揽拌的状态，向溶液中缓慢滴加 Imol/L的乙酸锋水溶液，直到溶液体系瞬间澄清。3000~4000rpm旋转离屯、得纳米氧化锋粒 子，粒径保持在20~200纳米。
[0033] =、负载=屯氧化锋纳米粒子的制备
[0034] 将20mg纳米氧化锋粒子超声分散在24mL丙酬/甲醇(体积比1:1)混合溶剂中，加入 24mgS屯超细粉超声溶解，于37°C下缓慢滴入200血含有少量S乙胺的去离子水，通过减压 旋转蒸馈除掉丙酬和甲醇。在8000pm转速下离屯、lOmin，用去离子水洗涂3次除去游离的药 物，然后冷冻干燥得到负载=屯氧化锋纳米粒子。
[0035] 四、负载=屯纳米氧化锋凝胶的制备
[0036] 将30mgS屯氧化锋纳米粒子加入IOml二氯甲烧中超声溶解，立即将上述超声溶解 后的溶液滴加于机械揽拌下的2.5%的聚丙締酷胺水溶性壳聚糖水凝胶中。滴加完继续揽 拌2分钟，然后在250W超声下冰浴10分钟，转到紫外灯下进行福射1小时后，继续揽拌2小时， W挥干二氯甲烧，得载S屯氧化锋的纳米粒子混悬液。将所得纳米粒混悬液先于1000 rpm下 低速离屯、除去未载入的药物沉淀，再200(K)rpm高速离屯、30分钟，沉淀用蒸馈水洗涂3次。将 所得到的沉淀超声分散在IOml蒸馈水中，加入3ml甘露醇，冷冻干燥48小时得负载=屯纳米 氧化锋凝胶。
[0037] 抑菌性能测试:将四种不同的菌接种到琼脂平板上，用直径为4mm的打孔器在每个 营养琼脂平板上均匀打出4个孔。用微量移液器加入25iU配置好的不同纳米氧化锋含量的 凝胶(米诺环素浓度为扣g/mU。静置，倒置培养皿于37°C培养24h后，用游标卡尺测量抑菌 直径。抑菌圈直径/mm =总抑菌直径-孔直径(4mm)。
[0038] 如图1所示，本发明的中西药联用纳米缓释凝胶的抑菌性能测试结果，抑菌圈直径 大于7mm视为有抑菌活性。由结果能看出凝胶的抑菌能力随纳米氧化锋含量增加逐步增大， 当纳米氧化锋含量大于0.6 %时抑菌能力较为稳定。
[0039] 图2是本发明的中西药联用纳米缓释凝胶的对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)抑菌性能测试对照实验。从实验结果可W看出加入氧化锋W后，凝胶的抑菌效果成 倍增加，优于=屯单独使用的效果(凝胶中=屯含量均为0.1 %，纳米氧化锋含量为0.6 % )。
[0040] 表1是本发明的中西药联用纳米缓释凝胶的临床疗效:治疗组外用中西药联用纳 米缓释凝胶(含氧化锋纳米粒质量分数为0.6 %，S屯含量为0.1 % )，30mg/次;对照组舰仿 纱条50mg/次；空白组外用空白卡波姆胶，30mg/次，均为日一次。连续治疗7天，观察到新鲜 肉芽组织产生即为有效。
[0041 ]表1中西药联用纳米缓释凝胶的临床对照实验
[0043]应当理解的是，对本领域普通技术人员来说，可W根据上述说明加W改进或变换， 而所有运些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
【主权项】
1. 一种负载三七纳米氧化锌缓释凝胶的制备方法，其特征在于：以聚丙烯酰胺或聚乙 烯醇为凝胶基质材料，结合纳米氧化锌及中药三七制备中西药联用的缓释凝胶;其组分为： 三七粉、纳米金属氧化锌、凝胶基质材料、水溶性壳聚糖、保湿剂；重量百分比为：三七粉 0 · 1 %~1 · 0 % (W/W)，纳米金属氧化锌0 · 2 %~0 · 8 % (W/W)，凝胶基质材料84 %~90 % (W/ 1)，水溶性壳聚糖5%~10%(1/1)，保湿剂2.5%~5%(1/￥)。2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述保湿剂为甘油、丙二醇中的一种 或多种。3. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述负载三七纳米氧化锌缓释凝胶制 备步骤如下： 1) 先辐射后冻融的方法制备聚丙烯酰胺(PAM)/水溶性壳聚糖水凝胶； 2) 反胶束法制备纳米氧化锌，粒径保持在20~200纳米； 3) 先超声后冷冻干燥制备负载三七氧化锌的纳米粒子； 4) 溶剂挥发法将负载三七氧化锌的纳米粒子制备水凝胶。4. