专利名称：一种含韭菜籽增强免疫力功能性食品及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种功能性食品及其制备方法，具体涉及一种含韭菜籽的功能 性食品及其制备方法。
背景技术：
韭菜籽为我国常见食用蔬菜百合科植物韭菜^h'咖^/6e/^咖RoUl.干 燥成熟的种子，韭菜籽(药典中常称为"韭子")为我国传统中药品种，始载 于《名医别录》，列为中品。据药典记载，韭菜籽具有"温补肝肾，壮阳固精" 之功效，韭子作为壮阳补肾用入药在我国民间已有数千年的历史。2002年我国 卫生部将其列为药食两用植物天然产物。韭子这种植物种子资源在我国十分丰 富，产量居世界首位。韭子中的一些化学成分可能具有重要的生理功效，如改 善性功能等，因此对韭子进行现代化开发与利用显得十分重要。国内外一直以 来对韭菜尤其是其种子韭子的研究很少，从我们掌握的文献资料来看，国外还 未对韭子进行过化学成分和功效等方面的研究，国内化学成分方面的研究也并 不多，迄今为止，对其生物活性或药理研究国内外都还几乎没有报道。因此， 有必要充分利用我国十分丰富的韭菜(韭子)植物资源，对其进行深入系统研 究，为实现韭子中药现代化和开发新型、高效、安全的健康食品和药品提供科 学依据。发明内容本发明的目的在于提供一种含韭菜籽的功能性食品，所述食品具有增强免 疫力功能。本发明的另一个目的为所述食品的制备方法，所述方法工艺简单、 生产成本低等优点，适合工业化生产。实现本发明目的的技术方案如下一种含韭菜籽增强免疫力功能性食品，其特征是组合物各原料重量配比如下韭菜籽50-70份，巴戟天50-60份，淫羊藿10-15份、菟丝子10-15 份、仙茅10-15份，熟地10-15份。较好的是韭菜籽50份，巴戟天50份，淫羊藿10份、菟丝子10份、仙 茅10份，熟地10份。一种含韭菜籽增强免疫力功能性食品的制备方法，其特征是将韭菜籽、 巴戟天混合用4倍量的95%乙醇提取三次，每次12小时，过滤合并三次滤液， 将滤液减压浓縮成浸膏；将淫羊藿、菟丝子、仙茅，熟地烘干研成细粉；将浸 膏和细粉混合，烘干，加入O.OP/。的BHT和0.0396的山梨酸钾，混合均匀，粉 碎，制粒，杀菌，装入胶囊，制得每粒0.5克的胶囊。胶囊样品制备取供试样品，先用研钵研成细粉，加去离子水配制成浓度 为0. 3g/ml的混悬液，实验前进行灭菌处理。细胞免疫增殖实验用肉灰蓉为对照品。 (-)细胞免疫增殖实验1. 检测指标及方法实验小鼠(Bav/c， 6-8周龄，体重15-17 g)购自上海实验动物中心， 喂食标准词料和水。用于实验前，动物在标准实验动物房条件(温度24士1 °C，相对湿度50%±10%)下词养，保持一周。2. 小鼠脾淋巴细胞的制备小鼠断颈处死后，无菌取脾，经200目钢网过筛，以含5%的胎牛血清的 Hanks液制成单个细胞悬液，用Tris-N仏CL低渗液裂解红细胞、离心洗涤2次 后，将细胞重悬浮于含10X胎牛血清的RPMI1640完全培养液中，台盼兰计数， 活细胞〉95%，细胞浓度lX10Vml。3. 免疫功能测定取样品IO mg于20 ml不完全RPMI1640培养液中(此初始浓度为500 ug/ ml)。常规方法制备正常小鼠脾细胞悬液，使其细胞浓度为1X106/1111。取IOO y l细胞悬液/孔和不同量的样品溶液/孔于96孔培养板，用不完全RPMI1640 培养液将每孔补齐至200 ul，同时设置空白对照？L。