专利名称：艾塞那肽缓释微球制剂及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及艾塞那肽药物制剂，尤其涉及一种艾塞那肽缓释微球制剂及其制备方法和应用。
背景技术：
毒蜥外泌肽(exendin-4)是从分布在北美洲西南部的钝尾毒蜥(Gila monster, Heloderma suspectum)唾液腺中分离出来的天然胰高血糖素样肽-l (glucagon-like p印tide-1 ， GLP-1) 的类似物。艾塞那肽(exenatide)是人工合成的毒蜥外泌肽(exendin-4)，由39个氨基酸 残基构成，其氨基酸序列如下
H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gin-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Va 1-Arg-Leu-Phe-11e-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro_Ser-Ser_Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Se r-NH2 (Eng等，J. Biol. Chem. ， 267: 7402-05， 1992)。
艾塞那肽与哺乳动物的GLP-1具有53%的同源性，与人的胰高血糖素(glucagon)有48% 的同源性，对GLP-l受体(GLP-1R)有高度亲和性，其与GLP-1R结合的能力是GLP-1的2.4 倍(Goke等，J Biol Chem， 268: 19650-55， 1993)。
艾塞那肽己知的药理作用包括(1)增加葡萄糖依赖性促胰岛素分泌，在血糖水平正常
或低血糖时并不剌激胰岛素的分泌，仅在血糖水平较高时刺激胰岛素分泌；(2)抑制II型
糖尿病患者胰高血糖素的分泌，并在高血糖时降低血清中胰高血糖素浓度，但不减弱正常胰
高血糖素对低血糖的反应；(3)抑制餐后臂肠动力及分泌功能，延迟胃排空，从而有利于餐 后血糖的控制；(4)降低食欲，减少食物的摄入；(5)刺激0细胞凋亡，从而增加0细 胞的数量；(6)恢复II型糖尿病患者丧失的胰岛素第一时相反应，显著增加第一时相及第 二时相胰岛素的分泌，改善n型糖尿病患者的空腹及餐后血糖水平。
艾塞那肽注射剂己于2005年4月获美国食品和药品管理局批准上市，商品名为Byetta。 该制剂已被证实在改善血糖控制及减轻体重方面具有良好效果。但由于艾塞那肽的半衰期仅 为2.4小时(Byetta说明书)，为平稳控制血糖，需每闩皮下注射给药两次，频繁的注射使 患者顺应性较差，特别是还需注射胰岛素的患者更难以接受。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种能有效延长艾塞那肽在体内作用时间的艾塞那肽缓 释微球制剂，降低了艾塞那肽的给药频率。此外，还需要提供一种艾塞那肽缓释微球制剂的制备方法，以及艾塞那肽缓释微球制剂 在制备治疗II型糖尿病的药物中的应用和艾塞那肽缓释微球制剂在制备减轻体重的药物中 的应用。
为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现
在本发明的一个方面，提供了一种艾塞那肽缓释微球制剂，主要包含艾塞那肽、聚乳酸-羟基乙酸共聚物，其质量百分比为艾塞那肽O. 5% 10%，聚乳酸-羟基乙酸共聚物85% 99%。 优选的，所述艾塞那肽缓释微球制剂还包含质量百分比为0. 5°/。 5%的保护剂，该保护剂选自 碳酸锌、人血清白蛋白、明胶、海藻糖、蔗糖或甘露醇中的一种或其混合物。保护剂可以保 护蛋白多肽类物质在制备微球的过程中不降解。
聚乳酸-羟基乙酸[poly(lactide-co-glycolide) ， PLGA]是由乳酸(LA)和羟基乙酸(GA) 以不同比例嵌段共聚而成的一种高分子材料，具有良好的生物相容性和可降解性，其最终降 解产物是二氧化碳和水。优选的，本发明所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物是聚乳酸羟基乙酸为 25:75 75:25的共聚物，其分子量为5000 20000道尔顿。
