专利名称：：一种降解黄曲霉毒素的复合微生物菌剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及的是微生物领域，具体的说是一种降解黄曲霉毒素的复合微生物菌剂。
背景技术：
：现有对脱霉的研究是针对一些菌种的筛选，能够在微生物方面应用于实践中的还没有，目前采用照射的办法，该方法，是用电子束辐照含有黄曲霉毒素的样品得到黄曲霉毒素含量降低的样品，虽然照射的方法简单，但是在照射杀菌的同时，菌也会释放出内毒素，同时带来了其它不利的因素，还有一些脱霉剂，可以导致维生素和矿物质的吸附，导致营养缺乏，如果添脱霉剂之后都要额外增加微量营养的使用量，增加成本。
发明内容本发明的目的是要提供一种降解黄曲霉毒素的复合微生物菌剂。为实现上述目的，本发明采用的技术方案为一种降解黄曲霉毒素的复合微生物菌剂由产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌组成，而后于培养基中培养28-37°C培养60-72小时，即为复合微生物菌剂，按重量份数计产朊假丝酵母粪肠球菌嗜酸乳杆菌枯草芽孢杆菌=1-31-31-31-3。所述培养基为培养基琼脂lg、牛肉膏lg、酵母浸粉2.5g、蔗糖35g、消泡剂1.5g、蛋白胨lg，蒸馏水加至1000ml，pH6.0，12rC高压灭菌20分钟，备用。所述降解黄曲霉毒素的复合微生物菌剂剂型为喷雾型。本发明所具有的优点本发复合微生物菌剂用于农产品及饲料产品中，即能够去除霉菌的同时，又可增加农产品营养成分，改变农产品发霉的气味。本发复合微生物菌剂以喷剂形式喷散在农产品中，动物应用后，有利于消化和吸收，调节动物的肠道菌群的作用，达到肠内菌群的动态平衡的作用。本发明根据不同菌种对霉菌的不同的抗菌活性进行一定配比，以复合益生菌的所需的营养成分、温度等条件的要求进行培养。本发明菌剂具有多种益生菌群，通过增加菌群的营养成分及对酸度的控制，使益生菌群达到一定的繁殖期，从而对霉菌有一定的抑制作用，降低霉菌毒素的作用，一些农产品及饲料都有常发霉的现象，霉菌中含量最高的毒素为黄曲霉毒素Bi，采用本发明能够降低此种霉毒素，安全可靠，价格低廉，减少经济损失。具体实施例方式以下结合实施例对本发明进行进一步描述复合微生物菌剂的制备方法将增殖培养后的产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌按重量份数计产朊假丝酵母粪肠球菌嗜酸乳杆菌枯草芽孢杆菌==1:1:1:1，而后于培养基中培养28-30°C培养60小时，即为复合微生物菌剂，所述培养基为琼脂lg、牛肉膏lg、酵母浸粉2.5g、蔗糖35g、消泡剂1.5g、蛋白胨lg，蒸馏水加至1000ml，pH6.0，121°C高压灭菌20分钟，备用。所述复合微生物菌剂剂型为喷雾型。所述产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌按照常规方法在下述各自的培养基中进行增殖培养。所述产朊假丝酵母增殖培养于马铃薯浸粉(市购)3g，葡萄糖20g，琼脂粉15g，蒸馏水加至IOOOml培养基中，121°C高压灭菌20分钟，备用。所述粪肠球菌增殖培养于葡萄糖2%，蛋白胨1%，牛肉膏1%，酵母膏0.5%，磷酸氢二钾0.2%，乙酸钠0.5%，柠檬酸铵0.2%，硫酸镁0.058%，硫酸锰0.025%，琼脂1.5-2%,pH6.5培养基中，121°C高压灭菌20分钟，备用。所述嗜酸乳杆菌增殖培养于葡萄糖2%，蛋白胨1%，牛肉膏1%，酵母膏0.5%，磷酸氢二钾0.2%，乙酸钠0.5%，柠檬酸铵0.2%，硫酸镁0.058%，硫酸锰0.025%，琼脂1.5-2%,pH6.5培养基中，121°C高压灭菌20分钟，备用。所述枯草芽孢杆菌增殖培养于蛋白胨10g，琼脂20g，氯化钠5g，肉浸粉10g，水加至1000ml，pH7.2培养基中，121°C高压灭菌20分钟，备用。