一种冬虫夏草固态培养基及固体发酵的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物技术领域，具体涉及一种冬虫夏草固态培养基及固体发酵的方法。
【背景技术】
[0002]冬虫夏草是麦角菌科真菌，它寄生于虫草蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体上。其主要分布于我国的寒地带和雪山草原等地区，如青海、西藏、四川、云南、甘肃、贵州等地。冬虫夏草具有具有多种生理活性，如补虚损、益精气、保肺、益肾、止血化痰、滋补强壮、抗氧化、提高免疫力等，因此，常用来治疗劳咳痰血、盗汗、阳痿、遗精、黄胆病、肺结核及老年衰弱、慢性咳喘等症。一直以来，冬虫夏草一直被视为珍贵的中药材。但天然冬虫夏草对生长环境要求高，生长率低，本身资源十分有限，而由于冬虫夏草可药食两用，且人们不断发现其新的药理作用，人们对其需要求日益增加，使得自然界中野生虫草越来越少，价格也逐年上涨。
[0003]深层发酵生产的冬虫夏草菌丝的成份及药理作用与天然虫草相似，已成为解决冬虫夏草供不应求、资源匮乏的一种有效途径。目前，工厂里普遍采用的是深层液体发酵工艺，但发酵过程中的搅拌，翻动，可破坏菌丝体，所获得的菌丝体短小，并且破碎。本发明提供一种冬虫夏草固体发酵培养基，不仅成本低，而且废液排放少，后处理简单，且菌丝不易流失，菌丝体生长良好。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是解决现有技术中存在的上述问题，提供一种。
[0005]本发明的技术方案如下:
一种冬虫夏草固态培养基，所述的培养基由包括以下重量份的组分组成:
大米5-10g，
玉米粉2-4g，
氮源l_2g，
麦麸2-4 g，
KH2PO42-4g,
MgSO4l-2g，
Vitamin B12_4g，
Vitamin B23_6g，
PH调节剂，
水余量。
[0006]优选的，所述的氮源选自蛋白胨、酵母浸出粉、蚕蛹粉或奶粉中的一种或多种。
[0007]优选的，所述的Vitamin 1^与 Vitamin B 2的质量比为(0.5_2): (1_3)。
[0008]优选的，所述的培养基的PH为6.5-7.0。
[0009]优选的，所述的料水比为(1-1.5): (1.5-2.5)，料层厚度为(2-2.3) cm。
[0010]一种采用如上所述的固态培养基进行冬虫夏草固体发酵的方法，包括以下步骤:
(1)先取大米5-10g，玉米粉 2-4g，氮源 l-2g，麦麸 2-4 g，KH2PO4 2_4g，MgSO4 l_2g，Vitamin B1 2_4g，Vitamin B2 3_6g，PH调节剂，水余量，制备固态培养基；
(2)将保藏菌种在改良PDA斜面培养基活化，于15-18°C下培养18_25d，取4_6mm2大小的菌种接种于步骤(I)中所制备好的固态培养基中培养，发酵培养结束后，收集菌丝，进行干燥，制成冬虫夏草菌丝成品。
[0011]优选的，步骤(2)中所述的固态培养基中培养的温度为18-22°c，所述的培养为无光照培养。
[0012]优选的，步骤(2)中所述的干燥为低温冷冻干燥，干燥温度为_40°C - -60°C。
[0013]本发明与现有技术相比，有益效果体现在:
1.氮源是虫草菌生长所必需的营养元素，由于虫草菌在原寄主蝙蝠蛾幼虫体内长期寄生，已适应对动物类蛋白的吸收利用，而对植物类蛋白吸收较差，导致其有效成分的含量及生物量低于动物氮源。因此，本发明中将蛋白胨或蚕蛹粉等作为固态培养基的氮源，可提高虫草菌丝体及其主要有效成分的含量
2.本发明对固态培养基的成分进行了严格优化，对固态培养时的培养温度、料水比及光照等培养条件也进行了严格控制，对冬虫夏草菌丝体生长更有利，可明显提高菌丝体中的主要有效成分之一麦留醇的含量。
【具体实施方式】
[0014]下面结合具体实施例对本发明进行详细说明:
实施例1
一种冬虫夏草固态培养基，所述的培养基由包括以下重量份的组分组成:
大米5g，
玉米粉2g，
蛋白胨lg，
麦麸2 g，
KH2PO42g,
MgSO4lg,
Vitamin B12g，
Vitamin B23g，
PH调节剂，
水余量。
[0015]所述的培养基的PH为6.5。
[0016]所述的料水比为1:1.5)，料层厚度为2cm。
[0017]一种采用如上所述的固态培养基进行冬虫夏草固体发酵的方法，其特征在于，包括以下步骤:
(O 先取大米 5g，玉米粉 2g，蛋白胨 lg，麦麸 2g，KH2PO4 2g，MgSO4 lg，Vitamin B1 2g，Vitamin B2 3g，PH调节剂，水余量，制备固态培养基； (2)将保藏菌种在改良PDA斜面培养基活化，于15°C下培养18d，取4mm2大小的菌种接种于步骤(I)中所制备好的固态培养基中培养，培养温度为18°C，无光照培养，发酵培养结束后，收集菌丝，在-40 °C下进行低温冷冻干燥，制成冬虫夏草菌丝成品。
[0018]实施例2
一种冬虫夏草固态培养基，所述的培养基由包括以下重量份的组分组成:
大米10g，
玉米粉4g，
酵母浸出粉2g，
麦麸4 g，
KH2PO44g,
MgSO42g，
