用作ppar配体的恶唑烷酮衍生物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及不同取代的恶唑烷酮家族及其任何药学上可接受的盐、酯、前药、互变异构体、溶剂化物和水合物，其对过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)受体的α和γ亚型具有亲和性，且因此调控由所述受体调节的活动，例如诱导饱腹感、控制消化和调控代谢作用，因此，其可用于作为药理学工具和作为用于治疗和/或预防代谢疾病和心血管疾病的药物来给药。
【专利说明】
用作PPAR配体的恶唑烷酮衍生物
技术领域
[0001] 本发明属于药物化学和药理学领域，并且具体地，涉及一个不同取代的恶唑烷酮 家族及其药学上可接受的盐、酯、前药、互变异构体、溶剂化物和水合物，其对过氧化物酶体 增殖物活化受体(PPAR)受体的〇和γ亚型具有亲和性，且因此调控由所述受体调节的活动， 例如诱导饱腹感、控制消化和调控代谢作用，因此，其可用于作为药理学工具和作为用于治 疗和/或预防代谢疾病和心血管疾病的药物来给药。
【背景技术】
[0002] PPAR受体属于由三种亚型α、β和γ组成的核受体家族，其参与转录负责调节代谢 和能量平衡的基因。因此，它们在调节碳水化合物和脂质代谢的作用是众所周知的，因此可 用于治疗代谢疾病（S.Alzhar,Future Cardiol .2010，6,657-691)〇
[0003] 该PPAR-a(a)亚型通过其天然配体活化，涉及对循环血脂浓度的控制。因此，该受 体家族的α亚型是一种用于治疗代谢紊乱性相关疾病，如血脂异常和心血管疾病(如动脉粥 样硬化和高血压），以及肥胖的非常有趣的治疗祀标（Evans et al. ,2004.Nature Medicine 10:355)。
[0004] 此外，PPAR伽马（γ )亚型调节脂肪生成、脂质代谢、血糖控制和炎症。PPAR伽马活 化剂通过调节脂肪生成、降低游离脂肪酸水平，提高对胰岛素的敏感性，并改善胰岛素抵 抗。然而，选择性PPAR γ激动剂有一定的副作用，如血管神经性水肿或体重增加 (A.Tenenbaum,2012.Cardiovasc Diabetol 11,140)。
[0005] 启发性地，当进行不同的PPAR亚型的泛激活或双重激活时，不同的生理反应以协 调的方式发生，由此PPARy的泛激活和α的联合作用可以同时导致胰岛素抵抗和血脂异常， 使其成为治疗相关疾病的有趣标革E(A.Tenenbaum 2005.Cardiovasc Diabetol 4,14)。
[0006] 激活PPARa和PPAR γ的药物在目前市场上已有销售。在所述药物中，α-激动剂，例 如非诺贝特或吉非贝齐用于通过调节参与某些血脂异常过程的不同转录因子来治疗高脂 血症（Plutzky J. 2000·Curr.Atheroscler Rep 2:327)。同样，噻唑烧二酮（TZD)是特异性 γ受体配体，其作用类似于"胰岛素增敏剂"，其销售给II型糖尿病患者用于高血糖。除特异 性同种型作用外，作用于两个或多个同种型的PPAR泛激动剂或双重激动剂也有记载，例如， 阿格列扎，其目前正在进行治疗II型糖尿病的III期临床试验。
[0007] 在这个意义上说，必须指出，美国食品和药品管理局确定，开始PPAR激动剂的临床 石开究之前，应在口齿齿类动物中进行2年的石开究(http ://www. fda. gov/downloads/Drugs/ GuidanceComplianceRegulatorylnformation/Guidan ces/ucm071624.pdf) 〇因此，在用于 人类之前，考虑到所有必要的实验是非常重要的。
[0008] 然而，特异性结合PPAR α受体的贝特类是第二选择的医药产品。出于安全考虑，不 应将其作为第一选择的处方药开具给首次诊断为血脂异常的患者，除非是严重的高甘油三 脂血症且不能服用拿他汀类药物的患者。
[0009] 此外，已有记载，某些作为PPAR γ激动剂的化学物质能引起肝脏损害，必须小心 使用，评估其益处和副作用。
[0010] 双重PPAR α和PPAR γ激动剂化合物的治疗副作用可以低于只对PPAR α受体作用 的化合物或仅对PPAR γ受体起作用的化合物。因此，开发更安全、更有效的双重PPAR α和 PPAR γ激动剂，具有巨大的治疗价值。
[0011] 因此，有必要以发现新的PPAR激动剂。更具体地说，有必要开发适用于PPAR α激动 剂和PPAR- γ激动剂，或双重激动剂。还需要开发具有治疗可接受的副作用的PPAR α激动剂 和PPAR γ激动剂，或双重激动剂。
【发明内容】
[0012] 本发明涉及一种具有对PPAR α亚型的亲和性和对PPAR γ亚型的微摩尔亲和性的 新化学结构，其新颖性尤其在于其末端的性质，能够建立对Tyr-464残基和PPAR γ的Tyr-473残基的羟基基团的活化而言具有重要意义的氢桥型交互作用，且其相当于恶唑烷酮环。
[0013] 本发明的第一目标涉及一种化合物，下文中称为本发明的化合物，如通式（I)所 示：
[0015] 或其任何药学上可接受的盐、酯、互变异构体、溶剂化物和水合物，其中：
[0016] R1选自（&-&2)烷基、环烷基或-(CH 2)-R3,其中R3为环烷基或芳基；
[0017] R2选自（d_C12)烷基、芳烷基、芳基和氨基。
[0018] 为此，本发明的一个优选实施例中，所述R1为环烷基。
[0019] 又一个优选实施例中，所述R1选自环丙基，环丁基，环戊基和环己基；在一个更优 选的实施例中，所述R 1选自环丙基和环己基。
[0020] 本发明的又一个优选实施例中，所述R1为(&-C12)烷基。更优选地，所述R 1为戊烷基 或十^烷基。
[0021] 本发明的又一个优选实施例中，所述R1为-(CH2)-R3,且其中所述R 3为环烷基或芳
基。
[0022] 又一个更优选的实施例中，所述R3为环己基或形式为 的芳基，且 所述R4为氢或被一种或多种卤素任选取代的直链或支链烷基。
[0023] 本发明的又一个优选实施例中，所述R2为(C7_C15)芳烷基。
[0024] 又一个更优选实施例中，所述R2为苄基。
[0025] 其他更优选实施例中，式(I)的化合物选自：
[0026] &)(1〇-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)4-(4-((4-(叔丁基)苄基)氨基甲 酰基)苯基)苯甲酰胺(1);
[0027] b)(R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4-((4-(三氟甲基)苄基)氨基 甲酰基)苯基)苯甲酰胺(2);
[0028] c)(R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4-(苄基氨基甲酰基)苯基)苯 甲酰胺(3);
[0029] d)(R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基）-N-(4-((环己基甲基）氨基甲酰 基)苯基)苯甲酰胺(4);
[0030] e)(R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4-(戊基氨基甲酰基)苯基)苯 甲酰胺(5);
[0031 ] f) (R)-3-( (4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4_(十二烷基氨基甲酰基）苯 基)苯甲酰胺(6);
[0032] g)(R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4_(环丙基氨基甲酰基)苯基） 苯甲酰胺(7);
[0033]或其任何药学上可接受的盐、酯、互变异构体、前药、溶剂化物和水合物。
[0034] 一个更优选实施例中，本发明的化合物是PPAR α受体激动剂;在又一个优选实施 例中，本发明的化合物是PPAR γ受体激动剂;且在一个更优选的实施例中，本发明的化合 物是双重PPARa和PPAR γ受体激动剂；
[0035] 本发明的第二目标涉及一种药物组合物，下文称为本发明的药物组合物，其包括 本发明的化合物。在一个优选实施例中，本发明的药物组合物进一步包括至少一种药学上 可接受的赋形剂和治疗有效剂量的式（I)化合物。更优选地，其包括药学上可接受载体，更 优选地，其可以进一步包括另一活性成分。
[0036] 本发明的第三目标涉及一种剂型，下文称为本发明的剂型，其包括本发明的化合 物或本发明的组合物。
[0037] 本发明的第四目标涉及本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型作为 PPAR受体的a(阿尔法)和γ (伽马)亚型的受体激动剂的用途，优选为体外用途。
[0038] 本发明的第五目标涉及本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型在制备 医药产品中的用途。
[0039] 因此，本发明提供用作医药产品的本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的 剂型。
[0040] 本发明的第六目标涉及本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型在制备 用于预防或治疗由PPAR(过氧化物酶体增殖物活化受体)受体的〇和γ亚型介导的病理的医 药产品中的用途。
[0041] 因此，本发明提供用于一种预防或治疗由PPAR(过氧化物酶体增殖物活化受体)受 体的a和γ亚型介导的病理的方法中的本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型。
[0042] 本发明的第七目标涉及本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型在制备 用于诱导饱腹感和控制消化，调节体脂和调整脂类和碳水化合物代谢的医药产品中的用 途。
[0043] 因此，本发明提供用于一种诱导饱腹感和控制消化，调节体脂和调整脂类和碳水 化合物代谢的方法中的本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型。
[0044] 本发明的第八目标涉及本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型在制备 用于预防或治疗代谢疾病的医药产品中的用途。在一个优选的实施例中，所述代谢疾病选 自肥胖、血脂异常、胰岛素抵抗、高血糖症和II型糖尿病。
[0045] 因此，本发明提供用于一种预防或治疗代谢疾病的方法中的本发明的化合物、本 发明的组合物或本发明的剂型。在一个优选的实施例中，所述代谢疾病选自肥胖、血脂异 常、胰岛素抵抗、高血糖症和II型糖尿病。
[0046] 本发明的第九目标涉及本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型在制备 用于预防或治疗心血管疾病中的医药产品中的用途。在一个优选的实施例中，所述心血管 疾病选自动脉粥样硬化和高血压。
