专利名称：一种固体恩诺沙星纳米粒的制备方法
技术领域：
本发明属于水产药物制剂技术领域，尤其是涉及一种固体恩诺沙星纳米粒的制备方法。
背景技术：
恩诺沙星(Enrofloxacin，ENR)又名乙基环丙沙星，于1996年获美国FDA批准，为 禽畜和水产专用第3代氟喹诺酮类抗菌药物，能通过抑制细菌DNA螺旋酶来达到抗菌效果， 具有杀菌谱广、体内分布广泛、与其他药物无交叉耐药性等特点。 目前，在生产中恩诺沙星仍然采用以粉剂为代表的第一、二代传统剂型，普遍存在 着生物利用度低、药效期短、肠胃剌激大、易产生耐药性等缺点，且抗逆性差，药物生产、运 输、保存等过程中易受光、热反应产生降解，导致治疗过程中药物疗效低、剂量增大、治疗周 期延长等问题，从而间接造成由药物残留等水产品安全隐患。 虽然，国内已有部分关于壳聚糖作为载体的相关研究，但都局限于对纳米粒混悬 液的制备和评价，不能提供该剂型投入生产和应用的有效方案。
发明内容
本发明的目的是提供一种固体恩诺沙星纳米粒的制备方法，该方法可实现纳米粒 子小、重分散性好、包封率及载药量较高，并能提高药物的缓释性能和药物对光、热的抗逆 性。
为了达到上述的目的本发明的固体恩诺沙星纳米粒的制备方法包括下列步骤
(1)以蒸馏水配制成浓度为1%的冰醋酸水溶液，在磁力搅拌的条件下，再加入壳 聚糖，使其溶解，得壳聚糖浓度为1. 5-2. 5mg/mL的壳聚糖溶液； (2)将恩诺沙星原料药加入上述壳聚糖溶液中，并保持磁力搅拌10分钟使其分散 均匀，后调节PH至5. 0，得到恩诺沙星壳聚糖溶液； (3)将三聚磷酸钠溶于蒸馏水中，配制成浓度为1. 2-1. 8mg/mL的三聚磷酸钠溶 液，且将其缓慢滴入磁力搅拌状态下的上述恩诺沙星壳聚糖溶液中，滴加完成后继续磁力 搅拌1小时固定，得恩诺沙星壳聚糖纳米粒混悬液； (4)将上述固定化的恩诺沙星壳聚糖纳米粒混悬液分装于冷冻瓶中，在-70°〇下
预冷冻2小时，然后在-501:下抽真空冷冻干燥，最后制成固体恩诺沙星纳米粒。 所述的pH值的调节以1. 0mol/L的NaOH溶液调节。所述的壳聚糖、恩诺沙星与三 聚磷酸钠的质量比为IO :2:1-8:4:3。所述的磁力搅拌的搅拌速度为800rpm。所 述的固体恩诺沙星纳米粒的包封率为50-70% ，载药量为8-12wt%。
本发明的固体恩诺沙星纳米粒的制备方法具有以下特点 1、本发明采用的壳聚糖是甲壳素脱乙酰化的产物，具有良好的生物降解性和生物 黏附性，能延长药物在吸收部位的滞留时间，提高药物的生物利用度，在药物传递系统的研 究中具有广泛的应用，此外，壳聚糖还可提高机体非特异性免疫功能，以壳聚糖作为载体材料制备纳米粒，原料来源广泛、降解性好，并且其制备过程无需添加任何有机制剂，所有辅
料无毒无害，在高效低毒渔药剂型的开发和应用中具有良好的使用价值。 2、本发明采用的三聚磷酸钠带有阴离子，可与壳聚糖正电荷氨基基团产生离子交
联作用，形成聚电解质复合物。离子交联法中的凝胶化过程与体系中阴离子和阳离子浓度
有关，因此纳米粒只在特定的壳聚糖和三聚磷酸钠浓度范围内形成。 3、在制备固体恩诺沙星纳米粒的过程中，优化了离子交联法制备恩诺沙星壳聚糖 纳米粒混悬液的条件，并结合冷冻干燥法制备了固体恩诺沙星纳米粒，使其具有较小的粒 径，纳米粒之间无团聚现象，并较高的包封率和载药量； 4、与恩诺沙星粉剂相比具有良好的缓释性能，其在体外环境下1小内可减少约 60%药物的释放，24小时总释放度为79. 9% ; 5、与恩诺沙星粉剂相比具有更好的抗逆性，在4小时内热降解率和紫外降解率分 别减少了 38. 4%和13. 3% ; 6、本发明操作简便，固化方法可靠，提高生产效率，降低生产成本，为大规模生产 和推广应用提供了有效的途径。
本发明由以下的实施例及其附图给出。
图1是固体恩诺沙星纳米粒的透射电镜图。
图2是固体恩诺沙星纳米粒的体外释放特点图。
图3是固体恩诺沙星纳米粒的热降解率图。
图4是固体恩诺沙星纳米粒的紫外降解率图。
具体实施例方式
以下将对本发明的一种固体恩诺沙星纳米粒的制备方法作进一步的详细描述。
实施例 1、称取40mg的壳聚糖，加入蒸馏水定溶至20mL，加入0. 2mL冰醋酸使其溶解，配制 成浓度为2mg/mL的壳聚糖溶液，上述在搅拌速度为800rpm的磁力搅拌的条件下进行；