在本发明的另一方面，提供了一种艾塞那肽缓释微球制剂的制备方法，包括以下歩骤
将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂，制成所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物浓度为100 400 mg/ml的油相；
将艾塞那肽溶于水，形成所述艾塞那肽浓度为200 600rag/ml的内水相，该内水相与油
相体积比为1: 50 1: 100;
将内水相与所述油相混合形成初乳，并将该初乳加入到含有表面活性剂的外水相水溶液
中形成复乳，该外水相水溶液与初乳的体积比为10: 1 20: 1;
待有机溶剂挥发后，得到包封有艾塞那肽的微球。
该方法采用Wl/0/W2 (水包油包水)法制成艾塞那肽缓释微球。
所述表面活性剂选自聚乙烯醇(polyvinyl alcohol, PVA)、油酸钠、硬脂酸钠、十二烷 基磺酸钠、羧甲基纤维素、卵磷脂、明胶、透明质酸、吐温、或司盘中的一种或其混合物， 优选的，所述表面活性剂为聚乙烯醇(PVA)。更优选的，将所述初乳加入到含有质量体积比 为1% 3%的聚乙烯醇的外水相水溶液中混匀形成复乳。
上述制备方法还进一歩包括将复乳用质量体积比为0. 5% 1%的聚乙烯醇水溶液进行稀 释，然后通过搅拌或其他方式，促使有机溶剂挥发。
在本发明的另一方面，还提供了一种艾塞那肽缓释微球制剂的制备方法，包括以下歩骤
将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂，制成所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物浓度为50 200 mg/ml的油相；将艾塞那肽溶于水，形成所述艾塞那肽浓度为50 100mg/ml的内水相，该内水相与油相
体积比为1: 10 1: 50;
将内水相与所述油相混合形成初乳，并将非溶剂有机物质加入到该初乳中，所述非溶剂
有机物质与油相有机溶剂的质量比为1: 1 2: 1;
待有机溶剂挥发后，得到包封有艾塞那肽的微球。 该方法采用W/01/02 (油包油包水)法制成艾塞那肽缓释微球。 所述非溶剂有机物质选自二甲基硅油、液体石蜡或石油醚中的一种或其混合物。 该方法还包括歩骤将微球进一歩转移到温度为3 5。C的庚烷/乙醇混合溶剂中，以固
化微球，该混合溶剂总体积与油相有机溶剂的体积比为10: 1 20: 1。
在本发明的另一方面，还提供了一种艾塞那肽缓释微球制剂的制备方法，包括以下歩骤 将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂，制成所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物浓度为50~
400 mg/ml的油相；
将艾塞那肽和聚乙二醇溶于水，冷冻干燥后除去聚乙二醇，得到艾塞那肽微粉； 将艾塞那肽微粉分散在所述油相中，经匀化制成混悬液； 用喷雾干燥器将所述混悬液以雾化状态喷入表面覆盖液氮的有机溶剂中； 待有机溶剂挥发或萃取后，得到包封有艾塞那肽的微球。 该方法是通过喷雾冻凝的方式制成油包固型的艾塞那肽缓释微球。 优选的，所述艾塞那肽和聚乙二醇的摩尔比为1: 8。
在本发明上述三种制备方法中，优选的，所述艾塞那肽溶于水时，还在该水溶液中加入 保护剂，以保护艾塞那肽在制备微球的过程中不降解；所述溶解聚乳酸-羟基乙酸共聚物的有 机溶剂为不能溶解被包封药物的有机溶剂，选自二氯甲垸、三氯甲垸、乙腈、乙酸乙酯或丙 酮中的一种或其混合物，待有机溶剂挥发后，共聚物析出，得到包封有艾塞那肽的微球。
在本发明的另一方面，还提供了一种上述艾塞那肽缓释微球制剂在制备治疗II型糖尿病 的药物中的应用。
在本发明的另一方面，还提供了一种上述艾塞那肽缓释微球制剂在制备减轻体重的药物 中的应用。