[0047] 因此，本发明提供用于一种预防或治疗心血管疾病的方法中的本发明的化合物、 本发明的组合物或本发明的剂型。在一个优选的实施例中，所述心血管疾病选自动脉粥样 硬化和高血压。本发明的第十目标涉及一种化妆品组合物，以下称为本发明的化妆品组合 物，包括本发明的化合物和至少一种化妆品可接受的赋形剂和/或佐剂。
[0048] 本发明的第十一目标涉及一种剂型，下文称为本发明的第二剂型，包括本发明的 化妆品组合物。
[0049] 本发明的第十二目标涉及本发明的化妆品组合物或本发明的第二剂型用于减少 皮下脂肪的用途。
[0050] 因此，本发明提供用于一种减少皮下脂肪的方法中的本发明的化合物、本发明的 组合物或本发明的剂型。
[0051] 本发明的第十三目标涉及用于获取如式（I)所示化合物的方法其包含在三甲基铝 和THF的存在下令芳香胺(式(II)的化合物)与酯类(式(III)的化合物)反应，其中取代基R 1 和R2的定义如上所述。
[0053] 在一个优选的实施例中，所述的用于获取如通式（I)所示化合物的方法，其特征在 于芳基胺与酯类的终反应，包括以下步骤：
[0054] a)用Boc酸酐保护对氨基苯甲酸的胺；
[0055] b)在三乙胺的存在下，通过H0Bt、EDCI或PyBOP酸活化剂令受保护的对氨基苯甲酸 与胺反应；
[0056] c)在CH2C12/TFA两相体系中令氨基去保护，得到芳基胺；
[0057] d)在作为THF中的碱的叔丁醇钾的存在下，通过溴化衍生物上的恶唑烷酮烯醇化 物的亲核取代反应，得到甲酯；
[0058] e)在三甲基铝的存在下，在微波反应器中以125°C反应35分钟，从甲酯和芳基胺反 应形成酰胺键;粗反应产物在冰水混合物中冷却并用HC1 (1N)酸化，直到泡腾停止；
[0059] f)用乙醚(2 X 20ml)提取，在无水MgS〇4中干燥，并减压除去溶剂；
[0000] g)用色谱层析法(6: 4Hex/AcOEt)纯化粗反应产物。
[0061]更优选地，所述的用于获取如通式（I)所示化合物的方法，其特征在于，所述胺选 自4_(叔丁基)-苄基胺、4_(二氟甲基)-节胺、节胺、六氢节胺、1-戊胺、1-十二烷基胺、环丙 胺，且所述酯是甲基-3-(溴甲基)苯甲酸酯。
[0062]本发明还提供包含本发明化合物的组合物。
[0063]本发明还提供包含本发明化合物的营养学组合物。
[0064] 本发明还提供本发明的营养学组合物用于减少皮下脂肪的用途。
【附图说明】
[0065] 图1所示为化合物1的急性摄取实验的结果，图中所示为相对于动物每千克体重所 消耗的食品克数的归一化值。该化合物保持活性直到给药后120分钟。X轴表示时间（分钟）。 y轴表示累积食物摄取(克/千克）。
[0066] 图2所示为化合物5的急性摄取实验的结果，图中所示为相对于动物每千克体重所 消耗的食品克数的归一化值。该化合物的活性具有剂量依赖性。X轴表示时间（分钟）。7轴表 示累积食物摄取(克/千克）。
[0067] 图3所示为化合物5给药后24小时的摄取结果。图中所示为相对于动物每千克体重 所消耗的食品克数的归一化值。该化合物在24小时后仍然以剂量依赖的方式具有活性。X轴 表示处理时间（24小时），而y轴表示累积食物摄取(克/千克）。
【具体实施方式】
[0068] 本发明的作者已经发现，式（I)化合物令人惊讶地分别在纳摩尔和微摩尔的范围 内激活PPAR受体的α和γ亚型。
[0069] 本发明的第一方面涉及一种化合物，如通式(I)所示：
[0071]或其任何药学上可接受的盐、酯、互变异构体、溶剂化物和水合物，其中：
[0072] R1选自（&-&2)烷基、环烷基和(CH2)_R 3,其中R3为环烷基或芳基；
[0073] R2选自（&-&2)烷基、芳烷基、芳基和氨基。
[0074]本发明的一个优选实施例中，所述R1为环烷基。
[0075] 又一个优选实施例中，所述R1选自环丙基，环丁基，环戊基和环己基。
[0076]在一个更优选的实施例中，所述R1选自环丙基和环己基。
[0077]本发明的又一个优选实施例中，所述R1为(&_&2)烷基。
[0078] 又一个更优选的实施例中，所述R1为戊烷基或十二烷基。
[0079] 本发明的又一个优选实施例中，所述R1为-(CH2)-R3,且其中所述R 3为环烷基或芳
基。
[0080] 又一个更优选的实施例中，所述R3为环己基或形式为 的芳基，且 所述R4为氢或被一种或多种卤素任选取代的直链或支链烷基。
[0081] 本发明的又一个优选实施例中，所述R2为(C7_C15)芳烷基。
[0082] 又一个更优选实施例中，所述R2为苄基。
[0083]在一个更优选的实施例中，式（I)的化合物选自：
[0084] &)(1〇-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)4-(4-((4-(叔丁基)苄基)氨基甲 酰基)苯基)苯甲酰胺(1);
[0085] b)(R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4-((4-(三氟甲基)苄基)氨基 甲酰基)苯基)苯甲酰胺(2);
[0086] c)(R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4-(苄基氨基甲酰基)苯基)苯 甲酰胺(3);
[0087] d)(R)-3_((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基）-N-(4_((环己基甲基）氨基甲酰 基)苯基)苯甲酰胺(4);
[0088] e)(R)-3_((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4_(戊基氨基甲酰基)苯基)苯 甲酰胺(5);
[0089] 〇(幻-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)4-(4-(十二烷基氨基甲酰基）苯 基)苯甲酰胺(6);
[0090] g)(R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4-(环丙基氨基甲酰基)苯基） 苯甲酰胺(7);
[0091 ]或其任何药学上可接受的盐、酯、互变异构体、前药、溶剂化物和水合物。
[0092] 术语"(C1-C12)烷基"在本发明中是指，由碳和氢原子组成的直链或支链烃链的自 由基，其不具有不饱和基，具有1至12个碳原子，且通过单键结合到该分子的其余部分，例如 甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，叔丁基，正戊基等。所述烷基自由基可以被一个或取代 的多个取代基任选取代，例如芳基，环烷基，卤素，羟基，烷氧基，駿基，氛基，幾基，醜基，烧 氧幾基，氣基，硝基，疏基，烧硫基等。
[0093] 术语"(C7_C15)芳烷基"在本发明中是指被芳基取代的烷基自由基，所述的芳烃基 能够具有其它取代基，如卤素。烷基的实例是苄基和苯乙基。
[0094] 术语"环烷基"指的是3至10元的、饱和或部分饱和的、仅由碳和氢原子组成的稳定 单环、二环或三环基团，如环己基或金刚烷基。除非在说明书中另有说明，否则所述"环烷 基"一词是指包括被一个或多个取代基如烷基、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、烷氧基、羧基、 烷氧羰基等任选取代的环烷基基团。
[0095] 术语"芳基"在本发明中是指单个或多个芳族环的自由基，其具有5-18个连接键， 其中一质子已从环内移除。芳基是，例如但不限于，苯基、萘基。优选的芳基具有5至7个碳原 子，更优选的芳基是苯基。芳基自由基可以被一个或多个直链或支链取代基任选取代，例如 (&-C6 )烷基，并被卤素、三氟烷基、卤素、羟基或羧酸基任选取代。
[0096]术语"卤素"在本发明中是指溴，氯，碘或氟。在一个优选的实施例中，其指的是氟。
[0097]除非另有说明，本发明的化合物还指差别仅在于一个或多个同位素富集原子的化 合物。例如，具有此述结构，但氢被氘或氚取代，或碳被13C-或14C-富集碳或15N-富集的氮取 代的化合物，属于本发明的范围之内。
[0098]术语"互变异构体"或"互变异构形式"在本发明中是指具有不同能量且可经由低 能势皇互变的结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子异变的互变异构体），包括通 过质子迀移互变，例如，酮-烯醇或亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体包括通过键电子重组 的互变。
[0099] 术语"药学上可接受的盐和/或溶剂化物"是指任何药学上可接受的盐、酯、溶剂化 物，或任何其它药学上可接受的化合物，其中，当施用于接受者时，其能够提供(直接或间 接)如本文所述的化合物。然而，可以看出，不可药学上可接受的盐也属于本发明的范围之 内，因为它们可以用于制备药学上可接受的盐。术语"药学上可接受的"是指生理上可容许 的分子实体和组合物，且其施用于人时，通常不会引起过敏反应或类似的不利反应，例如胃 紊乱，眩晕等。优选地，术语"药学上可接受的"指经联邦或州政府的管理机构测试或包括在 美国药典或其他一般公知药典中从而可用于动物的，更具体而言，可用于人。盐和溶剂合物 的制备可以通过本领域中已知的方法来进行。
[0100] 例如，本文提供的化合物的药学上可接受的盐，是通过常规化学方法手段，从含有 碱或酸残基的原始化合物合成的。通常，这些盐的制备，例如，是将所述化合物的游离碱或 酸形式与溶于水或有机溶剂或两者混合物中的化学计算量的合适碱或酸反应。通常，优选 为非水介质，如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。酸加成盐的实例包括:矿物酸加成盐，例 如:盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐；以及，有机酸加成盐，例如：乙酸 盐、马来酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、琥珀盐、酒石酸盐、苹果酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸 盐和对甲苯磺酸盐。碱加成盐的实例包括:无机盐，例如，钠盐、钾盐、钙盐、铵盐、镁盐、铝盐 和锂盐；以及，有机碱盐，例如，乙二胺、乙醇胺、N，N-二烷基乙醇胺、三乙醇胺、葡糖胺和碱 性氨基酸盐。
[0101] 所有式（I)化合物的前药的化合物均在本发明的范围之内。术语"前药"以其最广 泛的意义上使用，并且涵盖了在体内转化为本发明化合物的衍生物。所述衍生物对于本领 域技术人员是显而易见的，且所述化合物根据取决于分子中存在的官能团，包括下列衍生 物，但不限于此:酯、氨基酸酯、磷酸酯、金属盐磺酸酯、氨基甲酸酯和酰胺。
[0102] 特别优选的前药衍生物是那些，在所述化合物施用给患者时能增加本发明化合物 的生物利用度(例如，使口服给药的化合物更容易地被血液吸收）的前药衍生物，或者相对 于原始种类提高了原化合物在生物区室(例如，脑或淋巴系统）中的释放的前药衍生物。
