酵母培养物及其制备方法_2

文档序号:8346527阅读:来源:国知局
液。
[0036] (3)将步骤(1)得到的酵母菌液体发酵菌液(酵母菌活菌数为0.5亿CFU/ml)与步 骤⑵得到的接种有黑曲霉的固体培养基(黑曲霉活菌数为6亿CFU/g)以质量比为1:0. 6 混合均匀,在28~35°C有氧发酵12~24小时,得到固体发酵产物。
[0037] 作为本发明的一个优选实施例,所述有氧发酵条件为:空气相对湿度70~ 80%,所述酵母菌液体发酵菌液与接种有黑曲霉的固体培养基混合后的水分控制在40~ 45wt%,pH 控制在 4. 6 ~5. 0。
[0038] (4)将所述固体发酵产物置于28~35°C条件下厌氧发酵48~60小时,再将厌氧 发酵后的产物依次进行低温烘干、粉碎,即得到酵母培养物,其具有发酵香味,呈酸性。
[0039] 实施例2
[0040] 作为本发明的一个实施例,所述酵母培养物的制备方法包括以下步骤:
[0041] (1)将酿酒酵母菌菌种活化,再将分离纯化后的酿酒酵母菌接种到一级摇瓶培养 基中,500ml三角瓶培养基装量为100ml,28~30°C、180~200rpm摇瓶培养17~24h,得到 一级种子液,然后将一级种子液接种到二级摇瓶培养基,2000ml三角瓶装量450ml,28°C~ 30°C、180~200rpm摇瓶培养20~24h。其中,所述酵母菌的种子培养基为YEH)液体培养 基,所述YEH)液体培养基的组成为:葡萄糖25g、蛋白胨20g、酵母粉12g,1000ml水,自然 pH。该培养基在115°C条件下高温灭菌30min。
[0042] 在本实施例中,所述酿酒酵母菌为酿酒酵母菌Sa-10,保藏于中国普通微生物菌种 保藏管理中心,保藏号是CGMCCNo.6120。
[0043] 接着,再将得到的酵母菌种子培养液以4~7%的接种量接种至糖蜜液体培养基 中扩繁,于28~30°C条件下有氧发酵19~22小时,制得酵母菌液体发酵菌液。其中,所述 糖蜜液体培养基由以下物质按照质量百分比组成:糖蜜9%,尿素0.42%,玉米浆0. 15%, 硫酸镁〇. 1 %,氯化钙〇. 01 %,磷酸二氢钾〇. 1 %,余量为水;调节该培养基的初始pH至 5. 5~6. 5。发酵过程中不调控pH,控制该培养基溶氧在40%~60%。
[0044] (2)将黑曲霉菌种活化,从新鲜黑曲霉斜面中挑取一环菌,接种到装有数粒玻璃珠 的一级摇瓶培养基中,500ml三角瓶培养基装量为100ml,30~35°C、120~150rpm振荡培 养20~24h,得到一级种子液,然后将一级种子液接种到装有数粒玻璃珠的二级摇瓶培养 基,2000ml三角瓶装量500ml,30~35°C、120~150rpm振荡培养20~24h。其中,所述黑 曲霉的种子培养基为马铃薯液体培养基,每升马铃薯液体培养基中含有:马铃薯200g、蔗 糖20g,水1000ml。该培养基在115°C在条件下高温灭菌30min。
[0045] 接着,将得到的黑曲霉种子培养液按1:0.5的质量比接种至固体糖蜜培养基中, 在30~35 °C有氧条件下培养24~48h,得到固体发酵初产物;然后将所述固体初发酵产物 以2~6%的接种量接种至固体糖蜜培养基中进一步扩大培养,在30~35°C有氧条件下培 养24~48小时,得到接种有黑曲霉的固体培养基。
[0046] 进一步地,还可以以此含有黑曲霉的固体培养基为种子,以2~6%的接种量进一 步逐级扩大固体糖蜜培养基处理量,实际处理量以所需固体培养基重量为准。
[0047] 其中,所述固体糖蜜培养基由以下物质按照质量百分比组成:按照玉米粉30%、 麸皮20%、玉米胚芽柏10%、DDGS饲料20%、玉米芯粉20%配置成固体培养基,再向固体 培养基中加入糖蜜,糖蜜加入量为每kg固体培养基中加入50ml糖蜜。
[0048] 在该步骤中,玉米粉、麸皮主要提供碳源,玉米胚芽柏、DDGS饲料主要提供氮源,玉 米芯粉主要作为一种吸附成分,有效吸附菌液。
[0049] (3)将步骤⑴得到的酵母菌液体发酵菌液(酵母菌活菌数为0.35亿CFU/ml)与 步骤⑵得到的接种有黑曲霉的固体培养基(黑曲霉活菌数为6.8亿CFU/g)以质量比为 1:0. 7混合均匀,在28~35°C有氧发酵12~24小时,得到固体发酵产物。
[0050] 作为本发明的一个优选实施例,所述有氧发酵条件为:空气相对湿度70~ 80%,所述酵母菌液体发酵菌液与接种有黑曲霉的固体培养基混合后的水分控制在40~ 45wt%,pH 控制在 4. 8 ~5. 2。
[0051] (4)将所述固体发酵产物置于28~35°C条件下厌氧发酵50~80小时,再将厌氧 发酵后的产物依次进行低温烘干、粉碎,即得到酵母培养物,其具有发酵香味,呈酸性。