将培养板放入5%0)2培养 箱中，37'C下培养72 h，于结束前4 h加入100 ulMTT继续培养，培养结束后吸去表面液体100 ul，再加入O. lmol/1盐酸异丙醇100 ul混匀，于570 nm 测其光密度值。每实验点设置五复孔。附表样品对小鼠淋巴细胞增殖的影响(士s， n=6)组另u0D570正常组0. 210±0. 04韭菜籽胶囊样品组0. 271±0. 03*韭菜籽口服液样品组0. 248±0. 04*对照组0. 297±0. 03*与正常组比P〈0. 05(二) 非特异性免疫1. 实验分组及免疫功能低下模型建立将小鼠随机分为A、 B、 C、 D4组，A为正常对照组，B为免疫低下对照组; C组为韭子组；D组为肉苁蓉阳性药物对照组B、 C、 D组造成免疫低下模型， 环磷酰胺剂量为80mg / kg，第l、 2、 3天连续腹腔注射；A、 B组灌服生理盐水; C组灌服韭子液；D组灌服黄芪液2.0g/kg;各组灌胃体积相同，0.5ml/只，1 次/d;共灌服10d，第ll天检测指标。2. 巨噬细胞吞噬中性红试验小鼠腹腔无菌注射4%硫代乙醇酸钠肉汤0.5ml， 3d后脱颈椎处死小鼠， 腹腔注入5ml冷Hank， s液，轻柔腹部，解剖吸取腹腔液于试管中，离心洗涤， 用完全PRMI-1640培养液调整细胞浓度至2X 107ml，放入96孔细胞培养板中， 每孔100ml，每样3个复孔，置37。C 、 5%002培养箱。4h后甩去培养基，每孔加 入100ml的0.072。/。中性红溶液，于37。C 、 59^C02培养箱中培养30min后，弃去中 性红，用PBS洗3次，每孔再加入200pl的细胞溶解液(0. lmraol/L冰醋酸无 水乙醇l: 1)，静置过夜。用酶标仪测定540nm处各孔的吸光度A值，A值的大小 表示巨噬细胞吞噬功能的强弱。(三) 体液免疫1.溶血空斑形成细胞(PFC)测定小鼠于给药的第6天，腹部注射以生理盐水配制成的5%绵羊红细胞 (SRBC)O. 4ml免疫。3d后断颈处死，无菌取脾脏，剪碎，过200目钢网制成脾 细胞悬液(在冰盒内操作)，用Hank， s液调整脾细胞数为lX10Vml;取Hank， s 液0.6ml，脾细胞悬液、10% SRBC及1; 2小牛血清各0. lml，放入小试管内充 分混匀，取70 ul注入用两张载玻片制成的小室中，熔化石蜡将小室封闭，置 于37。C温箱培养lh，在显微镜下观察并记数每个小室的空斑数。计算出每百万 个脾细胞内所含空斑形成细胞数的平均值。
对免疫功能低下小鼠非特异性免疫功能的影响结果，见下表。
附表胶囊样品对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的影响(士s， n二lO)
组另lj0D570PFC
正常组0. 298±0. 06398. 5±9. 5
免疫力低下组0. 195±0. 04218. 2±8. 4
韭菜籽胶囊样品组0. 253±0. 04*347. 0±6. 7*
韭菜籽口服液样品组0. 242±0. 06*329. 0±9. 4*
对照组0. 261±0. 03328. 4±11. 6
与低下组相比，P〈0.05
从附表看出，CY构建的免疫低下组，其腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力明 显低于正常对照组，二者有显著差异(P〈0.05);韭子和肉苁蓉均能改善CY所 致的巨噬细胞功能低下，已达到了正常组水平，两者无显著差异(P〉0.05)。
