调控激酶级联的组合物以及方法

专利名称：调控激酶级联的组合物以及方法
技术领域：
本发明涉及本质上纯的N-苯甲基-2-(5-(4-(2_吗啉基乙氧基)苯基)吡啶-2-基)乙酰胺(KX2-391)及其盐的组合物，以及合成上述物质的方法。本发明同样涉及利用这类组合物的方法。
背景技术：
一个细胞将一种类型的信号或者刺激传递至另外一个细胞的任意的过程被称为信号转导。被称为信号转导的过程通常包括在所述细胞内发生的一定次序的生化反应，这些生化反应通过酶来实现并且经由第二信使进行连接。在许多转导过程中，越来越多数量的酶以及其他分子参与了由最初的刺激所引发的事件。在这类情况中，这种连串的步骤被称为“信号级联放大”或者“第二信使途径”，并且通常导致由一个小的刺激引发一种大的应答。在信号转导中所包括的一类分子是酶的激酶家族。激酶中最大的集团是蛋白激酶，其作用于特定的蛋白质并且修正所述特定蛋白质的活性。它们被广泛的用于信号的传输以及控制细胞内复杂的反应。蛋白激酶是酶中的一个大类，它催化了 Y-磷酸从ATP (三磷酸腺苷)至蛋白质以及肽中的丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)侧链或者酪氨酸(Tyr)侧链上的羟基基团的转移，并且最终参与控制各种重要的细胞功能，或许最显著的控制信号转导，分化以及扩增。据估计，在人类体内存在大约2000种不同的蛋白激酶，并且尽管它们中的每一种针对特定的蛋白/肽底物进行磷酸化，但它们都以高度保守的方式与一种同样的次级底物进行结合，所述的次级底物是ATP (三磷酸腺苷)。蛋白磷酸酶反向催化了磷酸的转移。酪氨酸激酶是一种能够将来自于ATP的磷酸基团转移至蛋白质中的酪氨酸残基中的酶。通过激酶完成的蛋白质的磷酸化作用是信号转导中的一个重要机制，用于对酶的活性进行调节。所述的酪氨酸激酶被分为两组它们是细胞质蛋白以及跨膜受体连接激酶。在人类中，存在32种细胞质蛋白酪氨酸激酶以及58种受体连接蛋白-酪氨酸激酶。那些作用于细胞表面酪氨酸激酶连接受体的激素以及生长因子通常是促进生长的，并且发挥刺激细胞分裂的功能(例如，胰岛素，胰岛素样生长因子I，表皮生长因子)。多种已知的蛋白激酶或者蛋白磷酸酶的抑制剂具有多种治疗学应用。蛋白激酶或者蛋白磷酸酶抑制剂的一种有前途的潜在的治疗用途是作为抗肿瘤制剂。在已知的致癌基因产物中有大约50%是蛋白酪氨酸激酶(PTK)，并且已经表明，它们的激酶活性导致了细胞的转化。
所述的蛋白酪氨酸激酶(PTK)可以被划分为两个种类，膜受体蛋白酪氨酸激酶(例如，生长因子受体蛋白酪氨酸激酶)以及非受体蛋白酪氨酸激酶(例如，原致癌基因产物中的Src家族)。在非受体蛋白酪氨酸激酶的Src家族中具有至少9个成员，利用pp60e_SM (在此之后将其简便的表示为“Src”)表示上述家族的原型蛋白酪氨酸激酶，其中有大约300个氨基酸的催化结构域是高度保守的。已经在多种人类癌症中报道了 Src的过度活化，包括结肠癌，乳腺癌，肺癌，膀胱癌，以及皮肤癌，还有胃癌，多毛细胞白血病，以及成神经细胞瘤。从跨膜受体(例如，表皮生长因子受体(EGFR)以及pl85HER2/Neu)至所述细胞内部的过度刺激细胞扩增信号也表现出经由Src进行反应。因此，近来建议将Src作为癌症治疗的通用靶位(universal target)，因为在许多重要的人类肿瘤类型中，肿瘤的形成、发展以及转移都涉及到过度活化(不存在变异)。由于在各种正常细胞的信号转导途径(例如，细胞的生长，分化，存活，粘着，迁移，等等)中都涉及到激酶，激酶被认为在各种疾病以及障碍中发挥作用。因此，对于激酶信号级联的调控可能是用以治疗或者预防这类疾病以及障碍的一种重要的方式。小规模的合成KX2-391的方法已经被公开(美国专利7，300, 931)。然而，这种合成方法对于上述化合物的大量生产而言是不切实际的，并且得到的产物受到氯乙烷的污染，所述的氯乙烷是一种已知的弱烷化剂。因此，以足够高的水平存在的氯乙烷限制了 KX2-391组合物的药物学效力。因此，需要高度纯化的KX2-391组合物及其合成方法，其是安全的并且是简单的，并且所述方法以大规模、高产量的生产KX2-391，且本质上不含有氯乙烷。

发明内容
本发明所述的化合物能够有效的调控所述的激酶信号级联中的一个成员。某些化合物能够有效的调控激酶信号级联中的不止一个成员。本发明所述的化合物可以被用作药物制剂。本发明所述的化合物能够有效的调控激酶的规则(regulation),其中所述的激酶是在正常的细胞信号转导途径(例如，细胞的生长，分化，存活，粘着，迁移，等等)中所涉及到的激酶，或者是在疾病或者障碍中所涉及到的激酶。例如，由本发明所述的化合物进行调控的所述激酶级联中的成员负责疾病或者障碍的显现，所述的疾病或者障碍是例如过度增殖障碍，癌症，癌前状态，骨质疏松症，心血管疾病，免疫系统功能紊乱，II型糖尿病，肥胖，眼科疾病，黄斑水肿，慢性神经性疼痛，听力缺失，以及移植排斥。本发明所述的化合物能够有效的用于治疗由酪氨酸激酶的抑制所调控的疾病以及障碍。例如，本发明所述的化合物能够有效的治疗由Src激酶所调控的疾病以及障碍。本发明所述的化合物还能够有效的治疗由黏着斑激酶(FAK)所调控的疾病以及障碍。例如，所述的化合物可以被有效的作为抗增殖制剂，用于对哺乳动物进行治疗，例如用于对人类以及动物进行治疗。所述的化合物可以被用来作为，例如但不局限于，抗癌症制齐U，抗血管生成制剂，抗转移制剂，抗微生物制剂，抗细菌制剂，抗真菌制剂，抗寄生虫制剂和/或抗病毒制剂。本发明所述的化合物可以用于例如治疗肺癌。本发明所述的化合物同样可以用于例如治疗结肠癌。本发明所述的化合物还可以用于例如治疗乳腺癌。本发明涉及本质上纯的N-苯甲基-2-(5-(4-(2_吗啉基乙氧基)苯基)吡、啶-2-基)乙酰胺(化合物1)，以及该化合物的盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物
O 。 。
Tl I Il(化合物 1，ΚΧ2-391)。本发明涉及高度纯化的ΚΧ2-391组合物(通过高效液相色谱法测得纯度>98.0%)及其合成方法，所述的合成方法是安全并且简单的，该方法大规模(> 100克)、高产量(>80%)的生产ΚΧ2-391，并且仅具有有限量的氯乙烷(利用顶空气相色谱法残留溶剂分析测得< 250ppm)。在优选的实施方式中，本发明所述的组合物中的化合物I具有高于98%的纯度。例如，在本发明所述的组合物中，所述化合物I的纯度为98. 5 %，99. O %，99. 5 %，99. 6 %，99. 7%,99. 8%或者 99. 9%。
在优选的实施方式中，本发明所述的组合物以及制剂含有低于2%的杂质。例如，本发明所述的组合物以及制剂含有低于2%的下述杂质中的任意一种或是它们的组合氯乙烧，乙醇，乙酸乙酯，庚烷，苯甲醚，以及钯。在另外的优选实施方式中，所述的组合物含有少于250ppm的氯乙烷，该数据是通过顶空气相色谱法残留溶剂分析测得的。在一种实施方式中，本发明所述的化合物以及制剂中含有的氯乙烧在大约Oppm至大约250ppm的范围之内(或者是所述范围内的任意值)。例如，所述的组合物中含有少于200ppm、少于200ppm、少于150ppm、少于lOOppm、或者少于50ppm的氯乙烧。本发明所述的化合物以及制剂含有少于大约IOOppm的钯。在一种实施方式中，本发明所述的化合物以及制剂中含有的钮I在大约Oppm至大约IOOppm的范围之内(或者是所述范围内的任意值)。例如，所述的组合物中含有少于75ppm、少于50ppm、少于30ppm、少于20ppm、少于lOppm、或者少于5ppm的钮。本发明涉及一种组合物，所述组合物包含本质上纯的化合物I的溶剂化物。本发明同样涉及一种组合物，所述组合物包含本质上纯的化合物I的水合物。本发明还包括本质上纯的化合物I的酸加成盐。例如，盐酸盐。所述的酸加成盐可以是，例如，二盐酸盐。本发明涉及一种组合物，所述组合物包含本质上纯的化合物I的酸加成盐。本发明涉及一种组合物，所述组合物包含本质上纯的化合物I的盐酸盐。本发明涉及一种组合物，所述组合物包含本质上纯的化合物I的二盐酸盐。本发明同样包括化合物I的前体药物。本发明还包括本质上纯的、化合物I的药物可接受性盐。 本发明同样涉及一种组合物，所述组合物包含本质上纯的化合物I，或者是其溶剂化物、水合物或者盐，以及至少一种药物可接受性赋形剂。本发明还涉及利用这种本质上纯的化合物以及组合物对所述激酶信号级联中的成员进行调控。某些化合物能够有效的调控激酶信号级联中的不止一个成员。本发明所述的化合物可以被用作药物制剂。
本发明中所述的某些化合物是非ATP竞争性激酶抑制剂。本发明涉及化合物以及利用所述的化合物治疗细胞增殖障碍的方法。本发明还包括预防或者治疗细胞增殖障碍的方法，所述的方法是给有需要的宿主施用一种药物组合物，所述的药物组合物中包含本质上纯的化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物，以及至少一种药物可接受性赋形剂。例如，所述的细胞增殖障碍是癌前状态或者癌症。利用本发明所述的化合物治疗或者预防的所述细胞增殖障碍可以是癌症，例如，结肠癌或者肺癌。 利用本发明所述的化合物治疗或者预防的所述细胞增殖障碍可以是过度增殖障碍。利用本发明所述的化合物治疗或者预防的所述细胞增殖障碍可以是银屑病。例如，可以通过对酪氨酸激酶的抑制来实现对于所述增殖障碍的治疗或者预防。例如，所述的酪氨酸激酶可以是Src激酶或者是黏着斑激酶(FAK)。本发明涉及一种治疗或者预防疾病或者障碍的方法，其中所述的疾病或者障碍受到酪氨酸激酶抑制的调控，所述的方法是施用一种药物组合物，所述的药物组合物中包含本质上纯的化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物，以及至少一种药物可接受性赋形剂。例如，所述的受到酪氨酸激酶抑制的调控的疾病或者障碍是癌症，癌前状态，过度增殖障碍，或者微生物感染。本发明所述的药物组合物可以调控激酶途径。例如，所述的激酶途径是Src激酶途径，或者是黏着斑激酶途径。本发明所述的药物组合物可以直接对激酶进行调控。例如，所述的激酶是Src激酶，或者是黏着斑激酶。本发明中所述的某些药物组合物是非ATP竞争性激酶抑制剂。本发明所述的化合物还可以有效的用于治疗或者预防微生物感染，例如细菌、真菌、寄生虫或者病毒感染。本发明所述的化合物可以被用来作为药物制剂。例如，本发明所述的化合物被用来作为抗增殖制剂，用于对人类和/或动物进行治疗，例如用于对人类和/或其他哺乳动物进行治疗。所述的化合物可以被用来作为，例如但不局限于，抗癌症制剂，抗血管生成制剂，抗微生物制剂，抗细菌制剂，抗真菌制剂，抗寄生虫制剂和/或抗病毒制剂。除此之外，所述的化合物可以被用于其他与细胞增殖相关的障碍例如糖尿病性视网膜病变，视网膜黄斑变性以及银屑病。抗癌症制剂包括抗转移制剂。本发明所述的被用来作为药物制剂的化合物包含本质上纯的化合物I及其盐、溶剂化物、水合物。在本发明的一个方面，本发明中所述的化合物，例如本发明所述的化合物被用来调控激酶级联。例如，所述的化合物被用来调控激酶级联中的一个成员，所述的成员负责疾病或者障碍的显现。这样的疾病以及障碍包括癌症，骨质疏松症，心血管疾病，免疫系统功能紊乱，II型糖尿病，肥胖，以及移植排斥。例如，本发明所述的化合物可以被用来治疗或者预防宿主的细胞增殖障碍。