在本发明中，术语"缓释微球"是用聚合物包封活性物质后形成的微粒。通常，微球不 一定是严格的球形，微球的形态可能很不规则，根据工艺不同，其表面有孔或无孔。微球的 粒径为0. 5 1000um，优选4 200nm，更优选10 150um，因为微球通常用于注射给药， 粒径太大将导致必须用更大号的注射针头，患者的疼痛感更强，而粒径太小将导致共聚物无 法很好的包裹药物，达不到良好的缓释效果。本发明艾塞那肽缓释微球制剂，不仅能延长艾塞那肽在体内的作用时间，降低给药频率， 而且可以维持艾塞那肽有效的血药浓度，提高治疗效果。体外释放实验结果表明，本发明艾 塞那肽缓释微球制剂缓释效果明显，7天累积释放达到80%以上，即缓释周期为7天，释放符 合近似零级模式，适于治疗II型糖尿病和控制体重。
下面结合附图和具体实施方式
对本发明作进一歩详细的说明。
图1是本发明实施例1所制备的艾塞那肽缓释微球制剂的体外累积释放曲线；
图2是本发明实施例4所制备的艾塞那肽缓释微球制剂的体外累积释放曲线；
图3是本发明实施例7所制备的艾塞那肽缓释微球制剂的体外累积释放曲线；
图4是本发明实施例1所制备的艾塞那肽缓释微球制剂给药后第1天血糖浓度-时间曲线
图5是本发明实施例1所制备的艾塞那肽缓释微球制剂给药后第3天血糖浓度-时间曲线
图6是本发明实施例1所制备的艾塞那肽缓释微球制剂给药后第5天血糖浓度-时间曲线 图； '
图7是本发明实施例1所制备的艾塞那肽缓释微球制剂给药后第7天血糖浓度-时间曲线图。
具体实施例方式
为克服艾塞那肽半衰期短、用药次数频繁的缺点，经历多次反复实验后，终于研制出本
发明艾塞那肽缓释微球制剂，主要包含艾塞那肽、聚乳酸-羟基乙酸共聚物，其质量百分比为
艾塞那肽0. 5% 10%，聚乳酸-羟基乙酸共聚物85% 99%。
优选的，艾塞那肽缓释微球制剂还包含质量百分比为0.5% 5%的保护剂，该保护剂选自 碳酸锌、人血清白蛋白、明胶、海藻糖、蔗糖或甘露醇中的一种或其混合物。保护剂可以保 护蛋白多肽类物质在制备微球的过程中不降解。
优选的，聚乳酸-羟基乙酸共聚物是聚乳酸羟基乙酸为25:75 75:25的共聚物，其分 子量为5000 20000道尔顿。
本发明艾塞那肽缓释微球制剂可以通过下述三种方法制备。
1. Wl/0/W2 (水包油包水)溶剂挥发法
(1)制备油相
将基质材料PLGA溶于有机溶剂二氯甲垸制成油相，浓度为100 400 mg/ml，该有机溶 剂也可选用三氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯或丙酮等其他不能溶解被包封药物的有机溶剂。(2) 制备内水相
取适量艾塞那肽和保护剂溶于水形成内水相，艾塞那肽浓度为200 600mg/ml，保护剂 选自明胶、海藻糖、蔗糖和甘露醇等，其浓度为200 300mg/ml ;内水相与油相体积比为1: 50 1: 100，优选范围l: 60 1: 80。
(3) 制备微球
将内水相加入上述油相混合形成初乳，混合时通常采用超声波、机械、磁力震荡或其他
方式强化该混合过程。然后，将初乳迅速滴加在质量体积比为1% 3%的聚乙烯醇水溶液中形
成复乳，该聚乙烯醇水溶液与初乳的体积比为10: 1 20: 1，该聚乙烯醇也可用油酸钠、硬
脂酸钠、十二垸基磺酸钠、羧甲基纤维素、卵磷脂、明胶或透明质酸等表面活性剂替代。经
机械搅拌充分匀化(搅拌速度为1000 1800 rpm)，再用0. 5% 1%的聚乙烯醇水溶液进行稀 释，室温下继续低速搅拌4小时(搅拌速度为300 600 rpm)，洗涤，收集，冷冻干燥即可。
2. W/01/02 (油包油包水)溶剂-非溶剂法
(1) 制备油相
将基质材料PLGA溶于二氯甲烷制成油相，浓度为50 200 rag/ml，该有机溶剂也可选用 三氯甲垸、乙腈、乙酸乙酯或丙酮等其他不能溶解被包封药物的有机溶剂。
(2) 制备内水相
取适量艾塞那肽和保护剂溶于水形成内水相，艾塞那肽浓度为50 100mg/ral，保护剂选 自海藻糖、蔗糖和甘露醇等，其浓度为10 25mg/ml;内水相与油相体积比为1: 10 1: 50， 优选范围1: 15 1: 25。
