的白蛋白糖基化特征。组合物（如药物组合物）的市售 商品可具有上述特征中的任意一种或多种。在一些实施方式中，组合物（如药物组合物） 的市售商品不具有上述特征。在一些实施方式中，组合物（如药物组合物）的市售商品具 有全部上述特征。
[0097] 试剂盒
[0098] 本申请还提供包括本文描述的用于本文描述的治疗方法、给药方法和用药方案的 组合物、制剂、单位剂量和制品的试剂盒。本文描述的试剂盒包括一种或多种包括紫杉醇纳 米颗粒组合物（制剂或单位剂型和/或制品）的容器，和在一些实施方式中进一步包括按 照本文描述的任一种治疗方法的使用说明。在不同实施方式中，试剂盒中包括的紫杉醇量 在下列范围中的任一个内：约5mg至约20mg、约20至约50mg、约50至约100mg、约100至约 125mg、约 125 至约 150mg、约 150 至约 175mg、约 175 至约 200mg、约 200 至约 225mg、约 225 至约250mg、约250至约300mg、约300至约350mg、约350至约400mg、约400至约450mg、 或约450至约500mg。在一些实施方式中，试剂盒中的紫杉醇量在如下范围内：约5mg至约 500mg，如约30mg至约300mg或约50mg至约200mg。在一些实施方式中，试剂盒包括一种或 多种其他化合物（例如，紫杉醇以外的有效用于癌症的一种或多种化合物）。
[0099] 本文描述的试剂盒中提供的说明一般是在标签或包装内插物（例如，试剂盒包含 的纸页）上的书面说明，但机器可读的说明（例如，存储磁盘或光盘上携载的说明）也是可 接受的。与纳米颗粒组合物的使用相关的说明通常包括关于目的治疗的剂量、用药安排和 给药途径的信息。试剂盒可进一步包括选择适合治疗的个体的描述。
[0100] 本申请还提供包括本文描述的组合物（或单位剂型和/或制品）的试剂盒，并且 可进一步包括关于组合物使用方法的说明（一个或多个），如本文进一步描述的应用。在一 些实施方式中，本文描述的试剂盒包括上述包装。在其他变型中，本文描述的试剂盒包括上 述包装和包括缓冲剂的第二包装。其可进一步包括在商业和使用者立场期望的其他材料， 包括其他缓冲剂、稀释剂、过滤器、针、注射器和包装内插物以及执行本文描述的任何方法 的说明。
[0101] 关于本文描述的联合治疗，试剂盒可包含同时和/或相继给予第一和第二治疗以 有效治疗癌症的说明。第一和第二治疗可存在于分别的容器中或单一容器中。要理解，试剂 盒可包括一种独特的组合物，或两种或更多种组合物一一其中一种组合物构成第一治疗， 一种组合物构成第二治疗。
[0102] 还可提供包含充足剂量的本文公开的紫杉醇以长期（如下列中的任一个：1周、 2周、3周、4周、6周、8周、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月或更长）为 个体提供有效治疗的试剂盒。试剂盒可还包括多个单位剂量的本文描述的紫杉醇、组合物 (如药物组合物）、和制剂和使用说明，并且以充足的数量包装，以在药房（例如，医院药房 和合成药房）中储存和使用。在一些实施方式中，试剂盒包括干燥的（例如，冻干的）组合 物，其可重构、重悬浮或重水合，形成包括紫杉醇和白蛋白的纳米颗粒的总体上稳定的水悬 浮液。
[0103] 本文描述的试剂盒处于适当的包装中。适当的包装包括但不限于小瓶、瓶、罐、挠 性包装（例如，密封Mylar或塑料袋）、及类似物。试剂盒可任选地提供另外的组分如缓冲 剂和说明性信息。
[0104] 制备纳米颗粒组合物的方法