[0052] 实施例3
[0053] 作为本发明的一个实施例,所述酵母培养物的制备方法包括以下步骤:
[0054] (1)将酿酒酵母菌菌种活化,再将分离纯化后的酿酒酵母菌接种到一级摇瓶培养 基中,500ml三角瓶培养基装量为100ml,28~30°C、180~200rpm摇瓶培养17~24h,得到 一级种子液,然后将一级种子液接种到二级摇瓶培养基,2000ml三角瓶装量450ml,28°C~ 30°C、180~200rpm摇瓶培养20~24h。其中,所述酵母菌的种子培养基为YEH)液体培养 基,所述YEH)液体培养基的组成为:葡萄糖18g、蛋白胨22g、酵母粉10g,1000ml水,自然 pH。该培养基在115°C条件下高温灭菌30min。
[0055] 在本实施例中,所述酿酒酵母菌为酿酒酵母菌Sa-10,保藏于中国普通微生物菌种 保藏管理中心,保藏号是CGMCCNo.6120。
[0056] 接着,再将得到的酵母菌种子培养液以8~10%的接种量接种至糖蜜液体培养基 中扩繁,于28~30°C条件下有氧发酵20~24小时,制得酵母菌液体发酵菌液。其中,所述 糖蜜液体培养基由以下物质按照质量百分比组成:糖蜜9%,尿素0.42%,玉米浆0. 15%, 硫酸镁〇. 1 %,氯化钙〇. 01 %,磷酸二氢钾〇. 1 %,余量为水;调节该培养基的初始pH至 5. 5~6. 5。发酵过程中不调控pH,控制该培养基溶氧在40%~60%。
[0057] (2)将黑曲霉菌种活化,从新鲜黑曲霉斜面中挑取一环菌,接种到装有数粒玻璃珠 的一级摇瓶培养基中,500ml三角瓶培养基装量为100ml,30~35°C、120~150rpm振荡培 养20~24h,得到一级种子液,然后将一级种子液接种到装有数粒玻璃珠的二级摇瓶培养 基,2000ml三角瓶装量500ml,30~35°C、120~150rpm振荡培养20~24h。其中,所述黑 曲霉的种子培养基为马铃薯液体培养基,每升马铃薯液体培养基中含有:马铃薯200g、蔗 糖20g,水1000ml。该培养基在115°C在条件下高温灭菌30min。
[0058] 接着,将得到的黑曲霉种子培养液按1 :0. 6的质量比接种至固体糖蜜培养基中, 在30~35 °C有氧条件下培养24~48h,得到固体发酵初产物;然后将所述固体初发酵产物 以2~6%的接种量接种至固体糖蜜培养基中进一步扩大培养,在30~35°C有氧条件下培 养24~48小时,得到接种有黑曲霉的固体培养基。
[0059] 进一步地,还可以以此含有黑曲霉的固体培养基为种子,以2~6%的接种量进一 步逐级扩大固体糖蜜培养基处理量,实际处理量以所需固体培养基重量为准。
[0060] 其中,所述固体糖蜜培养基由以下物质按照质量百分比组成:按照玉米粉30%、 麸皮20%、玉米胚芽柏10%、DDGS饲料20%、玉米芯粉20%配置成固体培养基,再向固体 培养基中加入糖蜜,糖蜜加入量为每kg固体培养基中加入50ml糖蜜。
[0061] 在该步骤中,玉米粉、麸皮主要提供碳源,玉米胚芽柏、DDGS饲料主要提供氮源,玉 米芯粉主要作为一种吸附成分,有效吸附菌液。
[0062] (3)将步骤(1)得到的酵母菌液体发酵菌液(酵母菌活菌数为0. 6亿CFU/ml)与 步骤⑵得到的接种有黑曲霉的固体培养基(黑曲霉活菌数为8.2亿CFU/g)以质量比为 1:0. 5混合均匀,在28~35°C有氧发酵12~24小时,得到固体发酵产物。
[0063] 作为本发明的一个优选实施例,所述有氧发酵条件为:空气相对湿度70~ 80%,所述酵母菌液体发酵菌液与接种有黑曲霉的固体培养基混合后的水分控制在40~ 45wt%,pH 控制在 5. 1 ~5. 5。
[0064] (4)将所述固体发酵产物置于28~35°C条件下厌氧发酵65~85小时,再将厌氧 发酵后的产物依次进行低温烘干、粉碎,即得到酵母培养物,其具有发酵香味,呈酸性。
[0065] 实施例4
[0066] 作为本发明的一个实施例,所述酵母培养物的制备方法包括以下步骤:
[0067] (1)将酿酒酵母菌菌种活化,再将分离纯化后的酿酒酵母菌接种到一级摇瓶培养 基中,500ml三角瓶培养基装量为100ml,28~30°C、180~200rpm摇瓶培养17~24h,得到 一级种子液,然后将一级种子液接种到二级摇瓶培养基,2000ml三角瓶装量450ml,28°C~ 30°C、180~200rpm摇瓶培养20~24h。其中,所述酵母菌的种子培养基为YEH)液体培养 基,所述YEH)液体培养基的组成为:葡萄糖20g、蛋
当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1