. 4mM lH亮氨酸溶液（内标物）：
[0154] 1.在50mL容量瓶中一次制备50mL( = 50000 μ L)溶液。
[0155] 2.使用下式从正亮氨酸储备溶液浓度计算需要的量：
[0156] 量（μ L) = [ (50000 μ L) * (0· 4mmol/L) V (储备溶液浓度）
[0157] 3.使储备溶液涡旋并将所需量的储备溶液移到容量瓶中
[015S] 4.使用0· IN HC1使容量瓶中的体积（准确地）达到50mL。
[0159] *通过将4. lmL约12. 2N HC1储备溶液[储备溶液是约37. 5% HC1 (v/v)，其MW为 36. 46g/mol和密度为1. 19g/mL]加入容量瓶中的约250mL超纯水中，然后用超纯水使体积 达到500mL来制备0.1 N HC1。
[0160] 5.转移到适合的储存容器中。
[0161] 6.储存于4°C下，直至使用。
[0162] 0. 2mM谷氨酰胺（再干步骤期间被加到全AA标准物中）：
[0163] 1.在50mL容量瓶中一次制备50mL溶液
[0164] 2.使用下式从谷氨酰胺储备溶液浓度计算需要的量：
[0165] 量 UL) = [(50000 yL)*(0· 2mmol/L) V (储备溶液浓度）
[0166] 3.使储备溶液涡旋并将所需量的储备溶液移到容量瓶中
[0167] 4.使用超纯水使容量瓶中的体积(精确地）达到50mL。
[0168] 5.转移到适合的储存容器中。
[0169] 6.储存于4°C下，直至使用。
[0170] 0. 5mM额外AA标准物溶液：
[0171] 1.在50mL容量瓶中一次制备50mL溶液
[0172] 2.对于天冬酰胺、半胱氨酸盐酸盐、鸟氨酸盐酸盐和瓜氨酸，使用下式计算需要的 每种储备溶液的量：
[0173] 量 UL) = [(50000 yL)*(0· 5mmol/L) V (储备溶液浓度）
[0174] 3.使储备溶液涡旋并将所需量的储备溶液移到容量瓶中
[0175] 4.己加入所有氨基酸储备溶液时，使用超纯水使容量瓶中的体积(精确地)达到 50mL〇
[0176] 5.转移到适合的储存容器中。
[0177] 6.储存于4°C下，直至使用。
[0178] 制备全 AA 标准物（0· 2mM = 200nmo1 /mL 的各 AA)：
[0179] 1.将500 μ L预制标准物（西格马（Sigma)产品A2908 ;0· 5mM)与500 μ L额外AA 标准物（0. 5mM)和250 μ L超纯水混合于离心管中。
[0180] 2.涡旋混合
[0181] 3.将25 μ L等份（5nmol)置于单个标记的肯堡玻璃管中。放置在冷冻干燥机烧瓶 中和冷冻干燥机上，直至其干燥。
[0182] 图7是统计学趋势（P = 0. 15))示出的饮食互动时，年长组和年轻组聚在一起的 示意。喂甘露庚酮糖的狗在空腹和喂食4小时后的Trp:LNAA浓度没有差异，而喂对照饮食 的狗中存在Trp:LNAA浓度显著（P〈0. 05)降低。
[0183] 图8是组被分别检查时的情况说明，对于狗比组2的年长的组1，饮食互动（P = 0. 0006)和时间（P = 0. 0008)高度显著。喂含有MH的饮食的狗在空腹和喂食4小时后 Trp: LNAA浓度没有差异（P>0. 05)，而喂对照饮食的包含较年长狗中存在Trp: LNAA浓度显 著（P〈0. 05)降低。比例差异不是由单独地色氨酸或LNAA所致的，如通过膳食处理或空腹 与喂食之间缺少统计学差异所证明的。
[0184] 喂测试饮食或对照饮食的较年轻狗（组2)中或空腹和喂食之间的Trp: LNAA比例 没有差异（P>〇. 05)，虽然从空腹到喂食，LNAA(亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸和酪氨 酸）的浓度显著增加（Ρ〈〇· 05)。
[0185] 表3说明了使用现有技术中标准的方法（包括挤出来）制备具有近似指定量的以 下组分的两种粗磨物组合物，并作为每日饲料喂给狗和/或猫：
[0186] 表 3
[0189] *可以用具有增强甘露庚酮糖含量的其它植物物质替代克里奥罗鳄梨。加入甘露 庚酮糖源可能取代组合物中相似量的谷物源。提取物包含约10%的甘露庚酮糖。
[0190] **维生素和矿物质可包括：维生素 Ε、β -胡萝卜素、维生素 A、抗坏血酸、泛酸钙、 生物素、维生素 Β12、维生素 Β1、烟酸、维生素 Β2、维生素 Β6、维生素 D3、维生素 D2、叶酸、氯 化物（chlorine chloride)、肌醇、碳酸钙、磷酸二钙、氯化钾、氯化钠、氧化锌、硫酸锰、硫酸 铜、一氧化锰、硫酸亚铁、碘化钾、碳酸钴。
[0191] ***次要成分可包括：鱼油、亚麻籽、亚麻籽粉、纤维素、香料、抗氧化剂、牛磺酸、 酵母、肉碱、硫酸软骨素、葡萄糖胺、叶黄素、迷迭香提取物。
[0192] 实施例5
[0193] 表4说明了牛肉味肉汁组合物通过以常规方式将以下组分混合来制备：