[0103] 式（I)的化合物可以是作为游离化合物或作为溶剂化物的晶体形式，这两种形式 均应视为属于本发明的范围之内。溶剂化的方法是本领域公知的。合适的溶剂化物是药学 上可接受的溶剂化物。在一个具体的实施例中，所述溶剂合物是水合物。
[0104]式（I)的化合物或其盐或溶剂化物，优选为药学上可接受的或基本纯净的形式。药 学上可接受的形式可以理解为，具有药学上可接受的纯度水平，不包括正常的药物添加剂 如稀释剂和载体，并且不包括认为在正常剂量水平下有毒的材料。活性成分的纯度水平优 选为大于50%，更优选为大于70%，更优选为大于90%。在一个优选的实施例中，式（I)的化 合物或其盐或溶剂化物或前药的纯度大于95%。
[0105]式（I)的化合物可以含有一个或多个不对称中心或立构中心，且可以是外消旋混 合物、旋光富集混合物、纯对映异构体或对映异构体混合物。本发明包括式（I)化合物的所 有异构体和化合物的混合物。当结构显示为给定的立体化学结构时，则其它的立体化学结 构作为对映异构体或其非对映异构体，以及对映异构体和/或非对映异构体的混合物(包括 外消旋混合物），也均包括在内。具有一个或多个立构中心的式（I)化合物，可以通过现有技 术中的已知方法分离成相应的对映异构体和非对映异构体。可选地，对映异构体和其它具 有立体中心的化合物可以从具有已知构型的光学纯起始原料来合成。
[0106] 本发明中已经发现，本发明的化合物显示出对PPAR受体的调节活性。因此，式（I) 化合物及其治疗上可接受的盐、前药、互变异构体或溶剂化物，可用于预防和/或治疗调制 所述受体相关的病症或疾病。
[0107] 本发明的第二目标涉及一种药物组合物，下文称为本发明的药物组合物，其包括 本发明的化合物。在一个优选实施例中，本发明的药物组合物进一步包括至少一种药学上 可接受的赋形剂和治疗有效剂量的式（I)化合物。更优选地，其包括药学上可接受载体，更 优选地，其可以进一步包括另一活性成分。
[0108] 本发明的组合物可以以现有技术中已知的形式范围配制并用于向动物给药，更优 选为向哺乳动物、包括人类给药。为此，其可以是，但不限于，无菌水溶液或在其他生物流体 中，如血清。水性溶液可以是缓冲或非缓冲的，并且具有另外的活性或无活性成分。附加成 分包括:用于调节离子强度的盐;防腐剂，包括但不限于，抗微生物剂、抗氧化剂、螯合剂等； 以及，营养物质，包括葡萄糖、右旋糖、维生素和矿物质。可选地，该组合物可以制备成固体 形式并用于给药。该组合物可以组合多种惰性载体或赋形剂，包括但不限于:粘合剂，例如 微晶纤维素、黄蓍胶、或明胶;赋形剂，如淀粉或乳糖;分散剂，如藻酸或玉米淀粉;润滑剂， 如硬脂酸镁，助流剂，如胶体二氧化硅;甜味剂，如蔗糖或糖精;或调味剂，如薄荷或水杨酸 甲醋。
[0109] 因此，在本发明的该方面的一个优选实施例中，本发明的药物组合物可以进一步 包括药学上可接受载体。在又一个优选实施例中，所述药物组合物进一步包括赋形剂。在又 一个优选实施例中，所述药物组合物可以进一步包括另一活性成分。
[0110] 本文所称的术语"活性成分"、"活性物质"、"药物活性物质"或"药物活性成分"，是 指任何可能提供药理活性或提供另一种诊断、治愈、缓解、预防疾病的不同效果，或影响人 类或其他动物的身体的结构或功能的组分。该术语包括促进药物制备中的化学变化，且以 提供特定活性或效果的预测修饰形式存在其中的成分。
[0111] 本发明的第三目标涉及一种剂型，下文称为本发明的剂型，其包括本发明的化合 物或本发明的组合物。
[0112]在本说明书中，"剂型"应理解为包含或不包含具有适合剂量、保存、给药和生物利 用度的物理特性的添加剂的一种或多种活性成分的混合物。
[0113]术语"治疗有效量"是指有效治疗或预防疾病、紊乱或病症所必需的化合物用量。
[0114]本发明的化合物、药物组合物和剂型可以单独使用或与其它药物联用以提供联合 治疗。所述其他药物可以是相同药物组合物的一部分，或者提供为在同一时间或不同时间 给药的单独药物组合物。药物组合物的实例包括用于口服、外用或肠胃外给药的任何固体 组合物(片剂、丸剂、胶囊、颗粒等)或液体组合物(溶液、混悬液或乳剂）。所述组合物和/或 其制剂可以以一定形式范围（包括但不限于，腹膜内、静脉内、肌内、皮下、鞘内、心室内、经 口、肠内、肠胃外、鼻内或外用给药形式)施用于动物，包括哺乳动物，由此包括人类。在一个 优选的实施例中，药物组合物适合于口服给药。
[0115] 本发明的第四目标涉及本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型作为 PPAR受体的α(阿尔法)和γ (伽马)亚型的受体激动剂的用途，优选为体外用途。
[0116] 本发明的第五目标涉及本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型在制备 医药产品中的用途，或可选地，用作医药产品的本发明的化合物、本发明的组合物或本发明 的剂型。
[0117] 术语"医药产品"在本说明书中是指用于预防、诊断、缓解或治疗人类和动物的疾 病的任何物质。在本发明的上下文中，疾病是由PPAR受体的α和γ亚型(过氧化物酶体增殖 物激活受体)介导的病理。
[0118] 因此，本发明的第六目标涉及本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型 在制备用于预防或治疗由PPAR(过氧化物酶体增殖物活化受体)受体的 〇和γ亚型介导的病 理的医药产品中的用途。
[0119] 因此，本发明提供用于一种预防或治疗由PPAR(过氧化物酶体增殖物活化受体)受 体的α和γ亚型介导的病理的方法中的本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型。
[0120] 本发明的第七目标涉及本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型在制备 用于诱导饱腹感和控制消化，调节体脂和调整脂类和碳水化合物代谢的医药产品中的用 途。
[0121] 因此，本发明提供用于一种诱导饱腹感和控制消化，调节体脂和调整脂类和碳水 化合物代谢的方法中的本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型。
[0122] 本发明的第八目标涉及本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型在制备 用于预防或治疗代谢疾病的医药产品中的用途。在一个优选的实施例中，所述代谢疾病选 自肥胖、血脂异常、胰岛素抵抗、高血糖症和II型糖尿病。
[0123] 因此，本发明提供用于一种预防或治疗代谢疾病的方法中的本发明的化合物、本 发明的组合物或本发明的剂型。在一个优选的实施例中，所述代谢疾病选自肥胖、血脂异 常、胰岛素抵抗、高血糖症和II型糖尿病。
[0124] 本发明的第九目标涉及本发明的化合物、本发明的组合物或本发明的剂型在制备 用于预防或治疗心血管疾病中的医药产品中的用途。在一个优选的实施例中，所述心血管 疾病选自动脉粥样硬化和高血压。
[0125] 因此，本发明提供用于一种预防或治疗心血管疾病的方法中的本发明的化合物、 本发明的组合物或本发明的剂型。在一个优选的实施例中，所述心血管疾病选自动脉粥样 硬化和高血压。本发明的第十目标涉及一种化妆品组合物，以下称为本发明的化妆品组合 物，包括本发明的化合物和至少一种化妆品可接受的赋形剂和/或佐剂。
[0126] 式(I)的化合物及其药学上可接受的盐、前药或溶剂化物用于给药，以利用所述化 合物治疗病理状态所需的治疗有效量及剂型，将取决于许多因素，包括患者的年龄和状况、 疾病严重程度、给药途径和频率、所使用的调制化合物等。
[0127] 本发明的化合物和组合物可以单独使用或与其它药物一起使用以提供联合治疗。 其他药物可以是相同的组合物的一部分，或者提供为在同一时间或在不同的时间给药的单 独组合物。
[0128] 本发明的第十一目标涉及一种剂型，下文称为本发明的第二剂型，包括本发明的 化妆品组合物。所述组合物可以以任何合适应用形式存在，例如，固体、液体或半固体(如乳 膏、软膏、凝胶或溶液），并且可以通过任何合适途径，优选为外用，为此，其可以包括给药期 望形式的制剂所需的化妆品可接受的佐剂。
[0129] 本发明的第十二目标涉及本发明的化妆品组合物或本发明的第二剂型用于减少 皮下脂肪的用途。
[0130] 因此，本发明提供用于一种减少皮下脂肪的方法中的本发明的化合物、本发明的 组合物或本发明的剂型。
[0131]本发明的第十三目标涉及用于获取如式（I)所示化合物的方法其包含在三甲基铝 和THF的存在下令芳香胺(式(II)的化合物)与酯类(式(III)的化合物)反应，其中取代基R1 和R2的定义如上所述。
[0133]在一个优选的实施例中，所述的用于获取如通式（I)所示化合物的方法，其特征在 于芳基胺与酯类的终反应，包括以下步骤：
[0134] a)用Boc酸酐保护对氨基苯甲酸的胺；
[0135] b)在三乙胺的存在下，通过H0Bt、EDCI或PyBOP酸活化剂令受保护的对氨基苯甲酸 与胺反应；
[0136] c)在CH2C12/TFA两相体系中令氨基去保护，得到芳基胺；
[0137] d)在作为THF中的碱的叔丁醇钾的存在下，通过溴化衍生物上的恶唑烷酮烯醇化 物的亲核取代反应，得到甲酯；
[0138] e)在三甲基铝的存在下，在微波反应器中以125°C反应35分钟，从甲酯和芳基胺反 应形成酰胺键;粗反应产物在冰水混合物中冷却并用HC1 (1N)酸化，直到泡腾停止；
[0139] f)用乙醚(2 X 20ml)提取，在无水MgS〇4中干燥，并减压除去溶剂；
[0? 40] g)用色谱层析法(6: 4Hex/AcOEt)纯化粗反应产物。
[0141]更优选地，所述的用于获取如通式（I)所示化合物的方法，其特征在于，所述胺选 自4_(叔丁基)-苄基胺、4_(二氟甲基)-节胺、节胺、六氢节胺、1-戊胺、1-十二烷基胺、环丙 胺，且所述酯是甲基-3-(溴甲基)苯甲酸酯。
[0142] 本发明还提供包含本发明化合物的组合物。
[0143] 本发明还提供包含本发明化合物的营养学组合物。
[0144] 营养药物组合物的，因为它在本说明书中使用的，是指任何组合物或成分它们提 供对人体健康有益。它们优选食品组合物和/或功能性食品，即，它们不仅制备由于它们的 特征的食品的营养，而且因为它们符合特定的功能，如提高的健康和减少感染疾病的危险。
[0145] 优选的食品组合物是选自，但不限于，饮料，食品，输注，牛奶，酸奶，奶酪，发酵乳， 乳味饮料，豆奶，谷物，面包，蛋糕，奶油，人造奶油，调味汁，煎炸油，植物油，玉米油，橄榄 油，大豆油，棕榈油，葵花籽油，棉籽油，调味品，沙拉酱，果汁，糖浆，甜点，釉料和馅料，软冷 冻产品，糖果，口香糖。
[0146] 本发明还提供本发明的营养学组合物用于减少皮下脂肪的用途。
[0147] 实施例
[0148] 以下实施例用于举例说明，并且旨在限制本发明。
[0149] A ·化学合成
[0150] 本发明的式（I)的化合物的合成利用了收敛合成路线，其中最终化合物是式（II) 的化合物与式(m)的化合物结合的结果。
[0151] 此方法总结在下面的方案(I)中：
