用作s1p受体激动剂的2－(芳基)氮杂环甲基羧酸酯、磺酸酯、膦酸酯、次膦酸酯和杂环化合物的制作方法

专利名称：用作s1p受体激动剂的2－(芳基)氮杂环甲基羧酸酯、磺酸酯、膦酸酯、次膦酸酯和杂环化合物的制作方法
背景技术：
本发明涉及是S1P1/Edg1受体激动剂并且因此通过调控白细胞通量、螯合二级淋巴组织中的淋巴细胞和提高血管完整性而具有免疫抑制、抗炎和止血活性的化合物。本发明还涉及包含该类化合物的药物组合物以及治疗或预防方法。
已经表明免疫抑制剂和抗炎剂可用于许多自身免疫和慢性炎性疾病，包括全身性红斑狼疮、慢性类风湿性关节炎、I型糖尿病、炎性肠病、胆汁性肝硬化、葡萄膜炎、多发性硬化和其它病症如克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、大疱性类天疱疮、肉样瘤病、牛皮癣、自身免疫性肌炎、韦格纳氏肉芽肿、鱼鳞病、格雷夫斯氏眼病、特应性皮炎和哮喘、慢性肺病、急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征和脓毒症。还证明其可用作用于治疗癌症、淋巴瘤和白血病的化疗方案的一部分。
虽然这些病症中各病症发病机理的基础可能完全不同，但是其都出现大量自身抗体、自身反应性淋巴细胞和/或涉及天然免疫的细胞激活。该类自身反应性可能部分是由于丧失了正常免疫系统在其下进行运转的稳态控制而造成的。类似地，在骨髓或器官移植后，宿主淋巴细胞识别该外来的组织抗原并开始产生细胞和体液响应，包括抗体、细胞因子和细胞毒性淋巴细胞，其导致了移植物排斥。
自身免疫或排斥过程的一种最终结果是由于其所释放的炎性细胞和介质而造成组织破坏。抗炎剂如NSAID主要通过阻断这些介质的作用或分泌来起作用，但是其并不会改变所说疾病的免疫学基础。另一方面，细胞毒素剂如环磷酰胺以一种非特异性方式起作用，从而使得既切断了正常响应又切断了自身免疫响应。因为感染是其自身免疫性疾病，所以用该类非特异性免疫抑制剂进行治疗的患者实际上很可能会死于感染。
环孢菌素A是一种被用来预防移植器官排斥的药物。FK-506是另一种被批准用于预防移植器官排斥并且特别是肝移植排斥的药物。环孢菌素A和FK-506是通过抑制机体的免疫系统使之不能调动其排斥移植性外来蛋白的天然保护剂的巨大储库而起作用的。环孢菌素A被批准用于治疗严重的牛皮癣并且已经被一些欧洲管理机构(Europeanregulatory agencies)批准用于治疗特应性皮炎。
虽然可有效延迟或抑制移植排斥，但是已知环孢菌素A和FK-506可造成几种不希望出现的副作用，包括肾毒性、神经毒性和肠胃不适。因此，仍然需要并且十分希望研制一种没有这些副作用的免疫抑制剂。
免疫抑制性化合物FTY720是目前正在进行临床试验的淋巴细胞螯合剂。FTY720在哺乳动物体内被代谢成是有效的鞘氨醇1-磷酸酯受体激动剂的化合物。鞘氨醇1-磷酸酯受体的激动调控着白细胞通量、在没有淋巴细胞耗竭(lymphodepletion)的情况下诱导了淋巴结和派伊尔班中淋巴细胞(T-细胞和B-细胞)的螯合和破坏了脾的体系结构，从而干扰了T细胞依赖性和非T细胞依赖性抗体响应。通过提高内皮完整性和抑制作为免疫系统激活后果的血管损害，S1P受体激动剂还具有抗炎性质。这样的免疫抑制和抗炎作用在下列方面是所希望的预防器官移植后的排斥，治疗自身免疫性病症，以及治疗在血管完整性方面具有病因性缺陷的病症例如急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征和脓毒症，-参见Groeneveld，A.B.J.2003.Vascular Pharm.39247-256。
鞘氨醇1-磷酸酯是一种由造血细胞分泌和储存并由被活化的血小板释放的生物活性的鞘脂代谢物。Yatomi，Y.，T.Ohmori，G.Rile，F.Kazama，H.Okamoto，T.Sano，K.Satoh，S.Kume，G.Tigyi，Y.Igarashi，and Y.Ozaki.2000.Blood.963431-8。其可作为G蛋白-偶合的受体族的激动剂来调节细胞增生、分化、存活、和能动性。Fukushima，N.，I.Ishii，J.J.A.Contos，J.A.Weiner，and J.Chun.2001.Lysophospholipidreceptors.Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.41507-34；Hla，T.，M.-J.Lee，N.Ancellin，J.H.Paik，and M.J.Kluk.2001.溶血磷脂受体(Lysophospholipids Receptor).Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.41507-34；Hla，T.，M.-J.Lee，N.Ancellin，J.H.Paik，and M.J.Kluk.2001.溶血磷脂-受体启示(Lysophospholipids-Receptor revelations).Science.2941875-1878；Spiegel，S.，和S.Milstien.2000.新鞘氨醇-1-磷酸酯受体族的功能(Functions of a new family of sphingosine-1-phosphatereceptors).Biochim.Biophys.Acta.1484107-16；Pyne，S.，和N.Pyne.2000.通过G-蛋白偶合的受体的内皮分化基因族发信号的鞘氨醇1-磷酸酯(Sphingosine 1-phosphate signalling via the endothelialdifferentiation gene family of G-protein coupled receptors).Pharm.&Therapeutics.88115-131。已经鉴定出了五种鞘氨醇1-磷酸酯受体(S1P1、S1P2、S1P3、S1P4和S1P5，也被称为内皮分化基因Edg1、Edg5、Edg3、Edg6、Edg8)，其广泛分布在细胞和组织中并且在人和啮齿动物种属体内被良好保存(见表)。与S1P受体的结合引起了通过Gq-、Gi/o、G12-、G13-、和Rho-依赖性途径进行的信号转导。已经表明配体诱导的S1P1和S1P3的活化促进了通过Rac-和Rho-进行的血管生成、趋化性、和粘附连接集合，见Lee，M.-J.，S.Thangada，K.P.Claffey，N.Ancellin，C.H.Liu，M.Kluk，M.Volpi，R.I.Sha′afi，和T.Hla.1999.Cell.99301-12。S1P通过以下方式来提高内皮屏障完整性经由S1P受体，主要是S1P1来装配皮层肌动蛋白细胞骨骼结构和加强细胞细胞连接以及细胞细胞外基质相互作用-，参见Garcia，J.G.N，F.Liu，A.D.Verin，A.Birukova，M.A.Dechert，W.T.Gerthoffer，J.R.Bamburg，D.English，2001.J.Clin.Invest.108689-701，并且S1P受体激动剂，包括FTY720，在小鼠中可以抑制由VEGGF诱导的血管渗透性，参见Sanchez，T.，T.Estrada-Hernandez，J.-H.Paik，M.-T.Wu，K.Venkataraman，V.Brinkmann，K.Claffey，and T.Hla.2003.J.Biol.Chem.27847281-47290。
给动物施用鞘氨醇1-磷酸酯诱导了全身外周血淋巴细胞螯合到二级淋巴器官中，从而产生了治疗学上有用的免疫抑制，参见Mandala，S.，R.Hajdu，J.Bergstrom，E.Quackenbush，J.Xie，J.Milligan，R.Thornton，G.-J.Shei，D.Card，C.Keohane，M.Rosenbach，J.Hale，C.L.Lynch，K.Rupprecht，W.Parsons，H.Rosen.2002.Science.296346-349。但是，鞘氨醇1-磷酸酯也具有一些限制其作为治疗剂的实用性的心血管和支气管收缩作用。鞘氨醇1-磷酸酯的静脉内给药降低了大鼠的心率、心室收缩和血压，参见Sugiyama，A.，N.N.Aye，Y.Yatomi，Y.Ozaki，and K.Hashimoto.2000.jpn.J.Pharmacol.82338-342。在人气道平滑肌细胞中，鞘氨醇1-磷酸酯调控着收缩、细胞生长和促进支气管收缩的细胞因子产生、气道炎症和哮喘中的改型，参见Ammit，A.J.，A.T.Hastie，L.C.Edsall，R.K.Hoffman，Y.Amrani，V.P.Krymskaya，S.A.Kane，S.P.Peters，R.B.Penn，S.Spiegel，R.A.Panettieri.Jr.2001，FASEB J.151212-1214。该不希望出现的鞘氨醇1-磷酸酯的作用与其无选择性地对所有的S1P受体都具有有效的激动剂活性有关。
本发明包括是S1P1/Edg1受体激动剂的选择性高于S1P3/Edg3受体的化合物。S1P1/Edg1受体选择性激动剂具有优于目前疗法的优点并且扩大了淋巴细胞螯合剂和血管完整剂的治疗窗，治疗窗的扩大使得可以耐受更高的剂量并且从而改善了其作为单一疗法的效力。
虽然免疫抑制剂和抗炎剂的主要应用是用于治疗骨髓、器官和移植排斥，但是该类化合物的其它应用还包括可用于治疗关节炎，特别是类风湿性关节炎、胰岛素和非胰岛素依赖性糖尿病、多发性硬化、牛皮癣、炎性肠病、克罗恩氏病、红斑狼疮、哮喘、变态反应、慢性肺病、急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征、脓毒症等等。
因此，本发明的目的在于提供比现有技术化合物更安全更有效的免疫抑制剂和血管完整性化合物。通过本文详细描述，本发明的这些和其它目的对于本领域普通技术人员而言将是明显的。
S1P受体的概述
发明概述本发明包括式I化合物
及其可药用盐。本发明化合物是S1P1/Edg1受体激动剂并且因此通过调控白细胞通量、螯合二级淋巴组织中的淋巴细胞和提高血管完整性而具有免疫抑制、抗炎和止血活性。本发明还涉及包含该类化合物的药物组合物以及治疗或预防方法。
发明详述本发明包括式I化合物 或其可药用盐，其中n是0、1或2；m是0、1或2，这样当m是0时，A直接键合在式I中所示的氮杂环丁烷(n＝0)、吡咯烷(n＝1)或哌啶(n＝2)上；R1、R2、R3和R4独立地选自-H、-F、C1-C4烷基、C1-C4全氟代烷基、-Cl、-Br、C1-C8烷氧基和-OCF3；R5和R6独立地选自-H、-OH、-F、C1-C4烷基和C1-C4全氟代烷基；R7选自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基和噻吩基，每一所述基团任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-OH、-NR8R9、-NO2、苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷氧基、C1-C6烷硫基和C2-C6酰氧基，其中所述苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷氧基、C1-C6烷硫基和C1-C6酰氧基分别任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-OH和C1-C5烷氧基；R8和R9独立地选自C1-C6烷基、C1-C6链烯基和C1-C6炔基，每一所述基团任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-OH和C1-C5烷氧基，或者R8和R9可以与它们所连接的氮原子一起形成任选含有1或2个氧原子的具有3-8个原子的饱和单环，所述环任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-OH和C1-5烷氧基；X、Y和Z独立地选自-C＝、-CH-、-O-、-N＝、-NH-、-N(R10)-和-S-，这样所得环是芳杂环；R10选自C1-C6烷基、C1-C6链烯基和C1-C6炔基，每一所述基团任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-OH和C1-C5烷氧基；A选自-CO2H、-PO3H2、-PO2H2、-SO3H、-CONHSO2R11、-PO(R11)OH、
R11选自C1-C4烷基、苯基、-CH2OH和CH(OH)-苯基；并且每个R12独立地选自-H和-CH3。
本发明的一个实施方案包括其中A是-CO2H的式I化合物。
本发明的另一个实施方案包括其中n是1的式I化合物。
本发明的另一个实施方案包括其中m是1的式I化合物。
本发明的另一个实施方案包括定义如下的式I化合物其中X是-N＝，Y是-N＝，且Z是-O-，这样所形成的环是1，2，4-二唑。
本发明的另一个实施方案包括定义如下的式I化合物其中R7是苯基，所述苯基任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-OH、-NR7R8、-NO2、苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷氧基、C1-C6烷硫基和C2-C6酰氧基，其中所述苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷氧基、C1-C6烷硫基和C1-C6酰氧基分别任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-OH和C1-C5烷氧基。
本发明的另一个实施方案包括式Ia代表的化合物 或其可药用盐，其中p是0、1或2；Ra选自苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6烷氧基和C3-C6环烷氧基，其中所述苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6烷氧基和C3-C6环烷氧基分别任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I和-OH；且Rb选自-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-CH3、-OCH3、-CF3、乙炔基、-NO2和-NH2。
本发明的一个实施方案包括定义如下的式Ia化合物其中p是0或1，且Rb选自-F、-Cl和-CF3。
本发明的另一个实施方案包括定义如下的式Ia化合物其中Ra选自C3-C5烷基、环戊基、环己基、C2-C4烷氧基、环戊氧基和环己氧基，每一所述基团任选被1-3个氟取代。
在下列实施例中进一步举例说明本发明。
本发明还包括一种治疗需要该类治疗的哺乳动物患者中免疫调节异常的方法，所述方法包括以有效治疗所述免疫调节异常的量给所述患者施用式I化合物。
在这种实施方案中包括其中所述免疫调节异常是选自全身性红斑狼疮、慢性类风湿性关节炎、I型糖尿病、炎性肠病、胆汁性肝硬化、葡萄膜炎、多发性硬化、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、大疱性类天疱疮、肉样瘤病、牛皮癣、自身免疫性肌炎、韦格纳氏肉芽肿、鱼鳞病、格雷夫斯氏眼病和哮喘的自身免疫性或慢性炎性疾病的上述方法。
