8小时、20小时、23小时、25小时、28小时、30小时、33小时、36小时、40小时、45小时、50小时、55小时、60小时、65小时、70小时、71小时或72小时，优选为2?12小时，
进一步优选为8?12小时。
[0031]优选地，步骤(a)所述洗涤为用纯水洗涤，所述干燥为冷冻干燥。
[0032]在本发明的疫苗制剂的制备方法中，步骤(b)还包括将所述疫苗制剂与免疫调节剂复配。
[0033]优选地，所述免疫调节剂为生物源性免疫调节剂或非生物源性免疫调节剂。
[0034]优选地，所述免疫调节剂为非甲基化胞苷酸鸟苷酸基序(CpG)、单磷酰脂质A(MPLA)、白细胞介素2 (IL-2)或白细胞介素12 (IL-12)中的任意一种或至少两种的组合。
[0035]优选地，步骤(b)所述复配为通过吸附、封装或者共混的方式进行复配。
[0036]作为优选技术方案，本发明的疫苗制剂的制备方法具体包括以下步骤:
[0037](a)微生物悬浮液转移到水热反应釜，在温度120?240 °C，压力I?3MPa下进行水热反应2?12小时，纯水洗涤，冷冻干燥后得到疫苗载体；
[0038](b)将步骤(a)得到的疫苗载体与抗原组分以及免疫调节剂复配，获得所述疫苗制剂。
[0039]本发明用于制备疫苗载体的微生物具有广泛适用性，涵盖细菌、真菌和病毒等各类微生物；疫苗载体可以复配的抗原和免疫调剂的种类也有很大的选择性；采用本发明的技术方案通过选用不同的抗原，可以实现针对不同疾病的疫苗构建，因此本发明的技术方案在疫苗构建上具有普适性。
[0040]另一方面，本发明提供了所述疫苗制剂在制备用于防治恶性肿瘤或感染类疾病药物中的用途。
[0041]优选地，所述感染类疾病为乙型肝炎、流行性感冒、细菌性肺炎或细菌性痢疾中的任意一种。
[0042]本发明提供的疫苗制剂通过对病原体的特征形态、表面配体和分子信号的仿生，实现强烈的免疫激活效果，高效地增强所负载抗原的免疫原性。通过机体对抗原形成的特异性免疫应答，可以实现针对特定疾病的免疫治疗及预防。
[0043]相对于现有技术，本发明具有以下有益效果:
[0044]本发明通过将微生物模板原料经水热反应制得的疫苗载体，与抗原组分以及任选地免疫调节剂复配得到疫苗制剂，使得疫苗载体材料的孔性、亲疏水性和表面免疫相关配体密度等性质得到优化，从而使得其与抗原组分以及任选的免疫调节剂复配时，抗原装载效率提高，使制备得到的疫苗制剂实现了强烈的免疫激活效果，高效地增强所负载抗原的免疫原性，通过机体对抗原形成的特异性免疫应答，实现针对特定疾病的免疫治疗及预防。此外，本发明的原料来源广泛，在疫苗构建上具有普适性，可以构建针对不同疾病的多种疫苗制剂。
【附图说明】
[0045]图1是实施例1制备的疫苗载体的扫描电镜(A)和透射电镜⑶图；
[0046]图2是实施例2制备的疫苗载体的扫描电镜图；
[0047]图3是实施例4制备的疫苗载体的扫描电镜图；
[0048]图4是实施例6制备的疫苗载体的扫描电镜图；
[0049]图5是实施例7制备的疫苗载体的扫描电镜图；
[0050]图6是实施例9中不同水热制备时间下制备的疫苗载体对甘露糖受体结合能力的比较图；
[0051]图7是实施例15中树突状细胞的各种表面信号的表达水平(A-E)及细胞因子分泌水平(F-J)图；
[0052]图8是实施例17中各组小鼠脾细胞中IFN-y+CD8T细胞的百分比图；
[0053]图9是实施例17中各组小鼠中淋巴瘤细胞的裂解率图；
[0054]图10是实施例18中各组小鼠的肿瘤生长曲线㈧及生存期⑶图；
[0055]图11是实施例19中各组小鼠的肿瘤生长曲线㈧及生存期⑶图；
[0056]图12是实施例22中各组小鼠在第14、21、28和35天的OVA特异性IgG的滴度水平图；
[0057]图13是实施例24中各组疫苗对恶性肿瘤的免疫防治效果图。
【具体实施方式】
[0058]下面通过【具体实施方式】来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
