专利名称：复方氨基酸注射液及其制备方法、检测方法
技术领域：
本发明涉及一种注射液及其制备方法、检测方法，特别涉及一种复方氨基酸注射液及其制备方法、检测方法。
背景技术：
复方氨基酸注射液(18AA)为氨基酸输液，在能量供给充足的情况下，参与蛋白质的合成代谢，获得正氮平衡，并生成酶类、激素、抗体和结构蛋白，促进组织愈合，恢复正常生理功能，主要适用于完全肠外营养的蛋白质缺乏症以及手术、烧伤等各种原因引起的严重蛋白质丢失的患者。目前复方氨基酸注射液(18AA)的生产工艺大多为根据溶解性，先投难容氨基酸， 待其溶解后再投易溶氨基酸；先投稳定性好的氨基酸，再投不稳定氨基酸，这不仅增加了配液时间，而且增加了注射液的安全性风险，同时增加了能耗成本；由于氨基酸注射液组方复杂，稳定性不佳，因此生产工艺大多采用全程充氮保护，包括投料前注射用水的脱氧、原辅料的脱氧、所有配制、灌装罐和管道充氮保护，同时灭菌FO < 12，以确保氨基酸注射液质量质检指标合格。复方氨基酸注射液工艺清洗验证测定方法根据GMP要求，所有生产系统均需进行清洗验证，使残留药物< 10_4，但复方氨基酸注射液残留药物的检测十分刺手，一般采用 HPLC和衍生测定各种氨基酸残留量，不仅操作复杂，而且由于浓度差异大，部分药物灵敏度达不到要求，故而测定结果不可靠，不能真实反映清洗效果。抗氧剂含量测定方法抗氧剂是一类能够有效阻止或延缓自动氧化的物质，是药物辅料的一个重要组成部分，主要用于防止药物及其制剂的氧化变质，以及由氧化所导致的变色、产生沉淀及其他方面的不稳定性。药物的氧化反应是引起药物不稳定的主要因素之一。大多数药物的氧化降解是含有自由基的自氧化过程，在这一过程中仅有很少的氧就能引起反应。而空气中的氧气占21% (ν/ν)，在如此多氧的存在下，药物不需要其他氧化剂的参与，室温就能自发引起“自氧化反应”。这种反应的过程很复杂，属于游离基诱发的“链反应”，光和热能加速这种反应的进行，微量的金属离子或过氧化物也会催化这种反应。分子结构中具有酚羟基或潜在酚羟基等有效成分的制剂中，只要有少量的氧存在，就可能引起药物自氧化反应。药物氧化的结果，不仅使有效物含量降低，而且有可能改变药物的颜色或出现沉淀，甚至产生有毒物质影响制剂的质量。因此，为了抑制O2对氧化反应的作用，就有必要加入抗氧剂。抗氧剂本身是一种还原剂，与药物同时存在时，抗氧剂遇氧后首先被氧化，对易氧化的药物成分起到保护作用，从而保证药物制剂的稳定性。在自氧化过程中，抗氧剂的作用是提供电子或有效氢离子，供给自由基接受，使自氧化链反应中断。复方氨基酸注射液等不稳定品种，在制备过程中一般都要加入一定的抗氧剂亚硫酸钠、焦亚硫酸钠等， 但必须对抗氧剂限量进行控制，以控制不良反应，同时必须保证抗氧剂能够发挥作用。目前文献一般根据氧化还原反应原理，采用显色法测定，但方法的专属性、准确性都较差。未见用离子色谱法专属、准确测定抗氧剂的含量方法。
复方氨基酸注射液中由于氨基酸种类多，没有吸收，极性强，因此要同时保证所有氨基酸分离检出，并且满足方法的精密、专属、准确一直是分析难题，目前氨基酸分析方法主要有四种柱前衍生法，分别为异硫氰酸苯酯(PITC)法、6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)法、邻苯二醛(OPA)和9-芴甲基氯甲酸甲酯(FMOC)法、2，4_ 二硝基氟苯 (DNFB)法，以及一种茚三酮柱后衍生法。