在这种实施方案中还包括其中所述免疫调节异常是骨髓或器官移植排斥或移植物抗宿主疾病的上述方法。
在这种实施方案中还包括其中所述免疫调节异常选自下列病症的上述方法器官或组织的移植、由移植造成的移植物抗宿主疾病、包括类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮在内的自身免疫性综合征、桥本氏甲状腺炎、多发性硬化、重症肌无力、I型糖尿病、葡萄膜炎、后葡萄膜炎、变应性脑脊髓炎、肾小球性肾炎、包括风湿热和感染后的肾小球性肾炎在内的感染后的自身免疫性疾病、炎性和过度增生性皮肤病、牛皮癣、特应性皮炎、接触性皮炎、湿疹性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔藓、天疱疮、大疱性类天疱疮、大疱性表皮松懈症、荨麻疹、血管性水肿、结节性脉管炎、红斑、皮肤上的嗜曙红细胞增多、红斑狼疮、痤疮、斑秃、角膜结膜炎、春季结膜炎、与贝切特氏病有关的葡萄膜炎、角膜炎、疱疹性角膜炎、圆锥形角膜、角膜上皮营养不良(dystrophia epithelialis corneae)、角膜白斑、眼天疱疮、莫伦氏溃疡、巩膜炎、格雷夫斯氏眼病(Graves’opthalmopathy)、伏格特-小柳-原田三氏综合征、肉样瘤病、花粉变态反应、可逆性阻塞性气道疾病、支气管哮喘、变应性哮喘、内源性哮喘、外源性哮喘、粉尘性哮喘、慢性或慢性顽固性哮喘、晚期哮喘(late asthma)和气道高反应性、支气管炎、胃溃疡、由局部缺血性疾病和血栓形成造成的血管损害、局部缺血性肠疾病、炎性肠病、坏死性小肠结肠炎、与热灼伤有关的小肠损害、腹部疾病、直肠炎、嗜酸细胞性胃肠炎、肥大细胞增生病、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、偏头痛、鼻炎、湿疹、间质性肾炎、肺出血肾炎综合征、溶血性尿毒症综合征、糖尿病肾病、糖多发性肌炎、格-巴二氏综合征、美尼尔氏病、多发性神经炎、多神经炎、单神经炎、神经根病、甲状腺功能亢进、巴塞多氏病、单纯性红细胞再生障碍、再生障碍性贫血、再生不良性贫血、特发性血小板减少性紫癜、自身免疫性溶血性贫血、粒细胞缺乏症、恶性贫血、巨幼红细胞贫血、红细胞发生不能、骨质疏松症、肉样瘤病、纤维化肺、特发性间质性肺炎、皮肤肌炎、寻常性白斑病、寻常性鱼鳞病、光变应性敏感性、皮肤T细胞淋巴瘤、动脉硬化、动脉粥样硬化、大动脉炎综合征、结节性多动脉炎、非炎性心肌病、硬皮病、韦格纳氏坏死性肉芽肿、口腔干燥-风湿性关节炎综合征、肥胖症、嗜曙红细胞性筋膜炎、龈、牙周组织、牙槽骨的损害、substantia ossea dentis、肾小球性肾炎、男性型脱发或老年性脱发(通过预防脱发或提供头发萌芽和/或促进头发产生和头发生长)、肌营养不良、脓皮病和赛杂瑞氏综合征、阿狄森氏综合征、在保护、移植或局部缺血性疾病时发生的器官的局部缺血-再灌注性损伤、内毒素休克、假膜性结肠炎、由药物或辐射造成的结肠炎、局部缺血性急性肾功能不全、慢性肾功能不全、由肺-氧或药物造成的毒素病、肺癌、肺气肿、白内障、铁尘肺、视网膜色素变性、老年性黄斑变性、vitreal瘢痕形成、角膜强碱烧伤、多形性红斑皮炎(dermatitiserythema multiforme)、linear IgA ballous dermatitis和cementdermatitis、齿龈炎、牙周炎、脓毒症、胰腺炎、由环境污染造成的疾病、衰老、癌发生、癌转移和高空病、由组胺或白三烯-C4释放造成的疾病、贝切特氏病、自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、硬化性胆管炎、部分肝切除术、急性肝坏死、由毒素造成的坏死、病毒性肝炎、休克、或缺氧症、B-病毒肝炎、非-A/非-B型肝炎、肝硬化、酒精性肝硬化、肝衰竭、暴发性肝功能衰竭、晚期发作的肝衰竭(late-onsethepatic failure)、“acute-on-chronic”肝衰竭、化疗作用的强化、巨细胞病毒感染、HCMV感染、AIDS、癌症、老年性痴呆、创伤和慢性细菌感染。
这种实施方案中还包括其中免疫调节异常选自下列病症的上述方法1)多发性硬化，2)类风湿性关节炎，3)全身性红斑狼疮，4)牛皮癣，5)移植器官或组织的排斥，6)炎性肠病，
7)淋巴来源的恶性肿瘤，8)急性和慢性淋巴细胞白血病和淋巴瘤以及9)胰岛素和非胰岛素依赖性糖尿病。
本发明还包括一种抑制需要免疫抑制的哺乳动物患者中免疫系统的方法，所述方法包括给所述患者施用免疫抑制有效量的式I化合物。
本发明还包括一种包含式I化合物和可药用载体的药物组合物。
本发明还包括一种治疗需要该类治疗的哺乳动物患者中呼吸疾病或病症的方法，所述方法包括以可有效治疗所述呼吸疾病或病症的量给所述患者施用式I化合物。在这种实施方案中包括其中所述呼吸疾病或病症选自下列的上述方法哮喘、慢性支气管炎、慢性阻塞性肺病、成人呼吸窘迫综合征、婴儿呼吸窘迫综合征、咳嗽、嗜酸细胞性肉芽肿、呼吸道合胞体病毒细支气管炎、支气管扩张、特发性肺纤维化、急性肺损伤和阻塞性细支气管炎组织肺炎(bronchiolitis obliteransorganizing pneumonia)。
本发明还包括治疗在有此需要的患者中涉及血管完整性的疾病或病症的方法，其中所述疾病或病症选自血管水肿、结节性脉管炎、由缺血性疾病和血栓形成引起的血管损伤、缺血性肠病、炎性肠病、坏死性小肠结肠炎、与热烧伤引起的肠损伤、动脉硬化、动脉粥样硬化、主动脉炎综合征，在保藏、移植或缺血性疾病期间发生的缺血-再灌注损伤，内毒素休克、假膜性结肠炎、由药物或放射引起的结肠炎、缺血性急性肾功能不全、慢性肾功能不全、由肺氧或药物引起的毒素病、脓毒症、胰腺炎、由组胺或白三烯-C4释放引起的疾病、由毒素引起的坏死、病毒性肝炎、休克或缺氧症、老年痴呆和创伤，所述方法包括给所述患者施用能有效治疗疾病或病症的量的式I化合物。
本发明还包括治疗有此需要的患者中与脑或肺水肿有关的疾病或病症的方法，所述方法包括给所述患者施用能有效治疗疾病或病症的量的式I化合物。该实施方案包括选自下列的疾病或病症休克、脓毒症、急性呼吸窘迫综合征和脑水肿。
在这种实施方案中还包括其中所述患者还患有呼吸疾病或病症的上述方法。
在这种实施方案中还包括其中所述患者还患有心血管疾病或病症的上述方法。
除非另有说明，使用下列定义来描述本发明。
当氮原子在本说明书的式中出现时，应当理解的是存在满足该氮原子效价的足够的氢原子或取代基。
术语“卤素”或“卤代”包括F、Cl、Br和I。
术语“烷基”指的是具有所示碳原子数的直链或支链结构及其组合。因此，例如C1-6烷基包括甲基、乙基、丙基、2-丙基、仲-和叔-丁基、丁基、戊基、己基、1，1-二甲基乙基、环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
术语“链烯基”是指具有所示数目碳原子的具有至少一个碳-碳双键的直链或支链结构或其组合，其中氢可以被另外的碳-碳双键替代。C2-6链烯基包括例如乙烯基、丙烯基、1-甲基乙烯基、丁烯基等。
术语“炔基”是指具有所示数目碳原子的具有至少一个碳-碳三键的直链或支链结构或其组合。C3-6炔基包括例如丙炔基、1-甲基乙炔基、丁炔基等。
术语“烷氧基”指的是具有所示碳原子数的直链、支链或环状构型的烷氧基。例如，C1-6烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基等。
术语“烷硫基”指的是具有所示碳原子数的直链、支链或环状构型的烷硫基。例如，C1-6烷氧基包括甲硫基、丙硫基、异丙硫基等。
术语“环烷基”指的是具有所示碳原子数的任选地组合有直链或支链结构的单-、二-或三-环结构。环烷基的实例包括环丙基、环戊基、环庚基、金刚烷基、环十二烷基甲基、2-乙基-1-二环[4.4.0]癸基、环丁基甲基、环丙基甲基等。
术语“环烷氧基”是指通过氧原子与分子连接的如上所定义的环烷基(环烷基-O)，并且包括例如环戊氧基、环丙基甲氧基等。
术语“酰基”是指通过除去羟基而衍生自有机酸的有机基团，并且具有通式R-C(O)-，其中R是直链或支链烷基，所述阿案卷与羰基一起具有所示碳原子数目。例如，C2-4酰基包括乙酰基、丙酰基和丁酰基。术语“酰氧基”是指通过氧原子与分子连接的如上所定义的酰基(酰基-O)，并且包括例如乙酰氧基等。
短语“R8和R9可以与它们所连接的氮原子一起形成任选含有1或2个氧原子的具有3-8个原子的饱和单环”是指例如吡咯烷、哌啶、吗啉、氮杂环丁烷等。
术语“全氟代烷基”是指所有氢原子都已经被氟原子代替的如上所定义的烷基。
对于本说明书，下列缩写具有指定的含义Me＝甲基Et＝乙基n-Pr＝正丙基i-Pr＝异丙基n-Bu＝正丁基i-Bu＝异丁基s-Bu＝仲丁基t-Bu＝叔丁基c-Pr＝环丙基c-Bu＝环丁基c-Pen＝环戊基c-Hex＝环己基术语“治疗”不仅包括治疗，患者用于缓解患者疾病或病症的迹象和症状，而且还包括对无症状患者进行的用于防止所说疾病或病症开始或阻止其进程的预防性治疗。术语“治疗有效量”指的是将引起研究人员、兽医、内科医生或其它临床医师所寻求的组织、系统、动物或人的生物或医学响应的药物或药学活性剂的数量。该术语还包括研究人员、兽医、内科医生或其它临床医师寻求的将防止组织、系统、动物或人出现生物学或医学事件的风险予以防止或降低的药物的量。
这里所述的本发明包括可药用的盐以及水合物。可药用的盐既包括金属(无机)盐又包括有机盐；在Remington′s Pharmaceutical Sciences，第17版，第1418页(1985)中给出了其目录。本领域技术人员众所周知的是，适宜盐形式的选择是以物理和化学稳定性、可流动性、吸湿性以及溶解度为基础的。正如本领域技术人员将理解的那样，可药用的盐非限制性地包括无机酸的盐如盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、二磷酸盐、氢溴化物、以及硝酸盐或有机酸的盐如苹果酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对-甲苯磺酸盐或扑酸盐、水杨酸盐和硬脂酸盐。相似地，可药用的阳离子非限制性地包括钠、钾、钙、铝、锂和铵(尤其是与仲胺形成的铵盐)。由于上面所列举的理由，本发明优选的盐包括钾、钠、钙和铵盐。本发明的范围内还包括式I化合物的结晶形式、水合物和溶剂化物。
对于本说明书的目的而言，“可药用的水合物”指的是本发明化合物与一分子或多分子水一起结晶从而形成的一种水合的形式。
式I化合物可含有一个或多个不对称中心，并且可以因此作为外消旋体和外消旋混合物、单独对映体、非对映体混合物以及单独非对映体存在。本发明意欲包括式I化合物的所有这样的异构体形式。
本文描述的某些化合物含有烯属双键，并且除非另有说明，意欲包括E和Z几何异构体。
某些本文描述的化合物可以具有不同的与氢连接的位点，称为互变异构体。这样的实例可以是酮及其烯醇形式，称为酮基-烯醇互变异构体。式I化合物包括单独的互变异构体及其混合物。
式I化合物可以通过例如以下方法分离成对映体的非对映体对从合适的溶剂例如甲醇或乙酸乙酯或其混合物中分步结晶。由此获得的对映体对可以通过常规方法例如通过使用旋光性酸作为拆分剂来分离成单独的立体异构体。
或者，通式I化合物的对映体可以通过使用具有已知构型的旋光纯原料或试剂进行立体特异性合成来获得。
本发明还包括一种或多种立体异构体形式、基本上纯形式或立体异构体混合物形式的式I化合物。所有这样的异构体都包括在本发明范围内。
由于其S1P1/Edg1激动剂活性，本发明化合物是用于治疗或预防自身免疫性或慢性炎性疾病的免疫调节剂。本发明化合物可用于抑制其中免疫抑制状况井然有序情况中的免疫系统如可用于骨髓、器官或移植排斥、自身免疫性和慢性炎性疾病，包括全身性红斑狼疮、慢性类风湿性关节炎、I型糖尿病、炎性肠病、胆汁性肝硬化、葡萄膜炎、多发性硬化、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、大疱性类天疱疮、肉样瘤病、牛皮癣、自身免疫性肌炎、韦格纳氏肉芽肿、鱼鳞病、格雷夫斯氏眼病和哮喘。本发明化合物也可用于提高血管完整性。
本发明的化合物更具体地可用于治疗或预防选自下列的疾病或病症器官或组织的移植、由移植造成的移植物抗宿主疾病、包括类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮在内的自身免疫性综合征、桥本氏甲状腺炎、多发性硬化、重症肌无力、I型糖尿病、葡萄膜炎、后葡萄膜炎、变应性脑脊髓炎、肾小球性肾炎、包括风湿热和感染后的肾小球性肾炎在内的感染后的自身免疫性疾病、炎性和过度增生性皮肤病、牛皮癣，特应性皮炎、接触性皮炎、湿疹性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔藓、天疱疮、大疱性类天疱疮、大疱性表皮松懈症、荨麻疹、血管性水肿、结节性脉管炎、红斑、皮肤上的嗜曙红细胞增多、红斑狼疮、痤疮、斑秃、角膜结膜炎、春季结膜炎、与贝切特氏病有关的葡萄膜炎、角膜炎、疱疹性角膜炎、圆锥形角膜、角膜上皮营养不良(dystrophiaepithelialis corneae)、角膜白斑、眼天疱疮、莫伦氏溃疡、巩膜炎、格雷夫斯氏眼病(Graves’opthalmopathy)、伏格特-小柳-原田三氏综合征、肉样瘤病、花粉变态反应、可逆性阻塞性气道疾病、支气管哮喘、变应性哮喘、内源性哮喘、外源性哮喘、粉尘性哮喘、慢性或慢性顽固性哮喘、晚期哮喘和气道高反应性、支气管炎、胃溃疡、由局部缺血性疾病和血栓形成造成的血管损害、局部缺血性肠疾病、炎性肠病、坏死性小肠结肠炎、与热灼伤有关的小肠损害、腹部疾病、直肠炎、嗜酸细胞性胃肠炎、肥大细胞增生病、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、偏头痛、鼻炎、湿疹、间质性肾炎、肺出血肾炎综合征、溶血性尿毒症综合征、糖尿病肾病、糖多发性肌炎、格-巴二氏综合征、美尼尔氏病、多发性神经炎、多神经炎、单神经炎、神经根病、甲状腺功能亢进、巴塞多氏病、单纯性红细胞再生障碍、再生障碍性贫血、再生不良性贫血、特发性血小板减少性紫癜、自身免疫性溶血性贫血、粒细胞缺乏症、恶性贫血、巨幼红细胞贫血、红细胞发生不能、骨质疏松症、肉样瘤病、纤维化肺、特发性间质性肺炎、皮肤肌炎、寻常性白斑病、寻常性鱼鳞病、光变应性敏感性、皮肤T细胞淋巴瘤、动脉硬化、动脉粥样硬化、大动脉炎综合征、结节性多动脉炎、非炎性心肌病、硬皮病、韦格纳氏坏死性肉芽肿、口腔干燥-风湿性关节炎综合征、肥胖症、嗜曙红细胞性筋膜炎、龈、牙周组织、牙槽骨的损害、substantiaossea dentis、肾小球性肾炎、男性型脱发或老年性脱发(通过预防脱发或提供头发萌芽和/或促进头发产生和头发生长)、肌营养不良、脓皮病和赛杂瑞氏综合征、阿狄森氏综合征、在保护、移植或局部缺血性疾病时发生的器官的局部缺血-再灌注性损伤、内毒素休克、假膜性结肠炎、由药物或辐射造成的结肠炎、局部缺血性急性肾功能不全、慢性肾功能不全、由肺-氧或药物造成的毒素病、肺癌、肺气肿、白内障、铁尘肺、视网膜色素变性、老年性黄斑变性、vitreal瘢痕形成、，角膜强碱烧伤、多形性红斑皮炎(dermatitis erythema multiforme)、linearIgA ballous dermatitis和cement dermatitis、齿龈炎、牙周炎、脓毒症、胰腺炎、由环境污染造成的疾病、衰老、癌发生、癌转移和由组胺或白三烯-C4释放造成的高空病、贝切特氏病、自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、硬化性胆管炎、部分肝切除术、急性肝坏死、由毒素造成的坏死、病毒性肝炎、休克、或缺氧症、B-病毒肝炎、非-A/非-B型肝炎、肝硬化、酒精性肝硬化、肝衰竭、暴发性肝功能衰竭、晚期发作的肝衰竭、“acute-on-chronic”肝衰竭、化疗作用的强化、巨细胞病毒感染、HCMV感染、AIDS、癌症、老年性痴呆、创伤和慢性细菌感染的。