[0105] 本申请还提供制备本文描述的紫杉醇纳米颗粒组合物的方法。包含弱水溶性药 剂和载体蛋白质（例如，白蛋白）的纳米颗粒可在高剪切力条件下（例如，声波处理、高压 均质化、或类似方式）制备。这些方法被公开于例如美国专利号5, 916, 596 ;6, 096, 331 ; 6, 749, 868 ;6, 537, 579 ;和 PCT 申请公开号 TO98/14174 ;TO99/00113 ;TO07/027941 ;和 TO07/027819。这些出版物--特别是关于制备包含载体蛋白质的组合物的方法--的内 容全体被引入本文作为参考。
[0106] 总体上，为制备本文描述的紫杉醇纳米颗粒组合物，将紫杉醇溶解于有机溶剂 中。适当的有机溶剂包括，例如，酮、酯、醚、氯化溶剂、和本领域已知的其他溶剂。例 如，有机溶剂可以是二氯甲烷/乙醇、氯仿/乙醇、或氯仿/叔丁醇（例如以如下比例： 约 1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、或 9:1 中 的任一个，或以如下比例：约 3:7、5:7、4:6、5:5、6:5、8 :5、9:5、9.5:5、5:3、7:3、6:4 或 9. 5:0. 5中的任一个）。白蛋白（如重组白蛋白，例如本文公开的Novozyme重组白蛋白 或Intrivia重组白蛋白）被溶解于水中，并且与紫杉醇溶液混合。混合物进行高压均质 化处理（例如，利用 Avestin、APV Gaulin、Microfluidizer?(如来自 Microfluidics 的 Microfluidizer?Processor M-110EH)、Stansted、或 Ultra Turrax 均质机）。乳液可循环 通过高压均质机约2至约100个循环，如约5至约50个循环或约8至约20个循环（例如， 约8、10、12、14、16、18或20个循环中的任一个）。然后可通过利用关于此用途已知的适当 设备进行蒸发来去除有机溶剂，该设备包括但不限于，旋转蒸发仪、降膜蒸发器、刮板式薄 膜蒸发器（wiped film evaporators)、喷雾干燥器、及类似物，其可以分批模式或连续操作 式操作。可在减压下（如在约 25mm Hg、30mm Hg、40mm Hg、50mm Hg、100mm Hg、200mm Hg、 或300mm Hg中的任一个）去除溶剂。可基于制剂体积调节在减压下去除溶剂所用的时间 量。例如，对于以300mL规模生产的制剂而言，可在约1至约300mm Hg下（例如，约5-100mm Hg、10_50mm Hg、20-40mm Hg、或25mm Hg中的任一个）去除溶剂约5至约60分钟（例如， 约7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、18、20、25、或30分钟中的任一个）。获得的分散液可被 进一步冻干。
[0107] 如需，可将另外的白蛋白溶液加入分散液，以调节白蛋白与紫杉醇的比、或调节分 散液中紫杉醇的浓度。例如，可添加白蛋白溶液（例如，25 % w/v)来调节白蛋白与紫杉醇 的比至约 18:1、15:1、14:1、13:1、12:1、11:1、10:1、9:1、8:1、7· 5:1、7:1、6:1、5:1、4:1、或 3:1中的任一个。在另一实施例中，添加白蛋白溶液（例如，25% w/v)或另一溶液来调节分 散液中紫杉醇的浓度至约 CL 5mg/ml、l. 3mg/ml、l. 5mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、 6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、30mg/ml、40mg/ml、 或50mg/ml中的任一个。分散液可通过多个过滤器被连续过滤，如I. 2 μπι和0. 8/0. 2 μπι 过滤器的组合；1. 2 μ m、0. 8 μ m、0. 45 μ m和0. 22 μ m过滤器的组合；或本领域已知的任何其 他过滤器的组合。获得的分散液可被进一步冻干。纳米颗粒组合物可利用分批工艺或连续 工艺（例如，大规模生产组合物）来制备。