PITC法和AQC法需要手动衍生，操作复杂，色谱条件的耐用性很差，几乎每次都要调整流动相，部分氨基酸分离不佳；0PA/FM0C法可以自动衍生，但流动相配制复杂，部分氨基酸分离不佳，特别是组氨酸和甘氨酸，色谱柱做几次样后，分离度就小于1.0，色谱柱寿命很短，连续使用不到一个月就损毁；DNFB法所用的2， 4-二硝基氟苯属易爆、剧毒物质，有强致癌性，且该法对色谱柱要求较高，易损坏色谱柱，衍生试剂水解生成的2，4_ 二硝基苯易干扰丝氨酸的测定；茚三酮法则由于仪器结构复杂、价格贵、灵敏度差、分析时间长、脯氨酸不能检测等诸多不足，日渐少用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种复方氨基酸注射液及其制备方法，本发明的另一个目的在于提供一种复方氨基酸注射液工艺清洗验证检测方法，第三个目的在于提供一种复方氨基酸注射液中抗氧剂的检测方法，第四个目的在于提供一种复方氨基酸注射液的检测方
法。
本发明的目的是通过如下技术方案实现的
本发明复方氨基麵■注射液的原料组成为
盐酸精氨酸2. 5-3. 5重量份
盐酸组氨酸1. 4-3. 5重量份
亮氨酸3. 5-4. 5重量份
异亮氨酸0. 7-2. 7重量份
盐酸赖氨酸2.3-4. 3重量份
苯丙氨酸1.8-3. 9重量份
苏氨酸Ι--3重量份
缬氨酸Ο.5-2重量份
甲硫氨酸0.5-1.5重量份
色氨酸0.2-0. 6重量份
甘氨酸2.3-4. 2重量份
丙氨酸0.8-2. 9重量份
脯氨酸0.5-1.5重量份
酪氨酸0.05-0. 15重量份
丝氨酸0.3-0. 9重量份
盐酸半胱氨酸0.2-0. 6重量份
门冬氨酸0.6-1.6重量份
谷氨酸0.9-2. 8重量份
亚硫酸氢钠0.3-0. 8重量份
木糖醇40-60重量份
8
注射用水适量全量1000体积份本发明复方氨基酸注射液的原料组成优选为盐酸精氨酸2.89重量份
盐酸组氨酸2.46重量份
亮氨酸3.79重量份
异亮氨酸1.70重量份
盐酸赖氨酸3.33重量份
苯丙氨酸2.83重量份
苏氨酸1.97重量份
缬氨酸1.36重量份
甲硫氨酸1.06重量份
色氨酸0.39重量份
甘氨酸3.24重量份
丙氨酸1.88重量份
脯氨酸1.00重量份
酪氨酸0.11重量份
丝氨酸0.67重量份
盐酸半胱氨酸0.44重量份
门冬氨酸1.15重量份
谷氨酸1.97重量份
亚硫酸氢钠0.50重量份
木糖醇50. 0重量份
注射用水适量
全量1000体积份-取上述原料，按照常规工艺，制成复方氨基酸注射液。本发明复方氨基酸注射液的制备方法为按配方量称取各原辅料，其中色氨酸以105 115%标示量投料，其余按100%标示量投料；在配液罐中加注射用水至配制总量的70 85%，控制温度为60 90°C，将称好的各种原辅料投入配液罐中，充分搅拌溶解，充氮，再加0. 02 0. 1 %活性炭搅拌吸附 15 30分钟，温度控制在60 90°C ；在配液罐中加注射用水稀释至全量，搅拌均勻，用 10 30%氢氧化钠溶液调节pH至5. 8 6. 8，取溶液测定色氨酸含量，色氨酸标示含量应为90% 110%，取溶液适量，加水稀释1000倍，在波长210nm处测定吸收值应为0. 25 0. 30 ；经钛棒脱碳、0. 22 μ m微孔滤膜过滤后，灌装、充氮，灌装后输液瓶内残氧量< 5%，于 115 130°C灭菌8 20分钟，灯检，包装，即得。本发明复方氨基酸注射液的制备方法优选为按配方量称取各原辅料，其中色氨酸以110%标示量投料，其余按100%标示量投料；在配液罐中加注射用水至配制总量的80%，控制温度为80°C，将称好的各种原辅料投入配液罐中，充分搅拌溶解，充氮，再加0. 05%活性炭搅拌吸附20分钟，温度控制在80°C ；在配液罐中加注射用水稀释至全量，搅拌均勻，用20%氢氧化钠溶液调节pH至6. 2 6. 4， 取溶液测定色氨酸含量，色氨酸标示含量应为95% 105%，取溶液适量，加水稀释1000 倍，在波长210nm处测定吸收值应为0. 