本发明的化合物还可用于治疗或预防阿尔茨海默氏病。
本发明还包括一种预防或治疗需要该类预防或治疗的哺乳动物患者对器官或组织移植的耐受性或移植排斥的方法，其包括施用治疗有效量的式I化合物。
本发明的另一个实施方案是一种抑制需要该类抑制的哺乳动物患者的免疫系统的方法，所述方法包括给该患者施用可抑制免疫系统量的式I化合物。
这里所述的方法最特定地包括一种治疗或预防骨髓或器官移植排斥的方法，所述方法包括以可以有效治疗或预防骨髓或器官移植排斥的量给需要该类治疗或预防的哺乳动物患者施用式I化合物或其可药用的盐或其水合物。
本发明化合物还可用于治疗呼吸疾病或病症，如哮喘、慢性支气管炎、慢性阻塞性肺疾病、成人呼吸窘迫综合征、婴儿呼吸窘迫综合征、咳嗽、嗜酸细胞性肉芽肿、呼吸道合胞体病毒细支气管炎、支气管扩张、特发性肺纤维化、急性肺损伤和阻塞性细支气管炎组织肺炎。
此外，本发明化合物还是具有超过对S1P3/Edg3受体选择性的S1P1/Edg1受体选择性激动剂。Edg1选择性激动剂具有优于目前疗法的优点并且扩大了淋巴细胞螯合剂的治疗窗，治疗窗的扩大使得可以耐受更高的剂量并且从而改善了其作为单一疗法的效力。
本发明还包括包含可药用载体和式I化合物或其可药用盐或水合物的药物制剂。所说制剂一种优选的实施方案是一种其中还包括第二种免疫抑制剂的制剂。该类第二种免疫抑制剂的实例非限制性地包括硫唑嘌呤、布喹那钠、脱氧精胍菌素、mizaribine、霉酚酸吗啉酯、环孢菌素、FK-506、雷帕霉素、FTY720和ISAtx247(Isotechnika)。本发明还包括将式I化合物与包括一种或多种上述物质在内的第二种免疫抑制剂共同给药的方法。
本发明的化合物包括其盐和水合物可用于治疗自身免疫性疾病，包括用于预防骨髓移植物、外来器官移植物的排斥和/或相关的折磨、疾病和病患。
可以用可使该活性成分化合物与温血动物体内的作用部位相接触的任何方法来将本发明的化合物进行给药。例如，可以将其口服给药、局部给药，包括经皮给药、眼睛给药、颊给药、鼻内给药、吸入给药、阴道内给药、直肠给药、脑池内给药和胃肠外给药。这里所用的术语“胃肠外”指的是包括皮下、静脉内、肌内、关节内注射或输入、胸骨内和腹膜内的给药模式。
可以用任何适于以单个治疗剂或治疗剂联合形式与药物联合应用的任何可获得的方便手段来将所述化合物进行给药。其可以被单独给药，但是通常是与在所选择的给药途径和标准药学实践的基础上所选择的药用载体一起进行给药。
给药剂量将取决于接受者的年龄、健康和体重、疾病的程度、如果存在的话的并行治疗的种类、所需的治疗频率和作用性质。活性成分化合物的日剂量通常为每天约0.1-2000毫克。一般地，每天一次或分多次应用的1至100毫克活性化合物可有效获得所需的结果。这些剂量是治疗自身免疫性疾病、预防外来器官移植物的排斥和/或相关的痛苦、疾病和病患的有效量。
所述活性成分可以以固体剂型或液体剂型形式被口服给药，所述固体剂型如胶囊、片剂、锭剂、糖锭剂、颗粒和粉剂，所述液体剂型如酏剂、糖浆剂、乳剂、分散体、和混悬液。所述活性成分还可以以无菌液体剂型如分散体、混悬液或溶液的形式被胃肠外给药。可以用于将所说活性成分进行给药的其它剂型还有用于局部给药的软膏、乳膏、滴剂、经皮贴剂或粉；用于眼睛给药的眼用溶液或混悬液形式，即滴眼液；用于吸入或鼻内给药的气雾剂喷雾剂或粉末组合物、或用于直肠或阴道给药的乳膏、软膏、喷雾或栓剂。
明胶胶囊包含活性成分和粉状载体，如乳糖、淀粉、纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸等等。还可以用相似的稀释剂来制备压缩片。片剂和胶囊都可以被制备成用于在数小时内提供药物的持续释放的缓释产品。可以对压缩片包糖衣或包膜衣以掩盖任何令人不愉快的味道和保护该片剂不受大气影响，或者可以对其包肠衣以选择性在胃肠道内崩解。
用于口服给药的液体剂型可包含着色剂和矫味剂以增加患者的接受性。
一般而言，水、适宜的油、盐水、水性右旋糖(葡萄糖)、以及相关的糖溶液和二醇如丙二醇或聚乙二醇是适用于胃肠外溶液的载体。用于胃肠外给药的溶液优选地包含活性成分的水溶性盐、适宜的稳定剂、和如果需要的话的缓冲物质。适宜的抗氧化剂例如单独或联合使用的亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、或抗坏血酸，是适宜的稳定剂。还可以使用枸橼酸以及其盐和EDTA钠。此外，胃肠外溶液还可以包含防腐剂，如苯扎氯铵、尼泊金甲酯或尼泊金丙酯、和氯丁醇。
在Remington′s Pharmaceutical Sciences，A.Osol(本领域中的一种标准参考教科书)中对适宜的药用载体进行了描述。
对于吸入给药而言，本发明的化合物可以方便地从加压包装或喷雾器中以气雾剂喷雾形式被传递。该化合物还可以以进行了配制的粉末形式被传递，并且可以在吹入粉末吸入器装置的帮助下来吸入所述粉末组合物。对于吸入而言，优选的传递系统是一种计量剂量的吸入(MDI)气雾剂，其可以被制备成式I的化合物在适宜推进剂如碳氟化合物或烃中的混悬液或溶液的形式。
对于眼睛给药而言，眼用制剂可以用在适宜的眼用基质中具有适宜重量百分比式I化合物的溶液或混悬液来进行制备，从而使得所述化合物可以与眼睛表面接触足够的时间从而使得该化合物可以渗透到眼睛的角膜和内部区域中。
可用于将本发明化合物进行给药的药物剂型如下所述胶囊通过用100毫克粉状活性成分、150毫克乳糖、50毫克纤维素和6毫克硬脂酸镁对各标准的两部分式硬明胶胶囊进行填充来制备许多单位胶囊。
软明胶胶囊制备活性成分在可消化的油如豆油、棉子油或橄榄油中的混合物并通过容积泵将其注射到明胶中从而形成包含100毫克活性成分的软明胶胶囊。对这些胶囊进行洗涤和干燥。
片剂用常规方法制备许多片剂从而使得该剂量单位为100毫克活性成分、0.2毫克胶体二氧化硅、5毫克硬脂酸镁、275毫克微晶纤维素、11毫克淀粉和98.8毫克乳糖。可以应用适宜的包衣以增加其适口性或延迟吸收。
可注射的制剂通过将1.5％重量的活性成分在10％体积的丙二醇中进行搅拌来制备一种适于注射给药的胃肠外组合物。用注射用水将该溶液的体积调节至足量并对其进行灭菌。
混悬液制备一种用于口服给药的水性混悬液，从而使得每5毫升混悬液包含100毫克分割得很细的活性成分、100毫克羧甲基纤维素钠、5毫克苯甲酸钠、1.0克山梨醇溶液U.S.P.和0.025毫升香草醛。
当本发明的化合物被逐步给药或者与另一种治疗剂联用时，通常可以使用相同的剂型。当这些药物以物理组合形式被给药时，可以根据所合并药物的相容性来对剂型和给药途径进行选择。因此，术语共同给药被理解为包括将两种活性剂相伴给药或相继给药，或者以两种活性组分固定剂量组合物的形式进行给药。
合成方法在下列反应方案和实施例中描述了制备本发明化合物的几种方法。原料和中间体是由已知方法或者如本文所示制得的。
反应方案1描绘了制备本发明中通式结构1-11的(5-(1，2，4-二唑-3-基)苯基吡咯烷-3-基)乙酸化合物的适宜方法。将适当取代的茴香醚1-1用焦谷氨酸1-2于高温在三氟甲磺酸酐(Bull.Korean Chem.Soc.1999，20，1253-1254)或五氧化磷或甲磺酸存在下处理(Tetrahedron Lett.1989，30，7057-7060)，获得内酰胺1-3。1-3的5-甲氧基转化成1-4的腈可以在三步骤顺序中完成1)在合适的溶剂例如二氯甲烷或二氯乙烷中，使用强路易斯酸例如TMSI、AlCl3、BCl3或BBr3将1-3去甲基化，获得苯酚；2)在合适的溶剂例如二氯甲烷、二氯乙烷、N-甲基吡咯烷酮或N，N-二甲基甲酰胺中，在合适的碱例如N，N-二异丙基乙胺、三乙胺、吡啶或二甲基吡啶存在下，使用三氟甲磺酸酐、2-(N，N-二(三氟甲基磺酰基)氨基)-5-氯吡啶或N-苯基-二(三氟甲磺酰亚胺)形成三氟甲烷磺酸酯(即三氟甲磺酸酯)；和3)在室温或室温以上温度，在合适的溶剂例如四氢呋喃、二氧杂环己烷、N-甲基吡咯烷酮或N，N-二甲基甲酰胺中，将该三氟甲磺酸酯用氰化锌或氰化铜以及采用合适的配体例如三苯基膦或1，1’-二(二苯基膦基)二茂铁的钯催化剂(0)处理。在两步骤顺序中实现烯丙基的引入以提供1-51)将1-4的内酰胺用合适的保护基(P)例如Boc、Cbz、Fmoc或三氟乙酰基保护；和2)将所得N-保护的内酰胺用强碱例如N，N-二异丙基氨基锂、二(三甲基甲硅烷基)氨基钾、二(三甲基甲硅烷基)氨基钠或氢化钠处理，然后加入烯丙型亲电子试剂。可以获得反式和顺式加成物的混合物，并且这两种立体异构体可以使用本领域技术人员已知的方法例如硅胶色谱法、HPLC或结晶而容易地分离。当采用烯丙基碘和N，N-二异丙基氨基锂时，可主要形成反式加成物。顺式加成物可通过从反应混合物中分离或者使用上述强碱将反式加成物差向异构化而容易地获得。1-5的烯烃转化成1-6的酯可在两步骤顺序中实现1)使用本领域技术人员已知的方法将1-5的烯烃氧化裂解成羧酸，所述方法已经在文献中综述(参见March，J.，“Oxidative Cleavage of Double Bonds and Aromatic Rings”，pp.1181-1183 in Advanced Organic Chemistry，John Wiley & Sons，1992)；和2)在强酸例如H2SO4或HCl存在下，使用(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷、重氮甲烷或者MeOH或EtOH将所得羧酸酯化，获得1-6。除去保护基P可以可以根据P的化学性质来完成。例如，如果P是Boc基团，则使用强酸例如三氟乙酸或盐酸将1-6水解，生成内酰胺1-7。在室温或室温以上温度，在合适的溶剂例如MeOH或EtOH中，在合适的碱例如三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、碳酸钠、碳酸钾或碳酸氢钠存在下，用羟基胺盐酸盐处理腈1-7，获得脒肟1-8，在合适的碱和溶剂存在下将其用活化羧酸处理，获得通式1-9的N-酰氧基脒。在该反应中的羧酸可以通过以下方式进行用于酰化的活化在溶剂例如1，2-二氯乙烷、甲苯、二甲苯、THF、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或N-甲基吡咯烷酮中，在合适的碱(如果需要的话)例如三乙胺、N，N-二异丙基乙胺或碳酸氢钠存在下，用试剂例如N，N’-二环己基碳二亚胺(EDC)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1，1’-羰基二咪唑或二(2-氧代-3-唑烷基)膦酰氯将其活化。或者，可以在上述碱和溶剂存在下使用酰氯、酸酐、酰基咪唑或五氟苯基羧酸酯来提供1-9。中间体1-9可以使用本领域技术人员已知的方法例如硅胶色谱、HPLC或结晶来进行分离，并且在随后的步骤中，通过在随后的步骤中，在合适的溶剂例如1，2-二氯乙烷、甲苯、二甲苯、THF、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺或N-甲基吡咯烷酮中温热来环合/脱水，以生成通式1-10的1，2，4-二唑。将1-9转化成1-10可需要加入合适的碱例如吡啶、N’N-二异丙基乙胺或氟化四丁基铵。不分离N-酰氧基脒1-9可能是更方便或可取的，这样1-8转化成1-10可以作为连续方法来进行。制备1，2，4-二唑的其它方法是与本发明潜在相关的，并且是本领域技术人员已知的，已经在文献中综述(参见Clapp，L.B.，“1，2，3-和1，2，4-二唑”，pp.366-91，ComprehensiveHeterocyclic Chemistry，Volume 6，Potts，K.T.，Editor，Pergamon Press，1984)。最终的化合物1-11可以由1-10在三步顺序中获得1)在合适的溶剂例如二氯甲烷或二氯乙烷中，使用四氟硼酸三甲基氧、甲磺酰氟或硫酸二甲酯将1-10的内酰胺转化成亚氨基醚；2)在合适的溶剂例如甲醇、乙醇或异丙醇中，于4-5的pH范围内(如果需要的话)，使用合适的还原剂例如氰基硼氢化钠或硼氢化钠将亚氨基醚还原；和3)根据-CO2A的化学结构，将羧酸酯水解成羧酸(即-CO2A→-CO2H)。这样的代表性实例包括(但不限于)如果-A是-CH3或-CH2CH3，则在室温或室温以上的温度，在合适的助溶剂例如甲醇、乙醇、二氧杂环己烷或THF中，用氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾来进行处理，以生成1-11。
反应方案1 反应方案2描述了制备脒肟中间体例如2-2、2-4和2-6的3种方法。这些中间体可以以类似于反应方案1的中间体1-8的方式，来与羧酸或活化羧酸稠合以形成1，2，4-二唑中间体，例如反应方案1中的1-10，然后可以按照类似于反应方案1中描述的方法来进行合适的官能团转化，以生成本发明中描述的通式1-11的化合物。根据P的化学性质，1-5的保护基P的除去可以在酸性或碱性条件下完成(反应方案2-1)。例如，如果P是Boc基团，则使用强酸例如三氟乙酸或盐酸将1-5水解，生成内酰胺2-1。在室温或室温以上温度，在合适的溶剂例如MeOH或EtOH中，在合适的碱例如三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、碳酸钠、碳酸钾或碳酸氢钠存在下，用羟基胺盐酸盐处理内酰胺2-1，获得脒肟2-2。然后可以使用类似于反应方案1中描述的用于将1-8转化成1-11的适当方法的组合，将脒肟2-2(以及在本反应方案中列出的其它脒肟)转化成如本发明所述的化合物。另一方面，还可以在三步顺序中将内酰胺2-1转化成保护的吡咯烷1)在合适的溶剂例如二氯甲烷或二氯乙烷中，使用四氟硼酸三甲基氧、甲磺酰氟或硫酸二甲酯将2-1的内酰胺转化成亚氨基醚；2)在合适的溶剂例如甲醇、乙醇或异丙醇中，于4-5的pH范围内(如果需要的话)，使用合适的还原剂例如氰基硼氢化钠或硼氢化钠将亚氨基醚还原；和3)将所得吡咯烷用合适的保护基(P’)例如Boc、Cbz、Fmoc或三氟乙酰基保护(反应方案2-2)。然后在室温或室温以上温度，在合适的溶剂例如MeOH或EtOH中，在合适的碱例如三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、碳酸钠、碳酸钾或碳酸氢钠存在下，用羟基胺盐酸盐处理吡咯烷2-3，获得脒肟2-4。类似地，在四步骤顺序中将N-保护的内酰胺1-6转化成N-保护的吡咯烷2-5(反应方案2-3)1)根据P的化学性质，可如上所述在碱性或酸性条件下完成1-6的保护基P的除去(反应方案2-1)；2)在合适的溶剂例如二氯甲烷或二氯乙烷中，使用四氟硼酸三甲基氧、甲磺酰氟或硫酸二甲酯将所得内酰胺转化成亚氨基醚；3)在合适的溶剂例如甲醇、乙醇或异丙醇中，于4-5的pH范围内(如果需要的话)，使用合适的还原剂例如氰基硼氢化钠或硼氢化钠将亚氨基醚还原；和4)将所得吡咯烷用合适的保护基(P’)例如Boc、Cbz、Fmoc或三氟乙酰基保护。最后，在室温或室温以上温度，在合适的溶剂例如MeOH或EtOH中，在合适的碱例如三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、碳酸钠、碳酸钾或碳酸氢钠存在下，用羟基胺盐酸盐处理吡咯烷2-5，获得脒肟2-6。
