一种植物乳杆菌th103及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物技术领域，涉及一种能抑制鼠伤寒沙门氏菌生长的植物乳杆菌 (Lactobacillus plantarum)TH103,还涉及所述植物乳杆菌TH103的用途。
【背景技术】
[0002] 鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium)是危害人类和动物的重要肠道致病 菌，如人类食源性污染引起的肠道感染和仔猪腹泻等。鼠伤寒沙门氏菌通过消化道进入小 肠后首先粘附和定值于小肠上皮表面，然后入侵细胞，主要引起小肠结肠炎，可导致宿主腹 泻、菌血症等一系列病变，是小儿沙门氏菌感染中最常见者。鼠伤寒沙门氏菌自然疫源广 泛，很多家禽、家畜、鼠、鸟和冷血动物是其自然宿主，蝇、蚤可带菌传播，常由污染的水、牛 奶和食物经口感染。据统计，鼠伤寒沙门氏菌每年感染数量约占沙门氏菌感染量的1/5,是 威胁人类健康的主要病原菌之一。
[0003] 益生菌是指能够以一定数量存活并定殖于宿主肠道内，通过调节肠道菌群平衡， 拮抗肠道内病原菌，从而对宿主健康发挥有益作用的活性有益微生物的总称。益生菌中有 很多属于乳酸菌，乳酸菌是一群可以发酵碳水化合物，并产生大量乳酸的革兰氏阳性杆菌 或球菌的统称。在胃肠道400多种微生物中，乳酸菌约占10%，是肠道正常菌群的主要成 员。作为人和动物肠道的正常菌群，乳酸菌具有阻止病原菌对肠道的入侵和定殖，抑制病原 菌和抗感染，维持肠道的微生态平衡等益生功能。乳酸菌及其代谢产物可能对鼠伤寒沙门 氏菌的污染具有一定的预防或干预作用，有作为抗生素的辅助治疗剂的潜能，筛选具有优 良拮抗特性的乳酸菌对于抑制鼠伤寒沙门氏菌的污染很有必要。
【发明内容】
[0004] 本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施 例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部 分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
[0005] 鉴于上述和/或现有植物乳杆菌TH103及其用途中存在的问题，提出了本发明。
[0006] 因此，本发明的一个目的是提供一种植物乳杆菌TH103,所述菌株已于2015年4 月23日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏登记入册的编号 为CGMCC10739,其分类命名为：植物乳杆菌Lactobacillus plantarum。
[0007] 本发明的另一个目的是提供一种植物乳杆菌TH103在蔬菜发酵领域的应用。
[0008] 作为本发明所述植物乳杆菌TH103在蔬菜发酵领域的应用的一种优选方案，其 中：包括，蔬菜经清洗沥干后将所述蔬菜去皮、切分，加入按照所述蔬菜重量计1.0%~ 1. 2%的鹿糖与6%~8%的食盐，搅拌均勾在室温预腌制36~48h，沥干水分，得到一种预 腌制蔬菜；称取食用香辛料，使用以所述使用香辛料重量计8~10倍水在温度75~80°C 下浸提4~6h，冷却后添加食用香辛料重量计10%的白酒，混匀得到一种香辛料汁；将植 物乳杆菌TH103以液体培养基体积计1~3%接种于液体培养基中，37°C培养20~28h， 4500rpm的条件下进行离心10~15min，弃上清，收集得到的菌泥用无菌水重悬，使得植物 乳杆菌TH103的活菌浓度达到108cfu/mL以上，从而得到一种菌悬液；在所述预腌制蔬菜中 添加以所述预腌制蔬菜重量计10~12%的所述香辛料汁以及2~5%的所述菌悬液，混匀 装罐，密封后在室温下发酵直至发酵液pH值达3. 0~4. 0,得到发酵蔬菜。
[0009] 作为本发明所述植物乳杆菌TH103在蔬菜发酵领域的应用的一种优选方案，其 中：所述的蔬菜是为白菜、萬笋、豆工豆、胡萝卜、白萝卜、萬笋、卷心、菜、甜椒、洋葱或芹菜中的 一种或几种。
[0010] 作为本发明所述植物乳杆菌TH103在蔬菜发酵领域的应用的一种优选方案，其 中：所述香辛料是辣椒、花椒、姜、蒜、八角、茴香、橘皮、香叶中的一种或几种。
