专利名称：双联双重定位式胞内疫苗的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种能将消灭T4细胞内的艾滋病毒(HIV)的阻遏蛋白及其它核苷与非核苷类似物等药物准确定位于T4细胞，并将其转运到人体淋巴细胞T4细胞的细胞质与细胞核内的抗艾滋病(AIDS)的双联双重定位式胞内疫苗。
经计算机检索，还没发现国内外目前有这种新型疫苗。
本发明的目的，是为了克服目前治疗艾滋病的两大基本方法的重大缺陷而设计的。这两大基本方法，一是药物治疗法，例如“鸡尾酒疗法”，另一个则是疫苗法，例如，目前研制的各类抗艾滋病疫苗。
对于目前的疫苗法来说，它们只能作用于被感染的T4细胞的外部的病毒，或通过识别被感染的T4细胞来消灭艾滋病毒，但却因为艾滋病毒的gp120表面抗原的迅速多变而失效。而对于药物疗法来说，虽然目前联合应用药物来治疗艾滋病，已取得重大疗效，但由于它们不能杀死全部隐藏在T4细胞内的艾滋病毒，以及艾滋病毒对药物产生了抗药性，特别由于它们是一种非定位作用于T4细胞，而是作用于全身的、需要大量口服的药物，不仅有严重的副作用，而且因服用药量过大而价格昂贵，因而很难使广大的艾滋病患者得以使用，从而获得治疗。
为了克服上述两类治疗艾滋病方法的缺陷，本专利独创性地设计了一种抗艾滋病的双联双重定位式胞内疫苗。它不仅可以将抗艾滋病的药物，例如，抗逆转录病毒的AZT(叠氮胸腺嘧啶核苷)，以及可阻遏病毒逆转录酶的药物，专一地、定位地作用于T4细胞的细胞质内(其中包括未感染的T4细胞而起到预防感染的作用)，而且还可以将它们定位地作用于T4细胞核内，已被整合在宿主DNA上的艾滋病毒的DNA中的可转录病毒逆转录酶的基因上，使抗体蛋白，例如，能够阻遏可产生病毒RnaseH，这种部分逆转酶的基因的抗体蛋白，可称为抗体蛋白I号，使其永久不能再转录复制这种逆转录酶，从而达到彻底杀死艾滋病毒的目的。
其它的抗体蛋白药物，例如可阻遏tat的基因，使其失去促使病毒mRNA产生的功能，可称为抗体II号，也同样具有这样的效应。
这种新型疫苗的基本特征在于它是由两种疫苗混合而成的，一种是负责将抗艾滋病毒的药物转运至T4细胞的细胞质之中，可称为A型疫苗；另一种是可将能阻遏艾滋病毒DNA转录复制逆转录酶的基因的抗体蛋白，例如抗体I号或抗体II号，转运到T4细胞核内的疫苗，可称为B型疫苗。因此，就称它们为“混合型双联疫苗”。其中，由于B型疫苗必须将抗体，例如抗体I号或II号转运至T4细胞核内，它不仅得与可转运至细胞质内的转让蛋白相结合，而且还得与能带领它们进入T4细胞核的核定位顺序的氨基酸短肽，这一转运蛋白相结合，因此称它为“双重疫苗”。这就是本专利称为“双联双重定位式胞内疫苗”的根本原因。
A型疫苗的制作，是将可作用于T4细胞质内爱滋病毒的逆转录酸酶及其辅酶的药物与gp120蛋白的相结合，以达到将它们转运至T4细胞质内的目的。众所周知，gp120蛋白是爱滋病毒自身所携带的外壳蛋白的一种。它可以有针对性地、专一地定位作用于T4细胞，而将爱滋病毒的RNA及其逆转录酶和其它辅酶带入T细胞的细胞质之中。
A型疫苗采用gp120蛋白作为一种针对T细胞的转运蛋白，实质上是一种“以其人之道，还治其人之身”的办法，或者说“以毒攻毒”的办法，即利用gp120蛋白可携带病毒的其它蛋白酶和RPNA进入T4细胞的细胞质内的特性，而将抗爱滋病毒逆转录酶的药物也同样应用gp120转运到T4细胞质内。当然，其间可能还需要一种变构酶或辅酶的帮助，才得使它们相结合，但这从技术上来说，并不是特别困难的问题。