反应方案2 按照类似于反应方案1的1-3中描述的方法，反应方案3描绘了合成5-芳基-吡咯烷酮或6-芳基-哌啶酮的两种不同方法。首先，在合适的溶剂例如二氯甲烷或二氯乙烷中，在合适的路易斯酸例如三氯化铝、氯化铁、氯化锌或三氟化硼存在下，将适当取代的茴香醚1-1用琥珀酸酐或谷氨酸酐3-1酰化，生成酮基羧酸，然后在0℃或0℃以上，在合适的酸例如四氟硼酸、盐酸或浓硫酸存在下，将其用甲醇处理，生成甲酯3-2(反应方案3-1)。在室温或室温以上温度，在合适的溶剂例如甲醇、乙醇或异丙醇中，在合适的碱例如三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾或乙酸钠存在下，将酮3-2用羟基胺盐酸盐处理，生成酮肟3-3。在合适的溶剂例如甲醇、乙醇或乙酸中，在质子酸例如盐酸或乙酸(如果需要的话)存在下，使用合适的催化剂例如披钯碳、以碳为载体的氢氧化钯、氧化铂(IV)或阮内镍，将酮肟3-3氢化，生成胺，然后在室温或室温以上温度，在合适的溶剂例如THF、醚、吡啶或甲苯中，将该胺用合适的碱例如三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、吡啶、二甲基吡啶、碳酸钾或碳酸钠处理，以生成类似于1-3的吡咯烷酮或哌啶酮。或者，可将适当取代的苯基卤化镁与5-乙氧基-2-吡咯烷酮(Org.Prep.Proc.Int.1993，25，255-258)或6-乙氧基-2-哌啶酮(J.Heterocyclic Chem.1970，7，615-622)反应，以分别生成类似于1-3的吡咯烷酮或哌啶酮。格式试剂3-4可以使用本领域技术人员已知的方法制得，并且已经综述在文献中(参见March，J.，“Aliphatic ElectrophilicSubstitution”，pp.622-625 in Advanced Organic Chemistry，John Wiley& Sons，1992，and Knochel，P.等人，“Functionalized Main-GroupOrganometallics for Organic Synthesis”Pure Appl.Chem.2002，74，11-17)。R1至R4和R12是与反应条件相容的官能团，并且使用本领域技术人员已知的方法可以很容易地将后者转化成脒肟来用于随后的二唑的合成。
反应方案3 反应方案4描绘了将乙酸官能团引入吡咯烷酮或哌啶酮环内的三种方法。首先，在室温或室温以上温度，在合适的溶剂例如二氯甲烷、二氯乙烷、THF、醚或甲苯中，可将适当取代的5-芳基-吡咯烷酮或6-芳基-哌啶酮4-1用强碱例如N，N-二异丙基氨基锂、二(三甲基甲硅烷基)氨基钾、二(三甲基甲硅烷基)氨基钠或氢化钠处理，然后加入2-卤代乙酸烷基酯或2-三氟磺酰氧基乙酸烷基酯，其中烷基可以是甲基、乙基或叔丁基，并且卤素可以是氯、溴或碘，获得4-2(反应方案4-1)。内酰胺4-2转化成本发明化合物可以使用本领域技术人员已知并且类似于反应方案1酯描述的方法来完成。或者，可以在室温，在合适的溶剂例如二氯甲烷、二氯乙烷、THF、醚或甲苯中，将吡咯烷酮或哌啶酮4-1用上述强碱处理，然后加入氯甲酸烷基酯，其中烷基可以是甲基、乙基或异丙基，获得4-3。可以在三步骤顺序中将吡咯烷酮或哌啶酮4-3转化成吡咯烷或哌啶4-4(反应方案4-2)1)在合适的溶剂例如二氯甲烷或二氯乙烷中，使用四氟硼酸三甲基氧、甲磺酰氟或硫酸二甲酯将4-3的内酰胺转化成亚氨基醚；2)在合适的溶剂例如甲醇、乙醇或异丙醇中，于4-5的pH范围内(如果需要的话)，使用合适的还原剂例如氰基硼氢化钠或硼氢化钠将亚氨基醚还原；和3)将所得吡咯烷用合适的保护基(P’)例如Boc、Cbz、Fmoc或三氟乙酰基保护。4-4的酯的还原可以在低温下，在合适的溶剂例如二氯甲烷、二氯乙烷、甲苯、THF或醚中，使用合适的还原剂例如氢化锂铝、氢化二异丁基铝或三乙基硼氢化锂来实现。可以在两步骤顺序中将4-5的羟基转化成氰化物4-61)使用本领域技术人员已知的方法，将羟基转化成合适的离去基团例如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、三氟甲磺酸酯、溴化物或碘化物；和2)在室温或室温以上温度，在合适的溶剂例如甲基亚砜、N，N-二甲基甲酰胺或丙酮中，使用氰化钠、氰化钾或氰化四丁基铵将所得离去基团置换。4-6的氰化物基团的水解可以在高温下，在合适的助溶剂例如甲醇、乙醇或异丙醇中，使用氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾水溶液来完成。最后，可以在合适的溶剂例如二氯甲烷、二氯乙烷、THF、醚或甲苯中，将吡咯烷酮或哌啶酮4-1用上述强碱处理，然后加入醛或酮，之后加入合适的质子酸例如盐酸，获得4-8(反应方案4-3)。使用本领域技术人员已知的在反应方案1和反应方案4中描述的方法可很容易地将羟基转化成羧酸。
反应方案4 最后，反应方案5描绘了两种杂[2+3]环加成方法，以制备2-芳基-4-吡咯烷，该吡咯烷具有可容易地转化成乙酸的官能团。可以在密封的反应管(如果需要的话)中，在高温下，在合适的溶剂例如乙腈、二氯甲烷、二氯乙烷、苯、甲苯或二甲苯中，将6，6-二甲基-4，8-二氧杂-1-亚甲基螺[2，5]辛烷5-1与适当取代的苯甲醛O-甲基肟5-2反应，生成烯酮缩醇5-3(J.Org.Chem.1998，63，1694-1703)。在合适的溶剂例如THF或乙腈中，在合适的质子酸例如乙酸或盐酸的水溶液存在下来完成烯酮缩醇5-3的水解。使用本领域技术人员已知的方法可将吡咯烷5-4转化成本发明化合物。另一方面，可以在高温下，在合适的溶剂例如THF或二氧杂环己烷中，在采用合适的配体例如三苯基膦或亚磷酸三异丙酯的钯(0)催化剂存在下，将N-甲苯磺酰基亚胺5-5与乙酸((三甲基甲硅烷基)甲基)烯丙基酯5-6反应(J.Am.Chem.Soc.1993，115，6636-6645)。可使用本领域技术人员已知的方法将吡咯烷5-7转化成本发明化合物。
反应方案5 代表性实施例如下所述举例说明本发明化合物一般方法对于水分或空气敏感的反应是用无水溶剂和试剂在氮气或氩气下进行的。反应进程是通过LC-MS或分析薄层色谱(TLC)确定的，薄层色谱是用E.Merck预涂布TLC平板，硅胶60F-254，层厚0.25mm进行的。溶液的浓缩是用旋转蒸发仪于减压条件下进行的。快速色谱法是用Biotage Flash Chromatography装置(Dyax Corp.)在硅胶(32-63mM，60孔径)上在预先填充的指定尺寸筒中进行的。除非另有说明，1H NMR光谱是在CDCl3溶液中在500MHz光谱计上获得的。化学位移是以百万份数报道的。在CD3Cl溶液中，使用四甲基硅烷(TMS)作为内标，在CD3OD溶液中，使用残余CH3OH峰或TMS作为内标。偶联常数(J)是以赫兹(Hz)报道的。缩写乙酸乙酯(EtOAc)，乙醚(醚或Et2O)，三乙胺(TEA)，N，N-二异丙基乙胺(DIEA)，N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，四氢呋喃(THF)，三氟乙酸(TFA)，饱和水溶液(饱和)，室温(rt)，小时(s)(h或hr)，和分钟(min)。高效液相色谱(HPLC)是在ADV731020 100×20mm柱上进行的，梯度为10∶90-95∶5 v/vCH3CN/H2O+v0.05％TFA，23分钟，保持在95∶5 v/v CH3CN/H2O+0.05％TFA，7分钟；10mL/分钟，254nm。
制备脒肟中间体脒肟1反式-5-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯步骤A5-(4-三氟甲磺酰基氧基苯基)-2-吡咯烷酮把DIEA (2.89mL，16.6mmol)加到5-(4-羟基苯基)-2-吡咯烷酮(1.47g，8.30mmol)和N-苯基三氟甲磺酰亚胺(4.45g，12.45mmol)在10mLDMF的溶液中，并将该溶液于室温搅拌过夜。将该反应混合物用EtOAc(100mL)洗涤，并用盐水(50mL)、H2O(3×50mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机层分离，用MgSO4干燥，并浓缩。在Biotage 40+M筒上进行色谱纯化，用EtOAc作为洗脱剂，获得2.45g(96％)本标题化合物，为白色固体1H NMRδ1.90-1.98(m，1H)，2.38-2.51(m，2H)，2.57-2.65(m，1H)，4.81(t，J＝7.1，1H)，6.92(br.s，1H)，7.27-7.30(m，2H)，7.38-7.42(m，2H).
步骤B5-(4-氰基苯基)-2-吡咯烷酮将5-(4-三氟甲磺酰基氧基苯基)-2-吡咯烷酮(2.45g，8.22mmol)、四(三苯基膦)钯(475mg，0.41mmol)和氰化锌(1.45g，12.3mmol)在10mLDMF中的溶液用氮气吹扫三次，然后于80℃搅拌。3小时后，将该化合物冷却至室温，用EtOAc(10mL)稀释，并通过硅藻土饼过滤。用EtOAc洗涤固体，合并滤液并浓缩。在Biotage 40+M筒上进行色谱纯化，用9∶1 v/v EtOAc/CH3OH作为洗脱剂，获得含有微量DMF的2.68g(100％)本标题化合物1H NMR(CD3OD)δ1.90-1.97(m，1H)，2.43-2.51(m，2H)，2.60-2.67(m，1H)，4.85(t，J＝7.2，1H)，7.41(d，J＝8.8，2H)，7.65(d，J＝8.5，2H).
步骤CN-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-2-吡咯烷酮把4-(二甲基氨基)吡啶(50mg，0.41mmol)加到上述腈(2.68g，8.22mmol)和二碳酸二叔丁酯(3.59g，16.4mmol)向20mL CH2Cl2内的溶液中。将该混合物于室温搅拌，然后浓缩。在Biotage 40+M筒上进行色谱纯化，用9∶11 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得1.16g(74％)本标题化合物1H NMRδ1.30(s，9H)，1.82-1.89(m，1H)，2.48-2.69(m，3H)，5.19(dd，J＝4.2，8.3，1H)，7.35(d，J＝8.2，2H)，7.68(d，J＝8.3，2H).
步骤D反式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮把刚制备的二异丙基氨基化锂(2.80mmol)在10mL THF中的溶液于-78℃滴加到N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-2-吡咯烷酮(763mg，2.67mmol)在10mL THF内的溶液中。于-78℃搅拌1小时后，加入烯丙基碘(488μL，5.33mmol)。将该混合物在-78℃搅拌1小时，然后用5.0mL饱和NH4Cl溶液中止。把该混合物倒入盐水(20mL)和CH2Cl2(20mL)的混合物中，分离水层并用CH2Cl2(3×20mL)萃取。将有机层合并，用MgSO4干燥，浓缩。在Biotage 40+M筒上进行色谱纯化，用1∶4 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得745mg(86％)本标题化合物1HNMRδ1.35(s，9H)，1.99-2.05(m，1H)，2.21-2.29(m，1H)，2.63-2.76(m，2H)，5.06-5.11(m，2H)，5.17-5.20(m，1H)，5.68-5.77(m，1H)，7.32(d，J＝8.2，2H)，7.67(d，J＝8.4，2H).
步骤E反式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸把氯化钌(III)水合物(3.5mg，0.02mmol)加到反式N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮(252mg，0.77mmol)和高碘酸钠(744mg，3.48mmol)在2∶2∶3 v/v/v CCl4/CH3CN/H2O的混合溶剂(14.0mL)内的溶液中。将该混合物于室温搅拌1小时后，然后在H2O(20mL)和CH2Cl2(20mL)之间分配。将水层分离并用CH2Cl2(3×20mL)萃取。将有机层合并，用Na2SO4干燥并浓缩，获得粗制酸，为无色浆液，将其用于下一步骤而不予进一步纯化。
步骤F反式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯把(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷(2.0M在己烷中的溶液，580μL，1.16mmol)加到上述粗制酸在7∶2 v/v的苯/CH3OH的混合溶剂中的溶液(18mL)内。30分钟后，将该反应混合物浓缩。在Biotage 40+M筒上进行色谱纯化，用9∶11 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得261mg(94％两步)本标题化合物，为白色固体1H NMRδ1.36(s，9H)，2.21(ddd，J＝1.1，8.7，13.0，1H)，2.29-2.36(m，1H)，2.52(dd，J＝8.7，17.2，1H)，2.92(dd，J＝4.2，17.1，1H)，3.02-3.06(m，1H)，3.68(s，3H)，5.24(d，J＝8.4，1H)，7.32(d，J＝8.2，2H)，7.68(d，J＝8.5，2H).
步骤G反式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯将上述甲基酯(261mg，0.73mmol)在10mL 20％TFA在CH2Cl2中的溶液于室温搅拌1小时。将该混合物浓缩，并把残余物溶解在CH2Cl2(50mL)中，并用饱和NaHCO3溶液(10mL×2)和盐水(10mL)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩。在Biotage 40+S筒上进行色谱纯化，用4∶1 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得167mg(89％)本标题化合物，为白色固体1H NMRδ2.25-2.31(m，1H)，2.42-2.54(m，2H)，2.82-2.92(m，2H)，3.68(s，3H)，4.84(dd，J＝2.4，8.8，1H)，7.07(s，1H)，7.40(d，J＝8.2，2H)，7.67(d，J＝8.2，2H).