[0153] a)BoC2〇，Et3N，H2〇/二恶烷；b)PyB0P，H0Bt，Et 3N，THF;c)CH2Cl2/TFA;d)(R)-(-)-4-R2-3_丙酰基恶唑烷-2-酮，ΑιιΟΚ，THF; e)哈A1 (CH3) 3的 2.0M 庚烷，THF。
[0154] 方案（I)
[0155] 为了合成式（II)的化合物，将用Boc酐保护胺的对-氨基苯甲酸用作起始材料。所 得中间体(A)在三乙胺的存在下，通过HOBt、EDCI或PyBOP酸活化剂与不同取代的胺反应，得 到中间体⑶。在CH 2C12/TFA两相体系中令氨基去保护，得到式（II)的化合物。然后，在作为 THF中的碱的叔丁醇钾的存在下，通过溴化衍生物上的相应恶唑烷酮烯醇化物的亲核取代 反应，得到式απ)化合物。
[0156] 在三甲基铝的存在下，式（II)和（III)通过甲基酯酰胺键的形成，结合产生通式 (I)化合物家族。
[0157] 实施例丨.制备获取式（IV)的（R)-3-(( 4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-Ν_(4-((4-(叔丁基)苄基)氨基甲酰基)苯基)苯甲酰胺（1)
[0159] 在N2气氛下，取含A1(CH3)3的2.0M庚烷(0.18毫升，0.36毫摩尔）添加至(R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)苯甲酸甲酯(0.06克，0.18毫摩尔）和化合物4-氨基-N-(4-(叔丁基）苄基）苯甲酰胺(0.10克，0.36毫摩尔）的溶液中；将反应混合物在微波反应器中 125 °C加热35分钟。粗反应产物在冰水混合物中冷却，并用HC1(1N)酸化直至泡腾停止。然 后，将其用二乙醚(20毫升)萃取，将有机萃取物用无水MgS0 4干燥，并减压除去溶剂。粗反应 产物通过biotage色谱仪色谱法(Hex/AcOEt)纯化，得到化合物1，为白色固体(0.05克， 44% ) </H NMR(300MHz，CDC13)S8.91(s，1H，NH)，7 ·83(ι?，1H) ,7.78-7.63(m，5H) ,7.44-7.15 (m,9H) ,7.07-6.96(m,2H) ,6.66(t ,J = 5.7Hz , 1H,NHCH2) ,4.74(m, 1H) ,4.57(d ,J = 5.7Hz , 2H,NHCH2),4.21-4.07(m,2H),4.00(m,lH),3.87(m,lH,H-4),3.04(dd,J=13.6,4.8Hz,1H, H-6)，2.63(dd，J=13.6,8.5Hz，lH，H-6)，1.30(s，9H，3CH3)</3C NMR(75MHz，CDC13)S166.8 (⑶），165.8(⑶），158.6(02)，150.5,141.2(07)，136.5(014)，135.2,131.2,129.8， 129.2,128.9(20,128.9(2C),127.9(2C),127.7(2C),127.2,127.1,126.6,125.6(20, 119.9(2C),67.l(C-5),55.8(C-4),46.0(C-13),43.8(CH 2),38.6(C-6),34.5(C(CH3)3), 31.3(3CH 3)。理论元素分析(：36出7吣〇4:(：，75.11;!1，6.484,7.30 ;实验元素分析:(：，75.00;!1， 6.75；N,7.70〇
[0160] 1)中间体(A):4-[(叔丁氧羰基)氨基]苯甲酸
[0161] 向含4-氨基苯甲酸(0.2克，1.5毫摩尔）的二恶烷(4毫升）的混合物(2毫升）中先后 加入三乙胺(0.4ml毫升，3毫摩尔）和二碳酸二叔丁酯(0.6克，3毫摩尔）。将反应混合物在室 温下搅拌24小时。减压去除溶剂，并且将残余物用IN HC1酸化。得到的沉淀物用水洗涤，获 得I，为白色固体（0.4克，89%)</H NMR(300MHz，DMS0-d6)S9.71(s，lH，C00H)，7.82(d，J = 8.7Hz,H-2,6),7.54(d ,J = 9Hz,H-3,5),1.44(s,9H,3CH3)〇13C NMR(75MHz ,DMS〇-d6)5l67.4 (CO)，152.9(C0),144.1，130.3(2CHar),124.4,117.6(2CHar),80.0([(CH3)3)，28.4(3CH 3)0 HPLC梯度：lOmin内 15-95%CH3CN/H20，tr = 4.25min，m/z[M+H] + = 237。理论元素分析 (：121115勵4:(：，60.75;!1，6.37 4,5.90;实验元素分析(：，60.84;!1，6.09 4,5.95。
[0162] 2)中间体(B):4-[N-(叔丁氧羰基)氨基]-N-(叔丁基)苄
[0163] 向含4-[N-(叔丁氧羰基）氨基]苯甲酸（0.30克，1.26毫摩尔）的THF中加入PyBOP (0 · 79克，1 · 52毫摩尔）、Et3N(0 · 21毫升，1 · 52毫摩尔）和H0Bt(0 · 21克，1 · 52毫摩尔）；将反应 混合物在〇°C下冷却几分钟。然后，加入4-(叔丁基)-苄胺(0.08克，1.52毫摩尔），并在室温 下保持恒定搅拌12小时。减压除去溶剂，用IN盐酸（20毫升)将残余物酸化，并用DCM(20毫 升）萃取。将有机萃取物用无水MgS04干燥，减压除去溶剂。粗反应产物通过柱色谱法纯化 (6:4己烷/乙酸乙酯），获得II，为白色固体(0.4克，60%)。咕 NMR(300MHz，CDCl3)S7.72(d，J = 8.6Hz,2H,H-2,6),7.42(d,J = 8.6Hz,2H,H-3,5),7.38(d,J = 8.4Hz,2H,H-l/ ,3^,7.29 (d,J = 8.4Hz,2H,H-3/ ,67 )6.77 (s , ΙΗ,ΝΗ), 6.37( t, J = 5.4Hz , 1H ,NHCH2), 4.59(d, J = 5.4Hz,2H,NHCH2) ,1.51(s,9H,CH3) ,1.31(s,9H,CH3) .13C NMR(75MHz，CDC13)S166·7(CO)， 152.3(00),150.6,141.5,135.2,128.5,128.0(0-3,5),127.8(0-37 ,57),125.7(C-2,6), 117.7(027 ,6' )，81.0(2(CH3)3)，43.8(CH2)，34.5(C)，31.3(3CH3)，28.3(301 3)。册1^：梯度： lOmin 内 15-95 % CH3CN/H2O，tr = 5 · 7 lmin，m/z [M+H] + = 383。理论元素分析C23H30N2O3: C， 72.22 ;H, 7.91 ;N, 7.32;实验元素分析 C, 72.51 ;H, 7.95 ;N, 7.20。
[0164] 3)式（11):4-氨基-1^(4-(叔丁基)苄基)苯甲酰胺
[0165] 将20ml三氟乙酸加入到4-[N-(叔丁氧羰基)氨基-N-(叔丁基)苄胺(0.20克，0.52 摩尔）的DCM(20毫升)溶液中；将反应混合物在室温下维持恒定搅拌5小时。然后，减压除去 溶剂，并将粗反应产物溶解于1M DCM/氢氧化钠双相系统（1:1)(20毫升）；将混合物搅拌10 分钟。然后，用DCM萃取，有机萃取物经MgS04干燥。溶剂在减压下获得III，为白色固体(0.13 克，90%) </H NMR(300MHz，CDCl3)S7.62((1, J = 8.3Hz ,211,11-37 ,5' )，7.37((1, J = 8.3Hz，2H， H-37 ,57 ),7.29(d ,J = 8.4Hz,2H,H-2/ , 67 ), 6.64(d, J = 8.4Hz , 2H,H-2,6), 4.59(d, J = 5.4Hz,2H,NHCH2) ,1.32(s,6H,CH3) .13C 匪R(75MHz，CDC13)S167·0(C0)，150·5，149·5， 135.5,128.7(0-3,5),127.7(0-3 7 ,57),125.6(0-27 ,67),124.0,114.1(C-2,6),43.7 (CH2)，34 · 5 (C)，31 · 3 (3CH3)。HPLC梯度：5min 内 15-95 % CH3CN/H2O，tr = 4 · 67min，m/z [M+H] + = 283。理论元素分析&8出办20:(：，76.56;!1，7.85 4,9.92;实验元素分析(：，76.71;!1，8.10;叱 9.94〇
[0166] 4)式（III): (R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)苯甲酸甲酯
[0167] 将叔丁醇钾(0.6克，5.24毫摩尔）加入到(R)-(-)_4-苄基-3-丙酰基恶唑烷-2-酮 (0.12克，5.24毫摩尔）的无水THF溶液（13毫升）中，并且将反应混合物在他气氛下室温搅拌 45分钟。然后，加入3-(溴甲基)苯甲酸甲酯（1克，4.36毫摩尔），并在室温下搅拌6小时。接 着，将饱和氯化铵溶液加入到反应混合物中，并用Ac0Et(20ml)萃取。将有机萃取物用无水 MgS04干燥，并减压除去溶剂。通过柱色谱法(7:3己烷/乙酸乙酯)纯化促反应产物，得到(R) 3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基）苯甲酸甲酯，为白色固体(0.432克，62%) JP 62 Γ,Η NMR(300MHz，CDC13)S8.06-7·95(ι?，1H)，7.90(s，lH) ,7.54-7.40(m，2H) ,7.36-7.22 (m，3H)，7.12-7.02(m，2H)，4.86(d，J=15.4Hz，lH)，4·18(m，2H)，4.10-4.02(m，lH),3.93 (s，3H，CH 3)，3 ·89-3·77(ι?，1H)，3.09(dd，J= 13.6,4.7Hz，lH，H-6)，2.66(dd，J= 13.6， 8.9Hz，1H，H-6).13C NMR(75MHz，CDC13)S166.5(C-20)，157.9(C-2)，136.4(C-7)，135.4(C-14),132.4(C-19),130.8(C-16),129.3(C-9),129.l(C-ll),129.0(C-18),128.9(C-8), 127.1(C-10)，67.0(C-5)，55.5(C-4)，51.9(C-21)，45.9(013)，38.3(06)。册1^：-]\^梯度 ： 5min 内 15-95 % CH3CN/H2O，tr = 4 · 8min，m/z [M+H] + = 326。理论元素分析 C19H19NO4: C，70 · 14; H, 5.89 ;N, 4.31;实验元素分析 C, 70.31 ;H, 5.67 ;N, 4.60。
[0168] 实施例2 .制备获取式(V)的（R)-3-( (4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4-((4-(三氟甲基)苄基)氨基甲酰基)苯基)苯甲酰胺(2)