(3) 制备微球
将内水相加入上述油相混合形成初乳，混合时通常采用超声波、机械、磁力震荡或其他 方式强化该混合过程。然后，将二甲基硅油缓缓加入到初乳中，该二甲基硅油与二氯甲烷质
量比l: 1 2: 1，得较软的初级微球，该二甲基硅油也可选用液体石蜡或石油醚等其他非溶 剂有机物质替代。
(4) 微球固化及收集
将初级微球迅速转移到温度为3 5t的庚烷和乙醇的混合溶剂(庚烷/乙醇摩尔比4: 1)
中，混合溶剂总体积与二氯甲烷体积比10: 1 20: 1， 3'C下低速搅拌1小时(搅拌速度为
300 600 rpm)，固化微球。然后弃溶剂，加入新鲜的正庚烷漂洗滤饼，真空条件下3 5°C 干燥6小时，然后在6小时内逐渐升温至4rC，再继续干燥84小时，收集即可。
3. 喷雾冻凝法。
(1)制备艾塞那肽微粉
8将适量的聚乙二醇6000和艾塞那肽及保护剂(其摩尔比为8: 1: 2)分散于水中，冷冻
干燥后，用二氯甲烷洗涤、离心，除去聚乙二醇6000，得到艾塞那肽微粉，保护剂选自海藻
糖、蔗糖和甘露醇等。
(2)制备微球
将艾塞那肽微粉加入PLGA的二氯甲烷溶液，PLGA的浓度为50 400mg/ml，匀化制成混 悬液，二氯甲烷也可选用三氯甲垸、乙腈、乙酸乙酯或丙酮等其他不能溶解被包封药物的有 机溶剂；
经喷雾干燥器以雾化状态喷入表面覆盖液氮的低温乙醇中； 乙醇挥发将PLGA液滴中的二氯甲烷萃取； 冷冻条件下挥去液氮，冷冻干燥得到微球。 实施例1Wl/0/W2溶剂挥发法制备艾塞那肽缓释微球制剂
将PLGA (RG502H， LA:GA=50:50， Mw二lOOOO) 800mg溶于3. Oml 二氯甲烷制成油相，艾塞 那肽20呢溶于0. 05ml的重蒸馏水中(内含12. 5呢明胶)形成内水相，将其加入上述油相， 超声乳化，形成W1/0的初乳，将含2%PVA溶液50ml置于撹拌容器中，将初乳在高速搅拌 (1200rpm)下快速加入外水相中充分匀化，三分钟后，将转速下调至400rpm,加入0.75% 聚乙烯醇溶液，室温下搅拌4小时，微球硬化后离心分离并洗涤，冷冻干燥即可。艾塞那肽 微球的包封率为90%，粒径〈100um。
实施例2Wl/0/W2溶剂挥发法制备艾塞那肽缓释微球制剂
将PLGA (RG502H， LA:GA=25:75， Mw=5000) 250mg溶于2. 5ml 二氯甲烷制成油相，艾塞 那肽lOmg溶于0. 05ml的重蒸馏水中(内含lOmg明胶)形成内水相，将其加入上述油相，超 声乳化，形成W1/0的初乳，将含1°/。PVA溶液50ml置于搅拌容器中，将初乳在高速搅拌 (1200rpm)下快速加入外水相中充分匀化，三分钟后，将转速下调至400rpm，加入0. 5%聚 乙烯醇溶液，室温下搅拌4小时，微球硬化后离心分离并洗涤，冷冻干燥即可。艾塞那肽微 球的包封率为85%，粒径〈90 u m。
实施例3Wl/0/W2溶剂挥发法制备艾塞那肽缓释微球制剂
将PLGA (RG502H， LA:GA=75:25， Mw=20000) 2000mg溶于5. Oml 二氯甲烷制成油相，艾 塞那肽30rag溶于0. 05ml的重蒸馏水中(内含15呢明胶)形成内水相，将其加入上述油相， 超声乳化，形成W1/0的初乳，将含3%PVA溶液50ml置于搅拌容器中，将初乳在高速搅拌 (1200rpm)下快速加入外水相中充分匀化，三分钟后，将转速下调至400rpm，加入1%聚乙 烯醇溶液，室温下搅拌4小时，微球硬化后离心分离并洗涤，冷冻干燥即可。艾塞那肽微球 的包封率为97%，粒径〈120um。实施例4 W/01/02溶剂-非溶剂法制备艾塞那肽缓释微球制剂