[0059]实施例1
[0060]在本实施例中，通过以下方法来制备疫苗载体，具体步骤如下:
[0061]将人工培养的干酪乳杆菌菌泥5g，分散于10mL 0.01mol/L盐酸溶液中制得微生物悬浮液，将其转移到置于恒温箱内的水热反应釜中，保持压力为3MPa，180°C下恒温加热10小时，将得到的沉淀物用纯水洗涤后冷冻干燥，得到疫苗载体(DB)。
[0062]利用扫描电镜(JEOL，JSM-6700F)和透射电镜(JEOL，JEM-1400)对制备得到的疫苗载体进行表征，如图1所示，所制备的疫苗载体保留了杆菌的形貌特征。另外，借助酸性溶剂环境下发生的剧烈水解反应，在载体表面形成了平均孔径27.66nm的多孔微观结构。
[0063]实施例2
[0064]在本实施例中，通过以下方法来制备疫苗载体，具体步骤如下:
[0065]将人工培养的干酪乳杆菌菌泥2g，分散于10mL 0.lmol/L盐酸溶液中制得微生物悬浮液，将其转移到置于恒温箱内的水热反应釜中，保持压力为2MPa，200°C下恒温加热12小时，将得到的沉淀物用纯水洗涤后冷冻干燥，得到疫苗载体。
[0066]利用扫描电镜对制备得到的疫苗载体进行表征，如图2所示，由于酸性溶剂环境下进行的水热反应，使载体材料表面形成了大量的大孔结构。
[0067]实施例3
[0068]在本实施例中，通过以下方法来制备疫苗载体，具体步骤如下:
[0069]将人工培养的干酪乳杆菌菌泥5g，分散于10mL 0.01mol/L盐酸溶液中制得微生物悬浮液，将其转移到置于恒温箱内的水热反应釜中，保持压力为3MPa，100°C下恒温加热72小时，将得到的沉淀物用纯水洗涤后冷冻干燥，得到疫苗载体。
[0070]实施例4
[0071]在本实施例中，通过以下方法来制备疫苗载体，具体步骤如下:
[0072]将人工培养的副溶血性弧菌菌泥10g，分散于50mL 1.00% (v/v)戊二醛溶液中，转移到置于恒温箱内的水热反应釜中，保持压力为lMPa，250°C下恒温加热2小时，将得到的沉淀物用纯水洗涤后冷冻干燥，得到疫苗载体。
[0073]利用扫描电镜对制备得到的疫苗载体进行表征，如图3所示，由于通过水热反应，载体材料表面形成了大量的大孔结构。
[0074]实施例5
[0075]在本实施例中，通过以下方法来制备疫苗载体，具体步骤如下:
[0076]将人工培养的副溶血性弧菌菌泥10g，分散于50mL 1.00% (v/v)戊二醛溶液中，转移到置于恒温箱内的水热反应釜中，保持压力为lMPa，400°C下恒温加热0.5小时，将得到的沉淀物用纯水洗涤后冷冻干燥，得到疫苗载体。
[0077]实施例6
[0078]在本实施例中，通过以下方法来制备疫苗载体，具体步骤如下:
[0079]人工培养的嗜热链球菌菌泥10g，分散于50mL 0.05g/mL氯化钠溶液中，转移到置于恒温箱内的水热反应釜中，180°C下恒温加热0.5小时，将得到的沉淀物用纯水洗涤后冷冻干燥，得到疫苗载体。
[0080]利用扫描电镜对制备得到的疫苗载体进行表征，如图4所示，水热处理制备的疫苗载体保留了嗜热链球菌的球形个体形态，同时还很好地保留了链球形的相互链接的结构特点。
[0081]实施例7
[0082]在本实施例中，通过以下方法来制备疫苗载体，具体步骤如下:
[0083]人工培养的乳酸片球菌菌泥10g，分散于50mL 0.1moI/mL乙醇溶液中，转移到置于恒温箱内的水热反应釜中，150°C下恒温加热72小时，将得到的沉淀物用纯水洗涤后冷冻干燥，得到疫苗载体。
[0084]利用扫描电镜对制备得到的疫苗载体进行表征，如图5所示，水热处理所制备的疫苗载体完整地保留了乳酸片球菌的特征片球外形特点。
[0085]实施例8
[0086]在本实施例中，通过以下方法来制备疫苗载体，具体步骤如下:
[0087]人工培养的酵母菌菌泥10g，分散于50mL 0.00 Imo I/mL氯化钠溶液中，转移到置于恒温箱内的水热反应釜中，3000C下恒温加热24小时，将得到的沉淀物用纯水洗涤后冷冻干燥，得到疫苗载体。