在所述实施方式中的一个方面，所述的细胞增殖障碍是癌前状态或者癌症。在所述实施方式中的另外一个方面，所述的细胞增殖障碍是过度增殖障碍。在另外一种实施方式中，对于所述细胞增殖障碍、癌症或者过度增殖障碍的预防或者治疗是通过对激酶的抑制来实现的。在另外一种实施方式中，对于所述细胞增殖障碍、癌症或者过度增殖障碍的预防或者治疗是通过对酪氨酸激酶的抑制来实现的。在另外一种实施方式中，对于所述细胞增殖障碍、癌症或者过度增殖障碍的预防或者治疗是通过对Src激酶或者黏着斑激酶(FAK)的抑制来实现的。在另外一种实施方式中，所述的宿主是哺乳动物。在一种实施方式中，所述的宿主是人类。本发明还涉及治疗或者预防宿主的癌症或者增殖障碍的方法，包括施用一种有效剂量的组合物，所述的组合物中包含本质上纯的化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物。例如，本发明所述的 化合物可以是一种激酶抑制剂。本发明所述的化合物可以是一种非ATP竞争性激酶抑制剂。本发明所述的化合物可以直接抑制激酶的活性，或者可以影响所述的激酶途径。本发明的另外一个方面包括一种保护宿主免受听力缺失或者治疗宿主的听力缺失的方法，所述方法包括施用一种组合物，所述的组合物中包含本质上纯的化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物。在一种实施方式中，所述的化合物抑制激酶信号级联中的一个或者多个成员。在一种实施方式中，所述的化合物是一种变构抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物是一种肽底物抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物并不抑制ATP与所述的蛋白激酶发生结合。在一种实施方式中，所述的化合物抑制Src家族蛋白激酶。在一种实施方式中，所述的Src家族蛋白激酶是pp6(TSM酪氨酸激酶。在一种实施方式中，所述化合物的给药是通过口服、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内的方式实现，通过鼻内灌输、通过腔内或者膀胱内灌输、局部的方式实现，例如，通过向耳朵内进行滴注、关节内、病灶内、通过计量泵、或者通过施用至黏膜的方式实现。在另外的实施方式中，所述的化合物与一种药物可接受性载体一同进行施用。在一种实施方式中，将所述的化合物在出现听力缺失之前进行施用。在另外一种实施方式中，将所述的化合物在出现听力缺失之后进行施用。在一种实施方式中，将所述化合物与一种能够引起听力缺失的药物一同施用，其中所述的药物是例如顺钼或者是一种氨基糖苷类抗生素。在另外一种实施方式中，将所述的化合物与一种以多毛细胞为靶向的药物一同施用。本发明的另外一个方面包括一种保护宿主防止患有骨质疏松症或者治疗宿主的骨质疏松症的方法，所述方法包括施用一种组合物，所述的组合物中包含本质上纯的化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物。在一种实施方式中，所述的化合物抑制激酶信号级联中的一个或者多个成员。在另外一种实施方式中，所述的化合物是一种变构抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物是一种肽底物抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物抑制Src家族蛋白激酶。例如，所述的Src家族蛋白激酶是pp60pslx酪氨酸激酶。在一种实施方式中，所述化合物的给药是通过口服、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内的方式实现，通过鼻内灌输、通过腔内或者膀胱内灌输、局部、关节内、病灶内、通过计量泵、或者通过施用至黏膜的方式实现。在一种实施方式中，所述的化合物与一种药物可接受性载体一同进行施用。在一种实施方式中，将所述的化合物在出现骨质疏松之前进行施用。在另外一种实施方式中，将所述的化合物在出现骨质疏松之后进行施用。
本发明的另外一个方面包括一种保护宿主防止患有眼科疾病或者治疗宿主的眼科疾病的方法，所述的眼科疾病是例如视网膜黄斑病变、视网膜病、黄斑水肿等等，所述方法包括施用一种组合物，所述的组合物中包含本质上纯的化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物。在一种实施方式中，所述的化合物抑制激酶信号级联中的一个或者多个成员。在另外一种实施方式中，所述的化合物是一种变构抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物是一种肽底物抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物抑制Src家族蛋白激酶。例如，所述的Src家族蛋白激酶是pp6(Tslx酪氨酸激酶。在另外一种实施方式中，所述的化合物抑制血管内皮生长因子(VEGF)途径中的一个或者多个成员。在一种实施方式中，所述化合物的给药是通过口服、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内的方式实现，通过鼻内灌输、通过腔内或者膀胱内灌输、局部(例如，通过向耳朵 内进行滴注)、关节内、病灶内、通过计量泵、或者通过施用至黏膜的方式实现。在一种实施方式中，所述的化合物与一种药物可接受性载体一同进行施用。在一种实施方式中，将所述的化合物在出现所述的眼科疾病之前进行施用。在另外一种实施方式中，将所述的化合物在出现眼科疾病之后进行施用。本发明的另外一个方面包括一种保护宿主防止患有糖尿病或者治疗宿主的糖尿病的方法，所述方法包括施用一种组合物，所述的组合物中包含本质上纯的化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物。在一种实施方式中，所述的化合物抑制激酶信号级联中的一个或者多个成员。在另外一种实施方式中，所述的化合物是一种变构抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物是一种肽底物抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物抑制Src家族蛋白激酶。例如，所述的Src家族蛋白激酶是pp60pSIX酪氨酸激酶。在一种实施方式中，所述化合物的给药是通过口服、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内的方式实现，通过鼻内灌输、通过腔内或者膀胱内灌输、局部、关节内、病灶内、通过计量泵、或者通过施用至黏膜的方式实现。在一种实施方式中，所述的化合物与一种药物可接受性载体一同进行施用。在一种实施方式中，将所述的化合物在糖尿病的发作之前进行施用。在另外一种实施方式中，将所述的化合物在糖尿病的发作之后进行施用。本发明的另外一个方面包括一种保护宿主防止患有肥胖症或者治疗宿主的肥胖症的方法，所述方法包括施用一种组合物，所述的组合物中包含本质上纯的化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物。在一种实施方式中，所述的化合物抑制激酶信号级联中的一个或者多个成员。在另外一种实施方式中，所述的化合物是一种变构抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物是一种肽底物抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物抑制Src家族蛋白激酶。例如，所述的Src家族蛋白激酶是pp60pSIX酪氨酸激酶。在一种实施方式中，所述化合物的给药是通过口服、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内的方式实现，通过鼻内灌输、通过腔内或者膀胱内灌输、局部、关节内、病灶内、通过计量泵、或者通过施用至黏膜的方式实现。在一种实施方式中，所述的化合物与一种药物可接受性载体一同进行施用。在一种实施方式中，将所述的化合物在宿主发生肥胖之前进行施用。在另外一种实施方式中，将所述的化合物在宿主发生肥胖之后进行施用。本发明的另外一个方面包括一种保护宿主防止患有脑卒中(stroke)或者治疗宿主的脑卒中(stroke)的方法，所述方法包括施用一种组合物，所述的组合物中包含本质上纯的化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物。在一种实施方式中，所述的化合物抑制激酶信号级联中的一个或者多个成员。在另外一种实施方式中，所述的化合物是一种变构抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物是一种肽底物抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物抑制Src家族蛋白激酶。例如，所述的Src家族蛋白激酶是pp60口酪
氨酸激酶。在一种实施方式中，所述化合物的给药是通过口服、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内的方式实现，通过鼻内灌输、通过腔内或者膀胱内灌输、局部、关节内、病灶内、通过计量泵、或者通过施用至黏膜的方式实现。在一种实施方式中，所述的化合物与一种药物可接受性载体一同进行施用。在一种实施方式中，将所述的化合物在发生脑卒中(stroke)之前进行施用。在另外一种实施方式中，将所述的化合物在发生脑卒中(stroke)之后进行施用。本发明的另外一个方面包括一种保护宿主防止患有动脉粥样硬化或者治疗宿主的动脉粥样硬化的方法，所述方法包括施用一种组合物，所述的组合物中包含本质上纯的 化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物。在一种实施方式中，所述的化合物抑制激酶信号级联中的一个或者多个成员。在另外一种实施方式中，所述的化合物是一种变构抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物是一种肽底物抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物抑制Src家族蛋白激酶。例如，所述的Src家族蛋白激酶是pp6(TSIX酪氨酸激酶。在一种实施方式中，所述化合物的给药是通过口服、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内的方式实现，通过鼻内灌输、通过腔内或者膀胱内灌输、局部、关节内、病灶内、通过计量泵、或者通过施用至黏膜的方式实现。在一种实施方式中，所述的化合物与一种药物可接受性载体一同进行施用。本发明的另外一个方面包括一种调节宿主的免疫系统活性的方法，所述方法包括施用一种组合物，所述的组合物中包含本质上纯的化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物。在一种实施方式中，所述的化合物抑制激酶信号级联中的一个或者多个成员。