一种提高葡萄籽提取物中多酚含量及水溶性的方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及植物提取生产技术领域，具体设及一种提高葡萄巧提取物中多酪含量 及水溶性的方法。
【背景技术】
[0002] 随着医疗卫生和保健事业的不断发展，社会的进步，人们对生活质量的追求不断 提高，人口的寿命延长，抗氧化、延迟衰老的保健食品的市场需求越来越大。
[0003] 葡萄巧提取物是纯天然物质是迄今发现的植物来源的高效的抗氧化剂之一，已被 国家食品药品监督管理局批准为具有抗氧化功能的原料。根据体内和体外实验表明，葡萄 巧提取物的抗氧化效果是维生素 C和维生素 E的30到50倍。葡萄巧提取物中主要的有效成分 包括多酪类成分和油脂类成分。其中，多酪类成分表现为水溶性，主要包括儿茶素类和原花 青素类。儿茶素类化合物主要包括儿茶素、表儿茶素及其没食子酸醋，是葡萄巧中主要的单 聚体，也是原花青素寡聚体和多聚体的构成单位。在结构上，原花青素是由不同数量的儿茶 素或表儿茶素结合而成。最简单的原花青素是儿茶素、或表儿茶素、或儿茶素与表儿茶素形 成的二聚体，此外还有Ξ聚体、四聚体等直至十聚体。按聚合度的大小，通常将二一-五聚 体称为低聚体(简称0PC)，将五聚体W上的称为高聚体(简称PPC)。
[0004] 目前，国内外市场销售和应用的W多酪类物质为有效成分的葡萄巧提取物主要 是应用溶剂浸提和柱层析结合的分离纯化的方法制备，其水溶性差(仅能达到略溶标准）、 低聚体含量低，该方法存在着提取工艺复杂、提取率低、分离柱寿命短、生产成本高等缺陷。 虽然一些改进工艺通过加入助溶剂解决产品的溶解性问题，但会使葡萄巧原有成分遭到破 坏，影响产品的酸碱度，对产品的安全性也有影响。
【发明内容】
[0005] 本发明提供一种提高葡萄巧提取物中多酪含量及水溶性的方法，能够克服现有技 术的不足，在不添加任何助溶剂的条件下，实现葡萄巧提取物中多酪含量和水溶性的提高， 且安全环保、工艺简单。
[0006] 本发明的技术方案如下： 一种提高葡萄巧提取物中多酪含量及水溶性的方法，包括如下步骤： 步骤一、将葡萄巧原料放入提取罐中，使用乙醇提取Ξ次，分别得到提取液I、提取液II 和提取液III; 步骤二、将提取液I和提取液II合并浓缩至无醇得到料液I，提取液ΠΙ浓缩至无醇得到 料液II;将料液I和II合并，加纯化水稀释至原液量的2.5-3倍，揽拌均匀后沉淀25-35分钟， 上清液离屯、后过200目絹布袋得到药液II;向离屯、渣中加入渣量2.5-3.5倍的纯化水，揽拌 均匀后，沉淀55-65分钟，上清液过200目絹布袋，离屯、后得到药液III;将药液III和药液II 合并，得到药液IV; 步骤Ξ、将药液IV匀速通过树脂柱，再用纯化水洗柱，再W乙醇洗脱，洗脱过程中的不 同阶段收集洗脱液分别得到药液V和药液VI; 步骤四、将药液V通过树脂柱，再通过乙醇洗脱一次W进一步纯化，药液VI通过有机膜 进行过滤，药液VI过滤后的料液和V纯化后的料液合并，合并得到的收集液在溫度50-75°C、 真空度在-0.〇6MPaW上浓缩至无醇，得到药液VII;将药液VII进一步浓缩至波美度15-16， 喷雾干燥即得水溶性葡萄巧提取物。
[0007] 优选地，所述步骤一中使用乙醇提取时，第一次和第二次提取参数如下：向提取罐 中加入提及浓度为50%的乙醇，乙醇用量满足固液比1:4-1:5,将提取罐密封后加热罐体至 乙醇沸腾，回流提取2次，每次2.5小时。其中，乙醇浓度指体积浓度，W下除非特殊说明，所 设及的浓度均为体积浓度；固液比指葡萄巧原料与酒精的体积比；回流提取是用乙醇等易 挥发的有机溶剂提取原料成分，将浸出液加热蒸馈，其中挥发性溶剂馈出后又被冷却，重复 流回浸出容器中浸提原料，运样周而复始，直至有效成分回流提取完全的方法。