[0194] 表 4
[0196] *甘露庚酮糖可以由另一种葡萄糖抗代谢物替代。
[0197] **维生素和矿物质可包括：维生素 Ε、β -胡萝卜素、维生素 A、抗坏血酸、泛酸钙、 生物素、维生素 Β12、维生素 Β1、烟酸、维生素 Β2、维生素 Β6、维生素 D3、维生素 D2、叶酸、氯 化物（chlorine chloride)、肌醇、碳酸钙、磷酸二钙、氯化钾、氯化钠、氧化锌、硫酸锰、硫酸 铜、一氧化锰、硫酸亚铁、碘化钾、碳酸钴。
[0198] 每天在喂哺乳动物之前将一液盎司肉汁组合物与二分之一杯食物组合物混合。按 哺乳动物监护人所需要的确定肉汁组合物的量。
[0199] 本文中公开的尺寸和值不应被理解为严格限制为所记载的准确数值。相反，除非 另有说明，每个这种尺寸意在指所记载的值以及包围该值的功能上等效的范围。例如，公开 为"40mm"的尺寸意在指"约40mm"。
【主权项】
1. 包含葡萄糖抗代谢物和/或葡萄糖抗代谢物源的组合物在增强哺乳动物积极情感 和/或能量唤醒的方法中的用途。2. 根据权利要求1所述的用途，其中所述增强哺乳动物积极情感和/或能量唤醒选自 增强的社会互动、新区域和/或新情境中增强的舒适、增强的服从、增强的习惯、增强的警 觉性、增强的意识、增强的活动性及它们的混合。3. 根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中所述哺乳动物选自人类和伴侣动物， 其中伴侣动物选自狗、猫、兔子、白鼬、马、牛，最优选地哺乳动物是选自狗或猫的伴侣动物。4. 根据权利要求1所述的用途，其中所述葡萄糖抗代谢物选自2-脱氧-D-葡萄糖、 5-硫代-D-匍萄糖、3-〇_甲基匍萄糖、1，5-脱水-D-匍萄糖醇、2, 5-脱水-D-甘露醇、甘露 庚酮糖及它们的混合物。5. 根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中所述葡萄糖抗代谢物最优选为甘露庚 酮糖。6. 根据权利要求5所述的用途，其中所述甘露庚酮糖来自植物材料，所述植物材料选 自鳄梨提取物、鳄梨粉、苜蓿、无花果和报春花及它们的混合物。7. 根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中所述组合物包含以组合物的重量 计0.0 OOl %至10 %的所述葡萄糖抗代谢物，优选为0.0 Ol %至5 %，更优选为0.0 Ol %至 1. 5%，以及最优选为0? 01 %至0? 5%。8. 根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中每天给哺乳动物的所述葡萄糖抗代谢 物的剂量为〇. 5mg/kg至200mg/kg，其中mg是葡萄糖抗代谢物的水平，和kg是哺乳动物的 体重的千克，优选为lmg/kg至150mg/kg，更优选为2mg/kg至100mg/kg，以及最优选为2mg/ kg 至 50mg/kg〇9. 根据权利要求8所述的用途，其中所述葡萄糖抗代谢物是甘露庚酮糖，每天给哺乳 动物的剂量为〇. 5mg/kg至20mg/kg，其中mg是葡萄糖抗代谢物的水平，和kg是哺乳动物的 体重的千克，优选为lmg/kg至10mg/kg，更优选为2mg/kg至8mg/kg.10. 根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中所述组合物选自营养均衡的食物、营 养均衡的宠物食物、营养均衡的狗食和营养均衡的猫食。11. 根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中所述组合物食物补充剂选自零食、咀 嚼物、饼干、肉汁、调味汁、饮料、补充水、酸奶、粉末及它们的组合。12. 根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中所述组合物还包含动物蛋白、植物 蛋白、含淀粉物质、蔬菜、水果、蛋基材料、未变性蛋白、食品级聚合物粘合剂、凝胶、多元醇、 淀粉、树胶、香料、调味品、盐、着色剂、缓释化合物、矿物质、维生素、抗氧化剂、益生元、益生 菌、芳香改性剂、脂质及它们的组合。
【专利摘要】本发明涉及包含葡萄糖抗代谢物和/或葡萄糖抗代谢物源的组合物在增强哺乳动物积极情感和/或能量唤醒的方法中的用途。
【IPC分类】A61K36/48, A61K36/185, A61K36/54, A61K31/7004, A61P25/00, A61K36/60
【公开号】CN105246488
【申请号】CN201480029845
【发明人】G·M·达文波特, A·K·肖夫勒, M·A·古丁, D·K·英格拉姆
【申请人】爱默思公司
【公开日】2016年1月13日
【申请日】2014年5月22日
【公告号】CA2911225A1, EP2805721A1, WO2014190139A1