在另外一种实施方式中，所述的化合物是一种变构抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物是一种肽底物抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物抑制Src家族蛋白激酶。例如，所述的Src家族蛋白激酶是pp6(TSM酪氨酸激酶。在一种实施方式中，所述化合物的给药是通过口服、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内的方式实现，通过鼻内灌输、通过腔内或者膀胱内灌输、局部、关节内、病灶内、通过计量泵、或者通过施用至黏膜的方式实现。在一种实施方式中，所述的化合物与一种药物可接受性载体一同进行施用。本发明的另外一个方面包括一种保护宿主防止患有慢性神经性疼痛或者治疗宿主的慢性神经性疼痛的方法，所述方法包括施用一种组合物，所述的组合物中包含本质上纯的化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物。在一种实施方式中，所述的化合物抑制激酶信号级联中的一个或者多个成员。在另外一种实施方式中，所述的化合物是一种变构抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物是一种肽底物抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物抑制Src家族蛋白激酶。例如，所述的Src家族蛋白激酶是pp60口酪氨酸激酶。在一种实施方式中，所述化合物的给药是通过口服、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内的方式实现，通过鼻内灌输、通过腔内或者膀胱内灌输、局部、关节内、病灶内、通过计量泵、或者通过施用至黏膜的方式实现。在一种实施方式中，所述的化合物与一种药物可接受性载体一同进行施用。在一种实施方式中，将所述的化合物在慢性神经性疼痛的发作之前进行施用。在另外一种实施方式中，将所述的化合物在慢性神经性疼痛的发作之后进行施用。本发明的另外一个方面包括一种保护宿主防止患有B型肝炎或者治疗宿主的B型肝炎的方法，所述方法包括施用一种组合物，所述的组合物中包含本质上纯的化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物。在一种实施方式中，所述的化合物抑制激酶信号级联中的一个或者多个成员。在另外一种实施方式中，所述的化合物是一种变构抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物是一种肽底物抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物抑制Src家族蛋白激酶。例如，所述的Src家族蛋白激酶是pp60pSIX酪氨酸激酶。在一种实施方式中，所述化合物的给药是通过口服、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内的方式实现，通过鼻内灌输、通过腔内或者膀胱内灌输、局部、关节内、病灶内、通过计量泵、或者通过施用至黏膜的方式实现。在一种实施方式中，所述的化合物与一种药物可接受性载体一同进行施用。在一种实施方式中，将所述的化合物在B型肝炎的发作之前进行施用。在另外一种实施方式中，将所述的化合物在B型肝炎的发作之后进行施用。本发明的另外一个方面是一种预防或者治疗细胞增殖障碍的方法，所述的方法包括向有需要的宿主施用一种组合物，所述的组合物中包含本质上纯的化合物1，或者是其盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物。在一种实施方式中，所述的化合物抑制蛋白激酶信号级联中的一个或者多个成员。在另外一种实施方式中，所述的化合物是一种变构抑制剂。在一种实施方式中，所述的化合物是一种肽底物抑制剂。在另外一种实施方式中，所述的化合物并不抑制ATP与蛋白激酶发生结合。在一种实施方式中，所述的化合物抑制Src家族蛋白激酶。在另外一种实施方式中，所述的Src家族蛋白激酶是pp6(TSM酪氨酸激酶。本发明涉及一种治疗或者预防疾病或者障碍的方法，其中所述的疾病或者障碍受到酪氨酸激酶抑制的调控，其中所述的增殖障碍选自癌症，癌前状态，过度增殖障碍，以及微生物感染。例如，所述的微生物感染是细菌、真菌、寄生虫或者病毒感染。在另外一个实施例中，所述的增殖障碍是一种过度增殖障碍，选自银屑病，糖尿病性视网膜病变以及视网膜黄斑变性。在某些实施例中，所述的增殖障碍是癌症。例如，所述的癌症可以是实体肿瘤，例如肺癌，乳腺癌，结肠癌，卵巢癌，脑癌，肝癌，胰腺癌，或者前列腺癌，恶性黑素瘤，或者非黑素瘤皮肤癌。在某些实施例中，所述的癌症是乳腺癌，结肠癌，或者是肺癌。在某些实施例 中，所述的癌症是血液肿瘤，恶性血液病，儿童白血病，淋巴瘤，多发性骨髓瘤，霍奇金氏病，淋巴细胞或皮肤原发性淋巴瘤，急性或者慢性白血病，成淋巴细胞白血病，急性髓细胞白血病，慢性髓细胞白血病，浆细胞肿瘤，淋巴肿瘤或者与AIDS (获得性免疫缺陷综合症)相关的癌症。在某些实施例中，所述的增殖障碍是表皮囊肿，皮样囊肿，脂肪瘤，腺瘤，毛细血管瘤，皮肤血管瘤，淋巴管瘤，痣损伤(nevi lesion)，畸胎瘤，肾瘤，肌纤维瘤，成骨细胞瘤，或者发育不良性团块(dysplastic mass)。在本发明的某些方法中，接受本发明所述化合物的治疗的所述宿主是人类。
上述的说明相当宽泛的列出了本发明中更为重要的特征，其目的是为了使其后的详细说明能够被理解，并且使本发明对于该领域所作的贡献能够被更好的理解。通过与实施例进行结合考虑，关于本发明的其他目的以及特征能够从下面的详细描述中显现出来。


附图I的图表表示的是KX2-391. 2HC1 lot 02BP111F的差式扫描量热(DSC)图。附图2的图 表表示的是KX2-391. 2HC1 lot 02BP111E的差式扫描量热(DSC)图。附图3的图表表示的是KX2-391. 2HC1 lot 02BP111E的X射线粉末衍射(XRPD)图。附图4的图表表示的是KX2-391. 2HC1 lot 02BP111F的X射线粉末衍射(XRPD)图。附图5表示的是KX2-391 (lot 02BP096K)的核磁共振(NMR)谱。
具体实施例方式在下面随后的描述中列出了本发明所述的一种或者多种实施方式的详细内容。尽管在本发明的实践或者检验中可以使用与本发明中所描述的相类似或者等价的任意方法以及物质，但下面描述的是优选的方法以及物质。通过下面的描述，本发明所述的其他特征、目的以及优点将是显而易见的。在下述的具体说明中，除非文章中明确指示，否则所述的单数形式也包括复数。除非特别定义，这里使用到的所有的技术术语以及科技术语与发明所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同。如产生矛盾，将以本说明书为准。这里所提及的所有的出版物、专利申请、专利、以及其他参考文献的全部内容在此引入作为参考。由于在许多正常的细胞信号转导途径(例如，细胞的生长，分化，存活，粘着，迁移，等等)的规则中涉及到激酶，激酶被认为是在许多的疾病以及障碍中发挥着作用。因此，对于激酶信号级联的调控可能是治疗或者预防这类疾病以及障碍的一种重要的方式。这类疾病以及障碍包括，例如，癌症，骨质疏松症，心血管疾病，免疫系统功能紊乱，II型糖尿病，肥胖，以及移植排斥。本发明所述的化合物能够有效的调控所述的激酶信号级联中的一个成员。某些化合物能够有效的调控激酶信号级联中的不止一个成员。所述的术语“调控蛋白激酶信号级联中的一个或者多个成员”指的是所述的激酶信号级联中的一个或者多个成员受到影响，使得细胞的功能发生改变。蛋白激酶信号级联中的成员包括在所述的激酶信号途径中直接或者间接涉及到的任何蛋白，包括第二信使以及上游靶位和下游靶位。许多蛋白激酶以及磷酸酶是已知的，并且它们是治疗学的发展所针对的目标。参见，例如，Hidaka 与 Kobayashi 于 1992 年的在 Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol《药理学与毒性学年鉴》32 =377-397中发表的文献；Davies等人于2000年在Biochem. J.《生物化学杂志》351 95-105中发表的文献，上述文献在此引入作为参考。激酶中的一个家族——蛋白酪氨酸激酶，被划分为两个大的家族受体酪氨酸激酶，或者表示为RTK(例如，胰岛素受体激酶(IRK)，表皮生长因子受体(EGFR)，成纤维细胞生长因子受体(FGFR)，血小板衍生生长因子受体(TOGFR)，血管内皮生长因子受体(VEGFR-2或者Flk 1/KDR)，以及神经生长因子受体(NGFR))，以及非受体酪氨酸激酶，或者表示为 NRTK(例如，Src 家族(Src, Fyn, Yes, Blk, Yrk, Fgr, Hck, Lck,以及 Lyn)，Fak, Jak,Abl 以及 Zap 70)。参见，例如，Parang 与 Sun 于 2005 年在 Expert Opin. Ther. Patents《治疗学专利的专家观点》15 =1183-1207中发表的文献，上述文献在此引入作为参考。由于Src激酶在各种癌症中所起到的作用，这些激酶成为许多研究的学科，这些研究涉及Src抑制剂作为癌症治疗剂的进展，包括高度转移的癌症细胞的生长。寻找Src抑制剂作为各种癌症的治疗剂，这些癌症包括，例如，结肠癌，癌症前期的结肠病变，卵巢癌，乳腺癌，上皮癌，食道癌，非小细胞肺癌，胰腺癌，以及其他癌症。参见，例如，Frame于2002年在Biochim. Biophys. Acta《生物物理学报》1602 :114-130中发表的文献，以及Parang与Sun于2005年在Expert Opin. Ther. Patents《治疗学专利的专家观点》15 1183-1207中发表的文献。