步骤H反式-5-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯把羟胺盐酸盐(45mg，0.65mmol)加到所得内酰胺(167mg，0.65mmol)和碳酸氢钠(272mg，3.24mmol)在10mL CH3OH内的溶液中。将该混合物回流5小时，然后冷却至室温。将沉淀物通过0.2μ滤器过滤，并用CH3OH(100mL)充分洗涤。将滤液浓缩，获得所需脒肟，为白色固体，将其用于下一步骤而不予进一步纯化。
脒肟2顺式-5-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯步骤A顺式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮把刚制备的二异丙基氨基化锂(0.75mmol)在5mL THF中的溶液于-78℃滴加到反式N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮(223mg，0.68mmol)在5mL THF内的溶液中。于-78℃搅拌1小时后，通过加入5.0mL饱和NH4Cl溶液将反应中止。使混合物温热至室温，倒入盐水(20mL)和CH2Cl2(20mL)的混合物中。将水层分离并用CH2Cl2(3×20mL)萃取。将有机层合并，用Na2SO4干燥并浓缩。在Biotage 40+S筒上进行色谱纯化，用1∶3 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得103mg(46％)本标题化合物和120mg(54％)起始材料1HNMRδ1.24(s，9H)，1.50-1.57(m，1H)，2.22-2.28(m，1H)，2.56-2.77(m，3H)，4.94-5.07(m，3H)，5.71-5.78(m，1H)，7.36(d，J＝8.2，2H)，7.66(d，J＝8.2，2H).
步骤B顺式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸使用类似于脒肟1、步骤E中描述的方法，用顺式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮代替反式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮，制得本标题化合物。将该粗制酸用于下一步骤而不予进一步纯化。
步骤C顺式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯使用类似于脒肟1、步骤F中描述的方法，用顺式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸代替反式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸，制得本标题化合物1H NMRδ1.24(s，9H)，1.62-1.69(m，1H)，2.62(dd，J＝8.1，17.2，1H)，2.69-2.76(m，1H)，2.92(dd，J＝3.9，17.4，1H)，2.98-3.04(m，1H)，3.69(s，3H)，4.98(dd，J＝7.5，9.5，1H)，7.43(d，J＝8.3，2H)，7.67(d，J＝8.4，2H).
步骤D顺式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯使用类似于脒肟1、步骤G中描述的方法，用顺式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯代替反式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯1H NMRδ1.67-1.74(m，1H)，2.52(dd，J＝8.6，17.1，1H)，2.80-2.98(m，3H)，3.68(s，3H)，4.75(dd，J＝6.8，9.3，1H)，6.51(s，1H)，7.48(d，J＝8.2，2H)，7.67(d，J＝8.2，2H).
步骤E顺式-5-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯使用类似于脒肟1、步骤H中描述的方法，用反式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯代替顺式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物。将该粗制脒肟不予进一步纯化而进行使用。
脒肟3反式-5-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)苯基)-2-氧代-3-(2-丙烯基)-吡咯烷步骤A反式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-(2-丙烯基)-吡咯烷使用类似于脒肟1、步骤G中描述的方法，用反式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-(2-丙烯基)-吡咯烷代替反式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物1HNMRδ2.05-2.12(m，1H)，2.23-2.29(m，1H)，2.38-2.44(m，1H)，2.54-2.64(m，2H)，4.77(dd，J＝4.3，8.6，1H)，5.08-5.14(m，2H)，5.74-5.80(m，1H)，6.55(br.s，1H)，7.40(d，J＝8.2，2H)，7.66(d，J＝8.3，2H).
步骤B反式-5-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)苯基)-2-氧代-3-(2-丙烯基)-吡咯烷使用类似于脒肟1、步骤H中描述的方法，用反式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-(2-丙烯基)-吡咯烷代替反式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物。将该粗制脒肟不予进一步纯化而使用。
脒肟4反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯步骤A反式-2-(4-氰基苯基)-2-H-3，4-二氢-5-甲氧基-4-吡咯烷乙酸甲酯将反式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯(参见脒肟1，步骤E)(196mg，0.76mmol)和四氟硼酸三甲基氧(135mg，0.91mmol)在10mL CH2Cl2中的溶液于室温搅拌过夜。将该混合物用用20mL饱和NaHCO3洗涤，并将水层用CH2Cl2(3×20mL)萃取。将有机层合并，用Na2SO4干燥并浓缩，获得所需甲氧基亚胺(207mg，100％)，为无色浆液1H NMRδ2.15-2.21(m，1H)，2.33-2.39(m，1H)，2.46(dd，J＝9.5，16.2，1H)，2.75(dd，J＝4.7，16.2，1H)，3.22-3.28(m，1H)，3.70(s，3H)，3.93(s，3H)，5.06(dd，J＝5.3，8.3，1H)，7.36(d，J＝8.2，2H)，7.61(d，J＝8.3，2H).
步骤B反式-2-(4-氰基苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯把氰基硼氢化钠(1.0M in THF，7.6mL，7.6mmol)加到甲氧基亚胺(207mg，0.76mmol)和少量溴甲酚绿在CH3OH(10mL)内的溶液中。把HCl在1，4-二氧杂环己烷(2.0M)中的溶液加到该反应混合物中，以便将颜色保持黄色，并将该反应混合物于室温搅拌4小时。倒入饱和NaHCO3溶液和CH2Cl2中，并将水层进一步用CH2Cl2(3×20mL)萃取。把将有机层合并，用Na2SO4干燥并浓缩，获得粗制胺(158mg，85％)，将其用于下一步骤而不予进一步纯化。
步骤C反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-氰基苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯把二碳酸二叔丁酯(170mg，0.78mmol)加到所得胺(158mg，0.65mmol)和催化量的4-二甲基氨基吡啶在CH2Cl2(10mL)内的溶液中。将该混合物于室温搅拌3小时。将该混合物浓缩。在Biotage 40+S筒上进行色谱纯化，用3∶7 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得208mg(93％)本标题化合物1H NMRδ1.20-1.45(m，9H)，1.99-2.14(m，2H)，2.37-2.63(m，3H)，3.17-3.27(m，1H)，3.67(s，3H)，3.86-3.88(m，1H)，4.87-4.89(m，1H)，7.28(d，J＝8.2，2H)，7.61(d，J＝8.0，2H).
步骤D反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯使用类似于脒肟1、步骤H中描述的方法，用反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-氰基苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯代替反式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物。将该粗制脒肟进行使用而不予进一步纯化。
脒肟5顺式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯步骤A顺式-2-(4-氰基苯基)-2-H-3，4-二氢-5-甲氧基-4-吡咯烷乙酸甲酯使用类似于脒肟4、步骤A中描述的方法，用顺式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯(参见脒肟2，步骤C)代替反式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物1H NMRδ1.51-1.58(m，1H)2.41(dd，J＝8.8，16.6，1H)，2.79(dd，J＝4.5，16.6，1H)，2.83-2.90(m，1H)，3.27-3.34(m，1H)，3.68(s，3H)，3.93(s，3H)，4.88(t，J＝8.2，1H)，7.44(d，J＝8.2，2H)，7.62(d，J＝8.3，2H).
步骤B顺式-2-(4-氰基苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯使用类似于脒肟4、步骤B中描述的方法，用顺式-2-(4-氰基苯基)-2-H-3，4-二氢-5-甲氧基-4-吡咯烷乙酸甲酯代替甲基反式-2-(4-氰基苯基)-2-H-3，4-二氢-5-甲氧基-4-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物。
步骤C顺式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-氰基苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯使用类似于脒肟4、步骤C中描述的方法，用顺式-2-(4-氰基苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯代替甲基反式-2-(4-氰基苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物1H NMRδ1.12-1.51(m，10H)，2.35-2.64(m，4H)，3.15(t，J＝9.9，1H)，3.68(s，3H)，4.02-4.08(m，1H)，4.72-4.81(m，1H)，7.30(d，J＝8.1，2H)，7.60(d，J＝8.2，2H).
步骤D反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯使用类似于脒肟1、步骤H中描述的方法，用顺式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-氰基苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯代替甲基反式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物。将该粗制脒肟进行使用而不予进一步纯化。
脒肟6反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)苯基)-4-(2-丙烯基)-吡咯烷步骤A反式-2-(4-氰基苯基)-2-H-3，4-二氢-5-甲氧基-4-(2-丙烯基)-吡咯烷使用类似于脒肟4、步骤A中描述的方法，用反式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮(参见脒肟1，步骤C)代替反式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物。将该粗制产物用于下一步骤而不予进一步纯化。
步骤B反式-2-(4-氰基苯基)-4-(2-丙烯基)-吡咯烷使用类似于脒肟4、步骤B中描述的方法，用反式-2-(4-氰基苯基)-2-H-3，4-二氢-5-甲氧基-4-(2-丙烯基)-吡咯烷代替反式-2-(4-氰基苯基)-2-H-3，4-二氢-5-甲氧基-4-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物。
步骤C反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-氰基苯基)-4-(2-丙烯基)-吡咯烷使用类似于脒肟4、步骤C中描述的方法，用反式-2-(4-氰基苯基)-4-(2-丙烯基)-吡咯烷代替反式-2-(4-氰基苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物1H NMRδ1.20-1.46(m，9H)，1.89-2.28(m，5H)，3.14-3.27(m，1H)，3.71-3.81(m，1H)，5.00-5.07(m，3H)，5.68-5.77(m，1H)，7.27(d，J＝8.2，2H)，7.60(d，J＝8.0，2H).
步骤D反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)苯基)-4-(2-丙烯基)-吡咯烷使用类似于脒肟1、步骤H中描述的方法，用反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-氰基苯基)-4-(2-丙烯基)-吡咯烷代替反式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物。将该粗制脒肟进行使用而不予进一步纯化。
脒肟7反式-5-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)-3-甲基-苯基)-2-氧代-3-(2-丙烯基)-吡咯烷步骤A5-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-2-吡咯烷酮把2-吡咯烷酮-5-甲酸(2.0g，15.5mmol)和2-甲基苯甲醚(2.1mL，17.0mmol)加到1.0g(3.52mmol)五氧化磷和6.7mL的甲磺酸的混合物中。将该混合物于100℃加热2小时，冷却至室温，并倒入H2O和CH2Cl2的混合物中。将水层分离，并用CH2Cl2(3×20mL)萃取。将有机层合并，用饱和NaHCO3溶液洗涤，用MgSO4干燥，浓缩。在Biotage 40+M筒上进行色谱纯化，用4∶1 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得1.78g(56％)本标题化合物1H NMRδ1.88-1.97(m，1H)，2.21(s，3H)，2.35-2.54(m，3H)，3.81(s，3H)，4.66(t，J＝7.1，1H)，6.53(br.s，1H)，6.79(d，J＝8.6，1H)，7.05-7.09(m，2H).
步骤BN-叔丁氧基羰基-5-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-2-吡咯烷酮使用类似于脒肟1、步骤C中描述的方法，用5-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-2-吡咯烷酮代替5-(4-氰基苯基)-2-吡咯烷酮，制得本标题化合物1H NMRδ1.29(s，9H)，1.84-1.90(m，1H)，2.20(s，3H)，2.39-2.53(m，2H)，2.64-2.71(m，1H)，3.82(s，3H)，5.07(dd，J＝3.6，8.3，1H)，6.78(d，J＝8.3，1H)，6.98-7.00(m，2H).
步骤C反式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮使用类似于脒肟1、步骤D中描述的方法，用N-叔丁氧基羰基-5-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-2-吡咯烷酮代替反式N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮，制得本标题化合物1H NMRδ1.34(s，9H)，2.00-2.04(m，1H)，2.12-2.24(m，5H)，2.63-2.68(m，1H)，2.74-2.81(m，1H)，3.82(s，3H)，5.03-5.10(m，3H)，5.69-5.77(m，1H)，6.76(d，J＝8.3，1H)，6.94-6.97(m，2H).
步骤D反式-5-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮使用类似于脒肟1、步骤E中描述的方法，用反式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮代替反式-N-叔丁氧基羰基-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物1H NMRδ2.07-2.13(m，1H)，2.21(s，3H)，2.22-2.33(m，2H)，2.55-2.60(m，1H)，2.62-2.66(m，1H)，3.82(s，3H)，4.61-4.63(m，1H)，5.06-5.14(m，2H)，5.77-5.82(m，1H)，5.99(br.s，1H)，6.78(d，J＝8.0，1H)，7.03-7.06(m，2H).
步骤E反式-5-(4-羟基-3-甲基-苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮把三溴化硼(10.1mL，1.0M在CH2Cl2中的溶液，10.1mmol)于-78℃滴加到反式-5-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮(1.13g，4.61mmol)在10.0mL CH2Cl2的溶液中。将该混合物于-78℃搅拌30分钟，然后于0℃搅拌1小时。通过加入20mL H2O将反应中止。把该混合物倒入乙醚和EtOAc的混合物(1∶1，50.0mL)中，并用2.0NNaOH(3×30mL)萃取。把水层合并，用5.0N HCl酸化，并用EtOAc(3×50mL)萃取。将有机层合并，用MgSO4干燥，浓缩，获得940mg(88％)粗制的本标题化合物，为淡褐色固体，将其用于下一步骤而不予进一步纯化。
步骤F反式-5-(4-三氟甲磺酰基氧基-3-甲基-苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮使用类似于脒肟1、步骤A中描述的方法，用反式-5-(4-羟基-3-甲基-苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮代替5-(4-羟基苯基)-2-吡咯烷酮，制得本标题化合物1H NMRδ2.08-2.29(m，1H)，2.23-2.29(m，1H)，2.34-2.40(m，4H)，2.55-2.66(m，2H)，4.68-4.71(m，1H)，5.08-5.15(m，2H)，5.75-5.83(m，1H)，6.33(br.s，1H)，7.16(dd，J＝2.3，8.5，1H)，7.21-7.24(m，2H).
步骤G反式-5-(4-氰基-3-甲基-苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮使用类似于脒肟1、步骤B描述的方法，用反式-5-(4-三氟甲磺酰基氧基-3-甲基-苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮代替5-(4-三氟甲磺酰基氧基苯基)-2-吡咯烷酮，制得本标题化合物1H NMRδ2.06-2.11(m，1H)，2.23-2.29(m，1H)，2.36-2.42(m，1H)，2.55-2.64(m，5H)，4.71-4.73(m，1H)，5.08-5.14(m，2H)，5.74-5.80(m，1H)，6.41(br.s，1H)，7.18(d，J＝8.0，1H)，7.23(br.s，1H)，7.59(d，J＝7.8，1H).
步骤H反式-5-(4-(氨基(羟基亚氨基)甲基)-3-甲基-苯基)-2-氧代-3-(2-丙烯基)-吡咯烷使用类似于脒肟1、步骤H中描述的方法，用反式-5-(4-氰基-3-甲基-苯基)-3-(2-丙烯基)-2-吡咯烷酮代替反式-5-(4-氰基苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯，制得本标题化合物。将该粗制脒肟进行使用而不予进一步纯化。
制备羧酸中间体羧酸14-(4-氟苯基)-5-(三氟甲基)噻吩-2-甲酸步骤A(E/Z)-(2-(4-氟苯基)-3-氯-4，4，4-三氟-2-丁醛于0℃把磷酰氯(6.8mL，74mmol)加到25mL DMF中。将所得混合物温热至室温并搅拌1小时。加入1，1，1-三氟甲基-3-(4-氟苯基)-2-丙酮(5.1g，24.8mmol)在10mL DMF中的溶液，并将所得混合物在70℃搅拌20小时。把反应混合物冷却至室温，倒在100g冰上，并加入乙酸钠(6.0g)。将该混合物于室温搅拌1小时，然后用乙醚(3×100mL)萃取。将有机层合并，用MgSO4干燥，浓缩。在Biotage 40+M筒上进行色谱纯化，用1∶19 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得4.0g(64％)本标题化合物。
步骤B(4-(4-氟苯基)-5-三氟甲基)噻吩-2-甲酸乙酯向巯基乙酸乙酯(2.1mL，19.1mmol)和氢化钠(482mg，19.1mmol)在20mL THF的悬浮液中于0℃加入(E/Z)-(2-(4-氟苯基)-3-氯-4，4，4-三氟-2-丁醛(4.0g，15.9mmol)。于室温搅拌过夜后，用50mL饱和NH4Cl溶液中止反应。将该混合物在250mL乙醚和100mL水之间分配。将有机层分离，用Na2SO4干燥并浓缩。在Biotage 40+M筒上进行色谱纯化，用1∶19 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得4.4g(86％)本标题化合物1H NMRδ1.39(t，J＝7.1，3H)，4.39(q，J＝7.2，2H)，7.12(t，J＝8.7，2H)，7.39(dd，J＝5.3，8.5，2H)，7.70(d，J＝1.4，1H).
