一种对丙型肝炎包膜感染性假病毒颗粒的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种对丙型肝炎包膜感染性假病毒颗粒的制备方法，其特征在于，选取适宜的HCV代表株，使其与包膜糖蛋白基因片段人工合成，其后插入包膜质粒；然后将上述质粒以最多零点五秒的时间，瞬间转染；使用间接免疫荧光方法进行检测各株基因的表达定位；收集细胞并提取总蛋白，分别与HCV病人混合血清；然后在上轻中获得HCV假病毒以及其体外感染病毒即可，上轻中获得的HCV假病毒必须经过流式细胞仪分析，感染率超过百分之五十的留用。本发明的有益效果是，成功包装了HCV包膜感染性假病毒颗粒；假病毒具有较严格的细胞噬性，且感染性为分子依赖型，达到预期效果。
【专利说明】一种对丙型肝炎包膜感染性假病毒颗粒的制备方法【技术领域】
[0001]本发明涉及一种实验方法，具体来说是指一种对丙型肝炎包膜感染性假病毒颗粒的制备方法。
【背景技术】
[0002]丙型病毒性肝炎，简称为丙型肝炎、丙肝，是一种由丙型肝炎病毒(Hepatitis Cvirus, HCV)感染引起的病毒性肝炎，主要经输血，针刺，吸毒等传播，据世界卫生组织统计，全球HCV的感染率约为3%，估计约1.8亿人感染了 HCV，每年新发丙型肝炎病例约3.5万例。丙型肝炎呈全球性流行，可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌(HCC)。一些数据显示，未来20年内与HCV感染相关的死亡率(肝衰竭及肝细胞癌导致的死亡)将继续增加，对患者的健康和生命危害极大，已成为严重的社会和公共卫生问题。
【发明内容】
[0003]为克服上述技术问题，我们提出了以下技术方案:
一种对丙型肝炎包膜感染性假病毒颗粒的制备方法，选取适宜的HCV代表株，使其与包膜糖蛋白基因片段人工合成，其后插入包膜质粒；然后将上述质粒以最多零点五秒的时间，瞬间转染；使用间接免疫荧光方法进行检测各株基因的表达定位；收集细胞并提取总蛋白，分别与H C V病人混合血清 ；然后在上轻中获得H C V假病毒以及其体外感染病毒即可。
[0004]本发明中，上轻中获得的H C V假病毒必须经过流式细胞仪分析，感染率超过百分之五十的留用。
本发明的有益效果是，成功包装了 H C V包膜感染性假病毒颗粒；假病毒具有较严格的细胞噬性，且感染性为分子依赖型，达到预期效果。
【具体实施方式】
[0005]一种对丙型肝炎包膜感染性假病毒颗粒的制备方法，选取适宜的HCV代表株，使其与包膜糖蛋白基因片段人工合成，其后插入包膜质粒；然后将上述质粒以最多零点五秒的时间，瞬间转染；使用间接免疫荧光方法进行检测各株基因的表达定位；收集细胞并提取总蛋白，分别与H C V病人混合血清；然后在上轻中获得H C V假病毒以及其体外感染病毒即可，上轻中获得的H C V假病毒必须经过流式细胞仪分析，感染率超过百分之五十的留用。
以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种对丙型肝炎包膜感染性假病毒颗粒的制备方法，其特征在于，选取适宜的HCV代表株，使其与包膜糖蛋白基因片段人工合成，其后插入包膜质粒；然后将上述质粒以最多零点五秒的时间，瞬间转染；使用间接免疫荧光方法进行检测各株基因的表达定位；收集细胞并提取总蛋白，分别与H C V病人混合血清；然后在上轻中获得H C V假病毒以及其体外感染病毒即可。
2.如权利要求1所述的一种对丙型肝炎包膜感染性假病毒颗粒的制备方法，其特征在于，上轻中获得的H C V假病毒必 须经过流式细胞仪分析，感染率超过百分之五十的留用。
【文档编号】C12N7/04GK103627679SQ201310541928
【公开日】2014年3月12日 申请日期:2013年11月6日 优先权日:2013年11月6日
【发明者】李刚 申请人:李刚