将PLGA (RG502H, PLA:PGA=50:50， Mw=10000) 930mg溶于10. 8ral 二氯甲烷制成油相， 艾塞那肽50mg溶于0. 6ml的重蒸馏水中(内含10. 8mg蔗糖)形成内水相，将其加入上述油 相，超声乳化，形成W/01的初乳，将16.2ml 二甲基硅油缓缓加入到初乳中，得较软的初级 微球，然后迅速将初级微球转移到3。C的173. Oml正庚烷/乙醇混合溶剂中，3'C下400rpm搅 拌1小时后，弃去溶剂，加入新鲜正庚垸9.0ml漂洗滤饼，真空条件下3'C干燥6小时，然 后在6小时内逐渐升温至4rC，再继续干燥84小时，收集，密封分装即可。艾塞那肽微球 的包封率为92%,粒径〈120um。
实施例5W/01/02溶剂-非溶剂法制备艾塞那肽缓释微球制剂
将PLGA (RG502H， PLA:PGA=25:75， Mw=8000) 300mg溶于6ml 二氯甲烷制成油相，艾塞 那肽30mg溶于0. 6ml的重蒸馏水中(内含6mg蔗糖)形成内水相，将其加入上述油相，超声 乳化，形成W/01的初乳，将12.5ml 二甲基硅油缓缓加入到初乳中，得较软的初级微球，然 后迅速将初级微球转移到5'C的60. Oml正庚垸/乙醇混合溶剂中，5'C下400rpm搅拌1小时 后，弃去溶剂，加入新鲜正庚垸9.0ml漂洗滤饼，真空条件下5'C干燥6小时，然后在6小 时内逐渐升温至4rC，再继续干燥84小时，收集，密封分装即可。艾塞那肽微球的包封率 为90%，粒径〈120um。
实施例6W/01/02溶剂-非溶剂法制备艾塞那肽缓释微球制剂
将PLGA (RG502H， PLA:PGA二75:25， Mw=15000) 6000mg溶于30ral 二氯甲烷制成油相，艾 塞那肽60mg溶于0.6ml的重蒸馏水中(内含15mg蔗糖)形成内水相，将其加入上述油相， 超声乳化，形成W/01的初乳，将83. lml二甲基硅油缓缓加入到初乳中，得较软的初级微球， 然后迅速将初级微球转移到4'C的600ml正庚垸/乙醇混合溶剂中，4。C下400rpm搅拌1小时 后，弃去溶剂，加入新鲜正庚烷9. Oml漂洗滤饼，真空条件下4'C干燥6小时，然后在6小 时内逐渐升温至4rC，再继续干燥84小时，收集，密封分装即可。艾塞那肽微球的包封率 为95%，粒径〈140um。
实施例7 喷雾冻凝法制备艾塞那肽缓释微球制剂
将96mg聚乙二醇6000和艾塞那肽8mg及海藻糖1. 6 mg分散于lml重蒸馏水中，旋涡混 合3分钟左右，冷冻干燥后，用二氯甲烷洗涤、离心，除去聚乙二醇，得到艾塞那肽微粉。 将PLGA (RG502H， LA:GA=50:50， Mw=10000) 150. 4mg溶于二氯甲烷2ml制成油相，将微粉加 入油相中超声分散，经喷雾干燥器以雾化状态喷入表面覆盖液氮的低温乙醇中；乙醇挥发萃 取出PLGA液滴中的二氯甲垸；冷冻条件下挥去液氮，冷冻干燥得到微球；艾塞那肽微球的包 封率为91%，粒径〈80um。实施例8 喷雾冻凝法制备艾塞那肽缓释微球制剂
将96mg聚乙二醇6000和艾塞那肽8mg及海藻糖1. 6 mg分散于lml重蒸馏水中，旋涡混 合3分钟左右，冷冻干燥后，用二氯甲烷洗涤、离心，除去聚乙二醇，得到艾塞那肽微粉。 将PLGA (RG502H， LA:GA=25:75， Mw=5000) lOOmg溶于二氯甲烷2ml制成油相，将微粉加入 油相中超声分散，经喷雾干燥器以雾化状态喷入表面覆盖液氮的低温乙醇中；乙醇挥发萃取 出PLGA液滴中的二氯甲烷；冷冻条件下挥去液氮，冷冻干燥得到微球；艾塞那肽微球的包封 率为82%，粒径〈80um。
实施例9 喷雾冻凝法制备艾塞那肽缓释微球制剂
将96mg聚乙二醇6000和艾塞那肽8mg及海藻糖1. 6呢分散于lml重蒸馏水中，旋涡混 合3分钟左右，冷冻干燥后，用二氯甲垸洗涤、离心，除去聚乙二醇，得到艾塞那肽微粉。 将PLGA (RG502H， LA:GA=75:25， Mw=20000) 800mg溶于二氯甲烷2ml制成油相，将微粉加入 油相中超声分散，经喷雾干燥器以雾化状态喷入表面覆盖液氮的低温乙醇中；乙醇挥发萃取
出PLGA液滴中的二氯甲烷；冷冻条件下挥去液氮，冷冻干燥得到微球；艾塞那肽微球的包封
率为95%，粒径〈80wm。
实施例10 微球突释和释放曲线的测定
将上述实施例制备的艾塞那肽缓释微球制剂进行微球突释和释放曲线的测定，测定方法