[0170] 在N2气氛下，取含A1(CH3)3的2.0M庚烷(0.30毫升，0.61毫摩尔）添加至(R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基）苯甲酸甲酯(0.10克，0.31毫摩尔）和4-氨基-N-(4-(三氟 甲基)苄基)苯甲酰胺(0.18克，0.61毫摩尔）的溶液中；将反应混合物在微波反应器中125 °C 加热35分钟。粗反应产物在冰水混合物中冷却，并用HC1 (IN)酸化直至泡腾停止。然后，将其 用乙醚(30ml)萃取，将有机萃取物用无水MgS04干燥，并减压除去溶剂。粗反应产物通过色 谱法(6:4己烷/乙酸乙酯)纯化，得到化合物2，为白色固体(0.05克，44% )。咕NMR(300MHz， DMS0-d6)5l0.49(s,lH,NH),9.07(t ,J = 6.1Hz,lH,CH2NH),7.98-7.77(m,6H),7.69-7.59(m, 2H),7.53-7.42(m,5H),7.35-7.10(m,5H),4.68(d ,J=15.6Hz,lH,H-13)4.55(d ,J = 5.8Hz, 2H,CH2NH),4.41(d,J=15.6Hz,lH,H-13),4.22-4.12(m,lH,H-5),3.92-3.81(m,lH,H-4), 3.05(dd，J=13.5,4.2Hz，lH，H-6)，2.75(dd，J=13.6,8.1Ηz，1Η，Η-6)</3(：匪R(75MHz, DMS0)S165.8(C0)，165.7(C0)，157.7(C0)，144.7,141.9,137.3,136.1,135.1,131.0,129.2 (20,129.0,128.7,128.5(3C),128.0(2C),127.9(3C),127.85,127.6,126.8,126.7,125.2 (CF 3) ,119.5,66.3(C-5) ,55.3(C-4) ,45.1(C-13)，42.3(NHCH2)，37.2(C-6) .HPLC梯度： lOmin 内 15-95%CH3CN/H2〇，tr=10.21min，m/z[M+H] + = 589。理论元素分析 C33H28F3N3〇4:C， 67.45;!1，4.8〇4,7.15;实验元素分析(：， 67.69;!1，5.0〇4,7.14。
[0171] 1)中间体(B):4-N-(叔丁氧羰基)氨基-N_(4-三氟甲基)苄胺
[0172] 4-[(叔丁氧羰基)氨基]苯甲酸(0.10克，0.42毫摩尔），1'册，？780?(0.26克，0.51毫 摩尔），H0Bt(0 · 07克，0 · 51晕摩尔），和Et3N(0 · 07毫升，0 · 51晕摩尔），4_(二氣甲基)-节胺 (0.07毫升，0.51 毫摩尔）。0· 匪R(300MHz，DMS0-d6)S9.61 (s，lH，NH)， 8.96(t,J = 6.0Hz,1H,NHCH2) ,7.81(d,J = 8.8Hz,2H,CHar),7.68(d,J = 8.2Hz,2H,CHar), 7.56-7.47(m,4H,CHar) ,4.52(d,J = 5.8Hz,2H,NHCH2) ,1.47(s,9H,CH3)〇13C 匪R(75MHz, DMS0)5l65.8(C0),152.5(C0),144.7(Car),142.4(Car),128.0(Car),127.8(2CHar),127.3 (2CHar),125.2(Car),125.1(2CHar),125.1,125.0,117.1(2CHar),79.4(CF3),42.2(C (CH3)3)，28 · 0 (CH3)。HPLC梯度：5min 内 10-100 % CH3CN/H2O，tr = 5 · 24min,m/z [M+H] + = 396。 理论元素分析(：2〇!12正必2〇3:(：，60.91 ;!1，5.37 4,7.10;实验元素分析(：，61.10;!1，5.25;1 6.88〇
[0173] 2)式（II) :4-氨基-Ν-(4_(三氟甲基)苄基)苯甲酰胺
[0174] 4-[Ν-(叔丁氧羰基）氨基]-Ν-(4-三氟甲基）苄胺(0.20克，0.51摩尔），DCM(20毫 升），三氟乙酸（20毫升）。0.14克，92%产率。4 Mffi(300MHz，CDCl3W7.63(d，J = 8.3Hz，2H， H-37 ,57 ) ,7.58(d,J = 7.8Hz,2H,H-2,6),7.44(d,J = 7.8Hz,2H,H-3,5),6.65(d,J = 8.3Hz, H-27 ,67 ) ,6.42(s,1H,NHCH2) ,4.67(d, J = 5.8Hz , 2H,NHCH2), 4.34-3.49(bs , 2H,NH). 13C ^^(7510^,0)(:13)3167.2(0)),149.8,142.8,128.8((:-37 ,5' )，127.9(C-3,5)，125.7(C-2, 6)，125·6，125·5，125·5，123·4，114· KC-2' ,6' )，43.4(012)。册1^：梯度：5min内：15-95% CH3CN/H2O in 5min,tr = 4.21min,m/z[M+H] + = 295〇
[0175] 实施例3.制备获取式(VI)的（R)-3_((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N_(4-(苄基氨基甲酰基)苯基)苯甲酰胺(3)
[0177] 在N2气氛下，取含A1 (CH3)3的2.0M庚烷(0.18毫升，0.36毫摩尔）添加至(R)-3-( (4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)苯甲酸甲酯(0.06克，0.18毫摩尔)和化合物4-氨基-N-苄 基苯甲酰胺(0.081克，0.36毫摩尔）的无水THF溶液中（10毫升）；将反应混合物在微波反应 器中125 °C加热35分钟。粗反应产物在冰水混合物中冷却，并逐滴加入HC1 (1N)直至泡腾停 止。然后，将其用二乙醚(20毫升)萃取，将有机萃取物用无水MgS04干燥，并减压除去溶剂。 粗反应产物通过色谱法(6 :4己烷/乙酸乙酯）纯化，得到3，为白色固体(0.04克，40 % )。咕 NMR(300MHz,DMS0-d6)5l0.47(s,lH,NH),8.95(t ,J = 6.0Hz,lH,NHCH2),8.04-7.78(m,6H), 7.64-7.48(m,4H) ,7.45-7.13(m,8H) ,4.68(d,J= 15.6Hz, 1H) ,4.47(d,J = 6.0Hz,2H, NHCH2),4.41(d,J=15.9Hz,1H),4.22-4.18(m,lH),4.08-3.99(m,lH),4.03-3.83(m,1H,H-4)，3.05((1(1，了=13.7,4.2抱，1!1，!1-6)，2.75((1(1，了=13.5,8.2泡，1!1，!1-6)。 13〇 NMR(75MHz, DMS0-d6)Sl65.6(2C0),139.8(⑶），137.3,136.1,135.1,131.0，129.2(2C)，128.7,128.5 (2C),128.2(3C),127.9(2C),127.2(3C),126.8,126.7(20,119.5(2C),66.3(C-5),55.3 (C-4) ,45.1 (C-13),42.5(NHCH2)，37.2(C-6)。理论元素分析C32H29N3〇4:C，73.97;H,5.63;N, 8 · 09;实验元素分析 C，73 · 88; H，5 · 66; N，8 · 08。
[0178] 1)中间体(B):叔丁基(4-(苄基氨基甲酰基)苯基)氨基甲酸酯
[0179] 4-[(叔丁氧羰基)氨基]苯甲酸(0.20 克，0.84 毫摩尔），THF(20ml)，PyB0P(0.53 克， 1 ·01晕摩尔），H0Bt(0 · 14克，1 · 01晕摩尔），Et3N(0 · 14毫升，1 ·01晕摩尔），节胺（0 · 11毫升， 1.01毫摩尔）。〇.19克，产率80%</Η Mffi(300MHz，DMS0-d6M9.60(s，lH，NH)，8.86(t，J = 5.9Hz,lH,NHCH2),7.80(d ,J = 8.7Hz,2H,H-2,6),7.52(d ,J = 8.7Hz,2H,H-3,5),7.38-7.18 (m,5H),4.45(d,J=5.9Hz,2H,NHCH2),1.47(s,9H,3CH 3)〇13C 匪R(75MHz，DMS0)S165·7 (CO)，152.5(C0)，142.3,139.8,128.2(C-2,6)，128.0(C-3,5)，127.6,127.1,126.1,117.1， 79.4([(013)3)，42.5(順012)，28.0(3013)。理论元素分析(：191122吣03:(：，69.92 ;!1，6.79 4， 8.58;实验元素分析 C, 70.16 ;H, 6.49 ;N, 8.58。
[0180] 2)式（II): 4-氨基-N-苯甲酰胺苄
[0181] 叔丁基(4-(苄氨甲酰)苯基)氨基甲酸酯(0.35克，1.07毫摩尔），DCM(20毫升），三 氟乙酸（20毫升）。0.22克，92%产率。1!1匪1?(3001泡，0150-(16)58.55(^ = 5.9泡，1!1， NHCH2)，7.62(d，J = 8.6Hz，2H，H-2,6) ,7.40-7.17(m，5H)，6.54(d，J = 8 ·6Ηζ，2Η，Η-3,5)， 5.60(s，2H，NH2)，4.42(d，J = 5.9Hz，2H，NHCH2)</3CMffi(75MHz，DMS0-d6)Sl66.2(C0)， 151.6,140.3,128.7(C-2,6) ,128.1,127.1,126.5,121.0,112.5(C-3,5)，42.3(CH2)。理论 元素分析&疋14他0:(：，74.31;!1，6.24 ;叱12.38;实验元素分析(：，74.39;!1，6.43;叱12.55。
[0182] 实施例4制备获取式(VH)的（R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4-((环己基甲基)氨基甲酰基)苯基)苯甲酰胺(4)