可以将对于其他激酶的抑制用于治疗以及调控其他类型的疾病以及障碍。例如，可以通过施用血管内皮生长因子(VEGF)受体酪氨酸激酶抑制剂来抑制或者预防各种眼部疾病。酪氨酸磷酸酶PTP-IB和/或糖原磷酸化酶的抑制剂能够为II型糖尿病或者肥胖提供治疗。p561ck能够有效的治疗免疫系统障碍。其他的靶位包括人类免疫缺陷病毒(HIV)逆转录酶，血栓素合成酶，表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFRTK)，p55fyn，等等。本发明所述的化合物可以是在Src肽底物位点发生结合的Src信号抑制剂。在c-Src(527F，组成性激活及转化)转化的NIH3T3细胞以及人类结肠癌细胞(HT29)中对本发明所述的各种化合物的活性进行了研究。例如，在这些细胞系中，KX2-391表现出以一种剂量依赖的形式降低了已知Src蛋白底物的磷酸化水平，并且与生长抑制效应建立了良好的关联。因此，在某些实施方式中，本发明所述的化合物能够直接抑制Src，并且可以通过与所述的肽结合位点进行结合(与结合于变构位点相反)来实现这一作用。已经完成了分子模型试验，该试验证明了本发明所述的化合物适合所述的模型Src底物位点(参见，例如，美国专利7，005，445以及7，070，936)。为了命中其他激酶，模型也可以被用来重组所述的Src激酶抑制剂支架(scaffold)，这可以简单的通过利用存在于所述分子之上的另外一套侧链和/或对所述的支架本身进行修饰来完成。尽管不希望受到理论的限制，但可以确信在细胞外的某些激酶(例如，Src)的构象与细胞内的构象存在显著的差别，因为在细胞内，许多激酶被包埋在多蛋白信号复合体中。因此，由于在分离的激酶中不能很好的形成所述的肽底物结合位点(如SrcX-射线结构所示)，可以确信肽底物结合抑制剂对于分离的激酶的活性而言应当是微弱的。在分离的激酶检测中，在这一位点上发生结合要求所述的抑制剂捕获到非常少量的完整蛋白质，所述的完整蛋白质在分离的酶检测中在细胞内具有同样的构象。为了能够被探测到，需要大量过量的抑制剂来消耗所述的大量的酶，其中所述的酶来自于所述检测的催化性循环。然而，对于基于细胞的检测而言，由于可以预期能够形成所述的肽结合位点，因而不需要大量过量的抑制剂。在基于细胞的Src检测中，SH2&SH3结构域结合蛋白已经改变了所述Src的构象，因而所述的肽底物结合位点已经完全形成。因此，低浓度的所述抑制剂能够除去来自于所述催化性循环的酶，因为所有的酶都呈现出紧密结合的构象。绝大多数的已知的激酶抑制剂都是ATP (三磷酸腺苷)竞争性的，并且在一组分离的激酶检测中表现出较差的选择性。然而，本发明中所述的许多化合物被认为是肽底物结合抑制剂。因此，针对分离的酶例如Src的传统的高生产量的化合物的筛选不会导致本发明所述化合物的发现。近来有相当多的文献支持这样的观点以pp60e_SM(SrC)为靶向，是一种具有广泛用途的癌症治疗方法，且不会产生严重的毒性。例如，那些显示出增强的表皮生长因子(EGF)受体蛋白酪氨酸激酶(PTK)信号、或者过表达所述相关的Her-2/neu受体的肿瘤，具有组成性激活的Src以及增强的肿瘤入侵性。对于这些细胞中的Src的抑制诱发生长停滞，引发细胞凋亡，并且翻转了转化了的表型(参见Karni等人(于1999年)在Oncogene《致癌基因》18 (33) =4654-4662中发表的文献)。已知Src活性的异常升高使得转化细胞以锚定不依赖性的形式进行生长。这显然是由于胞外基质信号以等同于有丝分裂信号的形式增强了 FAK (黏着斑激酶)/Src途径中的Src活性，并且从而阻碍了本应正常被激活的细胞凋亡机制。因此在肿瘤细胞中进行FAK/Src的抑制能够诱发细胞凋亡，因为本应在从所述的胞外基质中被释放出来之后才被正常激活的细胞凋亡机制被引发了(参见Hisano等人(于1997 年)在 Proc. Annu. Meet. Am. Assoc. Cancer Res. 38 A1925 中发表的文献)。此外，在Src受到抑制时注意到血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达减弱，并且来自于这些Src抑制细胞系的肿瘤表现出向生成血管方向的发展的减弱(参见Ellis等人(于1998年)在 Journal of Biological Chemistry《生物化学杂志》273 (2) : 1052-1057 中发表的文献)。例如，大鼠的Src基因的剔除仅会导致一种缺陷，即破骨细胞不能够形成皱褶缘并且因此不能进行骨的再吸收。然而，通过在这些大鼠中插入激酶缺陷性Src基因，能够挽救所述破骨细胞的骨的再吸收功能(参见Schwartzberg等人(于1997年)在Genes&Development《基因的研究发展》11 :2835_2844中发表的文献)。这表明可以在不引发仅已知的毒性的前提下在体内对Src激酶的活性进行抑制，这是因为所述的Src蛋白的存在显然足以补充并且激活存在于以破骨细胞为主的信号复合体(osteoclast essentialsignaling complex)中的其他蛋白酪氨酸激酶(这些蛋白酪氨酸激酶对于维持破骨细胞的功能而言是必不可少的)。由于已经发现在越来越多的人类肿瘤中存在Src的过度活化，已经提议将Src作为癌症治疗中的“通用”祀位(参见Levitzki (于1996年)在Current Opinion in CellBiology《细胞生物学的现代主张》8，239-244中发表的文献；Levitzki (于1996年)在Anti-Cancer Drug Design《抗癌症药物的设计》11,175-182中发表的文献)。对于Src的抑制在癌症治疗方面所产生的可能的效益是由自分泌生长因子环作用所引发的对于不受控制的细胞生长的抑制所产生的效益的四倍，是当从所述细胞基质中逃离后引发细胞凋亡而导致的对于转移的抑制所产生的效益的四倍，是经由降低的血管内皮生长因子(VEGF)水平以及低毒性所形成的对于肿瘤的血管生成作用的抑制所产生的效益的四倍。据报道，前列腺癌细胞中同时含有过表达的桩蛋白以及pl30cas，并且是过度磷酸化的(参见Tremblay等人于1996年在Int. J. Cancer《癌症研究杂志》68,164-171中发表的文献)，其因此可以作为Src抑制剂的首要靶位。因此，本发明涉及一类化合物，以及利用这类化合物治疗细胞增殖障碍的方法。本发明所述的化合物可以有效的用作药物制剂，例如，用于对人类以及动物进行治疗的治疗剂。所述的化合物可以被用作，例如但不局限于，抗癌症制剂，抗血管生成制剂，抗转移制剂，抗微生物制剂，抗细菌制剂，抗真菌制剂，抗寄生虫制剂和/或抗病毒制剂。所述的化合物可以被用于其他的细胞增殖相关性障碍，例如银屑病。正如本发明中所述，本发明所述的化合物能够用来保护宿主免受听力缺失或者预防宿主患有听力缺失。为了保护宿主免受听力缺失，可以在将其暴露于噪声或者施用能够诱发听力缺失的药物之前施用所述的化合物。这样的药物可能包括化疗药物(例如，以毛发细胞为靶向的基于钼的药物)以及氨基糖苷类抗生素。本发明所述的化合物能够与某些癌症药物一同提供协同效应。例如，可以在原发性人类肿瘤组织检测中筛选出有希望的抑制剂，特别是寻找与其他已知的抗癌症药物具有的协同性。除此之外，所述的蛋白激酶抑制剂可以降低某些癌症药物的毒性(例如，基于钼的药物，其对于耳蜗以及肾脏具有毒性)，从而允许剂量的增加。或者，本发明所述的化合物可以被用来治疗宿主的听力缺失。在这种实施方式中，在听力缺失发生之后为所述的宿主施用所述化合物，以降低听力缺失的程度。本发明所述的化合物可能涉及到激酶级联的调控，例如，是一种激酶抑制剂，非AIP竞争性抑制剂，酪氨酸激酶抑制剂，Src抑制剂或者黏着斑激酶(FAK)调控剂。尽管不希望受到理论的限制， 但可以确信激酶抑制剂的施用能够防止耳蜗毛发细胞的细胞凋亡，从而预防听力缺失。在一种实施方式中，本发明所述化合物的施用是施用于患有听力缺失的宿主，目的在于防止更严重的听力缺失。在另外一种实施方式中，本发明所述化合物的施用是施用于患有听力缺失的宿主，目的在于恢复丧失的听力。特别的，在被暴露于噪声中之后，耳蜗的毛发细胞之间紧密的细胞连接以及细胞与胞外基质间的相互作用受到撕裂和压力。这些紧密的细胞连接受到的压力(stressing)经由复杂的信号途径激发了细胞内的细胞凋亡，在上述信号途径中，酪氨酸激酶作为分子开关，与黏着斑激酶发生相互作用，从而将细胞-基质的分裂信号传感至细胞核。可以确信，激酶抑制剂的施用防止了这一级联中细胞凋亡的发生。对于暴露于噪声中的耳蜗中发生的细胞凋亡的识别，为噪声诱发的听力缺失(NIHL)的预防提供了许多种新的可能(参见Hu等人于2000年在Acta. Otolaryngol. 120,19-24中发表的文献)。例如，在耳朵的圆窗处施用抗氧化药物，能够保护耳朵免受噪声诱发的听力缺失(NIHL)(参见Hight等人于2003年在Hear. Res.《耳朵研究》179，21-32中发表的文献；Hu等人在Hear. Res.《耳朵研究》113，198-206中发表的文献)。具体的，在南美栗鼠体内施用FDA(食品及药品管理局)认可的抗氧化化合物(N-L-乙酰半胱氨酸(L-NAC)以及水杨酸盐)能够减轻噪声诱发的听力缺失(参见Kopke等人于2000年在Hear. Res.《耳朵研究》149，138-146中发表的文献)。此外，Harris等人近期描述了利用Src-蛋白酪氨酸激酶抑制剂预防噪声诱发的听力缺失(NIHL)(参见Harris等人于2005年在Hear.Res.《耳朵研究》208，14-25中发表的文献)。因此，可以设想，施用本发明所述的调控激酶活性的化合物能够有效的治疗听力缺失。细胞粘着或者细胞压力的改变能够通过整联蛋白的激活以及蛋白酪氨酸激酶的磷酸化作用激活各种信号，其中所述的蛋白酪氨酸激酶包括Src家族酪氨酸激酶。Src的相互作用与修饰细胞骨架的信号途径发生关联，并且激活了各种蛋白激酶级联，这些蛋白激酶级联控制细胞的存活以及基因的转录(参见Giancotti与Ruoslahti于1999年在Science《科学》285，1028-1032中发表的文献)。事实上，近来的研究结果已经表明，耳蜗外毛细胞(OHC)在被暴露于强烈的噪声中之后在所述的细胞底部发生分离，经受凋亡细胞的死亡。具体的，已经认为在代谢作用诱发的以及机械作用诱发的耳蜗感官细胞的细胞凋亡的发生中均涉及到所述的Src蛋白酪氨酸激酶信号级联。在一项最近的研究中，Src抑制剂为免受4小时、106dB的4kHz的倍频带噪声的影响提供了防护，这表明在被暴露于噪声中之后，耳蜗外毛细胞中的Src蛋白酪氨酸激酶可能被激活了(参见Harris等人于2005年在Hear. Res.《耳朵研究》208，14_25中发表的文献)。因此，本发明所述的能够调控Src活性的化合物能够有效的用于治疗听力缺失。本发明涉及一种预防宿主患有骨质疏松症或者治疗宿主的骨质疏松症的方法。这一方法包括向所述的宿主施用有效剂量的本发明所述的化合物，从而预防或者治疗骨质疏松症。为了预防骨质疏松症，可以在骨质疏松症发展之前施用所述的化合物。或者，可以将所述的化合物用来治疗宿主的骨质疏松症。在这种实施方式中，在骨质疏松症发生之后向所述的宿主施用所述化合物，用以减轻骨质疏松症的程度。本发明中所述的化合物可以是，例如，非ATP(三磷酸腺苷)竞争性抑制剂。本发明所述的化合物可以调控激酶信号级联，这取决于所选择的具体的侧链以及支架的修饰。本发明所述的化合物可以是一种激酶抑制剂。例如，所述化合物可以是一种蛋白酪氨酸激酶(PTK)抑制剂。所述的富含脯氨酸的酪氨酸激酶(PYK2 :也被称为细胞粘着激酶β，相关黏着斑酪氨酸激酶，或者钙依赖性酪氨酸激酶)与黏着斑激酶(FAK)属于非受体蛋白酪氨酸激酶中截然不同的家族的成员，它们是由各种胞外刺激来调节的(参见Avraham等人于2000年在Cell Signal.《细胞信号》12，123-133中发表的文献；Schla印fer等人于1999年在Prog. Biophys. Mol. Biol.《生物物理与分子生物学研究进展》71，435-478中发表的文献)。本发明所述的化合物可以是一种Src抑制剂。已经证明，Src的缺陷与大鼠的骨质疏松症相关，这是由于破骨细胞的功能缺失导致的(参见Soriano等人于1991年在Cell《细胞》64，693-702中发表的文献)。或者，本发明所述的化合物能够调控白细胞介素_1受体相关性激酶M(IRAK-M)的表达。缺乏白细胞介素-I受体相关性激酶M的大鼠发展成为严重的骨质疏松症，这与破骨细胞的加速分化、破骨细胞的半衰期的增大、以及它们的活化相关(参见Hongmei等人于2005年在J. Exp. Med.《药学专家杂志》201，1169-1177中发表的文献)。多核破骨细胞来自于单核噬菌细胞的融合，并且在骨的形成以及重塑中起到重要的作用，这种作用是通过骨的再吸收来实现的。