因此，这种A型疫苗实质上是一种两区性分子，可被裂为二个区段一个区段是gp120蛋白，可与T细胞的表面受体相结合，而将第二区段的抗病毒逆录酶药物转运到T4细胞质内。这种两区性分子与白喉毒素很相似。实际上也是受白喉毒素蛋白构成的启发而设计的。由于爱滋病毒的逆转录酶是稳定的，不象gp120蛋白那样迅速多变，因此，抗逆转录酶药物一旦进入T4细胞质内抗逆转录酶的药物(可以是一种，也可以是多种药物的联合)，就能立即消灭存在于T4细胞质内的全部爱滋病毒的逆转录酶及其辅酶。与此同时，这种约物也可以提前进入未受感染的T4细胞内，从而达到预防感染的目的。因此这种疫苗可以达到百分之百消灭T4细胞质内爱滋病毒的目的。
但是，为了更彻底地消灭已整合到T4细胞DNA上的爱滋病毒，使其没有机会再度复制，因此，还必须使用另一种抗爱滋病毒疫苗B型疫苗。
B型疫苗实质上是一种三区性分子。它的第一区段仍然是gp120蛋白，它的第二区段则是可阻遏病毒DNA逆转录基因的抗体蛋白，例如抗体蛋白I号。它的第三区段分子，则是一个与抗体蛋白相连接的核定位顺序。此顺序含有5个连续的带正电荷的残基—脯—赖—赖—赖—精—赖—缬。这一短肽顺序的指令可使抗体蛋白I号或II号进入T4细胞核内，因而能与产生病毒逆转录酶的基因相结合，以制止爱滋病毒再次进行自我复制(《生物化学》[美]LVBER STRYER 北京大学出版社1992年P71)，从而达到从根本上消灭爱滋病毒的目地。
由以上述两种疫苗，即A型疫苗与B型疫苗联合作用，就可以全面消灭患者体内的爱滋病毒，因而达到彻底治疗爱滋病的目的。
与此同时，又由于本疫苗专一性强，只针对T4细胞，并可采用小剂量针剂疫苗注射的方式来对患者进行治疗，不仅具有用药量小，没有毒性副作用的特点，而且价格更便宜，可为广大患者所使用。因此，它必然具有极为广阔的商业应用价值，从而具有极大的实用性。
还需要特别声明的是，“双联双重定位式胞内疫苗”，如果携带抗癌药物及其它抗病毒的药物，也可以用于癌症及其它种种病毒引发的人类疾病的治疗，其中B型双重疫苗还可以携带阻遏有缺陷基因或激活抗病毒与抗癌基因的药物，因此，本专利持有者保留为治疗上述疾病，而使用类似的“双联双重定位式胞内疫苗”的一切专利所属权。
还需要说明的是，无论是A型疫苗或者是B型疫苗，其中每种疫苗都是由多种同类疫苗混合而成的，所以，A型疫苗之中包含有AI型疫苗，AII型疫苗……。这是因为在混合式的A型疫苗中，每一种疫苗都只能由一个gP120转运蛋白携带一个抗爱滋病毒的一种药物。同样如此，在多种混合式的B型疫苗中，其中每一种B型疫苗也只能由一个gp120转运蛋白和一个核定位顺序短肽指令共同携带一种药物，例如抗体I号。但为了彻底消灭爱滋病毒，就必须在每种疫苗中，都联合使用多种药物，以便达到百分之百地消灭爱滋病毒的最佳效果，因此，每种疫苗都必须将各自携带一种药物的多种型号的同种疫苗混合使用。
权利要求