实验结果表明，韭菜籽组能够显著增强免疫功能低下小鼠腹腔巨噬细胞的 吞噬功能，使其恢复至正常水平，从而提高非特异免疫水平与低下组相比(P <0. 05)，由CY构建的免疫低下模型小鼠，其PFC数较正常组显著减少(P <0. 05)。 韭子和肉苁蓉的PFC数比低下组明显升高(P〈0.05)，已达了到正常组水平，两 者无显著差异(P>0.05)。实验结果表明，韭菜籽样品组可显著提高免疫功能 低下小鼠的溶血空斑形成细胞数，使其恢复至正常水平，从而提高小鼠的体液 免疫功能。
本发明为实现含韭菜籽增强免疫力功能性食品的中药现代化和开发新型、 高效、安全的健康食品和药品提供科学依据和实用的配置组分及制备方法。
具体实施例方式
下面通过实施例对本发明内容作进一步说明 实施例l
1.胶囊剂的制备
取组合物各原料配比的用量如下韭菜籽240克，巴戟天220克，淫羊藿 50克、菟丝子50克、仙茅50克，熟地50克。
将韭菜籽、巴戟天混合用4倍量的95%乙醇提取三次，每次12小时，过滤 合并三次滤液，将滤液减压浓縮成浸膏。将淫羊藿、菟丝子、仙茅，熟地烘干 研成细粉。将浸膏和细粉混合，烘干，加入0.0P/。的BHT和0.03。/。的山梨酸钾， 混合均匀，粉碎，制粒，杀菌，装入胶囊，制得每粒0.5克的胶囊。
实施例2
1.胶囊剂的制备
取组合物各原料配比的用量如下韭菜籽500克，巴戟天500克，淫羊藿 100克、菟丝子100克、仙茅100克，熟地100克。
将韭菜籽、补骨脂混合用4倍量的95%乙醇提取三次，每次12小时，过滤 合并三次滤液，将滤液减压浓縮成浸膏。将巴戟天、淫羊藿、菟丝子、仙茅， 熟地烘干研成细粉。将浸膏和细粉混合，烘干，加入0.0P/。的BHT和0.03呢的 山梨酸钾，混合均匀，粉碎，制粒，杀菌，装入胶囊，制得每粒0.5克的胶囊。
权利要求
1、一种含韭菜籽增强免疫力功能性食品，其特征是组合物各原料重量配比如下韭菜籽50-70份，巴戟天50-60份，淫羊藿10-15份、菟丝子10-15份、仙茅10-15份，熟地10-15份。
2、 根据权利要求l所述的功能性食品，其特征是所述组合物各原料重量 配比如下韭菜籽50份，巴戟天50份，淫羊藿10份、菟丝子10份、仙茅 10份，熟地10份。
3、 一种如权利要求1所述含韭菜籽增强免疫力功能性食品的制备方法， 其特征是将韭菜籽、巴戟天混合用4倍量的95%乙醇提取三次，每次12小时，过滤 合并三次滤液，将滤液减压浓縮成浸膏；将淫羊藿、菟丝子、仙茅，熟地烘干研成细粉；将浸膏和细粉混合，烘干，加入O.OP/。的BHT和0.03%的山梨酸钾，混合 均匀，粉碎，制粒，杀菌，装入胶囊，制得胶囊。
4、 根据权利要求3所述的制备方法，其特征是所述胶囊每粒0.5克。
全文摘要
本发明涉及一种功能性食品及其制备方法。一种含韭菜籽增强免疫力功能性食品，组合物各原料重量配比是韭菜籽50-70份，巴戟天50-60份，淫羊藿10-15份、菟丝子10-15份、仙茅10-15份，熟地10-15份。一种含韭菜籽增强免疫力功能性食品的制备方法将韭菜籽、巴戟天混合用4倍量的95％乙醇提取三次，每次12小时，过滤合并三次滤液，将滤液减压浓缩成浸膏；将淫羊藿、菟丝子、仙茅，熟地烘干研成细粉；将浸膏和细粉混合，烘干，加入0.01％的BHT和0.03％的山梨酸钾，混合均匀，粉碎，制粒，杀菌，装入胶囊，制得胶囊。本发明为实现开发含韭菜籽增强免疫力功能性食品提供科学依据和实用的配置组分及制备方法。
文档编号A61K36/8962GK101301075SQ20081003869
公开日2008年11月12日 申请日期2008年6月6日 优先权日2008年6月6日
发明者华 张, 胡国华, 茅仁刚, 马正智 申请人:上海师范大学