大川芎片全时段多波长融合指纹图谱的质量控制方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于一种中成药的质量检测技术领域，具体是一种大川芎片全时段多波长 融合指纹图谱质量控制方法。
【背景技术】
[0002] 大川芎片由天麻、川芎两味药材组成，适用于活血化瘀，平肝熄风、主治头风及瘀 血型头痛、症见头痛，脑涨，眩晕，颈项紧张不舒，上下肢及凌晨身麻木，舌部瘀斑等、大川芎 片专门用于治疗各种头痛和眩晕。该方最早出自《宣明论方》卷二，方用"川芎一斤，天麻四 两。上为末，炼蜜为丸。"用于"治首风，眩晕旋急，外和阳气，风寒相博，胃膈痰饮，偏正头痛， 身拘倦。"川芎、天麻二药在祖国医学中有悠久的应用历史，当代中医认为，川芎辛温走窜， 走而不守，既入血分，又能行气，为血中之气药；天麻甘平，专入肝经，具有平肝熄风之功效。 在大川芎片中，二者合用，共奏活血化瘀、平肝熄风、镇定止痛之效。现代药理研究证实，大 川芎片主要有镇静镇痛、显著改善肠系膜微循环、抗血小板释放5-HT、阻断血管内皮细胞钙 通道及抗实验性脑缺血等作用。
[0003] 随着科学技术的创新与进步，现代先进分析检测技术以及信息处理技术的日渐成 熟，使中药分析检测水平有了显著提高，中药质量控制方法得到不断完善。大川芎片制剂组 方药材成分复杂，单一波长测定不能全面、综合的评价其质量。其中的天麻又为名贵中药 材，天麻素是大川芎片质量控制的指标性成分，为避免市场上将天麻素单体代替天麻药材 混入到大川芎片中，因此，建立综合、全面、有效的质量评价标准具有重大的意义。中药指纹 图谱是中药质量控制的有效技术手段，多波长融合技术更是提供更多的指纹图谱信息，故 通过多波长融合技术手段建立指纹图谱成为中药质量控制和评价的一种发展模式，更能真 实客观的反映中药材及中成药的内在质量，是一种潜移默化的从相对定量到绝对定量的提 升，为中药材及中成药的质量控制和物质基础提供新的参考依据，为规范中药制剂及其合 理使用奠定基础。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种大川芎片全时段多波长融合指纹图谱质量控制方法，该 方法将现代分析检测技术和信息处理手段结合起来，为传统中成药大川芎片的质量控制提 供一种全面、稳定、可靠的评估方法，利于制药企业控制中药制剂的质量，保证药物的药效 稳定。
[0005] 为实现本发明的目的，本发明一方面提供一种大川芎片全时段多波长融合指纹图 谱的质量控制方法，包括如下顺序进行的步骤：
[0006] (1)制备供试品溶液：
[0007] 取大川芎片适量，用甲醇进行加热回流提取，提取液过滤后即得供试品溶液；
[0008] ⑵制备对照品溶液：
[0009] 取天麻素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lmL含天麻素对照品0. 4-0. 5mg的 溶液，即得；
[0010] (3)色谱条件与系统适用性试验：
[0011] 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；
[0012] 流动相：以甲酸溶液与乙腈的混合溶液为流动相，进行梯度洗脱，其中甲酸溶液为 流动相A，乙腈为流动相B ;流速1. OmL · min 1 ;柱温30°C ;检测波长210-320nm下同时进行 检测；进样量10 μ L ;理论塔板数计算，应不低于3000 ;
[0013] (4)全时段多波长融合：
[0014] 将210-320nm波长下的谱图数据利用计算机软件进行全时段融合，得到一张能够 同时反映多个波长融合后的色谱图和一组图谱数据；
[0015] (5)样品含量测定：
[0016] 应用融合后的指纹图谱数据，计算样品中指标成分的含量；
