N15多肽在抑制金黄色葡萄球菌抑制剂中的用途的制作方法

文档序号:12343152阅读:482来源:国知局

本发明涉及生物技术领域,具体指N15多肽在制备金黄色葡萄球菌抑制剂中的用途。



背景技术:

金黄色葡萄球菌致病力最强,主要产生溶血素、杀白细胞素和血浆凝固酶等,造成许多种感染,如疖、痈、脓肿和伤口感染等。金黄色葡萄球菌感染的特点是局限性组织坏死,脓液稠厚、黄色、不臭。也能引起全身性感染,影响人体健康,威胁人类生命安全。为了抑制和消灭病原真菌,人们一直致力于寻找有效的抗病原细菌药物。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种多肽,该多肽能够抑制金黄色葡萄球菌的生长,具有在制备病原细菌抑制剂中的用途,它已被现有技术公开,名为N15多肽。

N15多肽是一个具有15个氨基酸的短肽,其序列为甲硫氨酸-脯氨酸-酪氨酸-丝氨酸-苏氨酸-谷氨酸-亮氨酸-异亮氨酸-苯丙氨酸-酪氨酸-异亮氨酸-谷氨酸-甲硫氨酸-天门冬氨酸-脯氨酸,它具有多种生物学功能,包括调节NF-κB转录因子结合目的基因的能力,影响NF-κB目的基因产物蛋白质的转录和表达;阻断PCNA结合DNA聚合酶,从而阻止细胞DNA合成抑制细胞增殖;抑制上皮细胞增生,调节表皮增生及分化,使皮肤角化过程正常化等。

发明人发现在研究中发现N15多肽能够对各种病原细菌的生长产生抑制作用。

前期研究表明,在金黄色葡萄球菌中加入N15会起到抑制金黄色葡萄球菌增殖的效果。通过检测金黄色葡萄球菌内DNA含量发现,N15会引起金黄色葡萄球菌内的DNA含量的减少,因此N15抑制金黄色葡萄球菌的增殖可能是通过抑制基因组DNA复制而实现的。此外,实验结果还表明N15可以抑制沙门氏菌的生长。

本发明还提供了一种N15多肽制备的抗真菌药物,为N15多肽的水溶液,浓度大于等于500μg/mL。

本发明的有益效果:N15多肽是一种结构清晰,易于工业化生产的多肽,它可以抑制多种病原细菌的增殖,效果好且无毒副作用。

附图说明

图1为流式细胞仪检测N15对金黄色葡萄球菌DNA含量的影响。

具体实施方式

下面结合附图和具体实验例对本发明作进一步的论证说明,以下实验例仅是对本发明的解释而本发明并不局限于以下实验例。

实验例1:N15对金黄色葡萄球菌的生长具有抑制作用

实验方法:

取金黄色葡萄球菌菌株接种到牛肉膏蛋白胨培养基斜面上,37℃下活化培养,用接种环从斜面上挑菌到无菌水中制成菌悬液,接种培养无菌操作下,用取液器吸取100μL体积的菌液到灭菌小离心管中,充分混匀后,迅速注入到灭菌平皿中,在平板中加入N15多肽,以同体积的无菌水的混合液注入作空白,置于37℃恒温培养箱中培养48小时,观察菌落生长情况,并对菌落计数,结果见表1。

表1.N15对金黄色葡萄球菌生长抑制结果对照表

结果显示,和对照相比,加入N15多肽的平板上金黄色葡萄球菌的菌落数明显减少,N15对金黄色葡萄球菌的生长具有抑制效应。

实验例2:N15对金黄色葡萄球菌的DNA复制具有抑制效应

实验方法:

制备YEPD液体培养基,培养金黄色葡萄球菌,并加入N15到YEPD液体培养基中,同时设置不加N15多肽的金黄色葡萄球菌作为对照(control),加入N15多肽(终浓度500μg/mL),在处理2小时分别取样2mL金黄色葡萄球菌菌体,加入Sytox-Green染料对金黄色葡萄球菌细胞DNA染色后,使用流式细胞仪进行金黄色葡萄球菌的DNA相对含量进行测定,结果见图1。

如实验结果所示,横坐标表示单个金黄色葡萄球菌细胞内DNA的含量,纵坐标表示酵母细胞数量。在N15处理2小时内,N15处理细胞内的DNA含量和对照细胞相比没有显著性差异,而随着时间的增加,在N15处理15小时以后,N15处理细胞内的DNA含量和对照细胞相比明显减少。该结果表明N15会引起金黄色葡萄球菌细胞DNA含量的减少。

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