26 0. 28 ；经钛棒脱碳、0. 22 μ m微孔滤膜过滤后， 灌装、充氮，灌装后输液瓶内残氧量< 2%，于121°C灭菌12分钟，灯检，包装，即得。其中所述的色氨酸的含量测定方法为照分光光度法(中国药典2005年版二部附录IV A)测定；供试品溶液的制备精密量取本发明复方氨基酸注射液2 6ml (优选精密量取本发明复方氨基酸注射液4ml)，置IOOml量瓶中，加0. 05 0. 15mol/L氢氧化钠溶液(优选 0. lmol/L氢氧化钠溶液)稀释到刻度，摇勻，作为供试品溶液；对照品溶液的制备精密称取色氨酸和酪氨酸对照品适量，于100 110°C干燥 2 4小时(优选于105°C干燥3小时)，分别加0. 05 0. 15mol/L氢氧化钠溶液(优选 0. lmol/L氢氧化钠溶液)溶解并稀释成每Iml溶液中含色氨酸10 30 μ g和酪氨酸3 8yg的溶液，摇勻，分别作为对照品溶液(1)与对照品溶液O)；测定法取对照品溶液⑵，以观0匪为测定波长λ 2，在303nm波长附近每隔 0. 2nm选择等吸收点及参比波长X1，要求AA = AX2-AX1 = 0，再在人工与λ 2处分别测定对照品溶液(1)与供试品溶液的吸收度，求出各自的吸收度差值ΔΑ，计算。本发明氨基酸注射液中色氨酸含量为90% 110%标示量，优选为95 105%标不量。本发明复方氨基酸注射液工艺清洗验证检测方法为取清洗液在波长210nm处直接测定吸收度，若吸收度A21tlnm < 0. 03，则残留量 < 10_4，若吸收度 A210nm < 0. 005，则残留量< 10_5。本发明复方氨基酸注射液中抗氧剂的检测方法为色谱条件与系统适应性试验以DIONEX 9HC为色谱柱，流动相为0. 01 0. 04mol/L氢氧化钾溶液(优选为0. 02mol/L氢氧化钾溶液)，柱温为20 40°C (优选为 300C )，电化学检测器，流速为0. 5 1. 0ml/min(优选为0. 7ml/min)。对照品溶液的制备分别称取亚硫酸氢钠和硫酸钠各25mg，加水溶解并稀释至 50ml，分别量取0. 5 2ml置10 25ml量瓶中(优选精密量取Iml置IOml量瓶中)，加水稀释至刻度，即得；供试品溶液的制备精密量取本发明复方氨基酸注射液0. 5 aiil(优选精密量取本发明复方氨基酸注射液Iml)，置10 25ml量瓶(优选IOml量瓶)中，加水稀释至刻度， 摇勻，即得；测定法分别取供试品溶液和对照溶液各5 20 μ 1 (优选分别取供试品溶液和对照溶液各10μ 1)，注入离子色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明复方氨基酸注射液中抗氧剂的标示含量应为30% 110% (优选80% 100% )。本发明复方氨基酸注射液的检测方法为色谱条件与系统适应性试验仪器Agilent 1200 HPLC，色谱柱=Capcell pak C18, MGI1,150X4. 6mm，流动相 A :0. 02 0. 06mol/L K2HPO4, pH 为 6. 8 7. 8，流动相 B 60 40 40 60的乙腈-甲醇，检测波长338ηπιΛ62ηπι，柱温30 50°C，梯度程序为v0 = 0. 5-1. 5ml/min,时间0 15-40 20-45 25. 5-45. 5 27. 5-48. 5 29. 5-49. 5 30-50分钟，(优选时间0 15 20 25. 5 27. 5 29. 5 30分钟，时间0 40 45 45. 5 48. 5 49. 5 50分钟，时间0 30 35 35. 5 38. 5 39. 5 40 分钟，时间0 18 22 26. 