应用例将上述喷雾型复合微生物菌剂作用于200斤粉碎后的发霉玉米，上述复合微生物菌剂为1000ml，按照自然风干，即可测定黄曲霉毒素含量(参见表1)。表1复合微生物制剂不同时间对黄曲霉毒素含量检测平均结果(μg/kg)4h(u6h(ug/kg)~~12h(u~~18h(u|24h(ug/kg)g/kg)g/kg)g/kg)对照组25Λ25Γ§25325525Λ试验组2X29Γ9ΙΓδIoTi~~降解率％7Γ5722.8642.6958.0468.11从表中可以看出，本发明复合微生物喷剂具有降解黄曲霉毒素的作用，在24h时，能降低至68.11%，根据国家饲料卫生标准规定饲料中黄曲霉毒素Bl安全限量为20μg/kg，在12h后就可以完全在安全范围内。同时本发明菌剂能够调节发霉的气味，含有的益生菌能有助于消化和吸收，无毒副作用。实施例2复合微生物菌剂将增殖培养后的产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌按重量份数计产朊假丝酵母粪肠球菌嗜酸乳杆菌枯草芽孢杆菌==1:2:2:1，而后于培养基中培养30-32°C培养72小时，即为复合微生物菌剂，应用例将上述喷雾型复合微生物菌剂作用于饲料发霉，共50kg，上述复合微生物菌剂为500ml，按照自然风干，即可测定黄曲霉毒素含量(参见表2)。表2复合微生物制剂不同时间对黄曲霉毒素含量检测平均结果(μg/kg)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>从表中可以看出，复合微生物喷剂具有降解黄曲霉毒素的作用，在24h时，能降低至66.40%，根据国家饲料卫生标准规定饲料中黄曲霉毒素Bl安全限量为20μg/kg，在12h后就可以完全在安全范围内同时本发明菌剂能够调节发霉的气味，含有的益生菌能有助于消化和吸收，无毒副作用。实施例3复合微生物菌剂将增殖培养后的产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌按重量份数计产朊假丝酵母粪肠球菌嗜酸乳杆菌枯草芽孢杆菌==3:1:1:1，而后于培养基中培养35-37°C培养65小时，即为复合微生物菌剂。权利要求一种降解黄曲霉毒素的复合微生物菌剂，其特征在于由产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌组成，而后于培养基中培养28-37℃培养60-72小时，即为复合微生物菌剂，按重量份数计产朊假丝酵母∶粪肠球菌∶嗜酸乳杆菌∶枯草芽孢杆菌＝1-3∶1-3∶1-3∶1-3。2.按权利要求1所述的降解黄曲霉毒素的复合微生物菌剂，其特征在于所述培养基为培养基琼脂lg、牛肉膏lg、酵母浸粉2.5g、蔗糖35g、消泡剂1.5g、蛋白胨lg，蒸馏水加至1000ml,ρΗ6·0，121°C高压灭菌20分钟，备用。3.按权利要求1所述的降解黄曲霉毒素的复合微生物菌剂，其特征在于所述降解黄曲霉毒素的复合微生物菌剂剂型为喷雾型。全文摘要本发明涉及的是微生物领域，具体的说是一种降解黄曲霉毒素的复合微生物菌剂。由产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌组成，而后于培养基中培养28-37℃培养60-72小时，即为复合微生物菌剂，按重量份数计产朊假丝酵母∶粪肠球菌∶嗜酸乳杆菌∶枯草芽孢杆菌＝1-3∶1-3∶1-3∶1-3。文档编号A62D3/02GK101812406SQ200910248910公开日2010年8月25日申请日期2009年12月30日优先权日2009年12月30日发明者侯建华,吕良,张力,张玥,张艳平,徐斌龙,朱立良,王福喜,白子金,罗桂扬,赵明,邢迪,陈思,高林,黄鹤申请人:沈阳科丰牧业科技有限公司