ngs);狭窄；直肠炎；结肠癌；或瘘管，更优选为治疗结肠粘膜组织的疾病或损伤。
[0029]本发明的另一实施方式是在有或没有在先的切除或消融的情况下，使用如本文所描述的组织特异性ECM(TS-ECM)支架治疗患病或损伤的组织的方法。因此，所述方法的一个实施方式包括下述步骤:
[0030]a.任选地对损伤或患病的组织进行粘膜切除；
[0031]b.使用选自下述的组织制备TS-ECM移植物或支架组合物:肠道、生殖器(除了阴道)、皮肤、胰腺、肾、循环组织和呼吸组织；以及
[0032]c.将TS-ECM支架或组合物植入、移植或施用至患者中的组织，所述患者遭受影响相同的肠道、生殖器(除了阴道)、皮肤、胰腺、肾、循环组织和呼吸组织的疾病或病况。
[0033]将会理解的是，本发明的ECM或TS-ECM移植物、支架或组合物可以是可分散干细胞或ECM凝胶、溶液或悬浮液的生物相容的多孔、大孔或微孔基质。另外，本发明的ECM或TS-ECM可以是凝胶状的。
[0034]本领域中描述了制备用作细胞生长基质的管材、片材和凝胶化、溶解的ECM组合物或用作移植物的支架的方法。凝胶ECM组合物可在植入或施用至患者之前以组合物原位凝胶的凝胶化之前的未凝胶形式被模制。例如，美国专利号8，361，503描述了形成ECM移植物的这些和其他方法，通过参考将该专利整体引入。
[0035]在优选的实施方式中，根据如描述的一个或多个方法制备凝胶ECM组合物。例如，可通过下述方法制备凝胶ECM，所述方法包括:
[0036]i)粉碎 ECM，
[0037]ii)通过用在酸性溶液中的酸蛋白酶消化以产生消化液，来溶解完整的、非透析或非交联的ECM，
[0038]iii)调整消化液的pH至在7.2和7.8之间的pH值以产生中性消化液，以
[0039]及
[0040]iv)使溶液在大于25°C的温度下胶凝。
[0041]在制备ECM移植物或支架组合物的方法的另一实施方式中，进一步包括超声该支架。本发明的进一步方法包括将TS-ECM支架附着至患者的组织，其中所述支架的表面包括凝胶溶解的ECM，其用患者的细胞如干细胞嵌入或包被，其中在将支架植入、移植或施用至所述组织之前，所述嵌入或包被的细胞允许足够的时间使患者的细胞生长成支架。
[0042]在进行本发明的方法中，如本文所描述的方法或制备ECM的其他已知方法来制备支架或移植物，然后植入、移植或施用至少一部分患病或损伤的组织，并且允许保持与患病的或损伤的组织接触足够的时间，从而替换细胞生长且替换患病或损伤的细胞。足够的时间可以是一天至约六个月。
[0043]有利地，植入、移植或施用ECM移植物提供了用于将干细胞迀移至植入、移植或施用ECM移植物的位点的刺激。例如，在治疗UC时，ECM移植物被植入、移植或施用使其与至少一部分结肠接触，其中患病或损伤的结肠粘膜已经(在粘膜切除术后的情况下)或将(在未进行粘膜切除术的情况下)保持与粘膜接触一段时间，以允许结肠粘膜细胞的生长和替换，导致用健康的细胞替换患病或损伤的细胞。ECM移植物可以提供为相对短的固体区段，大约1-10厘米，其同时或顺序植入、移植或施用至结肠的内壁。可选地，可以制备具有对应整个结肠的多个片段或长度的ECM移植物。
【附图说明】
[0044]图1显示如本文所描述的从用小肠道粘膜下层细胞外基质(SIS-ECM)治疗的狗中移除的结肠片段(下图)的结果；显微照片(上图A-D)显示沿着结肠片段的远端一近端梯度显微镜细胞检查，且图解了沿着梯度增加的粘膜覆盖率3，即:在远端吻合看到不完整的粘膜覆盖(A)，朝近端出现逐渐增加的粘膜覆盖(B)、(C)和(D)。
【具体实施方式】
[0045]本发明涉及通过替换或刺激患病或损伤的粘膜细胞和组织的替换而不用结肠切除术来治疗炎性肠病(IBD)，例如，溃疡性结肠炎(UC)或克罗恩病(CD)等。
[0046]在一个实施方式中，本发明的方法包括通过下述步骤治疗损伤或患病的下肠道组织:(1)任选地对患病或损伤的结肠的粘膜内层进行粘膜切除；以及(2)用干细胞或祖细胞接种结肠的粘膜内层，或刺激干细胞和祖细胞迀移至具有结肠的粘膜内层的疾病或损伤的症状、或遭受结肠的粘膜内层的疾病或损伤的患者中的患病或损伤的结肠组织。结肠的粘膜内层的疾病可以是炎性肠病(IBD)，该方法可以用于治疗、改善或治愈IBD。
[0047]因此，本发明可以包括通过将干细胞或祖细胞直接递送至损伤或患病的结肠组织来接种干细胞或祖细胞，其中干细胞或祖细胞制备为流体组合物如溶液、悬浮液或凝胶，用于通过注射或注入结肠的内腔递送至结肠组织，从而干细胞或祖细胞与结肠的腔壁接触且至少临时存在于结肠的腔壁，以便启动或刺激结肠的粘膜内层的重建组织重构。因此，本发明方法可以实现用新的健康结肠组织替换损伤或患病的结肠组织。