5 沘 四.5 30分钟)；流动相B :0 40% -70% 80% -100% 80% -100% 80% -100% 0 0，(优选流动相 B :0 40% 80% 80% 80% 0 0，流动相B :0 70% 100% 100% 100% 0 0，流动相B 0 50-60% 100% 100% 100% 0 0)；流速0. 5-1. 5 0. 5-1. 5 0. 5-1. 5 1. 0-2. 5 1. 0-2. 5 1. 0-2. 5 0. 5-1. 5ml/min,(优选流速0· 5 0. 5 0. 5 1. 0 1. 0 1. 0 0. 5ml/min,流速1· 5 1. 5 1. 5 2. 5 2. 5 2. 5 1. 5ml/min,流速1· 2 1. 2 1. 2 2. 0 2. 0 2. 0 1. 2ml/min，流速0· 9 0. 9 0. 9 1. 8 1. 8 1. 8 0. 9ml/min)梯度程序:v0 = 0. 5 1. 5ml/min
权利要求
1. 一种复方氨基酸注射液，其特征在于该注射液的原料组成为盐酸精氨酸2. 5-3.5重量份盐酸组氨酸1. 4-3. 5重量份亮氨酸3. 5-4.5重量份异亮氨酸0. 7-2. 7重量份盐酸赖氨酸2. 3-4.3重量份苯丙氨酸1. 8-3. 9重量份苏氨酸1-3重量份缬氨酸0. 5-2重量份甲硫氨酸0. 5-1.5重量份色氨酸0. 2-0. 6重量份甘氨酸2. 3-4.2重量份丙氨酸0. 8-2. 9重量份脯氨酸0. 5-1.5重量份酪氨酸0. 05-0. 15重量份丝氨酸0. 3-0.9重量份盐酸半胱氨酸0. 2-0. 6重量份门冬氨酸0. 6-1.6重量份谷氨酸0. 9-2. 8重量份亚硫酸氢钠0. 3-0.8重量份木糖醇40-60重量份注射用水适量全量1000体积份。
2.如权利要求1所述的复方氨基酸注射液，其特征在于该注射液的原料组成为盐酸精氨酸2.89重量份盐酸组氨酸2.46重量份亮氨酸3.79重量份异亮氨酸1.70重量份盐酸赖氨酸3.33重量份苯丙氨酸2.83重量份苏氨酸1.97重量份缬氨酸1.36重量份甲硫氨酸1.06重量份色氨酸0.39重量份甘氨酸3.24重量份丙氨酸1.88重量份脯氨酸1.00重量份酪氨酸0.11重量份丝氨酸0.67重量份盐酸半胱氨酸0.44重量份门冬氨酸1. 15重量份谷氨酸1. 97重量份亚硫酸氢钠0. 50重量份木糖醇50. 0重量份注射用水适量全量1000体积份。
3.如权利要求1或2所述的复方氨基酸注射液的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤按配方量称取各原辅料，其中色氨酸以105 115%标示量投料，其余按100%标示量投料；在配液罐中加注射用水至配制总量的70 85%，控制温度为60 90°C，将称好的各种原辅料投入配液罐中，充分搅拌溶解，充氮，再加0. 02 0. 活性炭搅拌吸附15 30 分钟，温度控制在60 90°C ；在配液罐中加注射用水稀释至全量，搅拌均勻，用10 30% 氢氧化钠溶液调节pH至5. 8 6. 8，取溶液测定色氨酸含量，色氨酸标示含量应为90% 110%，取溶液适量，加水稀释1000倍，在波长210nm处测定吸收值应为0. 25 0. 30 ；经钛棒脱碳、0. 22 μ m微孔滤膜过滤后，灌装、充氮，灌装后输液瓶内残氧量< 5%，于115 130°C灭菌8 20分钟，灯检，包装，即得。