[0008] 优选地，所述步骤一中使用乙醇提取时，第Ξ次提取参数如下：加入纯化水，加水 量应超过提取罐内葡萄巧料面l〇cm-12cm，将提取罐密封后加热罐体至纯化水沸腾，提取一 小时。
[0009] 优选地，所述步骤Ξ中药液IV通过树脂柱的速度为IBV/h。其中，BV是代表树脂柱 体积的相对值；1BVA表示每小时流量为树脂柱装填体积量的3倍;药液流经树脂吸附柱被 精制纯化。
[0010] 优选地，所述步骤Ξ中纯化水洗柱时纯化水的用量为0.5BV柱体积，流速为1BVA; 纯化水洗柱是为了洗涂去杂质。
[0011] 优选地，所述步骤Ξ中乙醇洗脱至少两次；其中，第一次使用的乙醇浓度为25%- 30%，用量为1BV，流速为0.5BV/h;第二次使用的乙醇浓度为50%，用量为1BV柱体积，流速 0.5BV/h〇
[0012] 优选地，所述药液V自试剂检测有颜色反应开始收集，当流出树脂柱的液体中乙醇 浓度达到5%时停止收集。运样收集得到的药液V中包括了纯化水预洗得到的洗脱液。
[0013] 优选地，所述药液VI自流出树脂柱的液体中乙醇浓度达到5%时开始收集，至收集 液颜色变浅为止。药液VI中的乙醇浓度相对药液V中高。
[0014] 优选地，所述步骤四中喷雾干燥的条件为：喷雾进风溫度为190-210°C，出风溫度 为85-90 °C。
[0015] 优选地，所述步骤四中乙醇洗脱时使用的乙醇浓度为50%，用量为0.5-1BV，流速 0.5BVA通过树脂柱。
[0016] 本发明的方法在不添加任何助溶剂的条件下，通过多步提取加循环提取的方式， 始终保持溶剂和物料间的浓度差，有利于提升产率和避免有效成分的浪费，实现葡萄巧提 取物中多酪含量及水溶性的提高;此外，本发明的工艺安全环保，所用试剂仅设及水和乙醇 两种，均无毒无害，有利于降低成本，也能保证产品的安全性，工艺过程也相对简单，提取效 率高。
【具体实施方式】
[0017] 下面将结合【具体实施方式】对本发明实施例中的技术方案进行清楚完整地描述。 [001引 实施例1 本实施例提供一种提高葡萄巧提取物中多酪含量及水溶性的方法，包括如下步骤： 步骤一、将葡萄巧原料放入提取罐I中，向提取罐中加入浓度为50%的乙醇，乙醇用量满 足固液比1:4,然后将提取罐I密封并加热罐体至乙醇沸腾，回流提取2次，每次2.5小时，得 到提取液I;将提取液I转移到提取罐II中，再向提取罐I中加入浓度为50%的乙醇，乙醇用量 满足固液比1: 5，然后将提取罐I密封并加热罐体至乙醇沸腾，回流提取2次，每次2.5小时， 得到提取液II;将提取液II转移到提取罐ΠΙ中，再向提取罐I中加入纯化水，加水量超过提 取罐内葡萄巧料面10cm，将提取罐密封后加热罐体至纯化水沸腾，提取一小时，得到提取液 III。
[0019] 步骤二、将提取液I和提取液II合并浓缩至无醇得到料液I，提取液III浓缩至无醇 得到料液II;将料液I和II合并，加纯化水稀释至原液量的2.5倍，揽拌均匀后沉淀30分钟， 上清液离屯、后过200目絹布袋得到药液II;向离屯、渣中加入渣量3倍的纯化水，揽拌均匀后， 沉淀60分钟，上清液过200目絹布袋，离屯、后得到药液III;将药液ΙΠ 和药液II合并，得到药 液IV; 步骤Ξ、将药液IV W1BVA的速度匀速通过树脂柱，再用0.5BV的纯化水W1BVA的速度 冲洗树脂柱。冲洗完毕后再W乙醇洗脱两次：其中，第一次使用的乙醇浓度为25%，用量为 1BV，流速为0.5BVA;第二次使用的乙醇浓度为50%，用量为1BV，流速为0.5BVA。洗脱过程 中的不同阶段收集洗脱液分别得到药液V和药液VI:其中，药液V自试剂检测有颜色反应开 始收集，当流出树脂柱的液体中乙醇浓度达到5%时停止收集;所述药液VI自流出树脂柱的 液体中乙醇浓度达到5%时开始收集，至收集液颜色变浅为止。