专利名称：竹节参皂苷Ⅳa在制备α-糖苷酶抑制剂中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于中药技术领域，特别涉及竹节参皂苷IV a在制备α -糖苷酶抑制剂和/或α-淀粉酶抑制剂中的应用。
背景技术：
糖尿病(Diabetes Mellitus)是一种以复杂病因为特征的代谢紊乱性疾病，常伴随多种慢性并发症，造成多器官、多系统损伤，具有较高的致残率，其发病率呈逐年上升趋势。主要是由于胰岛素分泌缺陷或相对不足而引起的糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱为特征的疾病，表现为多食、多饮、多尿、消瘦的三多一少症状。随着生活方式的改变和脂肪摄入量的增加，曾经的富贵病目前已悄然平民化，2000年全球有I. 71亿人患有糖尿病，到2030年， 这个数字将至少增加到3. 66亿人，已成为继心血管疾病和恶性肿瘤之后第三大严重威胁人类健康的非传染性疾病。发病后若未得到及时有效治疗，随着病程的延长，可出现广泛的微血管及大血管病变，出现神经、泌尿、循环等多系统的病理改变。α -葡萄糖苷酶抑制剂是目前治疗2型糖尿病口服降糖药的一类。此类药物有阿卡波糖(acarbose)、米格列醇(miglitol)和伏格列波糖(voglibose)等。阿卡波糖是由拜耳公司推出的第I个α-糖苷酶抑制剂，1990年在德国上市。它们通过抑制小肠粘膜上皮细胞表面的α-葡萄糖苷酶抑制剂而延缓和减少碳水化合物的消耗和葡萄糖的吸收，并降低餐后血糖，从而达到控制血糖的目的。主要适应于肥胖或超重的2型糖尿病饮食控制和运动治疗，疗效不佳者，可单用此类药。大量的临床研究表明，抑制α -糖苷酶和α _淀粉酶对降低空腹及餐后血糖有明显疗效，在改善糖尿病患者体质，调节胰岛素、胆固醇、甘油三脂和高密度脂蛋白(HDL)代谢等方面也有明显作用。抑制α-糖苷酶从而降低糖化血红蛋白(HbAlc)的作用提示可能有益于预防糖尿病并发症。α-糖苷酶抑制剂已被第三次“亚太地区糖尿病治疗药物指南”推荐降低餐后血糖的一线药物，医学界也将其列为第三类口服降糖药。阿卡波糖(Acarbose,拜糖平)、米格列醇(Miglitol,奥怡苹)、伏格列波糖(Voglibose,倍欣)是目前已经用于临床的α-糖苷酶抑制剂药物。
发明内容
本发明的目的在于提供竹节参皂苷IV a作为α-糖苷酶抑制剂和/或α -淀粉酶抑制剂的用途。本发明的竹节参皂苷IV a是从太白惚木纯中草药中分离得到，其提取纯化方法包括以下步骤
(1)将太白惚木用粉碎机粉碎，称量约20g药粉，加入10倍量80%乙醇(料液比为1:10，w/v)，在80 ° C下回流提取60 min，回流提取3次，过滤、合并，浓缩回收乙醇得粗浸膏；
(2)粗浸膏用蒸馏水分散，分别用氯仿1:3(v/v)萃取除去脂溶性杂质，用水饱和的正丁醇萃取3次(1:3，v/v)，合并3次萃取液，用旋转蒸发仪在60 ° C下减压回收，在60° C水浴上蒸干得到正丁醇萃取物；
(3)正丁醇萃取物利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、ODS反相柱色谱、Lobar柱色谱和反相HPLC制备等手段进行分离，从中得到13个化合物。太白惚木皂苷分子量较大，结构较为复杂。利用ID NMR (1H和13C NMR), 2D NMR(DQCOSY、TOCSY、HMQC、HMBC、NOESY 和 R0ESY)和 MS (ESI-MS)等波谱技术对分离得到的皂苷成分进行结构解析，并结合化学手段(酸水解、碱水解、酶解、甲基化和乙酰化等)确定了其平面及立体化学结构。竹节参皂苷IV a单体对α -糖苷酶的抑制作用的操作方法包括以下步骤
I)药品与试剂的配制
A 0. 2 M 磷酸氢二钾，pH = 6. 8，T = 37。C
4.5644 g磷酸氢二钾用去离子水溶解，IM氢氧化钠调pH至6. 8,并定容至100 mL。B :1 mg/mL还原型谷胱甘肽
精密称取2 mg的还原型谷胱甘肽，用2 mL去离子水溶解。C 5 mM对硝基苯基a -D-糖苷酶
精密称取4. 5 mg的对硝基苯基a -D-糖苷酶，用3 mL去离子水溶解。D:200 mM 碳酸钠
精密称取I. 0599 g的碳酸钠，用50 mL去离子水溶解。E 1 u/mL α -糖苷酶
用冷的去离子水配制成I u/mL α-糖苷酶。F:取50 mg阿卡波糖I片，用研钵研碎，精密称取10 mg置于10 mL容量瓶中，力口甲醇适量，摇匀，并定容，即得I mg/mL阳性对照品溶液。2)实验原理
权利要求
1.竹节参皂苷IV a在制备α -糖苷酶抑制剂和/或α -淀粉酶抑制剂中的应用。
全文摘要
本发明公开了从太白楤木纯中草药中分离得到的竹节参皂苷Ⅳa对α-糖苷酶和α-淀粉酶具有高的抑制活性，证明其可用于制备α-糖苷酶抑制剂和α-淀粉酶抑制剂。
文档编号A61K31/704GK102824355SQ201210299319
公开日2012年12月19日 申请日期2012年8月22日 优先权日2012年8月22日
发明者文爱东, 窦芳, 汤海峰, 奚苗苗 申请人:中国人民解放军第四军医大学