4.如权利要求3所述的复方氨基酸注射液的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤按配方量称取各原辅料，其中色氨酸以110%标示量投料，其余按100%标示量投料； 在配液罐中加注射用水至配制总量的80%，控制温度为80°C，将称好的各种原辅料投入配液罐中，充分搅拌溶解，充氮，再加0. 05%活性炭搅拌吸附20分钟，温度控制在80°C ；在配液罐中加注射用水稀释至全量，搅拌均勻，用20 %氢氧化钠溶液调节pH至6. 2 6. 4，取溶液测定色氨酸含量，色氨酸标示含量应为95% 105%，取溶液适量，加水稀释1000倍，在波长210nm处测定吸收值应为0. 26 0. 28 ；经钛棒脱碳、0. 22 μ m微孔滤膜过滤后，灌装、 充氮，灌装后输液瓶内残氧量< 2%，于121°C灭菌12分钟，灯检，包装，即得。
5.如权利要求1或2所述的复方氨基酸注射液的工艺清洗验证检测方法，其特征在于该方法为取清洗液在波长210nm处直接测定吸收度，若吸收度A21tlm < 0. 03，则残留量< 10_4，若吸收度A21tlm < 0. 005，则残留量< 10_5。
6.如权利要求1或2所述的复方氨基酸注射液中抗氧剂的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤色谱条件与系统适应性试验以DIONEX 9HC为色谱柱，流动相为0. 01 0. 04mol/L氢氧化钾溶液，柱温为20 40°C，电化学检测器，流速为0. 5 1. Oml/min ；对照品溶液的制备分别称取亚硫酸氢钠和硫酸钠各25mg，加水溶解并稀释至50ml， 分别量取0. 5 2ml置10 25ml量瓶中，加水稀释至刻度，即得；供试品溶液的制备精密量取本发明复方氨基酸注射液0. 5 anl，置10 25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇勻，即得；测定法分别取供试品溶液和对照溶液各5 20μ 1，注入离子色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明复方氨基酸注射液中抗氧剂的标示含量应为30% 110%。
7.如权利要求6所述的复方氨基酸注射液中抗氧剂的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤色谱条件与系统适应性试验以DIONEX 9HC为色谱柱，流动相为0. 02mol/L氢氧化钾溶液，柱温为30°C，电化学检测器，流速为0. 7ml/min ；对照品溶液的制备分别称取亚硫酸氢钠和硫酸钠各25mg，加水溶解并稀释至50ml， 精密量取Iml置IOml量瓶中，加水稀释至刻度，即得；供试品溶液的制备精密量取本发明复方氨基酸注射液1ml，置IOml量瓶中，加水稀释至刻度，摇勻，即得；测定法分别取供试品溶液和对照溶液各10 μ 1，注入离子色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明复方氨基酸注射液中抗氧剂的标示含量应为80% 100%。
8.如权利要求1或2所述的复方氨基酸注射液的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤色谱条件与系统适应性试验仪器Agilent 1200HPLC，色谱柱=Capcell pak C18， MGI1,150X4. 6mm,流动相 A :0. 02 0. 06mol/L K2HPO4, pH 为 6. 8 7. 8，流动相 B 60 40 40 60的乙腈-甲醇，检测波长338ηπιΛ62ηπι，柱温30 50°C，梯度程序为 v0 = 0. 5-1. 5ml/min,时间0 15-40 20-45 25. 5-45. 