[0108] 如需，组合物还可包括第二治疗（例如，有效用于治疗癌症的一种或多种化合 物）、抗微生物剂、糖、和/或稳定剂。例如，这种另外的试剂可在制备紫杉醇纳米颗粒组合 物的过程中与紫杉醇和/或白蛋白混合，或在制备紫杉醇纳米颗粒组合物后加入。在一些 实施方式中，该试剂在冻干前与紫杉醇纳米颗粒组合物混合。在一些实施方式中，该试剂被 加入冻干的紫杉醇纳米颗粒组合物。在添加该试剂改变组合物PH的一些实施方式中，组合 物的PH通常（但不一定）被调节至期望的pH。组合物的示例性pH值包括，例如，约5至约 8. 5的范围。在一些实施方式中，组合物的pH被调节至不小于约6,包括例如不小于约6. 5、 7或8中的任一个（例如，约8)。
[0109] 治疗疾病的方法
[0110] 本发明的纳米颗粒组合物可用于治疗与细胞增殖或过度增殖有关的疾病，如癌 症。
[0111] 可通过本文描述的方法治疗的癌症的实例包括但不限于，乳腺癌（如转移性乳腺 癌）、肺癌（如非小细胞性肺癌）、胰腺癌（如转移性胰腺癌或局部晚期不可切除型胰腺 癌）、多发性骨髓瘤、肾细胞癌、前列腺癌、黑素瘤（如转移性黑素瘤）、结肠癌、结肠直肠癌、 卵巢癌、肝癌、肾癌、和胃癌。在一些实施方式中，癌症是转移性疾病联合化疗失败或辅助化 疗6个月内复发后的乳腺癌。在一些实施方式中，在前治疗包括蒽环类抗生素治疗。
[0112] 本文描述的组合物所治疗的癌症包括但不限于，癌、淋巴瘤、胚细胞瘤、肉瘤和白 血病。可通过本文描述的组合物治疗的癌症的实例包括但不限于，鳞状细胞癌、肺癌（包 括小细肺癌、非小细胞性肺癌、肺腺癌、和肺鳞状癌--包括鳞状NSCLC)、腹膜癌、肝细胞 癌、胃癌症（包括胃肠癌）、胰腺癌（如晚期胰腺癌）、成胶质细胞瘤、子宫颈癌、卵巢癌、肝 癌（如肝细胞癌）、膀胱癌、肝瘤、乳腺癌、结肠癌、黑素瘤、子宫内膜或子宫癌、唾腺癌、肾 癌、肝癌、前列腺癌（如晚期前列腺癌）、外阴癌、甲状腺癌、肝癌、头颈癌、结肠直肠癌、直肠 癌、软组织肉瘤、Kaposi肉瘤、B细胞淋巴瘤（包括低级/滤泡性非霍奇金淋巴瘤（NHL)、 小淋巴细胞（SL)NHU中级/滤泡性NHL、中级弥漫性NHL、高级免疫母细胞NHL、高级成淋 巴细胞NHL、高级小非核裂细胞NHL、肿块性病变NHL(bulky disease NHL)、套细胞淋巴瘤、 AIDS相关淋巴瘤、和Waldenstrom巨球蛋白血症）、慢性淋巴细胞白血病（CLL)、急性成淋巴 细胞白血病（ALL)、骨髓瘤、毛细胞白血病、慢性成髓细胞白血病和移植后淋巴增生性障碍 (PTLD)、以及与斑痣性错构瘤病（phakomatoses)有关的异常血管增生、水肿（如与脑瘤有 关的水肿）、和Meigs综合征。在一些实施方式中，提供了治疗转移性癌症（即，从原发性肿 瘤转移的癌症）的方法。在一些实施方式中，提供了减少细胞增殖和/或细胞迀移的方法。 在一些实施方式中，提供了治疗超常增生的方法，例如血管系统超常增生，其可导致再狭窄 或超常增生，再狭窄或超常增生可导致动脉或静脉高血压。
[0113] 在一些实施方式中，提供了治疗晚期癌症的方法。在一些实施方式中，提供治疗乳 腺癌（可以是HER2阳性或HER2阴性）的方法，该乳腺癌包括，例如，晚期乳腺癌、IV期乳 腺癌、局部晚期乳腺癌和转移性乳腺癌。在一些实施方式中，癌症是肺癌，包括，例如，非小 细胞性肺癌（NSCLC，如晚期NSCLC)、小细胞肺癌（SCLC，如晚期SCLC)和肺晚期恶性实体肿 瘤。在一些实施方式中，癌症是卵巢癌、头颈癌、胃恶性肿瘤（gastric malignancies)、黑素 瘤（包括转移性黑素瘤）、结肠直肠癌、胰腺癌、和实体肿瘤（如晚期实体肿瘤）。在一些实 施方式中，癌症是下列中的任一种（并且在一些实施方式中选自下列）：乳腺癌、结肠直肠 癌、直肠癌、非小细胞性肺癌、非Hodgkins淋巴瘤（NHL)、肾细胞癌症、前列腺癌、肝癌、胰腺 癌、软组织肉瘤、Kaposi肉瘤、类癌、头颈癌、黑素瘤、卵巢癌、间皮瘤、神经胶质瘤、成胶质细 胞瘤、成神经细胞瘤和多发性骨髓瘤。在一些实施方式中，癌症是实体肿瘤。
