白胨20g、酵母粉10g，1000ml水，自然 pH。该培养基在115°C条件下高温灭菌30min。
[0068] 在本实施例中，所述酿酒酵母菌为酿酒酵母菌Sa-10,保藏于中国普通微生物菌种 保藏管理中心，保藏号是CGMCC No. 6120。
[0069] 接着，再将得到的酵母菌种子培养液以3~6%的接种量接种至糖蜜液体培养基 中扩繁，于28~30°C条件下有氧发酵19~23小时，制得酵母菌液体发酵菌液。其中，所述 糖蜜液体培养基由以下物质按照质量百分比组成：糖蜜9%，尿素0.42%，玉米浆0. 15%， 硫酸镁〇. 1 %，氯化钙〇. 01 %，磷酸二氢钾〇. 1 %，余量为水；调节该培养基的初始pH至 5. 5~6. 5。发酵过程中不调控pH，控制该培养基溶氧在40%~60%。
[0070] (2)将黑曲霉菌种活化，从新鲜黑曲霉斜面中挑取一环菌，接种到装有数粒玻璃珠 的一级摇瓶培养基中，500ml三角瓶培养基装量为100ml，30~35°C、120~150rpm振荡培 养20~24h，得到一级种子液，然后将一级种子液接种到装有数粒玻璃珠的二级摇瓶培养 基，2000ml三角瓶装量500ml，30~35°C、120~150rpm振荡培养20~24h。其中，所述黑 曲霉的种子培养基为马铃薯液体培养基，每升马铃薯液体培养基中含有：马铃薯200g、蔗 糖20g，水1000ml。该培养基在115°C在条件下高温灭菌30min。
[0071] 接着，将得到的黑曲霉种子培养液按1:0.45的质量比接种至固体糖蜜培养基中， 在30~35 °C有氧条件下培养24~48h，得到固体发酵初产物；然后将所述固体初发酵产物 以2~6%的接种量接种至固体糖蜜培养基中进一步扩大培养，在30~35°C有氧条件下培 养24~48小时，得到接种有黑曲霉的固体培养基。
[0072] 进一步地，还可以以此含有黑曲霉的固体培养基为种子，以2~6%的接种量进一 步逐级扩大固体糖蜜培养基处理量，实际处理量以所需固体培养基重量为准。
[0073] 其中，所述固体糖蜜培养基由以下物质按照质量百分比组成：按照玉米粉30%、 麸皮20%、玉米胚芽柏10%、DDGS饲料20%、玉米芯粉20%配置成固体培养基，再向固体 培养基中加入糖蜜，糖蜜加入量为每kg固体培养基中加入50ml糖蜜。
[0074] 在该步骤中，玉米粉、麸皮主要提供碳源，玉米胚芽柏、DDGS饲料主要提供氮源，玉 米芯粉主要作为一种吸附成分，有效吸附菌液。
[0075] (3)将步骤（1)得到的酵母菌液体发酵菌液（酵母菌活菌数为0.2亿CFU/ml)与步 骤⑵得到的接种有黑曲霉的固体培养基（黑曲霉活菌数为5亿CFU/g)以质量比为1:0. 8 混合均匀，在28~35°C有氧发酵12~24小时，得到固体发酵产物。
[0076] 作为本发明的一个优选实施例，所述有氧发酵条件为：空气相对湿度70~ 80%，所述酵母菌液体发酵菌液与接种有黑曲霉的固体培养基混合后的水分控制在40~ 45wt%，pH 控制在 4. 7 ~5. 3。
[0077] (4)将所述固体发酵产物置于28~35°C条件下厌氧发酵58~78小时，
[0078] 再将厌氧发酵后的产物依次进行低温烘干、粉碎，即得到酵母培养物，其具有发酵 香味，呈酸性。
[0079] 对比实施例1
[0080] (1)同实施例1中的步骤（1);
[0081] (2)将步骤⑴得到的酵母菌液体发酵菌液（酵母菌活菌数为0. 5亿CFU/ml)以 1 :〇. 6的质量比接种至固体糖蜜培养基中，在28~35°C有氧条件下培养12~24,得到发 酵产物；
[0082] 所述有氧发酵条件为：空气相对湿度70~80%，所述酵母菌液体发酵菌液的水分 控制在40~45wt %，pH控制在4. 6~5. 0。
[0083] (3)将所述发酵产物置于28~35°C条件下厌氧发酵48~72小时，再将厌氧发酵 后的产物依次进行低温烘干、粉碎，即得到酵母培养物，其具有发酵香味，呈酸性。
[0084] 测试实施例1-4中经过步骤（3)有氧发酵后得到的固体发酵产物、以及对比实施 例1中经过步骤（2)有氧发酵后得到的发酵产物的活菌数，结果见下表。
[0085] 酵母菌固体有氧发酵过程中酵母活菌数统计结果
[0086]
【主权项】