是精密称取含药微球50mg置10ml离心管中，以pH为7. 4的磷酸缓冲液(含0. 02%叠氮化
钠作为抑菌剂，0.02%F-68作为润湿剂)为释放介质，置于恒温水浴摇床中，在振荡速度
100rpm、温度37。C土0.5。C条件下进行微球的体外释放度测定。分别在ld、 2d、 4d和7d取
出全部释放介质并更换新的释放介质，高效液相色谱法测定艾塞那肽含量。图l、 2、 3分别
为实施例1 、 4、 7所制备的艾塞那肽缓释微球制剂的体外累积释放曲线。由图1 3可以得出，
本发明三种制备方法制得的艾塞那肽缓释微球制剂都具有良好的缓释效果，1天内的突释约
为23%， 7天累积释放达到85%以上。 实施例U 动物试验
选取成年Wistar大鼠16只，体重200g左右，雌雄各半，随机分成给药组和空白组，给
药组皮下注射适量微球(依实施例1制得2.0mg微球，含艾塞那肽约4.5lig)，空白组皮下
注射同体积的生理盐水。分别于给药后的第l、 3、 5、 7天的同一时间，给每只大鼠腹腔注射
18 mraol/kg葡萄糖，注射前每鼠先采空白血样，然后在5、 10、 15、 20、 30和50分钟眼眶
取血，测定注射前后的血糖。血糖测定参照葡萄糖测定试剂盒(葡萄糖氧化酶法，北京化工
厂)的说明书进行。制作血糖浓度和时间的曲线图，图4、 5、 6、 7分别为实施例1所制备的
艾塞那肽缓释微球制剂给药后第l、 3、 5、 7天的血糖浓度-时间曲线图，由图4 7可见，空
11白对照组腹腔注射葡萄糖，5分钟后血糖明显升高，回落缓慢，240分钟才逐渐达到基态血糖 浓度。给药组在第1、 3、 5、 7天都可以观察到明显的降血糖作用，30分钟内即回落到基态 浓度，说明本发明艾塞那肽微球在体内有明显的缓释和降血糖作用，可作为艾塞那肽的缓释 剂型用于治疗II型糖尿病或控制体重。
以上所述实施例仅表达了本发明的实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而 理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱 离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此， 本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
1权利要求
1.一种艾塞那肽缓释微球制剂，其特征在于，主要包含艾塞那肽、聚乳酸-羟基乙酸共聚物，其质量百分比为艾塞那肽0.5％～10％，聚乳酸-羟基乙酸共聚物85％～99％。
2. 根据权利要求1所述的艾塞那肽缓释微球制剂，其特征在于，还包含质量百分比为 0.5% 5%的保护剂，该保护剂选自碳酸锌、人血清白蛋白、明胶、海藻糖、蔗糖或甘露醇中 的一种或其混合物。
3. 根据权利要求1所述的艾塞那肽缓释微球制剂，其特征在于，所述聚乳酸-羟基乙酸共 聚物是聚乳酸羟基乙酸为25:75 75:25的共聚物，其分子量为5000 20000道尔顿。
4. 一种艾塞那肽缓释微球制剂的制备方法，其特征在于，包括以下歩骤 将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂，制成所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物浓度为100 400 mg/ml的油相；将艾塞那肽溶于水，形成所述艾塞那肽浓度为200 600mg/ml的内水相，该内水相与油相体积比为1: 50 1: 100;将内水相与所述油相混合形成初乳，并将该初乳加入到含有表面活性剂的外水相水溶液中形成复乳，该外水相水溶液与初乳的体积比为10: 1 20: 1; 待有机溶剂挥发后，得到包封有艾塞那肽的微球。
5. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述表面活性剂选自聚乙烯醇、油酸钠、硬脂酸钠、十二烷基磺酸钠、羧甲基纤维素、卵磷脂、明胶、透明质酸、吐温、或司盘 中的一种或其混合物。