破骨细胞是多核的、末端分化的细胞，能够降解矿化的基质。在正常的骨组织中，在由造骨细胞引起的骨的形成与由破骨细胞引发的骨的再吸收之间存在一种平衡。当这种动态的并且高度规则的过程中的平衡被破坏时，骨的再吸收会超过骨的形成，从而导致定量的骨损失。由于破骨细胞对于骨的形成以及重塑是必不可少的，增加其数量和/或活性会导致与全身的骨损失相关的疾病的产生(例如，骨质疏松症)，也会导致其他与局部的骨损失相关的疾病的产生(例如，风湿性关节炎，牙周疾病)。破骨细胞以及造骨细胞均支配涉及蛋白激酶的多数的细胞信号途径。破骨细胞的活化是由骨的粘着、细胞骨架的重新排列、封闭带(sealing zone)的形成、以及极性波缘膜的形成所引发的。可以确信，蛋白酪氨酸激酶2(PYK2)参与了信号从所述的细胞表面至所述的细胞骨架的传递，因为在破骨细胞中由粘着所引发的信号使其发生了酪氨酸的磷酸化以及活化(参见Duong等人于1998年在J. Clin. Invest《临床研究杂志》· 102，881-892中发表的文献)。近来的证据已经表明，蛋白酪氨酸激酶2(PYK2)蛋白水平的降低导致了对于体外破骨细胞的形成以及骨的再吸收的抑制(参见Duong等人于2001年在J. Biol. Chem.《生物化学杂志》276，7484-7492中发表的文献)。因此，对于蛋白酪氨酸激酶2 (PYK2)或者其他蛋白酪氨酸激酶的抑制可能通过减少破骨细胞的形成以及骨的再吸收，从而降低骨质疏松的程度。因此，尽管不希望受到理论的限制，但可以设想，施用本发明所述的化合物将能够调控激酶(例如，蛋白酪氨酸激酶)的活性并且因此导致对于破骨细胞的形成和/或骨的再吸收的抑制，从而治疗骨质疏松症。Src酪氨酸激酶作为用于骨疾病的有希望的治疗靶向，其作用已经被Src剔除小鼠的研究以及体外细胞试验所证实，这表明Src在破骨细胞(阳性)以及造骨细胞(阴性)中起到有规则的作用。在破骨细胞中，Src在运动性、极性、存活性、活化(皱褶缘的形成)以及粘着中起到关键的作用，这种作用是通过介导各种信号转导途径，特别是细胞因子以及整联蛋白信号来实现的(参见Parang与Sun于2005年在Expert Opin. Ther. Patents《治疗学专利的专家观点》15，1183-1207中发表的文献)。此外，大鼠的Src基因的靶向破坏诱发了骨质疏松症，并且在其他的组织或者细胞中不表现出任何明显的形态学异常或者功能异常，其中所述的骨质疏松症是一种以骨的再吸收的减少为特征的障碍(参见Soriano等人于1991年在Cell《细胞》64，693-702中发表的文献)。所述的骨质疏松性显型src+大鼠是细胞自治的，并且其成因是成熟破骨细胞的缺失，其通常表达高水平的Src蛋白(参见Horne等人于1991年在Cell《细胞》119，1003-1013中发表的文献)。通过限制Src酪氨酸激酶的有效性，Src抑制剂被认为能够减轻骨的分解并且促进骨的形成，其中所述的Src酪氨酸激酶能够激发破骨细胞的活性并且抑制造骨细胞。由于破骨细胞通常表达高水平的Src，对于Src激酶活性的抑制对于骨质疏松症的治疗而言可能是有效的(参见Missbach等人于1999年在Bone《骨》24，437-449中发表的文献)。因此，本发明中所述的能够调控所述Src活性的所述蛋白酪氨酸激酶(PTK)抑制剂能够有效的用于治疗骨质疏松症。正如本发明中所述，本发明中所述的化合物可以被用来保护宿主避免患上肥胖症或者预防宿主的肥胖症。为了保护宿主避免患上肥胖症，可以在肥胖症形成之前向宿主施用所述的化合物。或者，所述的化合物可以被用来治疗宿主的肥胖症。本发明所述的化合物可能涉及到激酶信号级联的调控，例如，是一种激酶抑制剂，非AIP竞争性抑制剂，酪氨酸激酶抑制剂，蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂，或者蛋白酪氨酸磷酸酶IB抑制剂。肥胖症与糖尿病以及在胰岛素应答组织中出现的胰岛素抗性的增强有关联，其中所述的胰岛素应答组织是例如骨骼肌，肝脏，以及白色脂肪组织(参见Klaman等人于2000年在Mol. Cell. Biol.《分子细胞生物学》20，5479-5489中发表的文献)。胰岛素在葡萄糖稳态、脂质代谢、以及能量平衡的调节中起到至关重要的作用。胰岛素信号是由于胰岛素与所述的胰岛素受体(IR)发生结合而引发的，所述的胰岛素受体是一种受体酪氨酸激酶。胰岛素的结合唤起了磷酸化事件的级联，其开始于所述的胰岛素受体(IR)在多发性(multiple)酪氨酰残基上的自动磷酸化作用。自动磷酸化作用增强了胰岛素受体(IR)的激酶活性并且激发了下游的信号事件。蛋白酪氨酸激酶的刺激效应以及蛋白酪氨酸磷酸酶的抑制效应很大程度上定义了所述胰岛素的作用。适当的胰岛素信号将血糖浓度的大幅度 波动降低到最小，并且确保将足够的葡萄糖运送至细胞。由于胰岛素的刺激导致了多发性酪氨酰磷酸化事件的发生，因而增强一种或者多种蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)的活性能够导致胰岛素抗性的产生，其可以导致肥胖症。事实上，已经报道在包括肥胖症在内的几种胰岛素抗性状态中存在增强的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)活性(参见Ahmad等人于1997年在Metabolism《代谢学》46，1140-1145中发表的文献)。因此，尽管不希望收到理论的限制，但施用本发明所述的化合物能够调控激酶(例如，蛋白酪氨酸磷酸酶)的活性，从而治疗宿主的肥胖症。胰岛素信号开始于经由酪氨酸的磷酸化作用而发生的胰岛素受体(IR)的活化，并且在由葡萄糖转运蛋白GLUT4将葡萄糖吸收至细胞中时达到顶点(参见Saltiel与Kahn于2001年在Nature《自然》414，799-806中发表的文献)。随后必须对上述活化的胰岛素受体进行灭活，并且返回到基态，可以确信这一过程中涉及到蛋白酪氨酸磷酸酶-IB(PTP-IB)(参见Ahmad等人于1997年在J. Biol. Chem.《生物化学杂志》270，20503-20508中发表的 文献)。对大鼠体内编码蛋白酪氨酸磷酸酶-IB(PTP-IB)的基因进行破坏，会导致胰岛素敏感并且增加对由膳食诱发的肥胖症的抗性(参见Elchebly等人于1999年在Science《科学》283，1544-1548中发表的文献；Klaman等人于2000年在Mol. Cell. Biol.《分子细胞生物学》20，5479-5489中发表的文献)。蛋白酪氨酸磷酸酶-IB缺陷型大鼠的肥胖程度的减轻的原因是脂肪细胞群的显著减少，而不是脂肪细胞数量的减少(参见Klaman等人于2000年在Mol. Cell. Biol.《分子细胞生物学》20，5479-5489中发表的文献)。此外，蛋白酪氨酸磷酸酶-IB缺陷型大鼠的消瘦伴随着基础代谢率以及总能量消耗的增加，而解耦联蛋白mRNA的表达没有发生显著的改变。对于蛋白酪氨酸磷酸酶-IB基因的破坏证明，改变蛋白酪氨酸磷酸酶-IB的活性能够调控体内的胰岛素信号以及由膳食诱发的肥胖症。因此，尽管不希望受到理论的限制，但施用本发明所述的能够调控胰岛素信号(例如，蛋白酪氨酸磷酸酶-IB活性)的化合物，能够有效的治疗宿主的肥胖症。正如本发明中所述，本发明中的所述化合物能够被用来保护宿主避免患上糖尿病或者预防宿主的糖尿病。为了保护宿主避免患上糖尿病，可以在糖尿病形成之前向宿主施用所述的化合物。或者，所述的化合物可以被用来治疗宿主的糖尿病。本发明所述的化合物可能涉及到激酶信号级联的调控，例如，是一种激酶抑制剂，非AIP竞争性抑制剂，酪氨酸激酶抑制剂，第10号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)抑制剂，或者含SH2结构域的II型肌醇5’磷酸酶(SHIP 2)抑制剂。II型糖尿病(T2DM)是一种错配(dysregulated)能量代谢障碍。能量代谢很大程度上受到激素胰岛素的控制，激素胰岛素是一种有效的合成代谢制剂，其促进蛋白质、碳水化合物以及脂质的合成以及存储，并且抑制它们的分解以及释放回所述的循环当中。胰岛素的作用是在其与酪氨酸激酶受体发生结合时被激发的，其导致了自动磷酸化作用并且增强了所述激酶的催化活性(参见Patti等人于1998年在J. Basic Clin. Physiol.Pharmacol.《基础临床生理学与药理学杂志》9,89-109中发表的文献)。酪氨酸的磷酸化作用导致胰岛素受体底物(IRS)蛋白与磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的p85调节亚基发生相互作用，从而导致所述酶的活化并且使其命中一个特异的亚细胞位置，这取决于所述细胞的类型。所述的酶生成所述的脂质产物3，4，5-三磷酸磷脂酰肌醇(PtdIns (3,4, 5) P3)，其调节许多蛋白质的定位以及活性(参见Kido等人于2001年在J. Clin. Endocrinol. Metab. 86,972-979中发表的文献)。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)在胰岛素刺激的葡萄糖吸收以及存储、脂解作用的抑制以及肝脏基因表达的调节方面起到至关重要的作用(参见Saltiel等人于2001年在Nature《自然》414，799-806中发表的文献)。显性干扰型磷脂酰肌醇3-激酶的过表达能够阻止葡萄糖的吸收以及谷氨酸转运蛋白4GLUT4向质膜的转移(参见Quon等人于1995年Mol. Cell. Biol.《分子细胞生物学》15，5403-5411中发表的文献)。因此，施用本发明所述的能够调控激酶(例如，磷脂酰肌醇3-激酶)活性、并且因此导致葡萄糖吸收的增加的化合物，能够有效的治疗糖尿病。第10号染 色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)是许多细胞类型中的磷脂酰肌醇3-激酶信号的主要调节剂，并且由于其对于磷脂酰肌醇3-激酶途径的抗细胞凋亡、增殖性以及肥大性活性具有对抗性，因而具有肿瘤抑制剂的功能(参见Goberdhan等人于2003年在Hum. Mol. Genet.《人类分子遗传学》12，R239-R248中发表的文献)。尽管不希望受到理论的限制，但可以确信第10号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)通过所述3，4，5-三磷酸磷脂酰肌醇(PtdIns (3，4，5)P3)分子的去磷酸化作用削弱了所述的磷脂酰肌醇3-激酶途径，将这种重要的脂质第二信使降解为二磷酸_4，5-磷脂酰肌醇(PtdIns (4，5)P2)。在最近的一项研究中，利用小干扰RNA(SiRNA)减少50%的内源性第10号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)蛋白，能够增强3，4，5-三磷酸磷脂酰肌醇水平的胰岛素依赖性增加，并且增强葡萄糖的吸收(参见Tang等人于2005年在J. Biol.Chem.《生物化学杂志》280，22523-22529中发表的文献)。因此，尽管不希望受到理论的限制，但可以设想，施用本发明所.