一种食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及食品添加剂检测领域，尤其涉及一种食用香精香料中萜烯醇酯类化合 物的检测方法。
【背景技术】
[0002] 现代食品工业为了追求利益最大化，需要添加相应的香精来强化或改善其产品的 香味，诱导消费，扩大销售。食用香精是指由食品用香料和（或）食品用热加工香味料与食 品用香精辅料组成的用来起香味作用的浓缩调配混合物。食用香精可以起到调香作用，模 仿天然瓜果、食品的香和味，强化食品的香气和味觉的仿真性，是食品添加剂的一种，广泛 应用在食品中。目前国家食品工业可以使用的食品香料、香精有上千种之多。尽管按照标 准规定的用量使用，食用香精一般不会危害人体健康，但近年发现，某些天然香料中含有的 黄樟素对健康有害。并且，目前食品行业对产品中所含添加剂进行标注时往往仅简单标注 "食用香精"，而不标注具体成分和含量，这不仅客观不能约束生产企业不规范使用食用香 精，且给质量检测部门在对产品成分进行检测时造成了困扰。
[0003] 目前，我国食品领域，包括纯乳制品、大米、蜂蜜等在内的25类商品明令禁止含有 香精。而是否添加了香精、添加了哪些种类的香精、添加香精的量是影响食品品质的重要因 素。但是，由于食用香精是种混合物，其中既有植物中提取的成分，也有很多化学合成成分， 成分越复杂检测起来难度越大。
[0004] 萜烯类化合物及其衍生物是香精香料的重要成分。例如：香叶醇和橙花醇是无环 单萜烯醇类化合物，具有温和而甜的玫瑰花香，留香较长，是玫瑰系香精的主剂，广泛应用 于食用香精、日化香精、烟草、药物等领域，入药用于抗菌和驱虫；临床表现为：有治疗慢性 支气管炎、改善肺通气功能和降低气道阻力等作用。香叶醇、橙花醇以及衍生物是非常有 价值的天然产物，因此其酯类化合物是相关香料的重要成分，具有香柠檬、薰衣草样持久香 气，使人心旷神怡、清新舒畅，是制备高级香精不可缺少的香料，在日化、烟草、食品工业 中占有十分重要的地位。广泛用于配制食品香精、香水香精、化妆品香精、皂用香精等，其用 途非常广泛。随着日用化妆品及其它香精产品需求量的日益递增。其他常见的萜烯类化合 物及其衍生物还有异丁酸橙花酯、异丁酸香叶酯、2-甲基丁酸橙花酯、异戊酸橙花酯、2-甲 基丁酸香叶酯、异戊酸香叶酯、反-2-己烯酸香叶酯、糠酸橙花酯、糠酸香叶酯、苯甲酸橙花 酯、苯甲酸香叶酯、肉桂酸橙花酯、肉桂酸香叶酯、肉豆蔻酸橙花酯、肉豆蔻酸香叶酯等。
[0005] 但是，由于食用香精香料中的成分比较复杂，目前国内外有关萜烯醇酯尚无检测 标准，也缺乏相关研宄及检测方法。而由于市场对萜烯醇酯的需求正逐步增加，开发萜烯醇 酯的检测方法具有重要的经济价值和社会效益。
【发明内容】
[0006] 有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种食用香精香料中萜烯醇酯类化 合物的检测方法。该方法检测限低、准确度高，重复性好。能够实现对香精香料中常见的萜 烯醇酯类化合物的快速准确检测。
[0007] 本发明提供的食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法，包括以下步骤：
[0008] 步骤1 :以二氯甲烷萃取含有内标的食用香精香料，制得样品溶液；以二氯甲烷稀 释萜烯醇酯类化合物标准品后与内标混合，制得标准工作液；以二氯甲烷为空白溶液；
[0009] 步骤2 :将所述样品溶液、标准工作液、空白溶液经气相色谱-质谱联用检测，建立 标准曲线，获得食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的种类及含量；
[0010] 所述气相色谱柱为Elite-35MS毛细管色谱柱。
[0011] 本发明提供的食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法是通过气相色谱法 进行的。利用气相色谱（GC)对小分子溶剂进行定量检测是目前常用的检测方法，在面对需 要对食用香精香料中萜烯醇酯类化合物进行定量、定性分析时，采用气相色谱是一种快速 有效的方式。但是，现有技术中，关于萜烯醇酯类化合物的检测方法研宄较少，尚未有方法 能够同时对样品中的多种萜烯醇酯类化合物进行鉴定。而通过实验证实，本发明提供的方 法目标化合物及内标色谱峰都分离度较好，且均具有较好的线性相关性，检出限在I. 95mg/ kg~4. 01mg/kg之间。并且，本发明方法的加标回收率在83. 43%~113. 84%之间，相对标 准偏差（RSD)均小于5%，说明本发明方法的回收率高，重复性好。
[0012] 色谱柱的填料、规格很大程度上的影响检测的效果。增加柱长可使理论塔板数增 大，但同时使峰宽加大，分析时间延长。因此，填充柱的柱长要选择适当。一般情况下，柱长 选择以使组分能完全分离，分离度达到所期望的值为准。本发明本发明比较了 Elite-35MS、 Elite-17MS和HP-INN0WAX色谱柱，对香精香料中萜烯醇酯类化合物的分离效果，结果表 明，Elite-35MS毛细管色谱柱的峰型和分离效果最好。且本发明实验表明，色谱柱的长度 影响样品的分离度，柱子越长分离度越高。信噪比越高。