步骤C4-(4-氟苯基)-5-(三氟甲基)噻吩-2-甲酸向(4-(4-氟苯基)-5-三氟甲基)噻吩-2-乙酸甲酯(948mg，3.0mmol)在10mL EtOH内的溶液中加入氢氧化钠(358mg，8.9mmol)。搅拌3小时后，除去溶剂，并将残余物稀HCl(100mL，pH＝3)和1∶1 v/v EtOAc∶乙醚的混合物(200mL)之间分配。将水层分离并进一步用乙醚(2×50mL)萃取。将有机层合并，用Na2SO4干燥并浓缩，获得本标题化合物1HNMRδ7.14(t，J＝8.5，2H)，7.39(dd，J＝5.3，8.5，2H)，7.70(d，J＝1.4，1H)，10.6(br.s，1H).
羧酸23-氟-4-异丁基苯甲酸步骤A3-氟-4-异丁基苯甲酸甲酯向4-溴-3-氟苯甲酸甲酯(322mg，1.38mmol)和异丁基溴化锌(4.1mL，0.5M in THF)在10mL THF内的溶液中加入二(三-叔丁基膦)钯(0)(14mg，0.03mmol)。将该混合物用氮气吹扫三次，然后于室温搅拌过夜。通过加入5.0mL 1.0N HCl溶液将该反应中止，并用Et2O(3×20mL)萃取。将有机层合并，用盐水洗涤，用MgSO4干燥，浓缩。在Biotage40+S筒上进行色谱纯化，用1∶99 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得243mg(84％)本标题化合物1H NMRδ0.92(d，J＝6.6，6H)，1.93(m，1H)，2.56(d，J＝6.1，2H)，3.91(s，3H)，7.21(t，J＝7.6，1H)，7.67(dd，J＝1.5，10.2，1H)，7.74(dd，J＝1.6，7.8，1H).
步骤B3-氟-4-异丁基苯甲酸向3-氟-4-异丁基苯甲酸甲酯(243mg，1.16mmol)在10mL EtOH内的溶液中，加入氢氧化钠(2.3mL，5.0N)。将该混合物于室温搅拌1小时，然后浓缩。将该混合物在稀HCl(10mL)和Et2O(10mL)之间分配。将水层分离并进一步用Et2O(2×10mL)萃取。并有机层合并，用MgSO4干燥，浓缩，获得212mg(93％)本标题化合物1H NMRδ0.93(d，J＝6.6，6H)，1.95(m，1H)，2.58(d，J＝7.4，2H)，7.26(m，1H)，7.74(dd，J＝1.4，10.1，1H)，7.82(dd，J＝1.5，7.9，1H)，11.2(br.s，1H).
羧酸33-氟-4-(3-甲基丁基)苯甲酸使用类似于有关羧酸2所描述的方法，在步骤A中用3-甲基丁基溴化锌代替异丁基溴化锌，制得本标题化合物1H NMRδ0.95(d，J＝6.4，6H)，1.51(m，2H)，1.52(m，1H)，2.70(t，J＝8.0，2H)，7.30(t，J＝7.6，1H)，7.72(dd，J＝1.3，10.2，1H)，7.82(dd，J＝1.4，7.8，1H).
羧酸44-((R)-3，3-二氟环戊基)苯甲酸步骤A(3R)-3-(4-溴苯基)环戊酮在氮气下向7.2g(35.8mmol)4-溴苯基硼酸、186mg(0.72mmol)乙酰基乙酸二(亚乙基)铑(I)和446mg(0.71mmol)(R)-2，2’-二(二苯基膦基)-1，1’-联萘(BINAP)在60mL二氧杂环己烷和6mL H2O中的混合物内，加入1.0mL(11.9mmol)2-环戊烯-1-酮。回流5.5小时后，将该反应浓缩。将残余物在300mL EtOAc和300mL 1N NaHCO3之间分配。把相分离后，将有机层用300mL盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。将残余物在40M Biotage住上进行纯化，用9∶1 v/v己烷/EtOAc作为洗脱剂，获得1.90g本标题化合物，为白色固体1H NMRδ1.97(m，1H)，2.29-2.37(m，2H)，2.43-2.52(m，2H)，2.69(m，1H)，3.40(m，1H)，7.16(d，J＝8.5，2H)，7.49(d，J＝8.5，2H).
步骤B(R)-3-(4-溴苯基)-1，1-二氟环戊烷于0℃将2.1mL(11.4mmol)[二(2-甲氧基乙基)氨基]三氟化硫和0.10mL(0.7mmol)三氟化乙醚合物在7mL甲苯中的溶液在不时地搅拌下放置1.3小时。加入1.9g(7.9mmol)(R)-3-(4-溴苯基)环戊酮(得自步骤A)在13mL甲苯中的溶液。将该反应在55℃搅拌2天。冷却后，于0℃把该混合物加到加到250mL 2N NaOH和250mL Et2O中。搅拌30分钟后，把相分离。将有机层用250mL 1N NaOH和250mL H2O洗涤，用MgSO4干燥并浓缩。把残余物在40M Biotage柱上进行纯化，用49∶1 v/v己烷/Et2O作为洗脱剂，获得1.47g本标题化合物1H NMRδ1.85(m，1H)，2.09-2.26(m，3H)，2.35(m，1H)，2.56(m，1H)，3.30(m，1H)，7.13(d，J＝8.3，2H)，7.46(d，J＝8.3，2H).
步骤C4-((R)-3，3-二氟环戊基)苯甲酸将1.0g(3.8mmol)(R)-3-(4-溴苯基)-1，1-二氟环戊烷(得自步骤B)在15mL THF中的溶液于-78℃用1.6mL(4.0mmol)2.5M Bu Li在己烷中的混合物处理。搅拌15分钟后，把该反应加到干冰在200mL Et2O中的悬浮液内。使该混合物温热至室温。将该反应混合物用100mL 1NNaOH萃取。把相分离后，将水层用浓HCl酸化至pH 1-2。将水相用3×100mL CH2Cl2萃取。把合并的有机相干燥并浓缩，获得0.67g本标题化合物1H NMR(CD3OD)δ1.87(m，1H)，2.13-2.37(m，4H)，2.54(m，1H)，3.41(m，1H)，7.39(d，J＝8.2，2H)，7.97(d，J＝8.2，2H).
羧酸54-((S)-3，3-二氟环戊基)苯甲酸使用类似于有关羧酸4所描述的方法，在步骤A中用(S)-2，2’-二(二苯基膦基)-1，1’联萘(BINAP)代替(R)-2，2’-二(二苯基膦基)-1，1’联萘(BINAP)1H NMR(CD3OD)δ1.87(m，1H)，2.13-2.37(m，4H)，2.54(m，1H)，3.41(m，1H)，7.39(d，J＝8.2，2H)，7.97(d，J＝8.2，2H).
羧酸64-((R)-3，3-二氟环己基)苯甲酸使用类似于有关羧酸4所描述的方法，在步骤A中用2-环己烯-1-酮代替2-环戊烯-1-酮，制得本标题化合物1H NMRδ1.47(m，1H)，1.66-1.96(m，5H)，2.19(m，1H)，2.31(m，1H)，2.96(m，1H)，7.32(d，J＝8.3，2H)，8.07(d，J＝8.2，2H).
羧酸74-((S)-3，3-二氟环己基)苯甲酸使用类似于有关羧酸6所描述的方法，用(S)-2，2’-二(二苯基膦基)-1，1’联萘(BINAP)代替(R)-2，2’-二(二苯基膦基)-1，1’联萘(BINAP)，制得本标题化合物1H NMRδ1.47(m，1H)，1.66-1.96(m，5H)，2.19(m，1H)，2.31(m，1H)，2.96(m，1H)，7.32(d，J＝8.3，2H)，8.07(d，J＝8.2，2H).
羧酸84-((1R，3R)-3-氟环戊基)苯甲酸步骤A(3S)-3-(4-溴苯基)环戊醇向(3R)-3-(4-溴苯基)环戊酮(1.14g，4.77mmol，羧酸4，步骤A)在10mL CH2Cl2内的溶液中于-78℃加入二异丁基氢化铝(7.2mL，1.0M在CH2Cl2中的溶液)。将该混合物在-78℃搅拌1小时，然后加入5.0mL饱和罗谢尔盐水溶液。把该混合物倒入稀HCl溶液中并用CH2Cl2(3×10mL)萃取。将有机层合并，用饱和NaHCO3和盐水洗涤。将有机层用MgSO4干燥并浓缩，获得1.16g(100％)本标题化合物，为1∶1比例的非对映混合物，其不能够用色谱法进行分离。
步骤B乙酸(1R，3R)-3-(4-溴苯基)环戊基酯和(1S，3R)-3-(4-溴苯基)环戊醇将(3S)-3-(4-溴苯基)环戊醇(1.01g，4.19mmol)和Porcine PancreasLipase(PPL，1.0g，Sigma)在20.0mL 1∶1 v/v 乙酸乙烯酯/己烷中的悬浮液于室温搅拌过夜。将酶通过硅藻土饼过滤并用EtOAc和己烷洗涤。把滤液浓缩。在Biotage 40+M筒上进行色谱纯化，用1∶19 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得536mg(45％)乙酸(1R，3R)-3-(4-溴苯基)环戊基酯1H NMRδ1.59(m，1H)，1.77-1.89(m，2H)，2.05(s，3H)，2.12-2.29(m，3H)，3.25(m，1H)，5.30(m，1H)，7.09(d，J＝8.2，2H)，7.41(d，J＝8.3，2H)，并且用1∶3 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得503mg(50％)(1S，3R)-3-(4-溴苯基)环戊醇1H NMRδ1.61(m，2H)，1.77-1.94(m，3H)，2.04(m，1H)，2.45(m，1H)，3.01(m，1H)，4.45(m，1H)，7.16(d，J＝8.3，2H)，7.40(d，J＝8.5，2H).
步骤C1-溴-4-((1R，3R)-3-氟环戊基)苯向(1S，3R)-3-(4-溴苯基)环戊醇(503mg，2.09mmol)在10mL CH2Cl2内的溶液中于-78℃加入(二(2-甲氧基乙基)氨基)三氟化硫(Deoxo-Fluor，462μL，2.50mmol)。使该混合物逐渐温热至室温过夜，然后倒入饱和NaHCO3溶液中(20mL)。将水层用CH2Cl2(3×20mL)萃取。将有机层用MgSO4干燥并浓缩。在Biotage 40+S筒上进行色谱纯化，用己烷作为洗脱剂，获得383mg(76％)本标题化合物1H NMRδ1.53-1.78(m，2H)，1.95-2.39(m，4H)，3.35(m，1H)，5.19-5.32(m，1H)，7.09(d，J＝8.5，2H)，7.40(d，J＝8.2，2H).
步骤D4-((1R，3R)-3-氟环戊基)苯甲酸使用类似于有关羧酸4所描述的方法，在步骤D中用1-溴-4-((1R，3R)-3-氟环戊基)苯代替1-溴-4-((1R)-3，3-二氟环戊基)苯，制得本标题化合物1H NMRδ1.65-1.87(m，2H)，1.99-2.46(m，4H)，3.47(m，1H)，5.23-5.36(m，1H)，7.33(d，J＝8.2，2H)，8.05(d，J＝8.2，2H).
羧酸94-((1R，3S)-3-氟环戊基)苯甲酸步骤A(1R，3R)-3-(4-溴苯基)环戊醇向乙酸(1R，3R)-3-(4-溴苯基)环戊基酯(羧酸8，步骤B，536mg，1.9mmol)在5.0mL EtOH内的溶液中，加入氢氧化钠(1.9mL，5.0N)。于室温搅拌30分钟，除去溶剂，并将残余物在饱和NaHCO3溶液(50mL)和CH2Cl2(50mL)之间分配。把水层分离并用CH2Cl2(2×50mL)萃取。将有机层合并，用MgSO4干燥，浓缩。在Biotage 40+M筒上进行色谱纯化，用7∶3 v/v己烷/EtOAc作为洗脱剂，获得445mg(97％)本标题化合物1H NMRδ1.49(br.s，1H)，1.56-1.81(m，2H)，2.05-2.27(m，4H)，3.35(m，1H)，4.52(m，1H)，7.09(d，J＝8.2，2H)，7.40(d，J＝8.3，2H).
步骤B4-((1R，3S)-3-氟环戊基)苯甲酸使用类似于有关羧酸8所描述的方法，在步骤C中用(1R，3R)-3-(4-溴苯基)环戊醇代替(1S，3R)-3-(4-溴苯基)环戊醇，制得本标题化合物。
羧酸103-氟-4-环戊基苯甲酸将0.45g(1.45mmol)3-氟-4-溴苯甲酸苄酯(0.45g，1.45mmol)在4.4mL 0.5M溴化环戊基锌在THF中的溶液中的溶液用～5mg二(三叔丁基膦)钯(0)处理，并将所得混合物于室温搅拌24小时。将该反应混合物直接在Biotage 40S筒上是进行纯化，用1∶1己烷/EtOAc作为洗脱剂。将所得固体(0.27g，0.91mmol)和10％Pd/C在5mL MeOH中的混合物在1atm H2下搅拌3小时。将该反应过滤并浓缩。通过HPLC B纯化，获得本标题化合物1H NMRδ1.58-1.90(m，6H)，2.05-2.14(m，2H)，3.30(m，1H)，7.36(t，J＝7.7，1H)，7.72(dd，J＝1.6，10.5，1H)，7.83(dd，J＝1.6，8.0，1H).
羧酸112-氟-4-环戊基苯甲酸使用类似于有关羧酸10所描述的方法，用2-氟-4-溴苯甲酸苄酯代替苄基3-氟-4-溴苯甲酸苄酯1H NMRδ1.57-1.85(m，6H)，2.07-2.13(m，2H)，3.05(m，1H)，7.03(dd，J＝1.1，12.4，1H)，7.10(dd，J＝1.4，8.2，1H)，7.94(t，J＝8.0，1H).
羧酸123-三氟甲基-4-(((1S)-1-甲基丙基)氧基)苯甲酸步骤A3-三氟甲基-4-(2-(S)-丁氧基)苄腈将1.1g(5.9mmol)4-氟-3-三氟甲基苄腈和485mg(6.5mmol)(S)-(+)-2-丁醇在10mL THF中的溶液于-10℃用235mg(5.9mmol)氢化钠处理。将所得混合物在冷条件下搅拌2小时，然后用10mL H2O中止反应。将该中止反应的溶液用Et2O萃取，用MgSO4干燥并浓缩。在Biotage 40M筒上进行色谱法纯化，用4∶1 v/v己烷/乙酸乙酯作为洗脱剂，获得550mg本标题化合物1H NMRδ0.99(t，J＝7.6，3H)，1.35(d，J＝6.2，3H)，1.58-1.83(m，2H)，4.51(七重峰，1H)，7.04(d，J＝8.7，1H)，7.75(d，J＝8.7，1H)，7.85(s，1H).