[0114] 在一些实施方式中，待治疗癌症是乳腺癌，如转移性乳腺癌。在一些实施方式中， 待治疗癌症是肺癌，如非小细胞性肺癌，包括晚期非小细胞性肺癌。在一些实施方式中，待 治疗癌症是胰腺癌，如早期胰腺癌或晚期或转移性胰腺癌。在一些实施方式中，待治疗癌症 是黑素瘤，如ΠΙ或IV期黑素瘤。
[0115] 在一些实施方式中，接受增殖性疾病治疗的个体已被鉴定具有本文描述的症状中 的一种或多种。本文描述的由熟练医师进行的症状鉴定是本领域中的日常工作（例如，通 过血液测试、X射线、CT扫描、内窥镜检查、活组织检查、血管造影术、CT-血管造影术、等）， 并且也可被个体或其他人员怀疑，例如，基于肿瘤生长、出血、溃疡、疼痛、淋巴结肿大、咳 嗽、黄疸、肿胀、减重、恶病质、发汗、贫血、癌旁现象、血栓等。在一些实施方式中，个体已被 鉴定易患本文描述的症状中的一种或多种。个体的易感性可基于技术人员理解的多种风险 因素和/或诊断方法中的任意一种或多种，包括但不限于，基因剖析、家族史、医疗史（例 如，出现相关症状）、生活方式或习惯。
[0116] 在一些实施方式中，本文所用的方法和/或组合物使增殖性疾病（例如，癌症） 相关的一种或多种症状的严重程度，与治疗前相同个体的相应症状相比或与未接受该方法 和/或组合物的其他个体的相应症状相比，降低至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、 70%、80%、90%、95%、或100%中的任一个。
[0117] 在一些实施方式中，本文描述的组合物（如药物组合物）与另一给予模式或治疗 联合应用。
[0118] 用药和给药方法
[0119] 给予个体（如人）的药物组合物量可随具体组合物、给药方法、和被治疗的复发癌 症的具体类型而变化。该量应足以产生期望的有益效果。例如，在一些实施方式中，组合物 量有效导致目标响应（如部分响应或完全响应）。在一些实施方式中，纳米颗粒组合物量足 以导致个体的完全响应。在一些实施方式中，组合物量足以导致个体的部分响应。在一些实 施方式中，单独给予的组合物量足以在用该组合物治疗的个体群中产生大于约40%、50%、 60%、或64%中任一个的总体响应率。个体对本文所述方法的治疗的响应可被确定，例如， 基于RECIST或CA-125水平。例如，在利用CA-125时，完全响应可被限定为至少28日从治 疗前值恢复到正常范围值。颗粒响应可被限定为自治疗前值持续超过50%的下降。
[0120] 在一些实施方式中，纳米颗粒组合物量足以延长个体的无进展生命（例如，如通 过RECIST或CA-125变化进行的测量）。在一些实施方式中，纳米颗粒组合物量足以延长个 体的整体生命。在一些实施方式中，组合物量足以在用该组合物治疗的个体群中产生大于 约50%、60%、70%、或77%中任一个的临床效益。
[0121] 在一些实施方式中，组合物中的紫杉醇量在诱导毒理效应（即，在临床可接受的 毒性水平以上的效应）的水平以下，或处于在给予个体组合物时潜在副作用可被控制或 耐受的水平。在一些实施方式中，组合物量接近组合物按照相同用药方案的最大耐受剂量 (MTD)。在一些实施方式中，组合物量大于MTD的约80%、90%、95%、或98%中的任一个。