述的能够调控第10号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)的活性、并且因此导致葡萄糖吸收的增加的化合物，能够有效的治疗糖尿病。3，4，5-三磷酸磷脂酰肌醇(PtdIns (3，4，5) P3)水平同样受到含SRC同源(SH2)结构域的II型肌醇5’磷酸酶(SHIP)蛋白家族——SHIPl以及SHIP2的控制(参见Lazar与Saltiel于2006年在Nature Reviews 5，333-342中发表的文献)。含SH2结构域的II型肌醇5’磷酸酶(SHIP 2)在骨骼肌中进行表达，在其他胰岛素敏感性组织中催化3，4，5-三磷酸磷脂酰肌醇(PtdIns (3，4，5) P3)转化成二磷酸_4，5-磷脂酰肌醇(PtdIns (4，5) P2)(参见Pesesse等人于1997年在Biochem Biophys. Res. Commun.《生物化学与生物物理学研究通讯》239,697-700中发表的文献；Backers等人于2003年在Adv. Enzyme Regul.《酶调节进展》43，15-28中发表的文献；Chi等人于2004年在J. Biol. Chem.《生物化学杂志》279,44987-44995中发表的文献；Sleeman等人于2005年在Nature Med.《自然药学》11，199-205中发表的文献)。含SH2结构域的II型肌醇5’磷酸酶(SHIP 2)的过表达显著的降低了胰岛素刺激性3，4，5_三磷酸磷脂酰肌醇(PtdIns (3，4，5)P3)水平，这与被提议的含SH2结构域的II型肌醇5’磷酸酶对于磷脂酰肌醇3-激酶下游效应物质的活化的削弱能力相一致(参见Ishihara等人于1999年在Biochem. Biophys. Res. Commun.《生物化学与生物物理学研究通讯》260，265-272中发表的文献)。因此，尽管不希望受到理论的限制，但可以设想，施用本发明所述的能够调控含SH2结构域的II型肌醇5’磷酸酶(SHIP 2)的活性、并且因此导致葡萄糖吸收的增加的化合物，能够有效的治疗糖尿病。正如本发明中所述，本发明中的所述化合物能够被用来保护宿主避免患上眼部疾病或者预防宿主的眼部疾病。为了保护宿主避免患上眼部疾病，可以在眼部疾病形成之前向宿主施用所述的化合物。或者，所述的化合物可以被用来治疗宿主的眼部疾病，例如，视网膜黄斑病变，视网膜病，以及黄斑水肿。本发明所述的化合物可能涉及到激酶级联的调控，例如，是一种激酶抑制剂，非AIP竞争性抑制剂，酪氨酸激酶抑制剂，例如，血管内皮生长因子(VEGF)受体酪氨酸激酶抑制剂。
生理学上无血管的角膜可能发生威胁视力的新血管形成反应。所述的增生性视网膜病变，主要是糖尿病性视网膜病变以及与年龄相关的视网膜黄斑变性的特征是血管的渗透性增强，从而导致视网膜水肿和视网膜下液聚集，以及易于出血的新血管的增殖。血管的生成，从先前存在的毛细血管中形成新的血管的过程，是正常的生长过程以及诸多的病理过程中很重要的一部分。血管内皮生长因子(VEGF)，作为血管生成作用的复杂级联中的一种重要介导体以及一种有效的渗透因素，对于新的治疗剂而言是一个有吸引力的靶向。血管内皮生长因子是两种膜结合酪氨酸激酶受体的配位体，所述的两种膜结合酪氨酸激酶受体是血管内皮生长因子受体-I (VEGFR-I)以及血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)。配位体的结合触发了血管内皮生长因子受体的二聚作用以及转磷酸化作用，并且随后伴随着胞内酪氨酸激酶结构域的活化。继而发生的胞内信号轴导致了血管内皮细胞的增殖、迁移、以及存活。因此，尽管不希望受到理论的限制，但可以设想，施用本发明中所述的化合物能够有效的治疗眼部疾病，例如，视网膜黄斑病变，视网膜病变和/或黄斑水肿，其中，所述的化合物能够调控激酶活性，例如，酪氨酸激酶的活性，并且引起对于血管生成和/或新血管形成的抑制。
视网膜黄斑病变的特征是血管内皮生长因子介导的视网膜渗漏(血管渗透性的增强)以及眼底小血管的异常生长(血管生成)。已经在糖尿病性视网膜病变以及与年龄相关的视网膜黄斑变性中的新血管膜中识别出了血管内皮生长因子，并且在糖尿病性视网膜病变中，新血管形成的严重程度与上述因子的眼内水平存在关联(参见Kvanta等人于1996年在Invest. Ophthal. Vis. Sci.《调查性眼科学与视觉科学》37，1929-1934中发表的文献；Aiello等人于1994年在N. Engl. J. Med.《新英格兰医学杂志》331，1480-1487中发表的文献)。血管内皮生长因子在这些模型中的治疗对抗性导致视网膜新血管形成以及脉络膜新血管形成被显著的抑制，同时也导致了血管渗透性的降低(参见Aiello等人于1995年在Proc. Natl. Acad. Sci.《美国科学院院刊》，美国，92，10457-10461中发表的文献；Krzystolik等人于2002年在Arch. Ophthal.《眼科学档案》120，338-346中发表的文献；Qaum等人于2001年在Invest. Ophthal. Vis. Sci.《调查性眼科学与视觉科学》42,2408-2413中发表的文献)。因此，尽管不希望受到理论的限制，但可以设想，施用本发明中所述的化合物能够有效的治疗眼部疾病，例如，视网膜黄斑病变，视网膜病变和/或黄斑水肿，其中，所述的化合物能够调控血管内皮生长因子的活性，并且引起对于血管生成和/或新血管形成的抑制。 本发明中所述的化合物可以被用于治疗、预防、改善宿主的脑卒中的方法中，其中所述的宿主具有患上脑卒中的危险、正患有脑卒中或者曾经患有过脑卒中。本发明所述的化合物能够被用在治疗处于脑卒中后恢复期的患者的方法中。脑卒中，也被称为脑血管意外(CVA)，是一种急性的神经损伤，是由于动脉的封闭或者血管的破裂而导致的大脑部分区域的血液供应阻断。所述的血液供应被阻断的大脑部分区域不再接收到由所述血液带来的氧和/或营养。所述的脑细胞被损坏或者坏死，从而削弱了那部分大脑区域具有的功能以及来自于那部分大脑区域的功能。如果氧气被剥夺超过60至90秒，脑组织将终止其功能，并且在几分钟之后将遭受不可逆的损伤，可能导致所述组织的死亡，即，梗死。脑卒中被划分成两种主要的类型缺血性的，S卩，供应给脑部的血管发生封闭，以及出血性的，即，血液流至脑部内或者脑部周围。所有的脑卒中多半都是缺血性脑卒中。缺血性脑卒中通常被分成血栓形成性脑卒中，栓塞性脑卒中，系统性低灌注(分水岭脑卒中)，或者静脉血栓。在血栓形成性脑卒中中，血栓形成的过程发生在被感染的动脉内，所述的血栓，即血液凝块儿，使得所述的动脉内腔逐渐变窄，从而组织血液流向末梢组织。这些凝块儿通常形成在动脉粥样硬化斑块的周围。有两种类型的血栓形成性脑卒中，它们是根据形成所述血栓的血管的类型来分类的。大血管血栓形成性脑卒中包括普通颈动脉以及颈内动脉，脊椎，以及Willis环。小血管血栓形成性脑卒中包括所述的大脑内动脉，Willis环分支，大脑中动脉主干，以及发于所述末梢脊椎和基底动脉的动脉。血栓，即使是非闭塞性的，也能够导致栓塞性脑卒中，只要所述的血栓在其成为栓塞处发生中断。栓塞指的是在发源于别处的动脉血流中存在的移动的粒子或者碎片。栓塞性脑卒中指的是由栓塞引起的到达大脑部分区域的动脉通路的封闭。栓塞通常都是血液凝块儿，但其也可以是一个从动脉粥样硬化的血管中脱落的斑块，或者是许多其他的物质，包 括脂肪，空气，并且甚至是癌细胞。由于栓塞是来自于别处的，因而局部治疗仅仅能解决临时性的问题。因此，必须识别出所述栓塞的来源。有四种类型的栓塞性脑卒中具有已知的心脏来源的；具有可能的心脏来源或者大动脉来源的(来自于经胸廓超声心动图或者经食管超声心动图)；具有动脉来源的；以及具有未知来源的。系统性低灌注是指流向身体的所有部分的血液减少。其最常见的原因是由于心搏停止或者心律不齐、或者心脏输出量的减少而导致的心脏泵的衰竭，而这些都是由心肌梗塞、肺部栓塞、心包积液、或者流血造成的。血氧不足(即，低血氧含量)可能促进了所述的低灌注。由于这种血液流动的减少是全局性的，脑部的所有部分都可能受到影响，特别是所述的“分水岭”区域，这一区域是由主要的脑动脉供给的边缘带区域。血液流动至这些区域不必然停止，但取而代之的是，可能在脑部损伤发生处血液流动降低。脑部静脉的功能是将所述的血液排放回身体。当静脉由于形成血栓的原因而发生闭塞，所述的血液排放被阻滞并且所述的血液倒流，引发脑水肿。这种脑水肿能够导致缺血性脑卒中以及出血性脑卒中。这通常发生在罕见疾病窦静脉血栓形成中。利用本领域已知的各种技术中的一种或者多种在宿主或者患者体内诊断脑卒中，所述的技术是例如，神经系统检查，血液检测，CT扫描(不利用对比度增强手段)，MRI (磁共振成像)扫描，多普勒超声，以及动脉造影术(即，在所述血流中注射进不透射线的物质之后，动脉的X光片)。如果通过造影证实了脑卒中，则进行各种其他的研究，以确定是否存在外围来源的栓塞。这些研究包括，例如，针对所述颈动脉的超声/多普勒研究(用来检测颈动脉狭窄)；心电图(ECG)以及超声波心动图(用来识别心律不齐以及作为结果产生的心脏凝块儿，所述的心脏凝块儿能够通过血流蔓延至脑血管中);霍尔特氏心电图研究，用来识别间歇性心律不齐，以及大脑血管系统的血管造影片(如果认为出血是来源于动脉瘤或者动静脉畸形)。能够被用于这些治疗、预防或者改善脑卒中或者与脑卒中相关的症状的方法中的化合物，是能够在脑卒中之中或者之后调控激酶信号级联行动的化合物。在某些实施方式中，所述的化合物是一种激酶抑制剂。例如，所述的化合物是一种酪氨酸激酶抑制剂。在一种实施方式中，所述的酪氨酸激酶抑制剂是一种Src抑制剂。例如，能够被用于本发明中所述的这些治疗、预防或者改善脑卒中或者与脑卒中相关的症状的方法中的化合物是一种在脑卒中之中或者之后的激酶信号级联行动的变构抑制剂。优选的，能够被用于本发明中所述的这些治疗、预防或者改善脑卒中或者与脑卒中相关的症状的方法中的化合物是一种在脑卒中之中或者之后的激酶信号级联行动的非ATP竞争性抑制剂。已经表明，在脑卒中的过程中对于Src活性的抑制能够提供对于大脑的保护(参见Paul等人(于2OOl年)在Nature Medicine《自然医学》vol.(卷)7 (2) 222-227中发表的文献，上述文献的全部内容在此引入作为参考)。血管内皮生长因子(VEGF)，它的产生是为了对缺血性损伤进行应答，已经证明它能够提高血管的渗透性。研究表明，在发生脑卒中之后，所述的Src激酶能够调节大脑中由血管内皮生长因子介导的血管渗透性(VP)，而在脑卒中之前以及之后施用Src抑制剂减轻了水肿，增加了脑部的灌注并且在损伤发生之后减小了梗塞的体积(参见Paul等人于2001年发表的文献)。因此，Src抑制剂能够有效的用于预防、治疗或者改善脑卒中发生之后的次级损伤。本发明所述的化合物能够预防、治疗或者改善脑卒中或者与脑卒中相关的症状。 脑卒中的症状包括突发麻痹或者虚弱，特别是发生在身体的一侧；话语的突发混淆或者困难或者言语不清；单眼或者双眼的突发视觉困难；突发的行走困难，头昏眼花，或者丧失平衡或丧失协调性；或者是无已知缘由的突发的严重头痛。对于脑卒中的治疗通常分为三个阶段预防，脑卒中发生之后立即采取的治疗，以及脑卒中后的恢复。预防首发或者复发脑卒中的治疗是以治疗脑卒中的潜在危险因素为基础的，所述的潜在危险因素是例如，高血压，高胆固醇，心房颤动，以及糖尿病。急性脑卒中的治疗是尝试在脑卒中发生的时候对其进行终止，通过快速溶解引起缺血性脑卒中的血液凝块儿或者通过阻止出血性脑卒中的流血的方式。