专利名称：一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌及菌剂的制作方法
技术领域：
本发明属于环境修复技术领域，涉及一种应用于高盐环境下的石油降解菌剂及制备方法。
背景技术：
随着人类石油勘探开发活动的不断增强，环境也承受着巨大的石油污染风险。大量的石油污染物通过意外事故等途径进入到环境中，造成石油污染。石油污染往往发生在高盐环境中，形成石油污染高盐环境，例如石油污染盐溃化土壤、石油污染高盐废水和石油污染海水。我国多个大型油田由于其所处的特殊地理位置，土壤都有不同程度地盐溃化。石油开采过程中的意外泄露极易造成石油污染，形成石油污染盐溃化土壤。此外，石油勘探开发过程中产生的采油废水不仅含有大量的多环芳烃和石油烃组分还含有大量NaCl和Na2S04等成分。如果不能及时处理将会形成石油污染高盐废水。大型油轮的意外泄漏造成的海面溢油同样能够形成石油污染高盐环境。石油污染盐溃化土壤、石油污染高盐废水和石油污染海水均具有盐度高、难以生物降解的特点。在低盐环境中，石油污染一旦发生，环境中的土著石油烃降解菌大量繁殖，在利用石油烃为碳源进行生长代谢的同时逐渐降解石油烃，最终消除石油污染。例如:中国专利(20 0910074535)公开了一种应用原生动物纤毛虫降解石油的方法；中国专利(201010550531)公开了一种采用绿脓杆菌、藤黄微球菌、枯草芽孢杆菌、琼氏不动杆菌降解井场含油污泥的方法。然而在高盐环境中，石油烃降解菌等微生物受到盐分胁迫，特别是石油烃降解代谢活动受到严重干扰，大大降低了石油烃的微生物降解速度，从而使得高盐环境下的石油烃难以生物降解。因此，传统的非耐盐石油烃降解菌剂应用于石油污染盐溃化土壤和石油污染海水等高盐环境中时，往往降解效率低，应用效果差。耐盐菌可以适应较为广泛的盐分浓度，在高盐环境下仍能保持较高的生理代谢水平。特别是耐盐降解菌在高盐环境下仍可以高效地降解污染物。例如:中国专利(200910229167)公开了一种耐盐净污菌剂的制备方法及其用途，欧洲专利(EP0941137B1)公开了一种采用盐杆菌等嗜盐菌降解三氯苯酚等卤代烃的方法。采用耐盐降解菌降解高盐环境下的石油烃等污染物是一种有效的策略。然而，目前国内外并没有采用耐盐降解菌治理高盐环境下石油污染的相关专利。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，针对目前高盐环境下石油污染物难以生物降解的问题，提供一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌。本发明的的第二个目的是提供一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌剂。本发明的技术方案概述如下:一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌，由菌W25和菌W33组成，所述菌W25(Ornithinimicrobium kibberense),命名为克伯村鸟氨酸微菌，其微生物保藏编号为CGMCC N0.6844，所述菌W33 (Gordonia alkanivorans)，命名为食烷烃戈登氏菌，其微生物保藏编号为CGMCC N0.6845，所述石油降解复合菌具有在高盐环境中降解石油的能力。高盐为质量浓度为0.1% 8%的盐，盐包括NaCl和/或Na2S04。菌W25和菌W33的质量比优选为I 5:1 5，最好是I 2:1 2。一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌剂，是由菌W25、菌W33和载体组成，所述菌W25 (Ornithinimicrobium kibberense),命名为克伯村鸟氨酸微菌,其微生物保藏编号为CGMCC N0.6844，所述菌W33 (Gordonia alkanivorans)，命名为食烷烃戈登氏菌，其微生物保藏编号为CGMCC N0.6845，所述石油降解复合菌剂具有在高盐环境中降解石油的能力。菌W25、菌W33和载体的质量比最好是I 5:1 5:1 20。载体可以选自硅藻土、超细碳酸钙和海藻酸钠至少一种。载体可以是质量比为:0.1 50:0.1 50:0.1 50的硅藻土、超细碳酸钙和海
藻酸钠。高盐为质量浓度为0.1% 8%的盐，盐包括NaCl和/或Na2S04。本发明以石油微生物学为理论依据，综合极端微生物学、环境微生物学和环境工程学的相关理论知识，针对高盐环境下的石油降解问题，设计高盐环境下的石油降解复合菌及其复合菌剂的配方。实验证明，本发明的一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌及菌剂对高盐环境下的石油污染清除速度快；对石油污染环境的盐度适应广泛，最高可用于8%NaCl的高盐环境；所选用的菌种分离自高盐环境，活性高，适应性强。可以快速有效地治理石油污染盐溃化土壤、石油污染海水及石油污染废水等。