步骤B3-三氟甲基-4-(2-(S)-丁氧基)苯甲酸将550mg(2.2mmol)3-三氟甲基-4-(2-(S)-甲基丙氧基)苄腈(得自步骤A)在5mL乙醇中的溶液用1.5mL 5.0N NaOH处理，并加热至80℃3小时。将该反应浓缩，用2N HCl处理，用30mL EtOAc萃取，干燥并浓缩，获得600mg本标题化合物1H NMRδ0.99(t，J＝7.3，3H)，1.43(d，J＝5.9，3H)，1.73-1.83(m，2H)，4.54(七重峰，1H)，7.02(d，J＝8.9，1H)，8.21(d，J＝8.9，1H)，8.32(s，1H).
羧酸133-氯-4-异丙氧基苯甲酸步骤A3-氯-4-异丙氧基苯甲酸甲酯向1.42g(7.63mmol)3-氯-4-羟基苯甲酸甲酯、585μL(7.63mmol)2-丙醇和3.0g(11.45mmol)三苯基膦在20mL THF内的溶液中于0℃加入2.25mL(11.45mmol)偶氮二甲酸二异丙酯。使该混合物温热至室温，并搅拌16小时。除去溶剂。在Biotage 40+M筒上进行色谱纯化，用1∶19 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得1.77g(100％)本标题化合物1H NMRδ1.41(d，J＝6.2，6H)，4.63-4.70(m，1H)，6.93(d，J＝8.7，1H)，7.89(dd，J＝2.2，8.6，1H)，8.05(d，J＝2.0，1H).
步骤B3-氯-4-异丙氧基苯甲酸使用类似于有关羧酸2所描述的方法，在步骤B中用3-氰基-4-异丙氧基苯甲酸甲酯代替3-氟-4-异丁基苯甲酸甲酯1H NMRδ1.43(d，J＝5.9，6H)，4.66-4.73(m，1H)，6.96(d，J＝8.9，1H)，7.97(dd，J＝2.1，8.7，1H)，8.12(d，J＝2.0，1H)，11.7(br.s，1H).
羧酸14-15使用类似于有关羧酸13所描述的方法，在步骤A中用适宜的纯化代替2-丙醇，制得以下的羧酸中间体。
羧酸164-(4，4-二氟环己基)苯甲酸步骤A三氟甲磺酸1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基酯向N，N-二异丙基氨基锂(30.6mmol)在30mL THF内的溶液中，于-78℃滴加1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-酮(4.06g，26.0mmol)在15mLTHF中的溶液。将所得混合物在-78℃搅拌25分钟，然后把2-(N，N-二(三氟甲基磺酰基)氨基)-5-氯吡啶(12.0g，30.5mmol)在15mL THF中的溶液滴加入其中。于-78℃搅拌2.5小时后，通过加入10mL 1NNaHCO3水溶液中止反应。将该混合物在Et2O(200mL)和1N NaHCO3(200mL)之间分配。将有机层分离，用MgSO4干燥，并浓缩。在Biotage40M筒上进行色谱法纯化，用1∶9 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得4.62g(61％)本标题化合物。
步骤B4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)苯甲酸向4-羧基苯基硼酸(0.69g，3.53mmol)和三氟甲磺酸1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基酯(1.02g，3.53mmol)在14mL DMF内的溶液中，加入7mL 2N Na2CO3水溶液、三苯基膦(159mg，0.61mmol)和三(二亚苄基丙酮)钯(0)(68mg，74.2μmol)。于80℃搅拌3小时然后于室温搅拌16小时后，将该混合物浓缩并在100mL Et2O和150mL H2O水之间分配。把水层分离，用浓HCl酸化至pH～2-3，并用CH2Cl2(2×100mL)萃取。将有机层合并，用Na2SO4干燥并浓缩。将残余物从10mL EtOAc中再结晶，获得353mg(38％)本标题化合物。
步骤C4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)苯甲酸甲酯将4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)苯甲酸(572mg，2.20mmol)、碘甲烷(140μL，2.24mmol)和碳酸铯(710mg，2.17mmol)在6mL DMF中的混合物于室温搅拌16小时。将该混合物用H2O(10mL)稀释，并用Et2O(100mL)萃取。将有机层分离，用MgSO4干燥，并浓缩。在Biotage 40S筒上是进行色谱法纯化，用3∶17 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得399mg(72％)本标题化合物。
步骤D4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)苯甲酸甲酯将4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)苯甲酸甲酯(514mg，1.87mmol)和10％Pd/C(127mg)在15mL 1∶2 v/v EtOAc/CH3OH中的混合物在45Psi H2下用帕尔摇动器摇动6.5小时。将催化剂通过硅藻土饼过滤，并用大量EtOAc洗涤。将滤液浓缩，获得480mg本标题化合物。
步骤E4-(4-氧代环己基)苯甲酸甲酯向4-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)苯甲酸甲酯(480mg，1.73mmol)在8mL THF内的溶液中，加入4mL 1N HCl水溶液。将该混合物于室温搅拌21小时并浓缩。把残余物在50mL Et2O和50mL 1N NaHCO3水溶液之间分配。将有机层分离，用MgSO4干燥，并浓缩。在Biotage40S筒上进行色谱法纯化，用1∶9 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得343mg(85％)本标题化合物。
步骤F4-(4，4-二氟环己基)苯甲酸甲酯使用类似于有关羧酸4所描述的方法，在步骤B中用4-(4-氧代环己基)苯甲酸甲酯代替(3R)-3-(4-溴苯基)环戊酮，制得本标题化合物。
步骤G4-(4，4-二氟环己基)苯甲酸使用类似于有关羧酸1所描述的方法，在步骤C中用4-(4，4-二氟环己基)苯甲酸甲酯代替(4-(4-氟苯基)-5-三氟甲基)噻吩-2-甲酸乙酯，制得本标题化合物1H NMR(CD3OD)δ1.82(m，2H)，1.94(m，4H)，2.16(m，2H)，2.78(m，1H)，7.36(d，J＝8.2，2H)，7.96(d，J＝8.2，2H).
实施例的制备实施例1反式-2-(4-(5-(4-(2-甲基丙基)苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸步骤A反式-5-(4-(5-(4-(2-甲基丙基)苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-2-氧代-3-吡咯烷乙酸甲酯将脒肟1，4-(2-甲基丙基)苯甲酸(127mg，0.71mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(149mg，0.78mmol)和1-羟基苯并三唑水合物(44mg，0.32mmol)在乙腈(10mL)中的溶液于室温搅拌1小时。将该混合物浓缩，并在Biotage 40+S筒上进行色谱纯化，用EtOAc作为洗脱剂，获得酯中间体。
将上述酯在二甲苯(10mL)中的溶液回流2小时然后浓缩。在Biotage 40+S筒上进行色谱纯化，用3∶2 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得63mg(22％三步)本标题化合物，为白色固体1H NMRδ0.94(d，J＝6.7，6H)，1.92-1.97(m，1H)，2.33-2.59(m，5H)，2.89(dd，J＝4.0，16.9，1H)，2.97-3.00(m，1H)，3.70(s，3H)，4.85(dd，J＝3.0，8.7，1H)，6.08(br.s，1H)，7.33(d，J＝8.2，2H)，7.42(d，J＝8.2，2H)，8.12(d，J＝8.2，2H)，8.18(d，J＝8.3，2H).
步骤B反式-2-(4-(5-(4-(2-甲基丙基)苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸将上述内酰胺(63mg，0.15mmol)和氟硼酸三甲基氧(26mg，0.17mmol)在CH2Cl2(10mL)中的溶液于室温搅拌过夜。然后将该反应混合物用饱和NaHCO3溶液(20mL)洗涤。把水层分离，并用CH2Cl2(3×20mL)萃取。将有机层合并，用MgSO4干燥，浓缩，获得亚氨基醚，将其用于下一步骤而不予进一步纯化。
把氰基硼氢钠溶液(1.0M in THF中的溶液，727μL，0.73mmol)加到所得亚氨基醚和少量溴甲酚绿在CH3OH(10mL)内的溶液中。把HCl在1，4-二氧杂环己烷(2.0M)中的溶液加到该反应混合物中，以便将颜色保持黄色(pH～3-4)，并将所得混合物于室温搅拌4小时。把该混合物倒入饱和NaHCO3溶液(20mL)和CH2Cl2(20mL)中，并将水层进一步用CH2Cl2(3×20mL)萃取。将有机层合并，用Na2SO4干燥并浓缩，获得粗制的胺(70mg)。
把氢氧化钠(5.0N，110μL)加到粗制胺(23mg，0.05mmol)在EtOH(5.0mL)内的溶液中，并于室温搅拌30分钟。将反应混合物浓缩，并将残余物用HPLC纯化，获得实施例1(9.7mg，44％)1H NMR(CD3OD)δ0.88(s，6H)，1.86-1.91(m，1H)，2.23-2.29(m，1H)，2.44-2.64(m，5H)，2.93-2.99(m，1H)，3.12(dd，J＝7.9，11.8，1H)，3.70(dd，J＝7.6，11.8，1H)，4.85(t，J＝8.6，1H)，7.35(d，J＝8.3，2H)，7.60(d，J＝8.5，2H)，8.06(d，J＝8.5，2H)，8.18(d，J＝8.5，2H).
实施例2顺式-2-(4-(5-(4-(2-甲基丙基)苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸用类似于实施例1中描述的方法，在步骤A中用脒肟2代替脒肟1，制得实施例21H NMR(CD3OD)δ1.38(s，9H)，2.07(q，J＝12.3，23.8，1H)，2.61-2.74(m，3H)，2.89-3.00(m，1H)，3.23-3.27(m，1H)，3.72-3.76(m，1H)，4.79-4.83(m，1H)，7.66(d，J＝8.5，2H)，7.69(d，J＝8.5，2H)，8.14(d，J＝8.5，2H)，8.23(d，J＝8.5，2H).
实施例3反式-1-甲基-2-(4-(5-(4-(2-甲基丙基)苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸将反式-2-(4-(5-(4-(2-甲基丙基)苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯(实施例1，步骤B，18mg，0.04mmol)、碘甲烷(3μL，0.05mmol)和碳酸钾(30mg，0.21mmol)在2.0mL DMF中的混合物于100℃1小时。冷却至室温后，将该反应混合物通过硅藻土饼过滤，并将残余物用CH2Cl2(50mL)洗涤。将滤液用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，获得粗制的胺。
向上述粗制胺在EtOH(4.0mL)内的溶液中加入NaOH(86μL 5.0N NaOH，0.43mmol)。于室温搅拌16小时后，内所得反应混合物浓缩。在Biotage 40+S筒上进行色谱纯化，用具有1.0％NH4OH的3∶17 v/vCH3OH/CH2Cl2作为洗脱剂，获得8.0mg(44％两步)本标题化合物，为白色固体1H NMRδ0.88(d，J＝6.7，6H)，1.88(m，1H)，2.28(m，1H)，2.52-2.61(m，5H)，2.69(s，3H)，2.99(m，2H)，3.91(dd，J＝6.9，10.8，1H)，4.43(t，J＝9.1，1H)，7.36(d，J＝8.2，2H)，7.63(d，J＝8.2，2H)，8.07(d，J＝8.2，2H)，8.21(d，J＝8.5，2H).
实施例4反式-2-(4-(5-(4-(4-氟苯基)-5-三氟甲基-2-噻吩基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸步骤A反式-3-烯丙基-5-(4-(5-(4-(4-氟苯基)-5-三氟甲基-2-噻吩基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)吡咯烷-2-酮用类似于实施例1中描述的方法，在步骤A中分别用脒肟3代替脒肟1，用4-(4-氟苯基)-5-(三氟甲基)噻吩-2-甲酸代替4-(2-甲基丙基)苯甲酸，制得本标题化合物1H NMR(CD3OD)δ2.16(m，1H)，2.28(m，1H)，2.42(m，1H)，2.63(m，2H)，4.79(m，1H)，5.12(m，2H)，5.80(m，1H)，6.01(s，1H)，7.17(t，J＝8.7，2H)，7.44(m，4H)，7.88(m，1H)，8.14(d，J＝8.4，2H).
步骤B反式-2-(4-(5-(4-(4-氟苯基)-5-三氟甲基-2-噻吩基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯把氯化钌(III)水合物(1mg，4.4mol)加到反式3-烯丙基-5-(4-(5-(4-(4-氟苯基)-5-三氟甲基-2-噻吩基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)吡咯烷-2-酮(103mg，0.20mmol)和高碘酸钠(193mg，0.90mmol)在2∶2∶3 v/v/vCCl4/CH3CN/H2O的混合溶剂(7.0mL)中的溶液中。将该混合物于室温搅拌1小时，然后在H2O(20mL)和CH2Cl2(20mL)之间分配。将水层分离，并用CH2Cl2(3×20mL)萃取。将有机层合并，用Na2SO4干燥并浓缩，获得粗制的酸，为无色浆液。
把(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷(2.0M在己烷中的溶液，48μL，0.10mmol)加到粗制酸在7∶2 v/v 苯/CH3OH的混合溶剂(9mL)内的溶液中。30分钟后，将该反应混合物浓缩。在Biotage 40+S筒上进行色谱纯化，用3∶2 v/v EtOAc/己烷作为洗脱剂，获得20.0mg(18％两步)本标题化合物，为白色固体1H NMRδ2.36(m，1H)，2.44-2.58(m，2H)，2.90(dd，J＝4.0，7.0，1H)，2.98(m，1H)，3.71(s，3H)，4.85(dd，J＝2.9，9.0，1H)，5.89(s，1H)，7.17(d，J＝8.6，2H)，7.42-7.47(m.4H)，7.89(m，1H)，8.15(d，J＝8.2，2H).
步骤C反式-2-(4-(5-(4-(4-氟苯基)-5-三氟甲基-2-噻吩基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸将反式-2-(4-(5-(4-(4-氟苯基)-5-三氟甲基-2-噻吩基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯(20mg，0.04mmol)和氟硼酸三甲基氧(6.5mg，0.04mmol)在5mL CH2Cl2中的溶液于室温搅拌过夜。将该混合物用20mL饱和NaHCO3洗涤，并将水层用CH2Cl2(3×20mL)萃取。把有机层合并，用Na2SO4干燥并浓缩，获得亚氨基醚，将其用于下一步骤而不予进一步纯化。
把氰基硼氢钠溶液(1.0M在THF中的溶液，367μL，0.37mmol)加到上述亚氨基醚和少量溴甲酚绿在CH3OH(10mL)内的溶液中。把HCl在1，4-二氧杂环己烷(2.0M)中的溶液加到该反应混合物中，以便将混合物的颜色保持黄色。将所得混合物于室温搅拌4小时。倒入饱和NaHCO3溶液和CH2Cl2中，并将水层进一步用CH2Cl2(3×20mL)萃取。将有机层合并，用Na2SO4干燥并浓缩，获得粗制的胺，将其用于下一步骤而不予进一步纯化。
把氢氧化钠(5.0N，94μL)加到上述胺在EtOH(4.0mL)内的溶液中，并于室温搅拌过夜。将反应混合物直接用HPLC进行纯化，获得本标题化合物(11mg，58％三步)1H NMR(CD3OD)δ2.26(m，1H)，2.49(m，1H)，2.61(m，1H)，2.96(m，1H)，3.13(m，1H)，3.71(dd，J＝7.7，11.8，1H)，4.85(t，J＝8.6，1H)，7.16-7.20(m，2H)，7.46-7.50(m，2H)，7.61(d，J＝8.4，2H)，8.00(m，1H)，8.18(d，J＝8.2，2H).