脑卒中后的恢复是帮助个体克服由脑卒中的损伤所导致的伤残。药物治疗是最常见的治疗脑卒中的方法。用于预防或者治疗脑卒中的最常见的药物类型是抗血栓形成剂(例如，抗斑块剂以及抗凝血剂)以及血栓溶解齐Li。向患者施用所述的化合物，其中所述的患者具有患脑卒中的危险、正患有脑卒中或者曾经患有脑卒中，施用的时间是在脑卒中的发生之前、发生的过程中、发生之后、以及上述时机的任意组合。本发明中所述的化合物可以单独施用，以药物组合物的形式施用，或者与各种已知的治疗中的任意一种进行组合治疗，所述的已知的治疗是，例如，抗斑块药物(例如，阿司匹林，克拉匹多，双嘧达莫)，抗凝血剂(例如，华法林)，或者溶解血栓类药物(例如,组织型纤溶酶原激活因子(t-PA)，瑞替普酶(reteplase)，尿激酶，链激酶，替奈替普酶(tenectaplase),兰替普酶(Ianoteplase),或者阿尼普酶(anistreplase))。本发明中所述的化合物能够被用于治疗、预防、改善宿主的动脉硬化症或者由动脉硬化症带来的症状的方法，其中所述的宿主具有患动脉硬化症的危险或者患有动脉硬化症。动脉硬化症是一种影响动脉血管的疾病，并且其通常被称为动脉的“硬化”。它是由所述动脉内的多个斑块的形成所引发的。动脉粥样硬化斑块尽管可以通过动脉的扩张来补救，但其最终会导致斑块的破裂以及动脉的狭窄(即，变窄)，上述情况继而会导致由所述动脉供血的器官的血液供应补足。或者，如果用于进行补救的动脉扩张处理过度，会导致动脉瘤的最终结果。这些并发症是慢性的、缓慢发展的并且是累积的。最常见的，柔软的斑决突然破裂，引发血液凝块儿的形成(即，血栓)，所述的血液凝块儿迅速的减慢或者终止血液流动，上述情况继而会导致由上述动脉供血的组织死亡。这种灾变性事件被称为梗死。例如，冠状动脉患有的冠状动脉血栓症会引发心肌梗塞，通常被认为是心脏病发作。当动脉粥样硬化斑块缓慢的堵塞冠状动脉的内衬并且随后突然破裂，完全的封闭所述动脉并且阻止血液向下游流动时，就会发生心肌梗塞。利用各种临床检测和/或实验室检测中的任意一种为患者诊断动脉硬化症以及急性心肌梗塞，所述的临床检测和/或实验室检测例如是，身体检查，放射性检查或者超声波检查以及血液分析。例如，医生或者临床医师可以听诊患者的动脉，以检测一种异常移动的声响，被称为杂音(bruit)。当将听诊器放置于受到影响的动脉之上时，可以听到杂音。或者，或此外，临床医师或者内科医师可以检查脉搏，例如在腿上或者在脚上，查看其异常状况例如脉搏微弱或者缺乏脉搏。所述的内科医师或者临床医师可以进行血液研究，来检查胆固醇水平或者检查心肌酶水平，例如肌酸激酶，肌钙蛋白以及乳酸脱氢酶，查看其异常状况。例如，肌钙蛋白亚基I或者T对于所述的心肌层具有强烈的特异性，其在永久性损伤形成之前开始升高。在胸部疼痛发作时阳性肌钙蛋白的出现能够准确的预测出在不久的将来将发生心肌梗塞的高度可能性。用于诊断动脉硬化症和/或心肌梗塞的其他检测包括，例如，测量宿主的心跳速率以及规律的EKG(心电图)；测量踝肱指数的胸部X光，其利用踝 部的血压与臂部的血压进行比较；动脉的超声分析；目标区域的CT扫描；血管造影术；运动负荷试验，核素心脏扫描；以及心脏的磁共振成像(MRI)与心脏的正电子发射断层(PET)扫描。能够被用于这些治疗、预防或者改善动脉硬化症或者由动脉硬化症带来的症状的方法中的化合物，是能够调控患者的激酶信号级联的化合物，其中所述的患者具有患动脉硬化症的危险或者患有动脉硬化症。在某些实施方式中，所述的化合物是一种激酶抑制剂。例如，所述的化合物是一种酪氨酸激酶抑制剂。在一种实施方式中，所述的酪氨酸激酶抑制剂是一种Src抑制剂。优选的，能够被用于本发明中所述的治疗、预防或者改善动脉硬化症或者由动脉硬化症带来的症状的方法中的化合物是一种动脉硬化症所涉及的激酶信号级联的变构抑制剂。优选的，能够被用于本发明中所述的治疗、预防或者改善动脉硬化症或者与动脉硬化症相关的症状的方法中的化合物是一种动脉硬化症所涉及的激酶信号级联的非ATP竞争性抑制剂。由Src引起的细胞信号转导被认为在血管渗透性的增强中起到关键性的作用，血管的渗透性被称为血管渗透性(VP)。血管内皮生长因子(VEGF)，它的产生是为了对缺血性损伤进行应答，已经表明它能够提高血管的渗透性，其中所述的缺血性损伤包括，例如心肌梗塞。研究表明，对于Src激酶的抑制降低了由血管内皮生长因子介导的血管渗透性(VP)(参见 Parang 与 Sun (于 2005 年)在 Expert Opin. Ther. Patents《治疗学专利的专家观点》vol.(卷)15(9) :1183-1206中发表的文献，上述文献的全部内容在此引入作为参考)。经过Src抑制剂处理过的大鼠表明，与未经处理的大鼠相比，在心肌梗塞之后与血管的外伤或者损伤相关联的组织损伤降低了(参见，例如，由Cheresh等人申请的美国专利申请No. 20040214836以及No. 20030130209，上述文献的全部内容作为整体在此引入作为参考)。因此，Src的抑制能够有效的用于预防、治疗或者改善由于动脉硬化症而产生的损伤所带来的次级损伤，例如，心肌梗塞。本发明中所述的化合物能够预防、治疗或者改善脑卒中或者与动脉硬化症相关的症状。动脉硬化症通常不会产生症状，直至其严重的使动脉变窄或者限制血液流动，或者直至其引发突发性障碍。症状取决于形成所述斑块或者变窄的部位，例如，在心脏中，脑部，其他重要器官以及腿部，或者甚至是身体的任何一处。动脉硬化症的初始症状可能是疼痛或者抽筋，当身体需要更多氧气的时候，例如运动的过程中，当人由于心脏缺氧而感觉胸部疼痛(绞痛)的时候，或者由于腿部缺氧而感觉腿部抽筋的时候。为大脑提供血液的动脉的变窄可能导致头晕眼花或者短暂性缺血性发作(TIA’s)，在这种情况下，脑卒中的症状以及迹象将持续至少24小时。典型的，这些症状是逐步发展的。心肌梗塞的症状被定义为不同程度的胸部疼痛、不适、发汗、虚弱、恶心、呕吐、以
及心律不齐，有些时候会导致失去知觉。胸部疼痛是急性心肌梗塞的最常见的症状，并且通常被描述为紧缩感、压迫感、或者压榨感。疼痛可能蔓延至下颌，颈部，臂部，背部，以及上腹部，最通常蔓延至左臂或者颈部。当胸部疼痛持续时间超过30分钟时，其更有可能是由心肌梗塞引发的。患有心肌梗塞的患者可能表现出呼吸短促(呼吸困难)，特别是当心肌收缩性的减弱是由于所述的梗塞足以引发左心室衰竭以及肺部充血或者甚至肺部水肿而产生的情况。 本发明所述的化合物可以单独施用，以药物组合物的形式施用，或者与各种已知的用于动脉硬化症的治疗中的任意一种进行组合治疗，所述的已知的用于动脉硬化症的治疗是，例如，降胆固醇类药物(例如，他汀类)，抗斑块药物，或者抗凝血剂。本发明中所述的化合物能够被用在治疗、预防、改善宿主的神经性疼痛或者由神经性疼痛带来的症状的方法中，其中所述的神经性疼痛是例如慢性神经性疼痛，所述的宿主具有患神经性疼痛的危险、患有神经性疼痛、或者曾经患有神经性疼痛。神经性疼痛，也被称为神经痛，其本质上异于正常的伤害感受性疼痛。神经性疼痛通常呈现出持续稳定的烧灼感和/或“发麻(pins and needles) ”感和/或“电击(electricshock) ”感。伤害感受性疼痛与神经性疼痛之间的差异的原因在于一个“正常(ordinary) ”的事实，伤害感受性疼痛所刺激的仅仅是疼痛神经，而神经病通常在同一区域内同时导致对疼痛感觉神经以及非疼痛感觉神经(例如,负责应答触觉、温暖、凉爽的神经)的刺激,从而产生了脊髓以及大脑在正常状态下不会接收到的信号。神经性疼痛是一种复杂的、慢性的疼痛状态，并且通常伴随着组织损伤。发生神经性疼痛时，所述的神经纤维本身可能被破坏、功能紊乱或者损伤。这些被破坏的神经纤维向其他疼痛中心发出不正确的信号。所述的神经纤维损伤所带来的影响包括在所述损伤的位点处以及所述损伤周围的区域发生神经功能的变化。利用本领域已知的各种实验室技术和/或临床技术中的一种或者多种为宿主或者患者诊断神经性疼痛，所述的实验室技术和/或临床技术例如是，身体检查。能够被用于这些治疗、预防或者改善神经性疼痛或者与神经性疼痛相关的症状的方法中的化合物，是能够调控在神经性疼痛中所涉及到的激酶信号级联的化合物，其中所述的神经性疼痛是例如慢性神经性疼痛。在某些实施方式中，所述的化合物是一种激酶抑制剂。例如，所述的化合物是一种酪氨酸激酶抑制剂。在一种实施方式中，所述的酪氨酸激酶抑制剂是一种Src抑制剂。优选的，能够被用于本发明中所述的治疗、预防或者改善神经性疼痛或者由神经性疼痛带来的症状的方法中的化合物是一种神经性疼痛所涉及的激酶信号级联的变构抑制剂。优选的，能够被用于本发明中所述的治疗、预防或者改善神经性疼痛或者由神经性疼痛带来的症状的方法中的化合物是一种神经性疼痛中所涉及的激酶信号级联的非ATP竞争性抑制剂。已经证明，c-Src能够调节N-甲基_D_天冬氨酸(NMDA)受体的活性(参见Yu等人(于1999年)在Proc. Natl. Acad. Sci.《美国科学院院刊》，美国，vol.(卷)96 :7697_7704中发表的文献，上述文献的全部内容在此引入作为参考)。研究表明，PP2，一种低分子量的Src激酶抑制剂，降低了所述的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体匪2亚基的磷酸化作用(参见Guo等人(于2002年)在J. Neuro.《神经学杂志》vol.(卷)22 =6208-6217中发表的文献，上述文献的全部内容在此引入作为参考)。因此，对于Src的抑制继而抑制了所述N-甲基-D-天冬氨酸受体的活性，能够有效的用于预防、治疗或者改善神经性疼痛，例如慢性神经性疼痛。本发明所述的化合物能够预防、治疗或者改善神经性疼痛或者由神经性疼痛带来 的症状，其中所述的神经性疼痛是例如慢性神经性疼痛。神经性疼痛的症状包括击打疼痛以及烧灼疼痛，刺痛以及麻痹。本发明所述的化合物可以单独施用，以药物组合物的形式施用，或者与各种已知的治疗中的任意一种进行组合治疗，所述的已知的治疗是，例如，止痛剂，类阿片，三环类抗抑郁药物，抗痉挛药物以及复合胺去甲肾上腺素再吸收抑制剂。本发明所述的化合物能够被用在治疗、预防、改善宿主的B型肝炎或者由B型肝炎带来的症状的方法中，其中所述的宿主具有患B型肝炎的危险，或者患有B型肝炎。所述的B型肝炎病毒，是嗜肝DNA病毒家族中的一个成员，由一种蛋白质核心例子与包埋该蛋白的外层脂质基包膜组成，其中所述的蛋白质核心例子中含有病毒基因组，所述的病毒基因组以带有单链区域的双链DNA的形式存在。所述的包膜蛋白参与了病毒的结合以及向易感染细胞中的释放。所述的内衣层(inner caps id)重新部署了在病毒mRNA发生转录的细胞核中的DNA基因组。生成了三种编码所述包膜蛋白的次基因组转录体，以及一种编码所述的X蛋白的转录体。第四个前基因组RNA进行转录，其被输出至细胞溶质中并且对所述的病毒聚合酶以及核心蛋白进行了翻译。聚合酶以及前基因组RNA在装配核心例子时发生壳体化，所述的聚合酶蛋白使得从前基因组RNA至基因组DNA的逆转录发生。之后，所述的成熟的核心例子经由正常的分泌途径离开了所述的细胞，在离开的途中获得了包膜。B型肝炎是少数几个已知的将逆转录作为复制过程中的一部分的非逆转录病毒中的一个。其他的利用逆转录的病毒包括，例如，人T细胞白血病病毒(HTLV)或者人类免疫缺陷病毒(HIV)。在B型肝炎病毒(HBV)的感染过程中，所述的宿主免疫应答负责对肝细胞的损伤以及病毒的清除产生应答。由于先天性的免疫应答在这些过程中不起到主要的作用，适应性的免疫应答，特别是病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)，促成了与B型肝炎病毒的感染相关的几乎全部的肝损伤。通过杀死被感染细胞，以及通过生成能够从存活的肝细胞中清除B型肝炎病毒的抗病毒细胞因子，细胞毒性T淋巴细胞也能够清除所述的病毒。尽管肝损伤是由所述的细胞毒性T淋巴细胞引发并且介导的，但抗原非特异性炎性细胞能够恶化由细胞毒性T淋巴细胞诱导的免疫病理学作用，而血小板能够促进细胞毒性T淋巴细胞在肝脏中的积累。可以利用各种临床检测和/或实验室检测中的任意一种为患者诊断B型肝炎，所述的临床检测和/或实验室检测是例如，身体检查，以及血液分析或者血清分析。例如，对血液或者血清进行检测，看其中是否存在由所述的宿主产生的病毒抗原和/或抗体。在一项常规的B型肝炎检测中，对B型肝炎表面抗原(HBsAg)进行探测，用来筛选是否存在感染。在受到某一病毒感染的过程中，第一个出现的可以被探测到的是该病毒的抗原；然而，在感染的前期，这种抗原可能并不存在，并且在所述感染的后期可能探测不到这种抗原，因为它已经被所述的宿主清除了。在这个“空窗期(window)”，所述的宿主仍旧处于感染状态但其已经成功的清除了所述的病毒，所述的B型肝炎核心抗原的免疫球蛋白M(IgM)抗体(anti-HBc IGM)可能是该疾病的唯一的血清学证据。