[0184] 在N2气氛下，取含A1 (CH3)3的2.0M庚烷(0.18毫升，0.36毫摩尔）添加至(R)-3-( (4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)苯甲酸甲酯(0.06克，0.18毫摩尔）和化合物4-氨基-N-(环 己基甲基)苯甲酰胺(0.12克，0.36毫摩尔）的溶液中（10毫升）；将反应混合物在微波反应器 中125°C加热35分钟。粗反应产物在冰水混合物中冷却，并以HC1 (1N)酸化直至泡腾停止。然 后，将其用二乙醚(2X20毫升）萃取，将有机萃取物用无水MgS04干燥，并减压除去溶剂。粗 反应产物通过色谱法(6:4己烷/乙酸乙酯)纯化，得到4，为白色固体(0.04克，42 % )。咕NMR (300MHz，CDC13)S9.08(s，1H，NH)，7.85-7·74(m，1H)，7.78-7.61(m，5H),7.45-7.16(m，5H)， 7.09-6.96(m,2H),6.50(t,J=6.0Hz,lH,CH 2NH),4.73-4.62(m,lH),4.21-4.06(m,2H), 4.00(m,lH) ,3.93-3.79(m,lH,H~4) ,3.25(t,J = 6.0Hz,2H,CH2NH) ,3.03(dd,J=13.6, 4.9Hz,lH,H-6),2.63(dd,J=13.6,8.6Hz,lH,H-6),1.82-1.52(m,6H),1.32-1.10(m,4H), 0.93(111，2!1)。 13(：匪R(75MHz,CDC13)S166.9(C0) ,165.5(C0), 158.5,140.8,136.8,135.4， 135.3,131.4,130.5,129.3,129.0,127.9(4C)，127.3(2C)，127.0,126.6,119.8,119.7 (2C),67.2(C-5),55.7(C-4),46.3(CH 2NH),46.1(C-13),38.8(C-6),38.0(CH),30.9(2CH2), 26 · 4 (CH2)，25 · 8 (2CH2) · HPLC-MS梯度：1 Omin 内 40-95 % CH3CN/H2O，tr = 5 · 7 lmin, m/z [M+H] + = 526。理论元素分析(：32出5吣〇4:(：，73.12;!1，6.714,7.99 ;实验元素分析(：，73.44;!1，6.58; N,7.52〇
[0185] 1)中间体(B):叔丁基(4-((环己基甲基)氨基甲酰基)苯基)氨基甲酸酯
[0186] 4-[(叔丁氧羰基）氨基]苯甲酸（0.14克，0.57毫摩尔），DMF(20毫升），EDCI (0.17 克，0.88晕摩尔），H0Bt(0.12克，0.88晕摩尔），和Et3N(0.12毫升，0.88晕摩尔），六氛节胺 (0.11毫升，0.88毫摩尔），并将反应混合物在室温下搅拌12小时。减压除去溶剂，将粗反应 产物再溶于DCM( 20毫升）中，用1NHC1 (10毫升)酸化。然后，将其用DCM( 2 X 20毫升)萃取，有 机萃取物用无水MgS〇4干燥，并减压除去溶剂。最后，通过biotage色谱仪纯化，获得II，为白 色固体（0.06克，31%)</H NMR(300MHz，DMS0-d6)S9.56(s，lH，NH)，8.24(t，J = 5.8Hz，lH， NHCH2) ,7.74(d,J = 8.7Hz,2H,H-2,6) ,7.49(d,J = 8.6Hz,2H,H-3,5) ,3.05(c,J = 6.2Hz, 2H,NHCH2),1.67(m,5H),1.47(s,9H),1.24-1.01(m,4H),0.90(m,2H)〇 13C NMR(75MHz,DMS〇-d6)5l65.7(C0),152.6(C0),142.0,128.06,127.9(C-2,6),117.0(C-3,5),79.4(C(CH 3)3), 45.3(^012),37.5(014,30.5(03^50),28.0(3013),26.1((:-40,25.4((:-2^600
[0187] 2)式（II) :4-氨基-N-(环己基甲基)苯甲酰胺
[0188] 叔丁基(4-((环己基甲基)氨基甲酰基）苯基)氨基甲酸酯（0.20克，0.60毫摩尔）， DCM(20毫升），三氟乙酸(20毫升）。0.11克无色油，产率80%</Η NMR(300MHz，DMS0-d6)S7.92 (t,J = 5.8Hz,lH,CH2NH) ,7.54(d,J = 8.6Hz,Ar 2,6-H), 6.50(d ,J = 8.6Hz , Ar3,5-H), 5.60-5.48(m,2H,NH2),3.08-2.92(m,2H,CH 2NH),1.66(m,5H),1.47(m,lH),1.13(m,3H), 0.95-0.77(m,2H).HPLC-MS 梯度：10min 中内 15-95%CH3CN/H2〇，tr = 7.35min，m/z[M+H] + = 233〇
[0189] 实施例5.制备和获得式(VIII)的(R)-3-(( 4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4-(戊基氨基甲酰基)苯基)苯甲酰胺(5)
[0191] 在N2气氛下，取含A1(CH3)3的2.0M庚烷(0.30毫升，0.61毫摩尔）添加至(R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)苯甲酸甲酯(0.10克，0.31毫摩尔)和化合物4-氨基-N-戊 基苯甲酰胺(〇. 13克，0.61毫摩尔）的溶液中；将反应混合物在微波反应器中125 °C加热35分 钟。粗反应产物在冰水混合物中冷却，并用HC1(1N)酸化直至泡腾停止。然后，将其用二乙醚 (2 X 20毫升)萃取，将有机萃取物用无水MgS04干燥，并减压除去溶剂。粗反应产物通过色谱 法(6:4己烷/乙酸乙酯)纯化，得到5,为白色固体(0.07克，45%)。咕NMR(300MHz，DMS0-d 6)S 10.46(s,lH,NH),8.35(t,J=5.6Hz,lH,CH2NH),7.91(m,lH),7.86(s,5H),7.58-7.51(m, 2H),7.32-7.17(m,5H),4.69(d ,J=15.7Hz,lH) ,4,42(d ,J= 15.6Hz, 1H) ,4.23(m, 1H) ,4.06 (m,lH) ,4.00-3.89(m,lH,H-4) ,3.25(c,J = 6.7Hz,2H,NHCH2) ,3.06(dd,Jab=13.6 Ja4 = 4.2Hz,lH,H-6),2.77(dd ,Jba= 13.6 ,Jb4 = 8.1Hz,lH,H-6),1.52(m,2H), 1.42-1.18(m,4H), 0.95-0.79(m ,J = 6.8Hz,3H(32))〇13C NMR(75MHz ,DMS〇-d6)5l66,0(C0), 165.9(C0), 158.1, 141.9,137.6,136.5,135.5,131.4 130.1,129.6(2C),129.1,128.9(2C),128.2(2C), 127.6,127.2,127.1,119.8(20,66.7(C-5),55.7(C-4),45.5(C-13),40.7(CH 2),37.6(C-6), 29 · 2(CH2)，29 · 1 (CH2)，22 · 3 (CH2)，14 · 3(CH3) oHPLC-MS梯度：lOmin内 40-95 % CH3CN/H2O， tr = 5 · 09min，m/z [M+H] + = 500 ·理论元素分析 C3QH33N3O4 :C，72.12;H，6.66;N，8.41;实验元 素分析 C，72.40 ;H, 6.83 ;N, 8.68。
[0192] 1)中间体(B):叔丁基(4-(戊基氨基甲酰基)苯基氨基甲酸酯
[0193] 4_[(叔丁氧羰基）氨基]苯甲酸（0.3克，1.26毫摩尔），1'冊(2〇1111)，？780?(0.78克， 1 · 52晕摩尔），H0Bt(0 · 21克，1 · 52晕摩尔）和Et3N(0 · 21毫升，1 · 52晕摩尔），1_戊胺（0 · 17晕 升，1.52毫摩尔）。0.12克，33%产率。4 NMR(300MHz，CDCl3)S7.70(d，J = 8.6Hz，2HAr)，7.42 (d，J = 8.6Hz，2HAr)，6.70(s，lH，NH)，6.08(s，lH，NH)，1.52(s，9H，Me)，1.40-1.29(m，8H)， 0.91(t，J = 6.8Hz，3H，CH3)</3C NMR(75MHz，CDC13)S166.8(C0)，152.3(C0) ,141.2,129.0， 127.9(C-2,6) ,117.7(C-3,5) ,81.0(C(CH3)3) ,40.0(CH2) ,29.4(CH2) ,29.1(CH2) ,28.2 (CH2),22.4(CH3),13.9(3CH3)〇
[0194] 2)式(II): 4-氨基-N-戊基苯甲酰胺
[0195] 叔丁基(4-(戊基氨基甲酰基)苯基氨基甲酸酯(0.76克，3.68毫摩尔），DCM/TFA(1: 1 )(40毫升）。0.44克，85%产率。ΜΡ9%~</Η NMR(300MHz,CDC13)S7.58((1,J = 8.6Hz，2H，H-2， 6)，6.64(d，J = 8.6Hz，2H，H-3,5) ,6.01 (s, ΙΗ,ΝΗ),3.40(td, J = 7.2,5.7Hz ,2H,NHCH2CH2), 1.57(c,J = 7.1Hz,2H,NHCH2CH2),l.43-1.24(m,4H),0.99-0.79(m,3H,CH 3)〇13C NMR(75MHz, CDC13)S167.2(⑶），149.4，128.5(C-2,6)，124.4，114.1(C-3,5),40.0(0?)，29.5(CH 2)， 29.1(CH2)，22.4(CH2)，14.0(CH3)〇
[0196] 实施例6.制备获取式(K)的(R)- 3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N_(4-(十二烷基氨基甲酰基)苯基)苯甲酰胺(6)
[0198] 在N2气氛下，取含A1 (CH3)3的2.0M庚烷(0.3毫升，0.36毫摩尔）添加至(R)-3-( (4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基）甲基苯甲酸甲酯(0.06克，0.18毫摩尔）和化合物4-氨基-N-十二烷基苯甲酰胺(0.11克，0.36毫摩尔）的溶液中；将反应混合物在微波反应器中125°C 加热35分钟。粗反应产物在冰水混合物中冷却，并用HC1 (IN)酸化。然后，将其用二乙醚萃 取，将有机萃取物用无水MgS04干燥，并减压除去溶剂。粗反应产物通过色谱法(6:4己烷/乙 酸乙酯)纯化，得到化合物6，为白色固体(0.05克，45%)</H NMR( 300MHz，CDC13) δ8.69- 8.56 (m，lH),7.94-7.64(m，5H),7.53-7.19(m，5H),7.13-7.00(m，2H),6.34-6.14(m，lH),4.81 (m，lH，CH 2NH),4.30-4.13(m，lH)，4.02(m，lH),3.94-3.79(m，lH)，3.45(m，1H，H_4),3.06 (dd,J=13.6,4.8Hz,lH,H-6),2.66(dd,J=13.6,8.6Hz,lH,H-6),1.60(m,2H),1.46-1.15 (m, 18H) ,0.87( t,J = 6.7Hz,3H,CH3)〇13C NMR(75MHz , CDC13) δ166.9 (CO), 165.6(C0), 158.6,140.7,136.7,135.4,135.3,131.4,130.5,129.3,129.0(3C),127.8(2C),127.3, 127.0,126.6,119.9(20,116.7,67.2(C-5),55.7(C-4),53.1(CH 2),46.1(C-13),40.2 (CH2)，38.7(C-6)，31.9(CH2)，29.6(4CH2)，29.3(3CH2)，27.0(CH2)，22.7(CH2)，14.1(CH 3)。
