求1所述蛋 白质的cDNA分子或基因组DNA分子； b3)在严格条件下与bl)限定的核苷酸序列杂交，且编码权利要求1所述蛋白质的 cDNA分子或基因组DNA分子。4. 根据权利要求1-3任一所述的应用，其特征在于：所述调控植物生长为促进植物生 长。5. -种提高植物产量和/或促进植物生长的方法，包括对目的植物施用权利要求1中 所述蛋白质、权利要求2或3中所述生物材料或生物制剂，提高所述目的植物产量和/或促 进所述目的植物生长；所述生物制剂的活性成分为权利要求1中所述蛋白质或权利要求2 或3中所述生物材料。6. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述生物制剂按照方法1)制备，所述方 法1)为：培养权利要求2或3中B5)-B8)中任一所述重组微生物，使所述蛋白质的编码基 因表达，得到所述生物制剂。7. 根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于：所述方法1)为如下11)和12): 11) 培养权利要求2或3中B5)-B8)中任一所述重组微生物，使所述编码基因表达，得 到表达所述蛋白质的重组微生物培养物； 12) 破碎所述微生物培养物中的菌体，得到所述生物制剂。8. 权利要求5-7中任一所述生物制剂在提高植物产量和/或调控植物生长中的应用。9. 根据权利要求1-4中任一所述应用、权利要求5-7中任一所述方法或权利要求8所 述应用，其特征在于：所述植物为双子叶植物或单子叶植物；所述生长为营养生长和/或生 殖生长。10. 权利要求5-7任一所述方法中所述生物制剂。
【专利摘要】本发明公开了蛋白质VdAL在提高植物产量和促进植物生长中的应用。本发明所提供的应用中，蛋白质VdAL为下述A1)或A2)或A3)：A1)氨基酸序列为序列1的蛋白质；A2)在序列1的氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的具有相同功能的由A1)衍生的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。实验证明，本发明的蛋白质VdAL及其生物制剂可以促进植物生长提高植物产量。
【IPC分类】A01P21/00, C12N15/29, A01N47/44, C12P21/02, C12N15/82, C07K14/415, A01H5/00
【公开号】CN105218649
【申请号】CN201510691515
【发明人】齐俊生, 巩志忠, 洪旭辉, 张定朋
【申请人】中国农业大学
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年10月22日