在B型肝炎表面抗原(HBsAg)出现后不久，另外一种名字叫做B型肝炎e抗原(HBeAg)的抗原也将出现。传统意义上，宿主血清中B型肝炎e抗原的出现与病毒复制的超高速率相关；然而，所述的B型肝炎病毒的某些变异体根本不产生所述的“e”抗原。在所述感染发生的自然过程中，所述的B型肝炎e抗原可能被清除，并且在此之后针对所述“e”抗原的抗体(anti-HBe)将立即出现。这种转变通常与病毒复制的戏剧性衰退有关联。如果所述的宿主有能力清除所述感染，最终所述的B型肝炎表面抗原将变得不可探测，并且随后针对所述的B型肝炎表面抗原的抗体(anti-HBs)也将变得不可探测。B型肝炎表面抗原呈阴性、但针对B型肝炎表面抗原的抗体呈阳性的人，可能是已经清除了感染，或者是先前接种过疫苗。许多B型肝炎表面抗原呈阳性的人可能存在非常稀少的病毒繁殖，并且因此其患有长期并发症的危险很小，或者将这种感染传播给别人的危险很小。能够被用于这些治疗、预防或者改善B型肝炎或者由B型肝炎带来的症状的方法中的化合物，是能够调控患者的激酶信号级联的化合物，其中所述的患者具有患B型肝炎的危险，或者患有B型肝炎。在某些实施方式中，所述的化合物是一种激酶抑制剂。例如，所述的化合物是一种酪氨酸激酶抑制剂。在一种实施方式中，所述的酪氨酸激酶抑制剂是一种Src抑制剂。优选的，能够被用于本发明中所述的治疗、预防或者改善B型肝炎或者由B型肝炎带来的症状的方法中的化合物是一种B型肝炎所涉及的激酶信号级联的变构抑制齐U。优选的，能够被用于本发明中所述的治疗、预防或者改善B型肝炎或者与B型肝炎相关的症状的方法中的化合物是一种B型肝炎中所涉及的激酶信号级联的非ATP竞争性抑制剂。Src在B型肝炎病毒的复制中发挥作用。所述的病毒编码的转录因子HBx在所述的B型肝炎病毒的传播所需的步骤中激活Src (参见，例如，Klein等人(于1999年)在EMBO J. ((EMBO杂志》vol.(卷)18 =5019-5027中发表的文献；Klein等人(于1997年)在Mol. Cell. Biol.《分子细胞生物学》vol.(卷)17 =6427-6436中发表的文献)，上述文献的全部内容在此引入作为参考)。因此，对于Src的抑制继而抑制了由Src介导的B型肝炎病毒(HBV)的传播，能够有效的用于预防、治疗或者改善B型肝炎或者由B型肝炎所带来的症状。本发明所述的化合物能够预防、治疗或者改善B型肝炎或者与B型肝炎相关的症状。B型肝炎的症状通常在被暴露于所述细菌中的30-180天内出现。然而，在所述被B型肝炎病毒感染的人中，有达到半数的人没有出现症状。所述B型肝炎的症状通常被比喻成流感，并且包括，例如，食欲不佳；疲劳；恶心以及呕吐，浑身瘙痒；肝脏疼痛(例如，腹部的右侧，下胸腔的下方)，黄疸，以及排泄功能的变化。
本发明所述的化合物可以单独施用，以药物组合物的形式施用，或者与各种已知的用于B型肝炎的治疗中的任意一种进行组合治疗，所述的已知的治疗是，例如，α干扰素，拉米夫定(Epivir-HBV)以及博路定(恩替卡韦)。正如本发明中所述，本发明所述的化合物可以被用来调节宿主的免疫系统活性，从而保护其避免患有或者预防自身免疫性疾病，例如，风湿性关节炎，多发性硬化症，脓血症以及狼疮，以及移植排斥和过敏性疾病。或者，所述的化合物可以被用来治疗宿主的自身免疫性疾病。例如，所述的化合物可能导致宿主的自身免疫性疾病的症状的严重程度的减轻，或者终止所述宿主的自身免疫性疾病即将进行的恶化。本发明所述的化合物可能涉及到激酶信号级联的调控，例如，是一种激酶抑制剂，一种非ATP竞争性抑制剂，酪氨酸激酶抑制剂，例如，Src抑制剂，p59fyn (Fyn)抑制剂或者p561ck(Lck)抑制剂。
自身免疫性疾病是一类由自身耐受性的崩溃而引发的疾病，由于自身耐受性发生崩溃，所述的适应性免疫系统对自身抗原进行应答，并且介导细胞以及组织的损伤。自身免疫性疾病可能是器官特异性的(例如，甲状腺炎或者糖尿病)，或者是全身性的(例如，全身性红斑狼疮)。T细胞调控着所述的适应性免疫系统的由细胞介导的免疫应答。在正常的情况下，T细胞表达抗原受体(T细胞受体)，所述的抗原受体识别与自身主要组织相容性复合分子的外源蛋白质的肽片段。在T细胞受体(TCR)的刺激发生后最先被识别到的事件是Lck以及Fyn的活化，这种活化导致了存在于免疫受体酪氨酸活化基序中的酪氨酸残基上发生了 T细胞受体的磷酸化作用(参见Zamoyska等人于2003年在Immunol. Rev.《免疫学回顾》191，107-118中发表的文献)。酪氨酸激酶，例如Lck(它是蛋白质酪氨酸激酶Src家族中的一个成员)，在细胞信号以及细胞增殖的调节中起到至关重要的作用，其中所述的细胞信号以及细胞增殖是由肽以及蛋白质的酪氨酸残基的磷酸化作用导致的(参见Levitzki于2001年在Top. Curr. Chem.《现代化学论》211,1-15中发表的文献；Longati等人于2001年在Curr. Drug Targets《现代药物祀向》2,41-55中发表的文献；Qian与Weiss于1997年在Curr. Opin. Cell Biol.《细胞生物学的现代观点》9，205-211中发表的文献)。因此，尽管不希望受到理论的限制，但可以设想，施用本发明中所述的能够调控酪氨酸激酶(例如，Src)活性的化合物可以有效的用于自身免疫性疾病的治疗。上述的酪氨酸激酶Ick以及fyn均在所述的T细胞受体途径中得到活化；因此，Ick和/或fyn的抑制剂具有作为自身免疫性试剂的潜在效用(参见Palacios与Weiss于2004年在Oncogene《致癌基因》23，7990-8000中发表的文献)。Lck以及Fyn主要是由T细胞在它们大部分的生命期限内进行表达的。通过对动物以及细胞系进行的研究，已经证明了 Lck以及Fyn在T细胞的形成、动态平衡以及活化中所起的作用(参见Parang与Sun于2005年在Expert Opin. The. Patents《治疗学专利的专家观点》15，1183-1207中发表的文献)。在自身免疫性疾病以及移植排斥中涉及到Lck的活化(参见Kamens等人于2001年在Curr. Opin. Investig. Drugs《药物研究的现代观点》2,1213-1219中发表的文献)。结果表明，Ick(-) Jurkat细胞系(砷诱导淋巴细胞系)不能够增殖、生成细胞因子、并且产生胞内的钙、肌醇磷酸、以及酪氨酸的磷酸化作用的增加以应答T细胞受体的刺激(参见Straus与Weiss于1992年在Cell.《细胞》70，585-593中发表的文献；Yamasaki等人于1996年在Mol. Cell. Biol.《分子细胞生物学》16，7151-7160中发表的文献)。因此，一种抑制Ick的试剂能够有效的阻止T细胞的功能，发挥免疫抑制剂的作用，并且具有治疗自身免疫性疾病的潜在效用，例如风湿性关节炎，多发性硬化症，以及狼疮，并且在移植排斥的区域以及过敏性疾病中具有潜在效用(参见Hanke与Pollok于1995年在InflammationRes.《炎症的研究》44，357-371中发表的文献)。因此，尽管不希望受到理论的限制，但可以设想，施用本发明中所述的能够调控蛋白酪氨酸激酶Src家族中的一个或者多个成员(例如，Ick和/或fyn)的活性的化合物可以有效的用于自身免疫性疾病的治疗。本发明涉及本质上纯的N-苯甲基-2-(5-(4-(2_吗啉基乙氧基)苯基)吡啶-2-基)乙酰胺(化合物I)，以及该化合物的盐、溶剂化物、水合物、或者前体药物
权利要求
1.一种组合物，其包括KX2-391或其盐，溶剂化物，水合物，或者前体药物，通过高效液相色谱测得组合物具有高于98. 0%的纯度。
2.一种组合物，其包括KX2-391. 2HC1，通过高效液相色谱测得组合物具有高于98. 0%的纯度。
3.根据权利要求I或2所述的组合物，其中所述的组合物中含有少于2%的杂质，所述的杂质选自氯こ烷，こ醇，こ酸こ酷，庚烷，苯甲醚，钯，以及这些物质的组合物。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的组合物，其中进ー步包括药物可接受性载体或者赋形剂。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的组合物在制备用于治疗或者预防疾病或者障碍的药物中的应用，所述疾病或者障碍选自细胞増殖障碍，骨质疏松症，心血管疾病，免疫系统功能紊乱，II型糖尿病，肥胖症，眼科疾病，黄斑水肿，慢性神经性疼痛，听カ缺失，以及移植排斥。
6.根据权利要求5所述的应用，其中所述的细胞增殖障碍选自癌症，癌前状态，过度增殖疾病，以及微生物感染。
7.根据权利要求6所述的应用，其中所述的过度増殖障碍选自银屑病，糖尿病性视网膜病变，以及视网膜黄斑变性。
8.根据权利要求6所述的应用，其中所述的癌症是肺癌，乳腺癌，结肠癌，卵巣癌，脑癌，肝癌，胰腺癌，或者前列腺癌，或者是恶性黑素瘤，或者是非黑素瘤皮肤癌。
9.根据权利要求6所述的应用，其中所述的癌症是血液肿瘤，恶性血液病，儿童白血病，淋巴瘤，多发性骨髄瘤，霍奇金氏病，淋巴细胞或皮肤原发性淋巴瘤，急性或者慢性白血病，成淋巴细胞白血病，急性髓细胞白血病，慢性髓细胞白血病，浆细胞肿瘤，淋巴肿瘤或者与获得性免疫缺陷综合症(AIDS)相关的癌症。
10.根据权利要求5-9中任意ー项所述的应用，其中所述的化合物是用于ロ服给药或者局部给药的。
全文摘要
本发明涉及N-苯甲基-2-(5-(4-(2-吗啉基乙氧基)苯基)吡啶-2-基)乙酰胺(KX2-391)的组合物以及调控激酶级联的一种或者多种成员的方法。
文档编号A61P27/16GK102657656SQ20121010983
公开日2012年9月12日 申请日期2007年12月28日 优先权日2006年12月28日
发明者D·G·汉格尔, D·帕特拉, D·考格林, J·A·科迪, J·盖勒 申请人:金克斯医药品有限公司