[0048]可选地，干细胞或祖细胞可以通过将细胞外基质(ECM)组合物，例如，ECM移植物或支架，以固体(片材或管材)或流体(溶液、悬浮液或凝胶)的形式引入或接触结肠腔壁，从而刺激损伤或患病的结肠组织的位点。
[0049]在本发明的另一实施方式中，干细胞或祖细胞可以并入固体或流体ECM组合物，包括干细胞或祖细胞的ECM组合物可以通过适于如本文所描述组合物的递送方式递送自至结肠的粘膜内层。例如，固体ECM可以以内窥镜方式植入结肠内层，或流体ECM可以注入、注射或喷射至结肠。
[0050]通过设计，ECM快速原位降解并且促进炎症响应，包括将巨噬细胞迀移至位点。ECM的一个独特的特征是促进这些巨噬细胞的表型从Ml型(促炎症，例如，在遭受UC的患者中可见)转换至M2型(促组织重构，例如，在没有经历促炎症病况的人中)。该Ml至M2表型转换的重要的分支是使得可能有炎症倾向的组织仍保持健康。
[0051]可使用任何通常接受的方法如组织切除或消融法，在植入、移植或施用移植物之前，进行以移除患病或损伤的组织(例如，结肠粘膜组织)的任选粘膜切除术步骤。已知的切除或消融方法包括内窥镜或外科粘膜切除(切除)、内窥镜激光疗法、光动力学疗法、使用氩等离子体凝固的内窥镜热凝固法、冷冻治疗、使用m)TA或其他消融剂如加热的或“热”生理盐水或其他水溶液的射频消融或消除。
[0052]通过已知方法如在位点注射干细胞，可以进行用干细胞或祖细胞接种切除粘膜的组织，如在医学文献中描述。参见例如以下文献:Lanzoni，G.，Inflammatory boweldisease:Moving toward a stem cell-based therapy, World J Gastroenterol.14(29):4616-4626 (2008年8月7日)，其总结了使用造血干细胞和间质干细胞治疗IBD，但是没有教导或暗示先前的粘膜切除术。
[0053]优选地，通过在位点放置和/或固定(例如，植入、移植或施用)以ECM支架或移植物形式的细胞外基质(ECM)材料或组合物，可以将干细胞引入切除粘膜的组织。将ECM组合物引入切除粘膜的位点可以是固体片材或管材的形式，或可以为流体的形式如溶液、悬浮液或凝胶。固体ECM材料的放置或固定可以通过缝合、夹子、钉住、胶合或熟知的其他固定方式来进行。
[0054]可选地，可以通过通常采用的流体施用或递送方法如注射、注入或浸泡(“喷出”在位点上)或通过将流体喷射在位点上而施用流化的ECM。优选的喷射技术是，使用例如以内窥镜方式递送雾化的ECM流体来进行。
[0055]如本文所使用的，当提及ECM时，术语“组合物”、“材料”、“支架”和“移植物”可以交换使用，并且意味着具体的构造如为固体、液体、流体或其他形式。例如，“ECM支架”可以是固体或流体形式。
[0056]优选地，流化的ECM组合物形成为凝胶，使得其具有粘性特性，并且具有足够的粘度从而流体自粘附至身体内所期望的区域。在优选的实施方式中，流化的ECM是当施加或施用时具有相对非粘性液体特性的水凝胶，在施用或施加位点接触身体时，或在施用或施加位点接触身体后不久有利地变稠或更加有粘性，形成粘合剂凝胶。可以通过升高温度，例如，施用之后身体加热来启动凝胶化。流体ECM也可以与分开的粘性试剂如水凝胶或其他通常已知的凝胶剂混合，以提供足够的粘度。可选地，可以施用两种流体，由此至少一种流体包含ECM材料，其中两种流体在彼此接触或混合时进行胶凝。
[0057]非常确定的是，当存在足够的组织形成血管时，ECM组合物可使得干细胞迀移至位点，并且血管提供足够的导管用于细胞迀移至位点。另外，ECM与相邻的或下面的组织经化学信号传导通讯，相邻的或下面的组织与ECM通过称为“动态相互作用”的现象通讯，其优化使用ECM时的细胞和组织替换或再生。因此，ECM组合物可以用作固体、液体或凝胶支架以用于细胞和组织在放置、施用或施加的位点处生长。
[0058]在进一步的实施方式中，ECM衍生的组合物可以是组织移植物，由此ECM组合物用作促进组织在植入位点新的生长的支架。该支架可以是放置在所期望的位点的ECM管材或片材。支架可以是其中可分散干细胞或ECM凝胶、溶液或悬浮液的生物相容的多孔、大孔或微孔基质。ECM还可以在干细胞或ECM溶液或悬浮液的分散之后进行胶凝。
[0059]在一个