[0122] 在一些实施方式中，紫杉醇和/或组合物量是足以使肿瘤尺寸、癌症细胞数量、或 肿瘤生长速率，与治疗前相同对象的相应肿瘤尺寸、癌症细胞数量、或肿瘤生长速率相比或 与未接受治疗的其他对象的相应活性相比，减少至少约10 %、20 %、30 %、40 %、50 %、60 %、 70 %、80 %、90 %、95 %或100 %中任一个的量。可利用标准方法测量这种效果的量级，如利 用纯化酶的体外测定、基于细胞的测定、动物模型、或人测试。
[0123] 在一些实施方式中，组合物中包括的紫杉醇量在下列范围中的任一个内：约0. 5 至约5mg、约5至约10mg、约10至约15mg、约15至约20mg、约20至约25mg、约20至约50mg、 约25至约50mg、约50至约75mg、约50至约100mg、约75至约100mg、约100至约125mg、约 125 至约 150mg、约 150 至约 175mg、约 175 至约 200mg、约 200 至约 225mg、约 225 至约 250mg、 约250至约300mg、约300至约350mg、约350至约400mg、约400至约450mg、或约450至约 500mg。在一些实施方式中，组合物（例如，单位剂型）中的紫杉醇量在如下范围内：约5mg 至约500mg，如约30mg至约300mg或约50mg至约200mgD在一些实施方式中，组合物中紫杉 醇的浓度是稀的（约0. lmg/ml)或浓的（约100mg/ml)，包括例如约0. 1至约50mg/ml、约 0· 1 至约 20mg/ml、约 1 至约 10mg/ml、约 2mg/ml 至约 8mg/ml、约 4 至约 6mg/ml、约 5mg/ml 中的任一个在一些实施方式中，紫杉醇的浓度至少为约0. 5mg/ml、l. 3mg/ml、l. 5mg/ml、 2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、15mg/ml、20mg/ ml、25mg/ml、30mg/ml、40mg/ml、或 50mg/ml 中的任一个 D
[0124] 纳米颗粒组合物中紫杉醇的示例性剂量包括但不限于，约25mg/m2、30mg/m 2、50mg/ m2、60mg/m2、75mg/m2、80mg/m2、90mg/m 2、100mg/m2、120mg/m2、160mg/m2、175mg/m 2、180mg/m2、 200mg/m2、210mg/m2、220mg/m 2、250mg/m2、260mg/m2、300mg/m2、350mg/m 2、400mg/m2、500mg/m2、 540mg/m2、750mg/m 2、1000mg/m2、或1080mg/m2紫杉醇中的任一个在不同实施方式中，组合 物包括小于约 350mg/m2、300mg/m2、250mg/m2、200mg/m 2、150mg/m2、120mg/m2、100mg/m2、90mg/ m2、50mg/m2、或30mg/m2中任一个的紫杉醇在一些实施方式中，每次给予的紫杉醇量小于 约 25mg/m2、22mg/m2、20mg/m2、18mg/m 2、15mg/m2、14mg/m2、13mg/m2、12mg/m 2、I lmg/m2、IOmg/ m2、9mg/m2、8mg/m2、7mg/m2、6mg/m 2、5mg/m2、4mg/m2、3mg/m2、2mg/m 2、或 I mg/m2 中的任一个。在 一些实施方式中，组合物中包括紫杉醇的剂量在下列范围中的任一个内：约I至约5mg/m2、 约5至约10mg/m 2、约10至约25mg/m2、约25至约50mg/m2、约50至约75mg/m 2、约75至约 100mg/m2、约 100 至约 125mg/m2、约 125 至约 150mg/m2、约 150 至约 175mg/m2、约 175 至约 200mg/m2、约 200 至约 225mg/m2、约 225 至约 250mg/m2、约 250 至约 300mg/m2、约 300 至约 350mg/m2、或约350至约400mg/m2c3优选地，组合物中紫杉醇的剂量为约5至约300mg/m 2， 如约100至约150mg/m2、约120mg/m2、约130mg/m 2、或约140mg/m2c3在一些实施方式中，包括 紫杉醇的纳米颗粒不以300mg/m 2或900mg/m2的剂量给予。