5 27. 5-48. 5 29. 5-49. 5 30-50 分钟，流动相 B :0 40% -70% 80% -100% 80% -100% 80% -100% 0 0，流速0. 5-1. 5 0. 5-1. 5 0. 5-1. 5 1. 0-2. 5 1. 0-2. 5 1. 0-2. 5 0. 5-1. 5ml/ min,对照品溶液的制备 盐酸精氨酸25-35mg盐酸组氨酸14-35mg亮氨酸35-45mg异亮氨酸7-27mg盐酸赖氨酸23-4;3mg苯丙氨酸18-39mg苏氨酸10-30mg缬氨酸5-20mg甲硫氨酸5-15mg甘氨酸23-4ang丙氨酸8-29mg脯氨酸5-15mg门冬氨酸6-16mg谷氨酸9-28mg色氨酸20-60mg酪氨酸5-15mg丝氨酸30-90mg盐酸半胱氨酸20-60mg称取以上对照品，其中酪氨酸、色氨酸、盐酸半胱氨酸和丝氨酸置50 500ml量瓶A 中，其余各氨基酸置50 500ml量瓶B中，分别加水适量，振摇使溶解完全；将量瓶A加水稀释至刻度，摇勻，精密量取IOml溶液，置量瓶B中，加水稀释至刻度，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本发明复方氨基酸注射液0. 5 anl，置10 25ml量瓶中，加水稀释至刻度，即得；当测定胱氨酸或半胱氨酸时，分别取供试品溶液0. 2 2. Oml与3， 3，- 二硫代二丙酸溶液即DTDPA0. 2 2. 0ml，置进样瓶中混合，密塞，60 90°C加热40 80分钟，即得;测定法先取1 5 μ 1硼酸盐缓冲液与0. 2 2. Oul供试品溶液混合，再加入邻苯二甲醛0. 2 2. 0 μ 1、混合；最后加入9-芴甲基氯甲酸甲酯0. 2 2. 0 μ 1、混合；再加水10 ·30 μ 1混合，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明复方氨基酸注射液中各氨基酸均为标示含量的80% 120%。
9.如权利要求8所述的复方氨基酸注射液的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤色谱条件与系统适应性试验仪器Agilent 1200HPLC，色谱柱=Capcell pak C18， MGI1,150X4. 6mm,流动相 A :0. 05mol/L K2HPO4, pH 为 7. 0，流动相 B 50 50 的乙腈-甲醇，检测波长:338nm/262nm,柱温40°C，梯度程序为:v0 = 1. 2ml/min,时间 0-30-35-35. 5-38. 5-39. 5-40 分钟，流动相 B :0 50% -70% 100% 100% 100% 0 0，流速1. 2-1. 2-1. 2-2. 0-2. 0-2. 0-1. 2ml/min, 对照品溶液的制备盐酸精氨酸盐酸组氨酸17mg亮氨酸38mg异亮氨酸17mg盐酸赖氨酸3;3mg苯丙氨酸^mg苏氨酸20mg缬氨酸Hmg甲硫氨酸Ilmg甘氨酸3ang丙氨酸19mg脯氨酸IOmg门冬氨酸12mg谷氨酸20mg色氨酸39mg酪氨酸Ilmg丝氨酸67mg盐酸半胱氨酸Mmg称取以上对照品，其中酪氨酸、色氨酸、盐酸半胱氨酸和丝氨酸置IOOml量瓶A中，其余各氨基酸置IOOml量瓶B中，分别加水80ml，振摇使溶解完全；将量瓶A加水稀释至刻度， 摇勻，精密量取IOml溶液，置量瓶B中，加水稀释至刻度，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本发明复方氨基酸注射液1ml，置IOml量瓶中，加水稀释至刻度，即得；当测定胱氨酸或半胱氨酸时，取供试品溶液0. 