2、称取12mg的恩诺沙星原料药，加入上述所述的壳聚糖溶液中溶解，以800rpm速 度持续磁力搅拌IO分钟使溶液中各组分分散均匀，以1. Omol/L的NaOH溶液调节pH至5. 0， 得恩诺沙星壳聚糖溶液； 3、称取三聚磷酸钠10mg，溶于8mL蒸馏水，配制成浓度为1. 25mg/mL的三聚磷酸钠 溶液； 4、将8mL三聚磷酸钠溶液缓慢滴入上述恩诺沙星壳聚糖溶液中，其间以800rpm速 度持续磁力搅拌，使烧杯中液体略带白色乳光，在滴加完成后再以800rpm速度继续磁力搅 拌1小时加以固定，得恩诺沙星壳聚糖纳米粒混悬液； 5、将上述固定化的恩诺沙星壳聚糖纳米粒混悬液分装于冷冻瓶中，在-7(TC下预 冷冻2小时，然后在-50°〇下抽真空冷冻干燥，制成固体恩诺沙星纳米粒，所述的固体恩诺 沙星纳米粒且呈表面疏松多孔的白色固体粒状，所述的固体恩诺沙星纳米粒的包封率为 50-70 % ，载药量为8-12wt % 。
对本发明所制成的固体恩诺沙星纳米粒，用透射电镜(TEM)、紫外分光光度计 (UV)等仪器进行测定其表征、释放特点和热、光稳定性，结果表明如下 所制备的固体恩诺沙星纳米粒为球星或类球型颗粒，分散均匀，无团聚现象，平均 粒径在237. 4nm左右，见附图1。 所制备的固体恩诺沙星纳米粒具有一定的缓释作用，见附图2。 相比恩诺沙星粉剂，固体恩诺沙星纳米粒具有更好的热稳定性，见附图3。 相比恩诺沙星粉剂，固体恩诺沙星纳米粒具有更好的光稳定性，见附图4。
权利要求
一种固体恩诺沙星纳米粒的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤(1)以蒸馏水配制成浓度为1％的冰醋酸水溶液，在磁力搅拌的条件下，再加入壳聚糖，使其溶解，得壳聚糖浓度为1.5-2.5mg/mL的壳聚糖溶液；(2)将恩诺沙星原料药加入上述壳聚糖溶液中，并保持磁力搅拌10分钟使其分散均匀，后调节pH至5.0，得到恩诺沙星壳聚糖溶液；(3)将三聚磷酸钠溶于蒸馏水中，配制成浓度为1.2-1.8mg/mL的三聚磷酸钠溶液，且将其缓慢滴入磁力搅拌状态下的上述恩诺沙星壳聚糖溶液中，滴加完成后继续磁力搅拌1小时固定，得恩诺沙星壳聚糖纳米粒混悬液；(4)将上述固定化的恩诺沙星壳聚糖纳米粒混悬液分装于冷冻瓶中，在-70℃下预冷冻2小时，然后在-50℃下抽真空冷冻干燥，最后制成固体恩诺沙星纳米粒。
2. 根据权利要求1所述的一种固体恩诺沙星纳米粒的制备方法，其特征在于所述的pH 值的调节以1. 0mol/L的NaOH溶液调节。
3. 根据权利要求1所述的一种固体恩诺沙星纳米粒的制备方法，其特征在于所述的壳聚糖、恩诺沙星与三聚磷酸钠的质量比为io : 2 : l-8 : 4 : 3。
4. 根据权利要求1所述的一种固体恩诺沙星纳米粒的制备方法，其特征在于所述的磁 力搅拌的搅拌速度为800rpm。
5. 根据权利要求1所述的一种固体恩诺沙星纳米粒的制备方法，其特征在于所述的固 体恩诺沙星纳米粒的包封率为50-70%，载药量为8-12wt%。
全文摘要
一种固体恩诺沙星纳米粒的制备方法。特征是该方法为先以蒸馏水配制成浓度为1％的冰醋酸水溶液，在磁力搅拌的条件下，再加入壳聚糖，使其溶解，得壳聚糖浓度为1.5-2.5mg/mL的壳聚糖溶液；接着将恩诺沙星原料药加入上述壳聚糖溶液中，并保持磁力搅拌10分钟使其分散均匀，后调节pH至5.0，得到恩诺沙星壳聚糖溶液；再接着将三聚磷酸钠溶于蒸馏水中，配制成浓度为1.2-1.8mg/mL的三聚磷酸钠溶液，且将其缓慢滴入磁力搅拌状态下的上述恩诺沙星壳聚糖溶液中，滴加完成后继续磁力搅拌1小时固定，得恩诺沙星壳聚糖纳米粒混悬液；最后将上述固定化的恩诺沙星壳聚糖纳米粒混悬液分装于冷冻瓶中，在-70℃下预冷冻2小时，然后在-50℃下抽真空冷冻干燥，制成固体恩诺沙星纳米粒。
文档编号A61P31/04GK101744771SQ200810204719
公开日2010年6月23日 申请日期2008年12月17日 优先权日2008年12月17日
发明者杨先乐, 胡鲲, 黄宣运, 龚露旸 申请人:上海海洋大学