青葛締，终浓度为如M。
[0074] 实验组3:加入青葛締，终浓度为10測。
[00巧]实验组4:加入青葛締，终浓度为20iiM。
[0076] 2.3细胞培养24小时后，吸走培养基，每孔加入10化I的MTT(四甲基偶氮挫盐)试 剂，37°C，5%C〇2及饱和湿度条件下继续培养4小时。
[0077] 2.4小屯、吸去孔内液体，每孔加入150ul二甲基亚讽，置摇床上低速振荡lOmin，使 结晶充分溶解。
[0078] 用酶标仪测定在波长为450nm处的吸光度值(OD)，570nm作为参考波长，细胞生长 抑制率按公式:抑制率=(对照孔OD值-实验孔OD值)/对照孔OD值）X 100%计算。
[0079] 3.实验结果
[0080] 表3青葛締对化p3B2.1-7细胞增殖的影响
[0082] 结果如表3所示，青葛締能有效抑制化p3B2.1-7细胞增殖，其抑制率随剂量加大而 递增下面。
[0083] 实验二青葛締对人肝癌细胞株QGY-7703增殖的影响
[0084] 实验目的：研究青葛締对人肝癌细胞株QGY-7703增殖的影响。
[0085] 1.实验材料
[00化]1.1细胞株人肝癌细胞株QGY-7703
[0087] 1.2药材、试剂和仪器青葛締:购于天津±兰科技有限公司，批号A777550。胎牛 血清化yclone公司），MEM培养基(Gibco公司），DMSO(sigma公司），MTT(sigma公司）；膜蛋白 酶(G化CO公司）。倒置相差显微镜（CKX41奥林己斯）；BioTek化X800酶标仪（美国BioTek公 司）；低速台式自动平衡离屯、机(DT5-3)。
[0088] 2.实验方法
[00例 2.1 QGY-7703细胞培养生长至指数生长期时，即Wo. 25 %膜蛋白酶消化，1000 X g 离屯、3min，细胞沉淀W10 %FBS的1640培养基调整至5 X IO4个/ml，96孔培养板每孔接种200 ，置于37°C、5%C02及饱和湿度条件下培养24小时。
[0090] 2.2每组设5个复孔，每孔中加入不同浓度的青葛締，上述条件下继续培养24小 时。
[0091] 阴性对照组：即不加药组。
[0092] 根据所加入的药物将实验分为4组：
[0093] 实验组1:加入青葛締，终浓度为化M。
[0094] 实验组2:加入青葛締，终浓度为如M。
[00巧]实验组3:加入青葛締，终浓度为10測。
[0096] 实验组4:加入青葛締，终浓度为20iiM。
[0097] 2.3细胞培养24小时后，吸走培养基，每孔加入10化1的MTT(四甲基偶氮挫盐)试 剂，37°C，5%C〇2及饱和湿度条件下继续培养4小时。
[0098] 2.4小屯、吸去孔内液体，每孔加入150ul二甲基亚讽，置摇床上低速振荡IOmin，使 结晶充分溶解。
[0099] 用酶标仪测定在波长为450nm处的吸光度值(0D)，570nm作为参考波长，细胞生长 抑制率按公式:抑制率=(对照孔OD值-实验孔OD值)/对照孔OD值）X 100%计算。
[0100] 3.实验结果：
[0101] 表4青葛締对QGY-7703细胞增殖的影响
[0104]结果如表4所示，青葛締能有效抑制QGY-7703细胞增殖，其抑制率随剂量加大而递 增下面。
[010日]实验S青葛締对人肝癌细胞株化h7增殖的影响
[0106] 实验目的:研究青葛締对人肝癌细胞株化h7增殖的影响。
[0107] 1.实验材料
[0108] 1.1细胞株人肝癌细胞株化h7
[0109] 1.2药材、试剂和仪器青葛締:购于天津±兰科技有限公司，批号A777550。胎牛 血清化yclone公司），MEM培养基(Gibco公司），DMS0(sigma公司），MTT(sigma公司）；膜蛋白 酶(G化CO公司）。倒置相差显微镜（CKX41奥林己斯）；BioTek化X800酶标仪（美国BioTek公 司）；低速台式自动平衡离屯、机(DT5-3)。
[0110] 2.实验方法
[01川 2.1化h7细胞培养生长至指数生长期时，即WO. 25 %膜蛋白酶消化，1000 X g离屯、 Smin，细胞沉淀W10 %FBS的1640培养基调整至5 X IO4个/ml，96孔培养板每孔接种20化1， 置于37°C、5 % C02及饱和湿度条件下培养24小时。
[0112] 2.2每组设5个复孔，每孔中加入不同浓度的青葛締，上述条件下继续培养24小 时。
[0113] 阴性对照组：即不加药组。
[0114] 根据所加入的药物将实验分为4组：
[0115] 实验组1:加入青葛締，终浓度为1測。
[0116] 实验组2:加入青葛締，终浓度为如M。
