专利名称：猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒与猪细小病毒pcr诊断试剂盒的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒与猪细小病毒PCR诊断试剂盒。
背景技术：
猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒都能够不同程度的导致妊娠母猪的繁殖障碍，引起母猪流产、胚胎死亡、胎儿畸形、胎儿木乃伊化及不孕等，在猪群中具传播快、胚胎致死率高、流行范围广、传播 途径多、病原体顽固等特点，每年给养猪业造成了巨大损失。而且经常混合感染，靠中和试验和分离病毒来确诊容易造成假阴性，而且操作繁琐，所需时间长，寻求一种操作简单、快速的检测、鉴别诊断方法是防制这类疾病的基础。使用PCR诊断试剂盒快速、灵敏、准确、安全、简单、应用范围广、取样及样品处理方便。但是。目前广泛使用的诊断试剂盒其盒体壁仅为一层硬纸板，抗挤压能力差，在运输过程中往往会因为挤压原因而损坏，造成试剂盒内的试剂瓶破坏，影响试剂使用的安全性。
实用新型内容本实用新型要解决的技术问题是提供一种猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒与猪细小病毒PCR诊断试剂盒。本实用新型的技术方案是猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒与猪细小病毒PCR诊断试剂盒，包括盒体和盒盖，盒体内设有衬垫，衬垫上设有若干个放置诊断试剂的的容器孔，盒体壁由内向外依次为抗菌纤维聚酯复合膜层、硬纸板层、哑膜层、塑料膜层。所述诊断试剂包括PCR缓冲液、引物、酶、超纯水、检测PCR管。本实用新型的有益效果是本实用新型盒体壁由内向外依次为抗菌纤维聚酯复合膜层、硬纸板层、哑膜层、塑料膜层，抗菌，防潮，轻度好，抗挤压能力强，保证了试剂盒的使用安全。
图I为本实用新型展开示意图；图2为图I中A-A剖视图；图3为图2中B处局部放大图。
具体实施方式
猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒与猪细小病毒PCR诊断试剂盒，包括盒体I和盒盖4，盒体I内设有衬垫2，衬垫上设有若干个放置诊断试剂的的容器孔3，诊断试剂包括PCR缓冲液、引物、酶、超纯水、检测PCR管，可以根据需要设定容器孔的大小和数量。盒体壁由内向外依次为抗菌纤维聚酯复合膜层11、硬纸板层12、哑膜层13、塑料膜层14。猪圆环病毒引物的序列如下上游引物Pl :5 ' -TAA CTA CTC CTC CCG CCATAC-3丨;下游引物P2 :5 ' -GCC TAC GTG GTC TAC ATT TCC-3丨;猪细小病毒引物的序列如下上游引物 P3 5 ; -TGG GAG GGC TTG GTT AGA-3 ;;下游引物 P4 :5 ' -TGG TGGTGA GGT TGC TGA T-3 ;;猪伪狂犬病毒引物的序列如下上游引物P5 5 ; -CGT GGA ACGAGC CCT TCA G-3 ;;下游引物 P6 :5 ' -AGA GCG GGT TGG CGA TGT-3 ;。利用上述引物检测猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒的多重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA后，按如下SYBR Green I实时荧光PCR反应体系和SYBR Green I实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。所述SYBR Green I实时荧光PCR反应体系，在25W 体系中加入以下成份SYBR Green I PreMix 17 ；P1 / P3 / P5 0. 5+0. 5+0. 5 ；P2 / P4 / P6 0. 5+0. 5+0. 5 ；DNA 1+1+1 ；ddH20 2 ^l0 所述 SYBR Green I 实时荧光PCR扩增程序为95°C预变性5min ;进入循环，95°C变性15s，55°C退火20 s，72°C延伸 20s, 40个循环；反应结束后先加热至95°C，然后再降至65°C，开始以0. 5°C /s递增至95°C检测荧光信号得出扩增产物的溶解曲线。
权利要求1.猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒与猪细小病毒PCR诊断试剂盒，包括盒体和盒盖，盒体内设有衬垫，其特征在于衬垫上设有若干个放置诊断试剂的的容器孔，盒体壁由内向外依次为抗菌纤维聚酯复合膜层、硬纸板层、哑膜层、塑料膜层。
2.根据权利要求I所述的猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒与猪细小病毒PCR诊断试剂盒，其特征在于所述诊断试剂包括PCR缓冲液、引物、酶、超纯水、检测PCR管。
专利摘要本实用新型公开了一种猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒与猪细小病毒PCR诊断试剂盒，包括盒体和盒盖，盒体内设有衬垫，衬垫上设有若干个放置诊断试剂的的容器孔，盒体壁由内向外依次为抗菌纤维聚酯复合膜层、硬纸板层、哑膜层、塑料膜层。本实用新型盒体壁由内向外依次为抗菌纤维聚酯复合膜层、硬纸板层、哑膜层、塑料膜层，抗菌，防潮，轻度好，抗挤压能力强，保证了试剂盒的使用安全。
文档编号C12M1/34GK202415558SQ20122001490
公开日2012年9月5日 申请日期2012年1月13日 优先权日2012年1月13日
发明者崔保安, 魏战勇 申请人:魏战勇