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于:聚丙烯酰胺(PAM)/水溶性壳聚糖水凝 胶的制备方法如下：将聚丙烯酰胺按照l:20g/ml的比例浸泡于蒸馏水中，重复三次，于95°C 恒温回流3h至聚合物完全溶解;将冷却后的聚丙烯酰胺溶液与所述水溶性壳聚糖和所述保 湿剂混合，机械搅拌30min，之后在超声波清洗器中超声15min去泡，将所得溶液倒入塑料培 养皿中静置，采用先紫外辐射后冻融法制备水凝胶:辐照在氮气气氛下进行，剂量分别为40 和60kGy，剂量率为0.76kGy/h;将辐照得到的水凝胶再进行循环冷冻融化处理1~2次，冷冻 温度为20°C，冷冻时间为15h;室温下融化，融化时间为lh。5. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：纳米氧化锌的制备方法如下：精确配 置lmol/L的乙酸锌水溶液待用；然后，称量0.3644g的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)，加入 到10ml的环己烷中；随后向溶液中精确滴加5ml的异丙醇（IPA)，持续搅拌至形成均匀的乳 白色乳液;保持搅拌的状态，向溶液中缓慢滴加之前配置的乙酸锌水溶液，直到溶液体系瞬 间澄清；继续滴加剩余乙酸锌水溶液，该透明状态仍会在一定范围内保持澄清；3000~ 4000rpm旋转离心得纳米氧化锌颗粒，粒径保持在20~200纳米。6. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：负载三七氧化锌的纳米粒子的制备方 法如下：按照丙酮/甲醇体积比1:1配制混合溶剂，将纳米氧化锌粒子超声分散在混合溶剂 中，待充分溶解后，加入三七粉超声溶解，于37°C下缓慢滴入含有少量三乙胺的去离子水， 通过减压旋转蒸馏除掉丙酮和甲醇;在8000rpm转速下离心10min，用去离子水洗涤3次除去 游离的药物，然后冷冻干燥得到负载三七氧化锌纳米粒子;混合溶剂体积(ml):纳米氧化锌 粒子质量(mg):三七粉质量(mg):去离子水体积(ml) = 1:1-2:1-2:8-10。7. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：负载三七纳米氧化锌的聚丙烯酰胺/ 水溶性壳聚糖水凝胶制备方法:将三七氧化锌纳米粒子加入二氯甲烷中，三七氧化锌纳米 粒子(mg):二氯甲烷(ml) = 3:1-5,超声充分溶解，立即将所得溶液滴加到机械搅拌下的 2.5 %聚丙烯酰胺/水溶性壳聚糖水凝胶溶液中；滴加完继续搅拌2分钟，然后在250W下冰浴 超声10分钟，转到紫外灯下进行辐射；1小时后，关掉紫外灯，继续搅拌2小时，以挥发完二氯 甲烷，得载三七氧化锌的纳米粒混悬液;将所得纳米粒混悬液先于lOOOrpm下低速离心除去 未载入的药物沉淀，再20000rpm高速离心30分钟，沉淀用蒸馏水洗涤3次;将所得到的沉淀 超声分散在蒸馏水中，加入甘露醇，沉淀(mg):蒸馏水(ml):甘露醇(ml) = 1:1-2:0.5，冷冻 干燥48小时得载三七纳米氧化锌凝胶。8. 用权利要求1-7任一所述制备方法制备的负载三七纳米氧化锌缓释凝胶。9. 权利要求8所述的负载三七纳米氧化锌缓释凝胶在制备治疗干槽症药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了负载三七纳米氧化锌缓释凝胶及其制备方法和应用，以聚丙烯酰胺或聚乙烯醇为凝胶基质材料，结合纳米氧化锌及中药三七制备中西药联用的缓释凝胶；其组分为：三七粉、纳米金属氧化锌、凝胶基质材料、水溶性壳聚糖、保湿剂；其中，纳米氧化锌作为靶向药物的有效载体，将中药三七输送到特定靶组织，同时纳米氧化锌和三七起协同作用，从多种机制治疗干槽症，增强药效的同时减少药物副作用，具有缓释、靶向、生物利用度高等特点。
【IPC分类】A61P1/02, A61K47/10, A61K36/258, B82Y30/00, C01G9/02, C08L5/08, C08J3/075, A61K47/36, C08L33/26, A61K47/32, A61K47/04, A61K9/06, A61P31/04
【公开号】CN105497087
【申请号】CN201510824644
【发明人】牟杰, 刘宗响, 裴冬生, 高军红, 姜力群, 李程, 张彦卓, 徐新, 彭甜甜
【申请人】牟杰
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年11月25日