Vitamin B14g，
Vitamin B26g，
PH调节剂，
水余量。
[0019]所述的培养基的PH为7.0。
[0020]所述的料水比为1.5:2，料层厚度为2.3cm。
[0021]一种采用如上所述的固态培养基进行冬虫夏草固体发酵的方法，其特征在于，包括以下步骤:
(1)先取大米1(^，玉米粉48，酵母浸出粉28，麦麸4g,KH2PO4 4g,MgSO4 2g, Vitamin B14g，Vitamin B2 6g，PH调节剂，水余量，制备固态培养基；
(2)将保藏菌种在改良PDA斜面培养基活化，于18°C下培养25d，取6mm2大小的菌种接种于步骤(I)中所制备好的固态培养基中培养，培养温度为22°C，无光照培养，发酵培养结束后，收集菌丝，在-60 °C下进行低温冷冻干燥，制成冬虫夏草菌丝成品。
[0022]实施例3
一种冬虫夏草固态培养基，所述的培养基由包括以下重量份的组分组成:
大米8g，
玉米粉3g，
蚕蛹粉1.5g，
麦麸3g，
KH2PO43g,
MgSO41.5g，
Vitamin B13g，
Vitamin B26g，
PH调节剂，
水余量。
[0023]所述的培养基的PH为6.8。
[0024]所述的料水比为1.2:1.9，料层厚度为2.2cm。
[0025]一种采用如上所述的固态培养基进行冬虫夏草固体发酵的方法，包括以下步骤: (1)先取大米8g，玉米粉 3g，蚕蛹粉 1.5g，麦麸 3 g，KH2PO4 3g，MgSO4 1.5g，Vitamin B13g, Vitamin B2 6g，PH调节剂，水余量，制备固态培养基；
(2)将保藏菌种在改良PDA斜面培养基活化，于17°C下培养21d，取5mm2大小的菌种接种于步骤(I)中所制备好的固态培养基中培养，培养温度为20°C，无光照培养，发酵培养结束后，收集菌丝，在-50 °C下进行低温冷冻干燥，制成冬虫夏草菌丝成品。
[0026]上述实施例仅为本发明的优选实施方式，并不应理解为对本发明的限定，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种冬虫夏草固态培养基，其特征在于，所述的培养基由包括以下重量份的组分组成: 大米5-10g， 玉米粉2-4g， 氮源l_2g， 麦麸2-4 g， KH2PO42-4g, MgSO4l-2g， Vitamin B12_4g， Vitamin B23_6g， PH调节剂， 水余量。2.根据权利要求1所述的一种冬虫夏草固态培养基，其特征在于，所述的氮源选自蛋白胨、酵母浸出粉、蚕蛹粉或奶粉中的一种或多种。3.根据权利要求1所述的一种冬虫夏草固态培养基，其特征在于，所述的VitaminB !与 Vitamin B2的质量比为(0.5-2): (1-3)。4.根据权利要求1所述的一种冬虫夏草固态培养基，其特征在于，所述的培养基的PH为 6.5-7.005.根据权利要求1所述的一种冬虫夏草固态培养基，其特征在于，所述的料水比为(1-1.5): (1.5-2.5)，料层厚度为(2-2.3) cm。6.一种采用如权利要求1~5任一所述的固态培养基进行冬虫夏草固体发酵的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)先取大米5-10g，玉米粉 2-4g，氮源 l-2g，麦麸 2-4 g，KH2P042_4g，MgSO4 l_2g，Vitamin B1 2_4g，Vitamin B2 3_6g，PH调节剂，水余量，制备固态培养基； (2)将保藏菌种在改良PDA斜面培养基活化，于15-18°C下培养18_25d，取4_6mm2大小的菌种接种于步骤(I)中所制备好的固态培养基中培养，发酵培养结束后，收集菌丝，进行干燥，制成冬虫夏草菌丝成品。7.根据权利要求6所述的一种冬虫夏草固体发酵的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的固态培养基中培养的温度为18-22Γ，所述的培养为无光照培养。8.根据权利要求6所述的一种冬虫夏草固体发酵的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的干燥为低温冷冻干燥，干燥温度为-40°C - -60°C。
【专利摘要】本发明涉及一种冬虫夏草固态培养基，所述的培养基由包括以下重量份的组分组成：大米5-10g，玉米粉2-4g，氮源？1-2g，麦麸？2-4？g，KH2PO4？？2-4g,MgSO4？1-2g，Vitamin？B1？2-4g，Vitamin？B2？3-6g，PH调节剂，水余量。本发明将蛋白胨或蚕蛹粉等作为固态培养基的氮源，对固态培养基的成分进行了严格优化，对固态培养时的培养温度、料水比及光照等培养条件也进行了严格控制，对冬虫夏草进行发酵培养时，可提高虫草菌丝体及其主要有效成分的含量，更利于冬虫夏草菌丝体的生长，可明显提高菌丝体中的主要有效成分之一麦甾醇的含量。
【IPC分类】C05G3/00
【公开号】CN105000958
【申请号】CN201510346126
【发明人】郭狄
【申请人】中山鼎晟生物科技有限公司
【公开日】2015年10月28日
【申请日】2015年6月23日