[0125] 在上述任何方面的一些实施方式中，组合物中紫杉醇的剂量包括至少约lmg/kg、 2. 5mg/kg、3. 5mg/kg、5mg/kg、6. 5mg/kg、7. 5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg 或 20mg/kg 中的任一 个。在不同变型中，组合物中紫杉醇的剂量包括小于约350mg/kg、300mg/kg、250mg/kg、 200mg/kg、150mg/kg、100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg、20mg/kg、10mg/kg、7. 5mg/kg、6. 5mg/kg、 5mg/kg、3. 5mg/kg、2. 5mg/kg、2mg/kg、l. 5mg/kg 或 lmg/kg 中任一个的紫杉醇D 在一些实施 方式中，组合物中紫杉醇的剂量包括小于约500 μ g/kg、350 μ g/kg、300 μ g/kg、250 μ g/kg、 200 μ g/kg、150 μ g/kg、100 μ g/kg、50 μ g/kg、25 μ g/kg、20 μ g/kg、10 μ g/kg、7. 5 μ g/kg、 6· 5 μ g/kg、5 μ g/kg、3. 5 μ g/kg、2. 5 μ g/kg、2 μ g/kg、I. 5 μ g/kg、I μ g/kg 或 0· 5 μ g/kg 中 任一个的紫杉醇。在一些实施方式中，包括紫杉醇的纳米颗粒不以60mg/kg或90mg/kg的 剂量给予。
[0126] 示例性用药频率包括但不限于下列中的任一个：每周，无间断；每周，四周中的三 周；每三周一次；每两周一次；每周，三周中的两周。在一些实施方式中，给予组合物约每两 周一次、每三周一次、每四周一次、每六周一次、或每八周一次。在一些实施方式中，组合物 一周给予至少约]^、21、31、41、51、61、或71(即，每日）中的任一个。在一些实施方式中，每 次给药之间的间隔小于约6个月、3个月、1个月、20日、15日、12日、10日、9日、8日、7日、 6日、5日、4日、3日、2日或1日中的任一个。在一些实施方式中，每次给药之间的间隔大于 约1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、8个月或12个月中的任一个。在一些实施 方式中，用药安排中无间断。在一些实施方式中，每次给药之间的间隔不多于约一周。
[0127] 组合物的给予可长期持续，如约一个月上至约七年。在一些实施方式中，经至少约 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、18、24、30、36、48、60、72 或 84 个月中任一个的时间给予组合 物。在一些实施方式中，经至少一个月的时间给予组合物，其中每次给药之间的间隔不多于 约一周，并且其中每次给予的紫杉醇剂量为约0. 25mg/m2至约75mg/m2,如约0. 25mg/m2至约 25mg/m2或约 25mg/m2至约 50mg/m2。
[0128] 在一些实施方式中，纳米颗粒组合物中紫杉醇的剂量可以在3周安排下给予时在 5-400mg/m2范围内，或在一周安排下给予时在5-250mg/m 2范围内。例如，紫杉醇量为约60 至约 300mg/m2 (例如，约 260mg/m2)。
[0129] 给予纳米颗粒组合物的其他示例性用药安排包括但不限于下列中的任一个