1. 一种酵母培养物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 1) 先将酿酒酵母菌接种至YEro液体培养基中扩大培养，再将得到的酵母菌种子培养 液接种至糖蜜液体培养基中有氧发酵，制得酵母菌液体发酵菌液； 2) 先将黑曲霉接种至马铃薯液体培养基中扩大培养，再将得到的黑曲霉种子培养液接 种至固体糖蜜培养基中有氧发酵，得到固体发酵初产物；然后将所述固体初发酵产物接种 至固体糖蜜培养基中进一步扩大培养，得到接种有黑曲霉的固体培养基； 3) 将所述酵母菌液体发酵菌液与接种有黑曲霉的固体培养基混合，在28~35°C条件 下有氧发酵12~24小时，得到固体发酵产物； 4) 将所述固体发酵产物置于28~35°C条件下厌氧发酵48~85小时，再将厌氧发酵 后的产物进行干燥，即得到酵母培养物。
2. 根据权利要求1所述的酵母培养物的制备方法，其特征在于，在所述步骤3)中，所述 有氧发酵条件为：空气相对湿度70~80 %，所述酵母菌液体发酵菌液与接种有黑曲霉的固 体培养基混合后的水分控制在40~45wt %，pH控制在4. 6~5. 5。
3. 根据权利要求1所述的酵母培养物的制备方法，其特征在于，在所述步骤3)中，所述 酵母菌液体发酵菌液与接种有黑曲霉的固体培养基以质量比为1:0. 5~0. 8混合，所述酵 母菌液体发酵菌液中酵母菌活菌数为0. 2~0. 6亿CFU/ml，所述固体培养基中黑曲霉活菌 数为5~10CFU/g。
4. 根据权利要求1所述的酵母培养物的制备方法，其特征在于，所述酿酒酵母菌为酿 酒酵母菌Sa-ΙΟ,保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号是CGMCC No. 6120。
5. 根据权利要求1所述的酵母培养物的制备方法，其特征在于，经步骤3)的有氧发酵 后，酵母菌活菌数达到5~7亿CFU/g。
6. 根据权利要求1所述的酵母培养物的制备方法，其特征在于，在所述步骤1)中，将所 述酵母菌种子培养液以2~10%的接种量接种至糖蜜液体培养基中扩繁，于28~30°C条 件下有氧发酵17~24小时，制得酵母菌液体发酵菌液。
7. 根据权利要求6所述的酵母培养物的制备方法，其特征在于，所述YEH)液体培养基 的组成为：每IL水中含葡萄糖10~30g、蛋白胨10~30g和酵母粉5~15g ; 所述糖蜜液体培养基由以下物质按照质量百分比组成： 糖蜜8~15 %，尿素 (λ 2~(λ 5 %，玉米浆(λ 1~(λ 2 %，硫酸镁(λ 05~(λ 2 %，氯化钙 0. 005~0. 02 %，磷酸二氢钾0. 05~0. 2 %，余量为水，调节该培养基的初始pH至5. 5~ 6. 5,控制该培养基溶氧在40 %~60%。
8. 根据权利要求1所述的酵母培养物的制备方法，其特征在于，在所述步骤2)中，将 所述黑曲霉种子培养液按1:0. 4~0. 6的质量比接种量接种至固体糖蜜培养基中扩繁，在 30~35°C有氧条件下培养24~48h，得到固体发酵初产物；然后将所述固体初发酵产物以 2~6%的接种量接种至固体糖蜜培养基中进一步扩大培养，在30~35°C有氧条件下培养 24~48小时，得到接种有黑曲霉的固体培养基。
9. 根据权利要求8所述的酵母培养物的制备方法，其特征在于，所述固体糖蜜培养基 由以下物质按照质量百分比组成： 按照玉米粉20~30%、麸皮20~40%、玉米胚芽柏2~10%、DDGS饲料20~30%、 玉米芯粉10~20%配置成固体培养基，再向固体培养基中加入糖蜜，每千克固体培养基中 加入50ml糖蜜； 或者，按照玉米粉20~40%、麸皮30~50%、玉米胚芽柏5~15%、玉米芯粉10~ 30%配置成固体培养基，再向固体培养基中加入糖蜜，每千克固体培养基中加入50ml糖 蜜； 或者，按照玉米5~20%、麸皮70~90%、豆柏2~10%配置成固体培养基，再向固体 培养基中加入糖蜜，每千克固体培养基中加入50ml糖蜜。
10. -种酵母培养物，其特征在于，所述酵母培养物根据权利要求1~9中任意一项所 述的酵母培养物的制备方法制备得到。
【专利摘要】本发明公开了一种酵母培养物及其制备方法，包括：将酵母菌液体发酵菌液与接种有黑曲霉的固体培养基混合，在28～35℃条件下有氧发酵12～24小时，得到固体发酵产物；4)将所述固体发酵产物置于28～35℃条件下厌氧发酵48～85小时，再将厌氧发酵后的产物进行干燥，即得到酵母培养物。通过本发明提供的方法所制得酵母培养物具有独特的芳香气味，经烘干破壁后，酵母细胞壁、内容物等益生成分可发挥活菌所不具备或体现不充分的诱食、抗应激性、肠道益生等功效。
【IPC分类】A23K1-18, A23K1-16
【公开号】CN104664154
【申请号】CN201510067831
【发明人】李慧, 梁廷银, 王宏, 梁秒
【申请人】北京英惠尔生物技术有限公司
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2015年2月9日