[0199] 1)中间体(B):叔丁基(4-(十二烷基氨基甲酰基)苯基)氨基甲酸酯
[0200] 4-[(叔丁氧羰基)氨基]苯甲酸(0.20克，0.84毫摩尔），THF(20毫升），1_十二烷基 胺（0 · 23毫升，1 · 01晕摩尔），EDCI (0 · 19克，1 · 01晕摩尔），H0Bt (0 · 14克，1 · 01晕摩尔），和 Et3N(0· 14 毫升，1.01毫摩尔）。0.22 克，产率 65% ,Η MlR(300MHz，CDCl3)S7.69(d，J = 8.6Hz，2H，H-2,6)，7.42(d，J=8.6Hz，2H，H-3,5)，6.70(s，lH，NHC0-0)，6.12(bs，lH，NHC0)， 3.42(m,2H,CH 2NH), 1.61(m,2H,CH2), 1.52(s,9H,3CH3), 1.42-1.17(m,18H,9CH2),0.86-0.84(m，3H，CH3)</ 3C NMR(75MHz，CDC13)S166.8(C0)，152.3(C0)，141.3，128.9，127.9(C-2， 6) ,117.7(C-3,5) ,81.0(C(CH3)3) ,40.1(CH2N) ,31.9(CH2) ,29.7(CH2) ,29.6(CH2) ,29.54 (CH2)，29.50(CH2)，29.3(3CH2)，28.3(3CH3)，27.0(CH2)，22.6(CH2)，14.1(CH 3)。理论元素分 析〇24114必2〇3:(：，71.25;!1，9.97 4,6.92;实验元素分析(：，71.08;!1，10.12 4,6.63。
[0201] 2)式（II):4-氨基-N-十二烷基苯甲酰胺
[0202] 叔丁基（4-(十二烷基氨基甲酰基）苯基）氨基甲酸酯（0.20克，0.49毫摩尔），DCM (20毫升），三氟乙酸（20毫升）中。0.14克，92%产率。1!1匪1?(30冊!^，00(：13)67.59((1，了 = 8.6Hz,2H,H-2,6),6.65(d ,J = 8.6Hz,2H,H-3,5),6.05-5.91(m,lH,NH),3.40(c ,J = 7.1Hz, 1H,NHCH2), 1.65-1.50 (m, 2H,NHCH2CH2),1.45-1.16(m, 18H), 0.87(m, 3H, CH3). 13C NMR (75MHz，CDC13)S167.2，149.3，128.9，128.5，127.8(C-2,6)，114.1(C-3,5)，39.9(NHCH2), 31.9(CH2)，29.8(CH2)，29.6(4CH2)，29.3(3CH2)，27.0(CH2)，22.7(CH2)，14.09(CH 3)。理论元 素分析 C19H32N2O: C, 74.95 ;H, 10.59 ;N，9.20;实验元素分析 C, 74.65 ;H, 10.81 ;N，9.48。
[0203] 实施例7 .制备和获得式（x )的（R)-3-( (4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N_ (4-(环丙基氨基甲酰基)苯基)苯甲酰胺(7)
[0205] 在他气氛下，取含A1 (CH3)3的2.0M庚烷（1.11毫升，2.24毫摩尔）添加至(R)-3-( (4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基）甲基苯甲酸甲酯(0.18克，0.56毫摩尔）和化合物4-氨基-N-十二烷基苯甲酰胺(0.18克，0.67毫摩尔）的溶液中；将反应混合物在微波反应器中125 °C 加热35分钟。粗反应产物在冰水混合物中冷却，并用HC1 (IN)酸化。然后，将其用二乙醚萃 取，有机萃取物用无水MgS04干燥，并减压除去溶剂。粗反应产物通过色谱法(6:4己烷/乙酸 乙酯）纯化，得到化合物7,为白色固体(0.05克，NMR(Me0D，300MHz)S7.90-7.88(m, 1H),7.84(bs，2H),7.79-7.77(m，2H),7.55-7.51(m，4H),7·30-7·26(ι?，2H),7-18-7.16(m, 2H),4.81(d ,J = 4.8Hz,lH),4.36(d ,J = 4.4Hz 1H) ,4.30-4.26(m, 1H) ,4.15-4.12(m, 1H), 4.06-4.02(m,lH),3.11(dd,J=13.7,5.1Hz,1H),2.87-2.80(m,2H),0.83-0.79(m,2H), 0·66-0·63(m,2H) </3C 匪R(Me0D，75MHz)Sl69.7(C),167.2(C),159.5(C),141.7(C) ,137 (C) ,135.9(0,135.3(0,131.1 (2CH) ,129.5(0,128.9(2CH) ,128.8(2CH) ,128.4(2CH), 126.9(2CH),126.7(CH),119.8(2CH) ,67.2(CH2),55.9(CH),45.5(CH2),37.8(CH2), 22.6 (CH),5.14(2CH2)〇
[0206] 1)中间体(B):叔丁基-4-(环丙基氨基甲酰基)氨基甲酸
[0207] 4-[(叔丁氧羰基）氨基]苯甲酸（0.50克，2.11毫摩尔），01^(25毫升），环丙基胺 (0.22毫升，3.17毫摩尔）』0(：1(0.61克，3.17毫摩尔），!1(?以0.43克，3.17毫摩尔）4阳七必 (0.88毫升，6.33毫摩尔）。0.28克，48%产率。]\^184°(：。1!1匪1?(]^00,3001抱）57.72((1，了 = 8.8Hz，2H)，7.48((1, J = 8.8Hz，2H)，2.82(qd，J = 7 ·4,3·9Ηζ，1Η)，1.52(s，9H) ,0.93-0· 73 (m，2H)，0·69-0·50(ι?，2Η)。13。 NMR(Me0D，75MHz)Sl64.6(NH⑶Ar)，155·2(ΝΗ⑶0),144.5 (C) ,139.15(C),129.6(2CH),119.1(2CH),81.6(0,29.0(3CH3),24.3(CH),6.95(2CH 2) ? HPLC-MS gradient of 15-95% CH3CN/H2O in 10min，tr = 7.84min，m/z[M+H] + = 277。理 论元素分析&5出必203:(：，65.2;!1，7.3 ;叱10.14;实验元素分析(：，65.18;!1，6.94;叱10.08。
[0208] 2)式（II): 4-氨基-N-环丙基苯甲酰胺
[0209] 叔丁基(4-(环丙基氨基甲酰基)氨基甲酸酯(0.55克，1.99毫摩尔），DCM(30毫升）， 三氟乙酸（30 毫升）中。0.22 克，产率 63%。]^ 142°C 咕匪 R(300MHz，Me0D)S7.57(d，J = 8.7Hz,2H),6.64(d,J=8.7Hz,2H),4.86(s,4H),2.85-2.71(m,lH),0.83-0.70(m,2H), 0.65-0.53(m，2H).13CMMR(75MHz，Me0D)Sl72.1(NHC0Ar)，153.2(C)，129.9(C)，123.1 (2CH)，114 · 6(2CH)，23 · 8(CH)，6 · 6(2CH2)。HPLC-MS梯度：1 Omin内 15-95 % CH3CN/H2O，tr = 1 · 2min，m/z [M+H] + = 177。理论元素分析 C1QH12N20: C，68 · 16; H，6 · 86; N，15 · 90;实验元素分析 C,67.97；H,6.80；N,15.75〇
[0210] B.PPAR α和γ受体的体外活化试验
[0211 ]细胞转染和焚光素酶报告基因测定
[0212] 准备和试剂
[0213]报告基因测定法是用于确定和量化蛋白质之间的物理相互作用的体外方法，在本 例中用于确认MCF-7细胞中转录因子PPAR-a与共活化剂SRC-1之间，和PPAR- γ与PPRE之间 的相互作用。
[0214] 商售化合物GW7647用作PPAR-a的阳性对照，且罗格列酮用作PPAR-γ Tocris Bioscience的阳性对照(Cookson Lted. Bristol，UK)。对于细胞培养的体外实验，所有的化 合物均用二甲基亚砜(DMS0)(Sigma Aldrich Spain)溶解并稀释。
[0215] DNA结构：将真核pSG5表达载体(4100个碱基对，Stratagene Co.)用作cDNA表达载 体，用于人类的PPAR-α受体和PPAR- γ受体。该结构用于哺乳动物细胞中的蛋白质体内表 达。
[0216] 取人类CPTI基因 DR1 型RE(序列GTAGGGAAAAGGTCA)(参考文献：Tinahones FJ, Moreno-Santos I,Vendrell J,Chacon MR,Garrido-Sanchez L,Garcia-ffasntes E,and Macias-Gonzalez M.Obesity 2012,20:488-497)的四个副本，分别与pGL-2基本载体（5598 个碱基对，Promega Co.)(缺乏真核启动子并含有萤火虫(Photinus pyralis)焚光素酶报 告基因）的胸苷激酶启动子融合。该载体广泛用于能够在哺乳动物细胞中调控基因表达的 因子的定量分析。该PGL-2基本载体还具有氨苄青霉素抗性区(β-内酰胺酶基因）。
[0217] 在6孔板上，用不含酚红且补充有5%活性炭脱色的胎牛血清（或FBS)的杜氏改良 伊格尔培养基(DMEM)，培养人MCF-7乳腺癌细胞(10 5个细胞/ml)生长过夜。
[0218]细胞转染
[0219]含有DNA质粒的脂质体的形成，是通过将下列各项：
[0220] · lyg用于PPAR-a、RXR-a和野生型SRC-1的表达载体，或lyg用于PPAR-γ
[0221] 和PPRE野生型的表达载体；
[0222] · lyg萤光素酶报告基因质粒，
[0223] 与10yg N-[l_(2,3-二油酰基氧基)丙基]-N，N，N_三甲基铵硫酸盐(D0TAP，Roche) 在室温下以1〇〇μ1总体积共培养15分钟。脂质体用900μ1无酚红的DMEM稀释后，加入到细胞 中。在转染后4小时，加入补充有500μ1的15%活性炭脱色的?85的无酚红01^。此时，用含各 种浓度的不同化合物的DMS0将所述细胞处理16小时以作所述评估。
[0224] 根据厂商说明，细胞刺激开始后，用罗氏诊断有限公司（Roche Diagnostics GmbH)报告基因裂解缓冲液(50毫升5倍缓冲液)裂解16小时。
[0225] 还根据厂商说明进行了化学发光测定（萤光素酶报告基因测定的恒定光信号，罗 氏诊断有限公司），其允许定量测定转染细胞的荧光素酶活性。这种酶在转染细胞提取物中 可以检测为其生物发光的结果:在ATP，Mg 2+离子和02的存在下由萤光素酶催化的反应将荧 光素转化为氧化萤光素，进而产生可见光光子。