[0117] 实验组3:加入青葛締，终浓度为10測。
[0118] 实验组4:加入青葛締，终浓度为20測。
[0119] 2.3细胞培养24小时后，吸走培养基，每孔加入10化1的MTT(四甲基偶氮挫盐)试 剂，37°C，5%C〇2及饱和湿度条件下继续培养4小时。
[0120] 2.4小屯、吸去孔内液体，每孔加入150ul二甲基亚讽，置摇床上低速振荡lOmin，使 结晶充分溶解。
[0121] 用酶标仪测定在波长为450nm处的吸光度值(0D)，570nm作为参考波长，细胞生长 抑制率按公式:抑制率=(对照孔OD值-实验孔OD值)/对照孔OD值）X 100%计算。
[0122] 3.实验结果
[0123] 表5青葛締对化h7细胞增殖的影响
[0125] 结果如表5所示，青葛締能有效抑制化h7细胞增殖，其抑制率随剂量加大而递增下 面。
[0126] 实验四青葛締对人肝癌细胞株sk-hepl增殖的影响
[0127] 实验目的:研究青葛締对人肝癌细胞株sk-hepl增殖的影响。
[012引 1.实验材料
[0129] 1.1细胞株人肝癌细胞株sk-hepl
[0130] 1.2药材、试剂和仪器青葛締:购于天津±兰科技有限公司，批号A777550。胎牛 血清化yclone公司），MEM培养基(Gibco公司），DMS0(sigma公司），MTT(sigma公司）；膜蛋白 酶(G化CO公司）。倒置相差显微镜（CKX41奥林己斯）；BioTek化X800酶标仪（美国BioTek公 司）；低速台式自动平衡离屯、机(DT5-3)。
[0131] 2.实验方法
[0132] 2.1 sk-hepl细胞培养生长至指数生长期时，即WO. 25 %膜蛋白酶消化，1000 Xg 离屯、3min，细胞沉淀W10 %FBS的1640培养基调整至5 X IO4个/ml，96孔培养板每孔接种200 ，置于37°C、5%C02及饱和湿度条件下培养24小时。
[0133] 2.2每组设5个复孔，每孔中加入不同浓度的青葛締，上述条件下继续培养24小 时。
[0134] 阴性对照组：即不加药组。
[0135] 根据所加入的药物将实验分为4组：
[0136] 实验组1:加入青葛締，终浓度为1測。
[0137] 实验组2:加入青葛締，终浓度为如M。
[0138] 实验组3:加入青葛締，终浓度为10測。
[0139] 实验组4:加入青葛締，终浓度为20iiM。
[0140] 2.3细胞培养24小时后，吸走培养基，每孔加入10化1的MTT(四甲基偶氮挫盐)试 剂，37°C，5%C〇2及饱和湿度条件下继续培养4小时。
[0141] 2.4小屯、吸去孔内液体，每孔加入150ul二甲基亚讽，置摇床上低速振荡IOmin，使 结晶充分溶解。
[0142] 用酶标仪测定在波长为450nm处的吸光度值(0D)，570nm作为参考波长，细胞生长 抑制率按公式:抑制率=(对照孔OD值-实验孔OD值)/对照孔OD值）X 100%计算。
[0143] 3.实验结果：
[0144]表6青葛締对sk-hepl细胞增殖的影响
[0146]结果如表6所示，青葛締能有效抑制sk-hepl细胞增殖，其抑制率随剂量加大而递 增下面。
[0147]实验五青葛締对人肝癌细胞株QGY-7703调亡的影响
[014引实验目的：研究青葛締对人肝癌细胞株QGY-7703调亡的影响。
[0149] 1.实验材料
[0150] 1.1细胞株人肝癌细胞株QGY-7703
[0151] 1.2药材、试剂和仪器青葛締:购于天津±兰科技有限公司，批号A777550。胎牛 血清化yclone公司），MEM培养基（Gibco公司），DMS0(sigma公司）；细胞调亡试剂盒（抓公 司）；膜蛋白酶(G化CO公司）。倒置相差显微镜(CKX41奥林己斯）；BioTek化X800酶标仪（美 国BioTek公司）；低速台式自动平衡离屯、机(0巧-3);流式细胞仪(Bekman F巧00)。
[0152] 2.实验方法
[0153] 2.1 QGY-7703细胞培养生长至指数生长期时，即Wo. 25 %膜蛋白酶消化，1000 X g 离屯、3min，细胞沉淀W10 %FBS的1640培养基调整至5 X IO5个/ml，6孔培养板每孔接种2ml， 置于37°C、5 % C〇2及饱和湿度条件下培养24小时。
[0154] 2.2每组设3个复孔，每孔中加入不同浓度的青葛締，上述条件下继续培养24小 时。
[0K5]根据所加入的药物将实验分为6组：
[0156] 阳性对照组:加入顺销，终浓度为lOiig/ml。
[0157] 阴性对照组：即不加