[0017] (6)对上述确定的含量测定方法进行有效性评价，其中包括专属性、准确度、精密 度、重复性、稳定性、线性、范围以及耐用性。
[0018] 其中，步骤（1)中所述供试品溶液按照如下步骤制备而成：
[0019] 取大川芎片适量，去除包衣后研细，接着精密称取样品粉末1. 9-2. lg，置于100mL 圆底烧瓶中，加甲醇80mL回流提取1次，提取时间为2h，然后过滤，滤液浓缩后，加甲醇定容 至10mL容量瓶中，摇匀，再采用0. 45 μ m微孔滤膜进行过滤，滤液即为供试品溶液。
[0020] 特别是，优选精密称取大川芎片去除包衣后研细的粉末样品2. 0g进行供试品溶 液的制备。
[0021] 尤其是，采用0. 22 μ m微孔滤膜进行过滤，滤液即为供试品溶液。
[0022] 特别是，步骤（1)中所述的甲醇选择无水甲醇。
[0023] 其中，步骤（2)中所述天麻素对照品溶液的浓度优选为lmL溶液中含天麻素对照 品 0. 5mg。
[0024] 其中，步骤（3)中所述色谱柱选择规格为4. 6mmX 250mm，5 μ m的AglientTC_C18 色谱柱；所述流动相的甲酸溶液选择体积百分比浓度为〇. 04%的甲酸水溶液；所述检测波 长选择 210、225、254、270、320nm。
[0025] 特别是，步骤（3)中所述流动相梯度洗脱的技术参数为：
[0026]
[0027] 其中，步骤⑷中所述计算机软件为AglientllOO色谱工作站中使用Matlab软 件，对210-320nm波长下的谱图数据进行所述的全时段多波长融合，获得能够同时反映多 波长融合后的色谱图和一组图谱数据。
[0028] 特别是，采用AglientllOO色谱工作站中使用Matlab软件，对210、225、254、270、 320nm五个波长下的谱图数据进行所述的全时段多波长融合，获得能够同时反映五个波长 融合后的色谱图和一组图谱数据。
[0029] 特别是，上述方法用于检测提取方法相同或相近的含有大川芎片组成的任何一种 剂型，又可适用于任何一种由名贵中药材组成的中药复方的质量控制。
[0030] 本发明的大川芎片全时段多波长融合指纹图谱质量控制方法的有益效果如下：
[0031] (1)本发明首次公开大川芎片多波长融合指纹图谱质量控制方法，通过本方法可 以全面有效、安全可靠的控制大川芎片的质量，完善大川芎片质量控制方法。
[0032] (2)本发明采用现代先进分析检测技术，可通过HPLC-MS对大川芎片中主要成分 进行分析检测，获得大量关于大川芎片中化学成分的色谱和光谱信息，更能真实客观反映 大川芎片的内在质量。
[0033] (3)本发明是将现代分析检测技术和信息处理手段结合起来对大川芎片进行多波 长融合，克服单一波长下信息量不足的缺点，降低检测限，在不损失原有特征信息的基础上 得到一张同时反映多个波长信息的色谱图及图谱数据，避免了市场上将天麻素单体代替名 贵药材天麻混入到大川芎片中，影响大川芎片的治疗效果。
[0034] (4)本发明的质量控制方法，其优点是操作简便，稳定可靠，精密度高、重复性好、 易于掌握，能形成全面的质量控制体系控制样品质量，解决实际生产问题。
[0035] (5)本发明所建立的大川芎片多波长融合指纹图谱色谱图可用于大川芎片的指纹 定性分析和定量分析，完善了大川芎片的质量控制标准，从而确保其安全性、有效性，形成 了一个均一、稳定、可控的质量控制体系，为规范中药制剂及其合理使用奠定基础。
【附图说明】
[0036] 图1是天麻素含量测定标准曲线图。
[0037] 图2是大川芎片210nm波长下HPLC指纹图谱。
[0038] 图3是大川芎片225nm波长下HPLC指纹图谱。
[0039] 图4是大川芎片254nm波长下HPLC指纹图谱。
[0040] 图5是大川芎片270nm波长下HPLC指纹图谱。
[0041] 图6是大川芎片320nm波长下HPLC指纹图谱。
[0042] 图7是大川芎片多