[0011] 本发明的再一个目的是提供一种植物乳杆菌TH103在工作发酵剂领域的应用，其 在所述工作发酵剂中植物乳杆菌TH103的浓度是109cfu/g以上。
[0012] 作为本发明所述植物乳杆菌TH103在工作发酵剂领域的应用的一种优选方案，其 中：包括，按照以培养基重量计1~2%接种量，将植物乳杆菌TH103原始菌种接种于培养 基中，在37°C的条件下培养20~28h进行活化，连续以相同方式进行活化2~3次，得到活 化培养物中植物乳杆菌TH103活菌数为不小于108cfu/mL ;在温度2~6°C与转速4500rpm 的条件下进行离心10~15min，弃上清，收集得到的菌泥用pH7. 2的缓冲液冲洗3~4次， 然后，往所述的菌泥中加入冻干保护剂悬液，调整菌液浓度为不小于109cfu/mL，混匀后进 行真空冷冻干燥得到所述的植物乳杆菌TH103发酵剂，其中，所述冻干保护剂悬液的组成 是以重量计蔗糖2%、脱脂乳15%、乳糖5%、甘油1 %和75%的水。
[0013] 本发明的另一个目的是提供一种植物乳杆菌TH103在发酵青贮饲料领域的应用， 其包括，将青贮饲料原料揉切分段后待用；称取50~60kg青贮饲料原料，将0. 5~0. 6g如 权利要求7所述的植物乳杆菌TH103发酵剂与200~250mL无菌水混合均匀，喷洒到青贮 饲料原料中，翻拌混合均匀后装入青贮饲料桶中压实密封，常温条件下贮存1~2个月后即 得到含植物乳杆菌TH103的青贮饲料。
[0014] 本发明的还有一个目的是提供一种植物乳杆菌TH103在发酵香肠领域的应用，其 包括，将选自猪肉、牛肉或羊肉的肉切碎，5°C~8°C的冷藏室中进行预冻24~36h后，与食 盐、白砂糖、亚硝酸钠按照重量比100:4:1. 5:0. 015充分混合；将混合物置于温度0~4°C 下腌制24~48h，加入按照肉重量计5~10 %香辛料，搅拌混合，然后加入根据权利要求7 所述的植物乳杆菌TH103发酵剂，其加入量是以肉重量计0. 5~0. 8%，混合均匀后把含有 工作发酵剂的肉灌注到肠衣中，得到的灌肠在温度14°C~15°C与相对湿度80%的条件下 发酵25~30天；发酵结束后在温度65~70°C下进行烘烤，冷却后得到所述的发酵香肠。
[0015] 本发明的植物乳杆菌TH103在体外对鼠伤寒沙门氏菌具有明显的抑制作用，对人 工胃液、人工肠液具有强的耐受性，耐受NaCl能力尚达10%，在实际食品体系中可以显者 抑制鼠伤寒沙门氏菌的生长。对鼠伤寒沙门氏菌感染肠上皮细胞株HT-29细胞具有保护作 用。所述植物乳杆菌TH103可以用于发酵蔬菜、制备生产青贮饲料、发酵香肠等产品。
【附图说明】
[0016] 图1为在有TH103条件下及其不加入TH103条件下鼠伤寒沙门氏菌在牛乳中的生 长曲线。
【具体实施方式】
[0017] 为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合说明书附图对 本发明的【具体实施方式】做详细的说明。
[0018] 在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以 采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的 情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
[0019] 其次，此处所称的"一个实施例"或"实施例"是指可包含于本发明至少一个实现 方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的"在一个实施例中"并非均 指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
[0020] 下面将更详细地描述本发明。
[0021] 所述的植物乳杆菌TH103是采用下述筛选方法获得的，并且对其性质进行了研 宄。
[0022] 一、筛选
[0023] 筛选方法的具体实施步骤如下：
[0024] 1、样品采集
[0025] 原始样品采自邯郸涉县和裕村当地农民自制的自