5ml与3，3’-二硫代二丙酸溶液即 DTDPA溶液0. 5ml，置进样瓶中，密塞，80°C加热60分钟，即得；测定法先取2. 5μ 1硼酸盐缓冲液与0. 5ul供试品溶液混合，再加入邻苯二甲醛 0. 5μ 1、混合，最后加入9-芴甲基氯甲酸甲酯0. 5μ 1、混合，再取水20μ 1混合，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明复方氨基酸注射液中各氨基酸含量测定结果均为标示量的90 % 110 %。
10.如权利要求8所述的复方氨基酸注射液的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤色谱条件与系统适应性试验仪器Agi lent 1200HPLC，色谱柱waters Symmetry 150X3. 9mm,流动相 A :0. 03mol/L K2HPO4, pH 为 7. 0 ；流动相 B :60 40 的乙腈-甲醇；检测波长338nm/262nm，柱温45 °C，梯度程序为时间 0-18. 0-22-26. 5-28. 00-29. 5-30. 00 分钟，流动相 B :0 70% -100%— 100% 100% 0 0，流速0. 9-0. 9-0. 9-1. 8-1. 8-1. 8-0. 9ml/min, 对照品溶液的制备盐酸精氨酸盐酸组氨酸17mg亮氨酸38mg异亮氨酸17mg盐酸赖氨酸3;3mg苯丙氨酸^mg苏氨酸20mg缬氨酸Hmg甲硫氨酸Ilmg甘氨酸3ang丙氨酸19mg脯氨酸IOmg门冬氨酸12mg谷氨酸20mg色氨酸39mg酪氨酸Ilmg丝氨酸67mg盐酸半胱氨酸Mmg称取以上对照品，其中酪氨酸、色氨酸、盐酸半胱氨酸和丝氨酸置250ml量瓶A中，其余各氨基酸置250ml量瓶B中，分别加水80ml，振摇使溶解完全；将量瓶A加水稀释至刻度， 摇勻，精密量取IOml溶液，置量瓶B中，加水稀释至刻度，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本发明复方氨基酸注射液1ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，即得；测定法先取5. 0μ 1硼酸盐缓冲液与1. Oul供试品溶液混合，再加入邻苯二甲醛 1. Oy 1，最后加入9-芴甲基氯甲酸甲酯1. 0 μ 1，再取水30 μ 1混合，注入液相色谱仪，测定， 即得；本发明复方氨基酸注射液中各氨基酸含量测定结果均为标示量的90% 110%。
全文摘要
本发明公开一种复方氨基酸注射液，该注射液由盐酸精氨酸、盐酸组氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、盐酸赖氨酸等组成，同时本发明还公开了复方氨基酸注射液(18AA)的制备方法，在保证产品质量的同时，具有节能、增效的特点；本发明通过对精密度、检测限、定量限和线性范围等反复验证，确定了清洗验证简便快速可靠的方法；并且本发明还根据离子色谱法原理，检测复方氨基酸注射液中抗氧剂亚硫酸氢钠的残留量，以及亚硫酸氢钠降解产生的硫酸根离子，从而准确测定原料配比中投入的抗氧剂量，并根据测定结果判断原料配比工艺的稳定性；本发明提供的复方氨基酸注射液检测方法是一种在线衍生氨基酸含量测定方法，速度快，适合大生产的规模检验。
文档编号A61K31/198GK102440989SQ201010513639
公开日2012年5月9日 申请日期2010年10月13日 优先权日2010年10月13日
发明者何苗, 杨蕾, 王利春, 赵忠琼 申请人:四川科伦药物研究有限公司