1.一种抗爱滋病(AIDS)的双联双重定位式胞内疫苗。其特征为它将连结着可阻遏爱滋病毒(HIV)的药物，例如，抗体I号、抗体II号，抗逆转录酶的AZT(叠氮胸腺嘧啶核苷)，齐多夫定(Zidovudine)，等等核苷与非核苷类似物的两种疫苗A型疫苗与B型疫苗，通过它们所连结的特殊的转运蛋白，分别将这些药物转运至淋巴细胞T4细胞的细胞质与细胲核内，其中，A型疫苗所携带的药物被转运至T4细胞的细胞质内，而B型疫苗所携带的药物，被转运至T4细胞的细胞核内，其中A型疫苗所携带的药物，可直接消灭已感染爱滋病病毒的T4细胞的细胞质内的病毒逆转录酶及其辅酶，使病毒不能生长；而B型疫苗所携带的药物，例如抗体I号或抗体II号，可直接阻遏已整合到宿主T4细胞DNA中的病毒DNA的tat基因等等，或是其它可转录部分病毒逆转录酶RNaseH基因，使它们失去转录病毒的逆转录酶的功能，永久性地阻止病毒的再复制，从而达到彻底根治爱滋病的目的。由于需要同时使用A型和B型疫苗，所以称它们为“双联疫苗”；又由于所使用的B型疫苗需要连结两种转运蛋白，才能将其所携带的药物转运至T4细胞的细胞核内，所以称B型疫苗为“双重疫苗”；再由于上述“双联双重疫苗”可专一性地定位作用于T4细胞的细胞质与细胞核内，因此又总称它们为“双联双重定位式胞内疫苗”，其中胞内所指的是细胞质内和细胞核内。
2.根据权利1所述，本专利创造性地设计了A型疫苗。其特征为它是根据爱滋病毒外壳的gp120蛋白可与T4细胞的表面受体相结合，而将病毒的RNA，逆转录酶及其辅酶，专一针对T4细胞，定位式地转运至T4细胞质内的原理，根据“以毒攻毒”的原则而设计的。它也同样利用gp120蛋白，将抗病毒逆转录酶及其辅酶的药物，例如，AZT、齐多夫定，等等，转运至T4细胞的细胞质中，直接消灭病毒的逆转录酶及其辅酶，使病毒不能长生。由于病毒的逆转录酶十分稳定，不象gp120蛋白那样迅速多变，又由于它是被gp120蛋白直接转运至T4细胞的细胞内的，而不象口服这种抗逆转录酶药物那样，广泛作用于全身细胞，同时口服药物自身也会因在T4细胞外与其它人体代谢物发生反应而受到损失，因此，既有高效消灭病毒逆转录酶的作用，又有因其有专一针对T4细胞的特性而具有用量小的特点。因此A型疫苗是一种两区性分子，可被裂解为二个区段一个是gp120蛋白，可与T4细胞表面的受体结合，并将第二区段所携带的药物转运至T4细胞质内。
3.根据权利1所述，本专利创造性地设计了B型疫苗。其特征为它是一种三区性分子，第一区段为gp120蛋白；第二区段为可阻遏T4细胞核内的、已整合到宿主DNA上的病毒DNA的有关可转录病毒逆转录酶的基因，例如tat基因，或是可转录部分逆转录酶RNaseH基因的药物，例如抗体I号或抗体II号；第三区段则为一核定位顺序，它结合在抗爱滋病毒的药物，例如抗体I号或抗体II号上，此顺序含有S个连续的带正电荷的残基—脯—赖—赖—赖—精—赖—缬。这一短肽顺序的指令可使抗体I号或抗体II号蛋白进入T4细胞核内。其中第一区段的gpho蛋白的作用，是将第二和第三区段的分子转运主T4细胞的细胞质内。由于它含有两个转运蛋白，以使将药物从T4细胞外转运至T4细胞内后，再连续转运至T4细胞核内，所以称它为双重疫苗，它与A型疫苗合称为“双联双重定位式胞内疫苗。”
4.根据权利1所述，本专利为A型疫苗和B型疫苗创造性地设计了所携带的药物。其特征为其中，为A型疫苗设计的药物，可直接与T4细胞质内爱滋病毒的逆转录酶及其辅酶相结合，从而使其失去活性，例如AZT、齐多夫定，等等；而为B型疫苗所设计的药物，可阻遏已整合到宿主DNA的病毒DNA的可转录部分逆转录酶RNasiH的基因的阻遏蛋白抗体I号，以及可阻遏病毒tat基因的抗体II号，其它还有可阻遏病毒的gag、pol、enu和sor基因的抗体III号，抗体四号……等等。由于这些阻遏蛋白，抗体I号、II号……，可因能够阻遏这些病毒基因，使其失活，因而可永久性地使爱滋病毒失去在T4细胞中再复制的功能，因此，它与A型疫苗联合作用，就可彻底消灭存在于T4细胞的细胞质与细胞核内的一切爱滋病毒。