具体实施例方式本发明使用的菌株由发明人从石油污染盐溃化土壤中分离筛选得到，具有石油烃高效降解特征和耐盐特征。菌株W25,分类命名:克伯村鸟氨酸微菌(Ornithinimicrobium kibberense)于2012年11月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址:北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编:100101，保藏编号为CGMCCN0.6844，并已存活。菌株W33,分类命名:食烧烃戈登氏菌(Gordonia alkanivorans)于2012年11月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址:北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编:100101，保藏编号为CGMCCN0.6845，并已存活。菌株W25 (Ornithinimicrobium kibberense)具有以下微生物学特性:1.形态学特性在显微镜 下观察，为短杆状，直径为0.5 0.8 μ m ;在牛肉膏蛋白胨培养基上形成橘红色菌落。2.培养学特性在35°C下，在牛肉膏蛋白胨培养基中培养时，本发明的石油降解菌W25(Ornithinimicrobium kibberense)菌株具有以下特性。表面较光滑，干燥，边缘整齐规则，个体微小呈圆形，菌体呈橘红色。
3.生理特性好氧条件下可利用石油烃生长的革兰氏阳性细菌，接触酶阳性、甲基红试验阳性、水解淀粉、液化明胶、不产生吲哚、生长pH值为6 10，生长温度25 40°C。
权利要求
1.一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌，其特征是由菌W25和菌W33组成，所述菌W25 (Ornithinimicrobium kibberense),命名为克伯村鸟氨酸微菌,其微生物保藏编号为CGMCC N0.6844，所述菌W33 (Gordonia alkanivorans)，命名为食烷烃戈登氏菌，其微生物保藏编号为CGMCC N0.6845，所述石油降解复合菌具有在高盐环境中降解石油的能力。
2.根据权利要求1所述的一种应用于高盐环境下的石油降解菌，其特征是所述高盐为质量浓度为0.1% 8%的盐，所述盐包括NaCl和/或Na2S04。
3.根据权利要求1或2所述的一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌，其特征是所述菌W25和菌W33的质量比为I 5:1 5。
4.根据权利要求3所述的一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌，其特征是所述菌W25和菌W33的质量比为I 2:1 2。
5.一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌剂，其特征是由菌W25、菌W33和载体组成，所述菌W25 (Ornithinimicrobium kibberense),命名为克伯村鸟氨酸微菌,其微生物保藏编号为CGMCC N0.6844，所述菌W33 (Gordonia alkanivorans)，命名为食烷烃戈登氏菌，其微生物保藏编号为CGMCC N0.6845，所述石油降解复合菌剂具有在高盐环境中降解石油的能力。
6.根据权利要求5所述的一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌剂，其特征是所述菌W25、菌W33和载体的质量比为I 5:1 5:1 20。
7.根据权利要求5或6所述的一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌剂，其特征是所述载体为硅藻土、超细碳酸钙和海藻酸钠至少一种。
8.根据权利要求5或6所述的一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌剂，其特征是所述载体为质量比为:0.1 50:0.1 50:0.1 50的硅藻土、超细碳酸钙和海藻酸钠。
9.根据权利要求5所述的一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌剂，其特征是所述高盐为质量浓度为0.1% 8%的盐，所述盐包括NaCl和/或Na2S04。
全文摘要
本发明公开了一种应用于高盐环境下的石油降解复合菌及菌剂，复合菌由菌W25和菌W33组成，菌W25(Ornithinimicrobium kibberense)，命名为克伯村鸟氨酸微菌，其微生物保藏编号为CGMCC No.6844，菌W33(Gordonia alkanivorans)，命名为食烷烃戈登氏菌，其微生物保藏编号为CGMCC No.6845，所述石油降解复合菌具有在高盐环境中降解石油的能力。实验证明，本发明的复合菌及菌剂对高盐环境下的石油污染清除速度快；对石油污染环境的盐度适应广泛，最高可用于8%NaCl的高盐环境；可以快速有效地治理石油污染盐渍化土壤、石油污染海水及石油污染废水等。
文档编号B09C1/10GK103232960SQ201310144009
公开日2013年8月7日 申请日期2013年4月23日 优先权日2013年4月23日
发明者王新新, 吴亮, 杨勇, 安伟, 牛志刚, 丁东华 申请人:中国海洋石油总公司, 中海油能源发展股份有限公司, 中海石油环保服务(天津)有限公司