[0013] 本发明采用的气相色谱柱为Elite_35MS毛细管色谱柱，固定相成分为35%苯基 /65 %甲基聚硅氧烷，为中等极性色谱柱，规格为60mXO. 25mmX0. 25 μ m。
[0014] 本发明所述标准曲线的横纵坐标分别为：萜烯醇酯类化合物色谱峰面积与内标色 谱峰面积的比值；萜烯醇酯类化合物浓度与内标浓度的比值。
[0015] 在本发明的实施例中，萜烯醇酯类化合物为异丁酸橙花酯、异丁酸香叶酯、2-甲基 丁酸橙花酯、异戊酸橙花酯、2-甲基丁酸香叶酯、异戊酸香叶酯、反-2-己烯酸香叶酯、糠酸 橙花酯、糠酸香叶酯、苯甲酸橙花酯、苯甲酸香叶酯、肉桂酸橙花酯、肉桂酸香叶酯、肉豆蔻 酸橙花酯或肉豆蔻酸香叶酯中任一种或两者以上的组合。
[0016] 采用本发明提供的方法能够同时鉴定出样品中的15种萜烯醇酯类化合物。其中 各化合物定量和定性选择离子如表1所示：
[0017] 表1萜烯醇酯类化合物定量和定性选择离子表
[0018]
【主权项】
1. 一种食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤1:以二氯甲烷萃取含有内标的食用香精香料，制得样品溶液；以二氯甲烷稀释萜 烯醇酯类化合物标准品后与内标混合，制得标准工作液；以二氯甲烷为空白溶液； 步骤2 :将所述样品溶液、标准工作液、空白溶液经气相色谱-质谱联用检测，建立标准 曲线，获得食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的种类及含量； 所述气相色谱柱为Elite-35MS毛细管色谱柱； 所述标准曲线的横纵坐标分别为：萜烯醇酯类化合物色谱峰面积与内标色谱峰面积的 比值；萜烯醇酯类化合物浓度与内标浓度的比值。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述萜烯醇酯类化合物为异丁酸橙花 酯、异丁酸香叶酯、2-甲基丁酸橙花酯、异戊酸橙花酯、2-甲基丁酸香叶酯、异戊酸香叶酯、 反-2-己烯酸香叶酯、糠酸橙花酯、糠酸香叶酯、苯甲酸橙花酯、苯甲酸香叶酯、肉桂酸橙花 酯、肉桂酸香叶酯、肉豆蔻酸橙花酯或肉豆蔻酸香叶酯中任一种或两者以上的组合。
3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述气相色谱-质谱联用，色谱的升温程 序为：初始温度60°C，以5°C/min升温至260°C，保持lOmin。
4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述气相色谱-质谱联用的进样口温度为 280°C;不分流进样；流速1.OmL/min。
5. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述气相色谱-质谱联用，质谱采用选择 离子扫描模式分段扫描。
6. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述气相色谱-质谱联用，质谱输线温度 260°C;离子源温度200°C;溶剂延迟8min。
7. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述内标为3-苯丙酸乙酯。
8. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述萃取的条件为25°C超声萃取30min。
9. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标准工作液中内标的浓度为50yg/ mL;猫稀醇醋类化合物的浓度为 2yg/mL、4yg/mL、10yg/mL、20yg/mL或 40yg/mL。
10. 根据权利要求1~9任一项所述的方法，其特征在于，所述食用香精香料中萜烯醇 酯类化合物的含量计算公式为：
式中： X为食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的含量； C为由标准曲线得到的食用香精香料中萜烯醇酯浓度； Q为由标准曲线得到的空白溶液中萜烯醇酯浓度； V为二氯甲烷的体积； M为试样的质量。
【专利摘要】本发明涉及食品添加剂检测领域，尤其涉及一种食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法。本发明提供的食用香精香料中萜烯醇酯类化合物的检测方法是通过气相色谱-质谱联用的方法法进行的。通过实验证实，本发明提供的方法对目标化合物及内标色谱峰都分离度较好，且均具有较好的线性相关性。本发明提供的方法能够实现对15种萜烯醇酯类化合物的同时定量、定性检测。检出限在1.95mg/kg～4.01mg/kg之间。并且，本发明方法的加标回收率在83.43％～113.84％之间，相对标准偏差(RSD)均小于5％，说明本发明方法的回收率高，重复性好。
【IPC分类】G01N30-88
【公开号】CN104807941
【申请号】CN201510242687
【发明人】李宝志, 黄飞, 佟亚楠, 刘金霞, 王超, 臧婉辰, 李河霖
【申请人】吉林烟草工业有限责任公司
【公开日】2015年7月29日
【申请日】2015年5月13日