5.根据权利1所述，本专利创造性地设计了混合式的A型疫苗与混合式的B型疫苗。其特征为由于无论A型或B型疫苗的每一种转运蛋白，例如A型疫苗的gp120或是B型疫苗的核定位顺序短肽指令，—辅—赖—赖—赖—精—赖—缬与gP120的组合，每次使用时，都只能携带一种药物，例如，B型疫苗的一组gp120蛋白与核定位顺序短肽的组合只可携带一个抗体I号分子，可称为BI型疫苗。如果需要多种B型疫苗所携带的药物，例如抗体I号、II号、III号……等等，同时进入T4细胞的核内，以加强阻遏病毒DNA基因的作用，就得将分别携带着抗体I号、II号、III号……的多种B型疫苗混合起来使用，其中多种B型疫苗各自携带一种药物，例如，BI型疫苗携带抗体I号、BII型疫苗携带抗体BI型II号……等等。对于A型疫苗也是如此每种A型疫苗分别只能携带一种药物，并为此可将它们分为称AI型疫苗，AII型疫苗……等等。同时也将它们混合使用，并与已混合在一起的BI型疫苗、BII型疫苗……的混合式B型疫苗联合起来，共同应用。
6.根据权利1所述，本专利创造性设计了抗爱滋病毒的注射式针剂“双联双重定位式胞内疫苗”。其特征为，将“双联双重定位式胞内疫苗”作为液体型的针剂，封于玻璃管内，并保存在能使疫苗存活的温度的冰箱中，由于本疫苗如权利2所述，具有专一性强，只定位式作用T4细胞，不广泛作用全身细胞的功能，因此具有用药量小，无副作用，价格更便宜的优点，可为广大患者使用，具有极强的实用性。又由于它只针对爱滋病毒的逆转录酶及其辅酶在T4细胞中的发生阻遏反应，所以当它进入未感染的T4细胞内，不但不会对T4细胞起破坏作用，因为健康的T4细胞中不含有逆转录酶及其辅酶，而且还可以起到使健康的T4细胞能够予防感染爱滋病毒的作用。
7.根据权利1所述，本专利所创造设计的双联双重定位式胞内疫苗，还可以用于治疗癌症及其它患基因缺陷症患者，以及被其它病毒感染患者的疾病。其特征为只需将A型疫苗或B型疫苗所携带的药物，更换为可阻遏癌症患者的原癌基因，或可激活癌症患者的抗癌基因的药物，或是可阻遏被病毒感染的患者细胞的宿主DNA中所整合的病毒基因，及其细胞质中病毒的致病因子，例如病毒逆转录酶等等，还有可阻遏基因病症患者的有缺陷基因的药物，就可以治愈这些病症，并且可专一性地，定位式地作用于这些患病的人体细胞。因此，本专利持有者保留一切使用按本专利所设计的“双联双重定位式胞内疫苗”的方式，将上述各种药物用于治疗以上所述人体各类特定细胞疾病的专利所有权。
全文摘要
本专利涉及一种抗艾滋病毒的“双联双重定位式胞内疫苗”。它是由A、B两种型号的疫苗共同组成的。本疫苗因采用了两种特殊的转运蛋白，因而可以把能够阻遏艾滋病毒(HIV)的逆转录酶及其辅酶，以及能够阻遏已整合到宿主T4细胞DNA中的艾滋病毒DNA的tat等基因的药物，转运到人体淋巴细胞T4细胞的细胞质与细胞核内，从而彻底消灭艾滋病毒，治愈艾滋病。本疫苗采用针剂注射方式，具有用药量小、无任何副作用的特点。
文档编号A61P31/18GK1433812SQ02100099
公开日2003年8月6日 申请日期2002年1月24日 优先权日2002年1月24日
发明者白涛 申请人:白涛