6. 根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，所述表面活性剂为聚乙烯醇。
7. 根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，将所述初乳加入到含有质量体积比为 1% 3%的聚乙烯醇的外水相水溶液中混匀形成复乳。
8. 根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，还进一歩包括将复乳用质量体积比 为0. 5% 1%的聚乙烯醇水溶液进行稀释。
9. 一种艾塞那肽缓释微球制剂的制备方法，其特征在于，包括以下歩骤 将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂，制成所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物浓度为50 200 mg/ml的油相；将艾塞那肽溶于水，形成所述艾塞那肽浓度为50 100mg/ml的内水相，该内水相与油相体积比为1: 10 1: 50;将内水相与所述油相混合形成初乳，并将非溶剂有机物质加入到该初乳中，所述非溶剂有机物质与油相有机溶剂的质量比为1: 1 2: 1;待有机溶剂挥发后，得到包封有艾塞那肽的微球。
10. 根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述非溶剂有机物质选自二甲基硅油、 液体石蜡或石油醚中的一种或其混合物。
11. 根据权利要求9或10所述的制备方法，其特征在于，还包括歩骤将微球进一歩转 移到温度为3 5。C的庚烷/乙醇混合溶剂中，以固化微球，该混合溶剂总体积与油相有机溶剂的体积比为10: 1 20: 1。
12. —种艾塞那肽缓释微球制剂的制备方法，其特征在于，包括以下歩骤 将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂，制成所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物浓度为50 400 mg/ml的油相；将艾塞那肽和聚乙二醇溶于水，冷冻干燥后除去聚乙二醇，得到艾塞那肽微粉； 将艾塞那肽微粉分散在所述油相中，经匀化制成混悬液； 用喷雾干燥器将所述混悬液以雾化状态喷入表面覆盖液氮的有机溶剂中； 待有机溶剂挥发或萃取后，得到包封有艾塞那肽的微球。
13. 根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，所述艾塞那肽和聚乙二醇的摩尔比 为1: 8。
14. 根据权利要求4、 9或12所述的制备方法，其特征在于，所述艾塞那肽溶于水时，还 在该水溶液中加入保护剂，该保护剂选自碳酸锌、人血清白蛋白、明胶、海藻糖、蔗糖或甘 露醇中的一种或其混合物。
15. 根据权利要求4、 9或12所述的制备方法，其特征在于，所述溶解聚乳酸-羟基乙酸 共聚物的有机溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯或丙酮中的一种或其混合物。
16. 权利要求1所述的艾塞那肽缓释微球制剂在制备治疗II型糖尿病的药物中的应用。
17. 权利要求1所述的艾塞那肽缓释微球制剂在制备减轻体重的药物中的应用。
全文摘要
本发明公开一种艾塞那肽缓释微球制剂，主要包含艾塞那肽、聚乳酸-羟基乙酸共聚物，其质量百分比为艾塞那肽0.5％～10％，聚乳酸-羟基乙酸共聚物85％～99％。本发明还公开了艾塞那肽缓释微球制剂的制备方法和应用。本发明的艾塞那肽缓释微球制剂，不仅能延长艾塞那肽在体内的作用时间，降低给药频率，而且可以维持艾塞那肽有效的血药浓度，提高治疗效果。
文档编号A61K9/16GK101658496SQ20091005789
公开日2010年3月3日 申请日期2009年9月11日 优先权日2009年9月11日
发明者媛 俞, 孙治国, 宣吉明, 翮 张, 豪 邹, 钟延强, 琰 陈, 静 高, 莹 鲁 申请人:中国人民解放军第二军医大学