[0226] 萤光素酶活性相对于蛋白质浓度(先前用试剂盒，即Bio-Rad Laboratories Inc. 市售的Quick Start Bradford蛋白测定试剂盒lx，并使用/ERSA(TTax_酶标仪，以 Bradford方法获得)进行归一化，且诱导因子计算为受配体刺激的细胞相对于溶剂的荧光 素酶活性比率(Gonzalez MM and Carlberg C.JBC,2002,277:18501-9)，如表 1所示，对应 于PPAR-α和PPAR- γ的亲和力结果。
[0227] C.食物摄取体内实验
[0228] 食物摄取研究:急性治疗
[0229] 使用来自Charles Rivers LaboratoriesEspafia，S.A.(西班牙巴塞罗那）雄性 Wistar白鼠 （Rattus Norvegicus)，其重量在实验开始时在300_350g范围内。这些动物在控 制温度(22°C)和湿度(55 % )的条件和12小时的光/暗周期(8:00ΑΜ至8:00ΡΜ灭灯））下单独 笼养。大鼠在其各自笼中可以自由取食和饮水。所有的训练和实验进行在8:00PM后进行。在 由含5%吐温80的无菌生理血清组成的溶液中新鲜制备所有药物。在不同的小瓶中制备不 同剂量，由此在称量化合物必需量之后加入吐温80。将化合物与相应量的表面活性剂进行 超声处理并均化(使用磁搅拌器）15-30分钟。然后，加入必要体积的血清，直至补满该溶液。 将化合物以每千克动物lml的给药体积，以急性形式进行腹膜内（i . p.)给药。
[0230]在开始摄取实验之前，令动物习惯于被处理。为此，各实验进行之前的48-72小时， 将大鼠放置在除去基材(木肩）的笼中，并将放油食物的小容器放置在笼中4小时。这个初始 习惯阶段后，动物禁食24小时，但总是有自由饮水。
[0231 ]所述禁食期间，建立不同处理组，并从笼中除去基材，称量动物并称量食物小容器 (商购实验室饲料）。此外，称量水容器。用化合物给药后15分钟，将各个称量后的食物容器 给予每个动物，并且在不同的时间（30，60，120和240分钟）时再次称重。在一种情形中，在给 予后24小时称重。
[0232] 使用该数据计算所述时间间隔中的食物消耗。食物消耗表示为相对累积消耗(每 千克动物体重的食物克数）。水容器也在实验结束时称重。
[0233] 生物结果
[0234] 生物测定的结果如下所示。
[0235] 表1.不同的特异性PPAR-α激活化合物，特异性PPAR- γ激活化合物或泛活化剂的 激活浓度值50(EC50)。
[0237] 图1所示为化合物1的急性摄取实验结果，其中，可以看出，所述化合物能够在3.0 毫克/千克的有效剂量下减少约50%的摄取，在给药后120分钟显示出结果，且该结果在给 药240分钟后消失，这使其具有急性给药方面的潜力。
[0238] 图2所示为化合物5的急性摄取实验结果，其表明所述化合物的活性具有剂量依赖 性，在1.0毫克/千克的有效剂量下减少约50%摄取。此化合物显示的效果在240分钟后仍随 时间维持，并且它令人惊讶地仍具有给药后24小时（图3)的效果，这使得它有趣慢性施用。
【主权项】
1. 如通式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐、酯、互变异构体、溶剂化物和水合物中的任意一种，其中： R1选自（C1-C12)烷基、环烷基或-(CH2)-R 3,其中R3为环烷基或芳基； R2选自（C1-C12)烷基、芳烷基、芳基和氨基。2. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述R2为芳烷基。3. 根据权利要求2所述的化合物，其特征在于，所述R2为苄基。4. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其特征在于，所述R1为环烷基。5. 根据权利要求4所述的化合物，其特征在于，所述R1选自环丙基，环丁基，环戊基或环 己基。6. 根据权利要求5所述的化合物，其特征在于，所述R1为环丙基。7. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其特征在于，所述R1为(C1-C12)烷基。8. 根据权利要求7所述的化合物，其特征在于，所述R1为戊基或十二烷基。9. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其特征在于，所述R1为-(CH2)-R3,且其中 所述R 3为环烷基或芳基。10. 枏据叔刹要求9所述的化合物，其特征在于，所述R3为环己基或形式为丨勺芳基，且所述R4为氢或被一种或多种卤素任选取代的直链或支链烷基。11. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，其选自： &)(1〇-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基）-1(4-((4-(叔丁基）苄基）氨基甲酰 基)苯基)苯甲酰胺(1)，如式(IV)所示：/C (IV); b)(R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4-((4-(三氟甲基)苄基)氨基甲酰 基)苯基)苯甲酰胺(2)，如式(V)所示：c) (R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4-(苄基氨基甲酰基)苯基)苯甲酰 胺(3)，如式(VI)所5·式（VI ); d) (R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4-((环己基甲基)氨基甲酰基）苯 基)苯甲酰胺(4)，如式(VII)所示：Λ (VII)； e) (R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-Ν-(4-(戊基氨基甲酰基)苯基)苯甲酰 胺(5)，如式(VIII)所示： Λ (VIII)；f) (R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-Ν-(4-(十二烷基氨基甲酰基)苯基)苯 甲酰胺(6)，如式（IX)所示：式（IX); g) (R)-3-((4-苄基-2-氧代恶唑烷-3-基）甲基)-N-(4-(环丙基氨基甲酰基)苯基)苯甲 酰胺(7)，如式(X) t= 式（X);或其药学上可接受的盐、酯、互变异构体、前药、溶剂化物和水合物中的任意一种。12. 根据权利要求1-11中任一项所述的化合物，其特征在于，其为双重PPARa和PPAR γ 受体激动剂。13. 包含如权利要求1-12中任一项所述的化合物的药物组合物。14. 根据权利要求13所述的药物组合物，其特征在于，其进一步包含药学上可接受的载 体。15. 根据权利要求13或14所述的药物组合物，其特征在于，其进一步包括另一活性成 分。16. -种剂型，该剂型包含根据权利要求1-12中任一项所述的化合物，或根据权利要求 13-15中任一项所述的药物组合物。17. 根据权利要求1-12中任一项所述的化合物、根据权利要求13-15中任一项所述的药 物组合物或根据权利要求16所述的剂型，作为PPAR受体的α(阿尔法)和γ (伽马）亚型的受 体激动剂的体外用途。18. 根据权利要求1-12中任一项所述的化合物、根据权利要求13-15中任一项所述的药 物组合物或根据权利要求16所述的剂型在制备医药产品中的用途。19. 根据权利要求1-12中任一项所述的化合物、根据权利要求13-15中任一项所述的药 物组合物或根据权利要求16所述的剂型，在制备用于预防或治疗由PPAR受体(过氧化物酶 体增殖物活化受体)的α和γ亚型介导的病理的医药产品中的用途。20. 根据权利要求1-12中任一项所述的化合物、根据权利要求13-15中任一项所述的药 物组合物或根据权利要求16所述的剂型在制备用于诱导饱腹感和控制消化，调节体脂和调 整脂类和碳水化合物代谢的医药产品中的用途。21. 根据权利要求1-12中任一项所述的化合物、根据权利要求13-15中任一项所述的药 物组合物或根据权利要求16所述的剂型在制备用于预防或治疗代谢疾病的医药产品中的 用途。22. 根据权利要求21所述的化合物、药物组合物或剂型的用途，其特征在于，所述代谢 疾病选自肥胖、血脂异常、胰岛素抵抗、高血糖症和II型糖尿病。23. 根据权利要求1-12中任一项所述的化合物、根据权利要求13-15中任一项所述的药 物组合物或根据权利要求16所述的剂型在制备用于预防或治疗心血管疾病的医药产品中 的用途。24. 根据权利要求23所述的化合物、药物组合物或剂型的用途，其特征在于，所述心血 管疾病选自动脉粥样硬化和高血压。25. 包含根据权利要求1-12中任一项所述的化合物和至少一种化妆品可接受的赋形剂 和/或佐剂的化妆品组合物。26. 包含根据权利要求25所述的化妆品组合物的剂型。27. 根据权利要求25所述的化妆品组合物或根据权利要求26所述的剂型用于减少皮下 脂肪的用途。28. 根据权利要求1-12中任一项所述的化合物、根据权利要求13-15中任一项所述的药 物组合物或根据权利要求16所述的剂型在制备用于减少皮下脂肪的医药产品中的用途。29. 包含根据权利要求1-12中任一项所述的化合物的营养学组合物。30. 根据权利要求29所述的营养学组合物用于减少皮下脂肪的用途。31. 用于获取如通式（I)所示化合物的方法，其特征在于，该方法包括在三甲基铝和THF 的存在下令式(I I)的化合物与式(I II)的化合物反应，其中取代基如权利要求1中所定义。32. 根据权利要求31所述的用于获取如通式（I)所示化合物的方法，其特征在于芳基胺 与酯的最终反应，包括以下步骤： a) 用Boc酸酐保护对氨基苯甲酸的胺； b) 在三乙胺的存在下，通过H0Bt、EDCI或PyBOP酸活化剂令受保护的对氨基苯甲酸与胺 反应； C)在CH2C12/TFA两相体系中令氨基去保护，以获得芳基胺； d) 在作为THF中的碱的叔丁醇钾的存在下，通过溴化衍生物上的恶唑烷酮烯醇化物的 亲核取代反应，得到甲酯； e) 在三甲基铝的存在下，在微波反应器中以125°C反应35分钟，从甲酯和芳基胺反应形 成酰胺键;粗反应产物在冰水混合物中冷却并用HCl (IN)酸化，直到泡腾停止； f) 用乙醚(2 X 20ml)萃取，在无水MgSO4上干燥，并减压除去溶剂； g) 用色谱层析法(6:4Hex/AcOEt)纯化粗反应产物。33. 根据权利要求32所述的用于获取如通式（I)所示化合物的方法，其特征在于，所述 胺选自4_(叔丁基)-节胺、4_(二氟甲基)-节胺、节胺、六氢节胺、1-戊胺、1-十二烷基胺、环 丙胺，且所述酯是甲基-3-(溴甲基)苯甲酸酯。
【文档编号】A61K31/421GK105899496SQ201480050395
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2014年7月11日
【发明人】露丝·佩雷斯-费尔南德斯, 玛丽亚-尼夫斯·佛雷斯诺-洛佩兹, 何塞·埃尔格罗-贝尔托利尼, 皮拉尔·戈雅-拉扎, 安娜-贝伦·托雷斯-扎吉雷, 费尔南多·罗里格兹-德-丰塞卡, 弗朗西斯科-哈维尔·帕文-莫隆, 曼纽尔·马西亚斯-冈萨雷斯, 米格尔·罗梅罗-奎瓦斯
【申请人】安达卢西亚健康服务部, 马拉加生物医学与健康研究安达卢西亚公共基金会（Fimabis）