专利名称：一种抗原抗体复合物解离液试剂盒及应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种检测用试剂盒，尤其涉及一种血清或血浆样本中的抗原抗体复合物解离液试剂盒及应用，属于医疗检测用试剂技术领域。
背景技术：
在机体感染病原体时，首先产生的是抗原，同时也产生少量的抗体。早期感染时 可检测到抗原，随着感染周期的延长，机体对病原体的免疫应答反应增强，抗体的量随之增 力口，并与抗原相结合、形成抗原抗体复合物，致使抗原和抗体在血清或血浆中的浓度降低， 造成临床上抗原或抗体检测灵敏度大幅降低。因此，要提高待测样本中的抗原或抗体检测 灵敏度，是必要设法将结合的抗原抗体复合物进行解离。然而，检索结果发现与检测相关的 血清或血浆样本中的抗原抗体复合物解离液试剂盒未见报道。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明要解决的问题是提供一种血清或血浆样本中的抗原 抗体复合物解离液试剂盒及应用。本发明所述抗原抗体复合物解离液试剂盒由如下体积百分比浓度的试剂等量混 合制成0. 3% Triton-XlOO1.5%十二烷基硫酸钠1.5% 3-[(3_胆烷酰胺丙基)_ 二甲铵]丙磺酸。上述抗原抗体复合物解离液试剂盒的制备方法是将试剂盒组分中的试剂按设计 浓度量各配成水溶液，然后按等体积量混合在一起，取混合液按5ml量分装入试剂瓶中。本发明所述抗原抗体复合物解离液试剂盒在病原体抗原抗体复合物分离中的应用。其中所述病原体抗原抗体复合物优选是指丙肝病毒抗原抗体复合物、乙肝病毒 抗原抗体复合物、甲肝病毒抗原抗体复合物、艾滋病病毒抗原抗体复合物、甲型Hmi流感 病毒抗原抗体复合物或禽流感病毒抗原抗体复合物；最优选是指丙肝病毒抗原抗体复合 物。传统的方法在检测病原体抗原或抗体时不能将抗原和抗体进行分离，大大影响了 检测试剂盒的灵敏度。本发明提供的抗原抗体复合物解离液试剂盒有效实现了待检测血清 或血浆样本中病原抗原抗体复合物的迅速解离，提高了抗原和抗体的绝对浓度值，大大提 高了待测样本的检测灵敏度。本发明的抗原抗体复合物解离液试剂盒通用于各种病原体抗原抗体复合物的分 离，能够实现对感染病原体后形成的抗原抗体进行快速分离，利于免疫的方法检测，大大的 提高了各种病原体的检出率，减少漏诊率。
具体实施例方式实施例1本发明所述抗原抗体复合物解离液试剂盒的制备按体积百分比浓度量分别配制0.3% Triton-XlOO (曲拉通X-100)、1. 5%十二烷 基硫酸钠(SDS)和1.5% 3-[(3_胆烷酰胺丙基)-二甲铵]丙磺酸(3-[(3-Ch0lamid0pr0 pyl)_dimethylammonio]propanesulfonic acid)的水溶液，然后按 1 1 1 体禾只量t昆合 在一起，取混合液按5ml量分装入试剂瓶中，包装制成试剂盒。实施例2本发明所述抗原抗体复合物解离液试剂盒在丙肝病毒抗原抗体复合物分离中的 应用采用酶联免疫方法检测HCV核心抗原的试剂盒，能直接检测血清或血浆中的游离 核心抗原，可缩短HCV病毒感染检测的“窗口期”约40 50天，在核酸检测技术查出HCV RNA之后1 2天，就可以检测出HCV核心抗原的存在。然而在机体出现抗HCV抗体之后， 抗体与抗原相结合成复合物，测定游离HCV-cAg的酶联免疫法的灵敏度明显降低。若将抗 原与抗体相结合成复合物解离开后，检测总HCV-cAg可大大提高检测的灵敏度。上述丙肝病毒抗原抗体复合物具体解离方法是1)取待测血清标本100 μ 1，加入本发明所述抗原抗体复合物解离液50 μ 1，混合 后56°C孵育30min，即对样本进行预处理，充分解离样本中的抗原抗体复合物，使核心区抗 原充分暴露；2)按照各HCV核心抗原试剂盒生产企业提供的产品操作说明书对步骤1)预处理 后的样本进行实验检测，以试剂盒规定的可见光波长临界OD值判断标记的抗原或抗体检 测结果。上述使用本发明所述抗原抗体复合物解离液对待测的血清或血浆样本经56°C，30 分钟处理后，抗原/抗体复合物解离释放出所有抗原/抗体，样本再加入被包被的单抗的酶 标板微孔中，如其中含有抗原，则会与酶标板上包被的抗体形成抗原_抗体结合物，经37°C 孵育后洗涤，再加入辣根过氧化物酶标记二抗，形成双抗原夹心复合物，最后加入酶底物显 色，在合适波长下测定光密度OD值，即可根据本试剂制定的cutoff临界值判断抗原阳性结^ ο与实施例2方法类似的，待测样本中的乙肝病毒抗原抗体复合物、甲肝病毒抗原 抗体复合物、艾滋病病毒抗原抗体复合物、甲型Hmi流感病毒抗原抗体复合物或禽流感病 毒抗原抗体复合物均可以使用本发明所述抗原抗体复合物解离液对其经56°C，30分钟处 理，使抗原/抗体复合物解离释放出所有抗原/抗体，以提高待测样本的检测灵敏度。
权利要求
一种抗原抗体复合物解离液试剂盒，其特征在于所述试剂盒由如下体积百分比浓度的试剂等量混合制成0.3％Triton-X1001.5％十二烷基硫酸钠1.5％3-[(3-胆烷酰胺丙基)-二甲铵]丙磺酸。
2.权利要求1所述抗原抗体复合物解离液试剂盒在病原体抗原抗体复合物分离中的应用。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述病原体抗原抗体复合物为丙肝病毒抗 原抗体复合物、乙肝病毒抗原抗体复合物、甲肝病毒抗原抗体复合物、艾滋病病毒抗原抗体 复合物、甲型mm流感病毒抗原抗体复合物或禽流感病毒抗原抗体复合物。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述病原体抗原抗体复合物为丙肝病毒抗 原抗体复合物。
全文摘要
本发明公开了一种抗原抗体复合物解离液试剂盒，由体积百分比浓度0.3％Triton-X100、1.5％十二烷基硫酸钠和1.5％3-[(3-胆烷酰胺丙基)-二甲铵]丙磺酸的试剂等量混合制成。本发明还公开了所述试剂盒在病原体抗原抗体复合物分离中的应用。本发明的试剂盒有效实现了待检测血清或血浆样本中病原抗原抗体复合物的迅速解离，提高了抗原和抗体的绝对浓度值，大大提高了待测样本的检测灵敏度。
文档编号G01N33/569GK101832999SQ20101015945
公开日2010年9月15日 申请日期2010年4月29日 优先权日2010年4月29日
发明者丁兴龙, 朱之炜, 朱翎嘉, 江长林, 郑祖惠 申请人:山东莱博生物科技有限公司