实施例5反式-2-(4-(5-(4-环戊基苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸步骤A反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-(5-(4-环戊基苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯用类似于实施例1中描述的方法，在步骤A中分别用脒肟4代替脒肟1，用4-环戊基苯甲酸代替4-(2-甲基丙基)苯甲酸，制得本标题化合物1H NMRδ1.21(s，9H)，1.47-1.87(m，6H)，2.05-2.15(m，3H)，2.41-2.48(m，2H)，2.70(m，1H)，3.06-3.31(m，2H)，3.67(s，3H)，3.93(m，1H)，4.91(m，1H)，5.07(m，1H)，7.30(d，J＝8.0，2H)，7.41(d，J＝8.3，2H)，8.12(m，4H).
步骤B反式-2-(4-(5-(4-环戊基苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸将反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-(5-(4-环戊基苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯(4.4mg，8.3mol)在2.5mL 20％TFA在CH2Cl2内的溶液中的溶液于室温搅拌1小时，然后浓缩。把残余物再溶解在5.0mL EtOH中，并加入氢氧化钠(189μL，5.0N，0.95mmol)。于室温搅拌1小时后，把反应混合物浓缩，并将残余物用HPLC进行纯化，获得3.5mg(100％)本标题化合物1H NMR(CD3OD)δ1.60(m，2H)，1.69(m，2H)，1.81(m，2H)，2.06(m，2H)，2.26(m，1H)，2.46(m，1H)，2.58(m，2H)，2.96(m，1H)，3.07(m，1H)，3.12(dd，J＝7.7，11.9，1H)，3.70(dd，J＝7.7，11.8，1H)，4.84(t，J＝8.6，1H)，7.44(d，J＝8.2，2H)，7.60(d，J＝8.4，2H)，8.06(d，J＝8.4，2H)，8.18(d，J＝8.2，2H).
实施例6-19以下实施例是使用类似于实施例5中描述的方法，在步骤A中用适宜的羧酸代替4-(2-甲基丙基)苯甲酸制备的。实施例9和10的前体-实施例5，步骤A中的产物是在Chiralcel OD 20×250mm柱上分离的，用85∶15 v/v 庚烷/EtOH等度洗脱30分钟，流速为8.0mL/分钟，UV波长在254nm。在该分离条件下，实施例9的前体的保留时间比实施例10的前体短。


实施例20-27以下实施例是使用类似于实施例5中描述的方法，在步骤A中用脒肟5代替脒肟4，用使用的羧酸代替4-环戊基苯甲酸制备的。

实施例28反式-2-(4-(5-(4-环己基苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸步骤A反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-(5-(4-环己基苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-(2-丙烯基)-吡咯烷用类似于实施例1中描述的方法，在步骤A中分别用脒肟6代替脒肟1，用4-环己基苯甲酸代替4-(2-甲基丙基)苯甲酸，制得本标题化合物1H NMRδ1.13-1.58(m，15H)，1.77-1.96(m，7H)，2.05-2.63(m，3H)，3.25(m，1H)，3.83(m，1H)，4.91-5.07(m，3H)，5.74(m，1H)，7.29(d，J＝8.0，2H)，7.38(d，J＝8.3，2H)，8.12(m，4H).
步骤B反式-2-(4-(5-(4-环己基苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-吡咯烷乙酸把氯化钌(III)水合物(0.1mg，0.5mol)加到反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-(5-(4-环己基苯基)-1，2，4-二唑-3-基)苯基)-4-(2-丙烯基)-吡咯烷(12mg，0.02mmol)将高碘酸钠(23mg，0.11mmol)在2∶2∶3 v/v/vCCl4/CH3CN/H2O的混合物溶剂(7.0mL)内的溶液中。将该混合物于室温搅拌1小时后，然后在H2O(10mL)和CH2Cl2(10mL)之间分配。把水层分离，并用CH2Cl2(3×10mL)萃取。将将有机层合并，用Na2SO4干燥并浓缩，获得粗制的酸，为无色浆液。
将上述粗制酸在2.5mL 20％三氟乙酸的CH2Cl2溶液中的溶液于室温搅拌30分钟。除去溶剂，并将残余物用HPLC进行纯化1H NMRδ1.26(m，2H)，1.43(m，4H)，1.74(m，2H)，1.83(m，4H)，2.25(m，1H)，2.55(m，4H)，2.95(m，1H)，3.12(dd，J＝8.0，11.8，1H)，3.69(dd，J＝7.7，12.3，1H)，4.83(m，1H)，7.41(d，J＝8.3，2H)，7.60(d，J＝8.3，2H)，8.07(d，J＝8.3，2H)，8.18(d，J＝8.3，2H).
实施例29-32以下实施例是使用类似于实施例18中描述的方法，在步骤A中用适宜的羧酸代替4-环己基苯甲酸制备的。

实施例33反式-2-(4-(5-(4-((1R)-3，3-二氟环戊基)苯基)-1，2，4-二唑-3-基)-3-甲基-苯基)-4-吡咯烷乙酸用类似于实施例4中描述的方法，在步骤A中分别用脒肟7代替脒肟3，用4-((1R)-3，3-二氟环戊基)苯甲酸代替4-(4-氟苯基)-5-(三氟甲基)噻吩-2-甲酸，制得本标题化合物1H NMRδ1.87(m，1H)，2.25(m，5H)，2.46(m，3H)，2.61(m，1H)，2.65(s，3H)，2.96(m，1H)，3.12(dd，J＝7.9，10.8，1H)，3.41(m，1H)，3.71(dd，J＝7.7，12.0，1H)，4.81(m，1H)，7.40-7.50(m，4H)，8.10-8.12(m，3H).
实施例34，35这些实施例是实施例33的非对映异构体。实施例33的前体-反式-N-叔丁氧基羰基-2-(4-(5-(4-((R)-3，3-二氟环戊基)苯基)-1，2，4-二唑-3-基)-3-甲基-苯基)-4-吡咯烷乙酸甲酯是在Chiralpak AD 20×250mm柱上分离的，用50∶50 v/v 庚烷/EtOH等度洗脱50分钟，流速为7.0mL/分钟，UV波长在254nm。在该分离条件下，实施例34的前体的保留时间比实施例35的前体的保留时间短。

生物学活性用下面的试验可以对本发明化合物的S1P1/Edg1、S1P3，/Edg3、S1P2/Edg5、S1P4/Edg6或S1P5/Edg8活性进行评估配体与Edg/S1P受体的结合试验用具有鞘氨醇激酶活性的粗酵母菌提取物在包含50mMKH2PO4、1mM巯基乙醇、1mM Na3VO4、25mM KF、2mM氨基脲1mM Na2EDTA、5mM MgCl2、50mM鞘氨醇、0.1％ TritonX-114、和1mCi γ33P-ATP(NEN；比活度3000Ci/mmol)的反应混合物中由γ33P-ATP和鞘氨醇来进行33P-鞘氨醇-1-磷酸酯的酶合成。用丁醇对该反应产物进行萃取并用HPLC对33P-鞘氨醇-1-磷酸酯进行纯化。
用不含酶的解离溶液(Specialty Media，Lavallette，NJ)来收获表达EDG/S1P受体的细胞。将其在冷PBS中洗涤一次并将其混悬于由50mM HEPES-Na，pH 7.5、5mM MgCl2、1mM CaCl2和0.5％不含脂肪酸的BSA所组成的结合试验缓冲剂中。将33P-鞘氨醇-1-磷酸酯与0.1nM鞘氨醇-1-磷酸酯一起在结合试验缓冲剂中进行声处理；向位于96孔微量滴定皿中的100μl细胞(1×106个细胞/ml)中加入100μl所述配体混合物。在温和混合的情况下使其在室温下结合60分钟。然后，用Packard Filtermate Universal Harvester将细胞收集到GF/B滤板上。在将该滤板干燥30分钟后，向各孔中加入40μl Microscint 20并在Wallac Microbeta闪烁计数器上对结合进行测定。非特异性结合被定义为在存在0.5μM冷鞘氨醇-1-磷酸酯的情况下剩余的放射性活性的量。
或者，在由表达Edg/S1P受体的细胞制备的膜上进行配体结合试验。用不含酶的解离溶液来收获细胞并将其在冷PBS中洗涤一次。通过用Kinematica polytron在冰冷的20mM HEPES pH 7.4、10mMEDTA中进行匀化(标度5，10秒)来破碎这些细胞。将这些匀浆在48,000×g下在4℃下离心15min并将小丸混悬于20mM HEPES pH 7.4，0.1mM EDTA中。在第二次离心后，将该最后的小丸混悬于20mM HEPESpH 7.4，100mM NaCl，10mM MgCl2中。用0.5至2μg膜蛋白如上所述的那样进行配体结合试验。
可以在该该33P-鞘氨醇-1-磷酸酯结合试验中确定Edg/S1P受体的激动剂和拮抗剂。将用DMSO、甲醇或其它溶剂稀释的化合物与包含33P-鞘氨醇-1-磷酸酯的探针和结合试验缓冲剂在微量滴定皿中进行混合。向其中加入由表达Edg/S1P受体的细胞制备的膜，并如所示那样进行与33P-鞘氨醇-1-磷酸酯的结合。测定存在各种浓度化合物情况下的结合数量并用非线性回归软件如MRLCalc(Merck ResearchLaboratories)或PRISM(GraphPad软件)对数据进行分析以测量这些化合物对所说受体的亲合力。通过用由被各受体(S1P1/Edg1，S1P3/Edg3，S1P2/Edg5，S1P4/Edg6，S1P5/Edg8)转染的细胞制得的膜在存在所说化合物的情况下测量33P-鞘氨醇-1-磷酸酯结合的水平来测定化合物对Edg/S1P受体的选择性。
35S-GTPγS结合试验用35S-GTPγS结合试验测量S1P/Edg受体与G蛋白的功能性偶合。将如配体与Edg/S1P受体结合试验中所述那样制备的膜(1-10μg膜蛋白)在200μl包含20mM HEPES pH 7.4，100mM NaCl，10mMMgCl2，5μM GDP，0.1％不含脂肪酸的BSA(Sigma，catalog A8806)，各种浓度的鞘氨醇-1-磷酸酯，和125pM35S-GTPγS(NEN；比活度1250Ci/mmol)的体积中在96孔微量滴定皿中进行培养。将其在温和混合的情况下在室温下进行1小时的结合，通过用Packard FiltermateUniversal Harvester将该膜收集到GF/B滤板上来终止结合。在将该滤板干燥30min后，向各孔中加入40μl Microscint 20并在WallacMicrobeta闪烁计数器对结合进行测量。
可以在所述35S-GTPγS结合试验中确定S1P/Edg受体的激动剂和拮抗剂。将用DMSO、甲醇或其它溶剂稀释的化合物加入到微量滴定皿中从而得到0.01nM至10μM的最终浓度。向其中加入由表达S1P/Edg受体的细胞制备的膜，并如所述的那样与35S-GTPγS进行结合。当在不存在天然配体或其它已知激动剂的情况下进行试验时，认为在高于内源性水平的水平上刺激35S-GTPγS结合的化合物是激动剂，而认为抑制35S-GTPγS结合的内源性水平的化合物是反相激动剂。在存在低于最大水平的天然配体或已知的S1P/Edg受体激动剂的情况下用35S-GTPγS结合试验来探测拮抗剂，在这种情况中这些化合物降低了35S-GTPγS结合的水平。用在存在各种浓度化合物的情况下测定的结合数量来测量化合物作为S1P/Edg受体的激动剂、反相激动剂、或拮抗剂的效力。为了对激动剂进行评估，将高于基准的刺激百分比计算为在存在化合物情况下的结合除以不存在配体情况下的结合再乘以100的形式。用非线性回归曲线拟合程序MRLCalc(Merck ResearchLaboratories)作剂量响应曲线，并将EC50值定义为获得其自身最大刺激50％所需的激动剂浓度。通过用由各受体转染的细胞制得的膜测量存在化合物情况下35S-GTPγS的结合水平来测定化合物对S1P/Edg受体的选择性。
细胞内钙通量试验用FLIPR(荧光成像板读数器，分子装置(Fluorescence ImagingPlate Reader，Molecular Devices))测量与细胞内钙活动有关的S1P/Edg受体与G蛋白的功能性偶合。收获表达S1P/Edg受体的细胞并将其用试验缓冲剂(包含20mM HEPES，0.1％BSA和710μg/ml丙磺舒(probenicid)的Hanks Buffered盐水溶液(BRL)(Sigma))洗涤一次。在37℃和5％CO2下在包含500nM钙敏感的染料Fluo-4(分子探针)的相同缓冲剂中对这些细胞标记1小时。用缓冲剂将这些细胞洗涤两次，然后将其以每孔1.5×105的数量(90μl)涂镀在涂覆了多熔素的96孔黑色微量滴定皿中。通过用200μl试验缓冲剂将鞘氨醇-1-磷酸酯或其它激动剂稀释至为最终试验浓度2倍的浓度来制备一种96-孔配体板。将该配体板和细胞板负载到该FLIPR仪器上以对其进行分析。使这些板平衡至37℃。通过将等体积的配体转移到细胞板中来开始试验，并以3min的间隔记录钙通量。以面积(总和)或最大峰高(max)的形式对细胞响应进行定量。在不存在天然配体的情况下，通过用适宜的溶剂对化合物进行稀释并将其转移到Fluo-4标记的细胞中来对激动剂进行评估。在通过加入天然配体或其它S1P/Edg受体激动剂来开始钙流出之前通过用各种浓度的化合物对该Fluo-4标记的细胞预处理15分钟来对拮抗剂进行评估。
表达S1P/Edg受体细胞的制备可以用许多方法中的任何一种来克隆S1P1/Edg1、S1P3/Edg3、S1P2/Edg5、S1P4/Edg6或S1P5/Edg8。这些方法非限制性地包括(1)RACE PCR克隆技术(Frohman等人，1988，Proc.Natl.Acad.Sci.USA858998-9002)。可以用5′和/或3′RACE来产生全长型cDNA序列；(2)在适宜的表达载体系统中在构建了包含S1P/Edg的cDNA文库后Edg/S1P cDNA的直接功能性表达；(3)用由该S1P/Edg蛋白的氨基酸序列设计的进行了标记的简并寡核苷酸探针对在噬菌体或质粒穿梭载体中构建的包含S1P/Edg的cDNA文库进行筛选；(4)用编码所述S1P/Edg蛋白的不完全cDNA对在噬菌体或质粒穿梭载体中构建的包含S1P/Edg的cDNA文库进行筛选。这种不完全cDNA是通过设计得自与S1P/Edg蛋白相关的其它蛋白已知的氨基酸序列的简并寡核苷酸引发剂由S1P/Edg DNA片断的特定PCR扩增而获得的；(5)用与哺乳动物S1P/Edg蛋白具有同源性的部分cDNA或寡核苷酸对在噬菌体或质粒穿梭载体重构建的包含S1P/Edg的cDNA文库进行筛选。对于S1P/EdgcDNA的PCR扩增而言，这种策略可能还涉及使用基因特异性的寡核苷酸引发剂；或(6)用S1P/Edg核苷酸序列作为模板设计5′和3′基因特异性的寡核苷酸，从而使得可以用已知的RACE技术来产生全长型cDNA，或者可以用这些用于产生和分离出一种部分编码区域的相同已知RACE技术来产生编码区域的一部分并用其作为用于从许多类cDNA和/或基因组文库中筛选出一种的探针，从而分离出编码S1P/Edg的核苷酸序列的全长型版本。
本领域技术人员显而易见的是可以用其它类型的文库以及由其它细胞类型或种属类型构建的数据库来分离编码S1P/Edg的DNA或S1P/Edg同系物。其它类型的文库非限制性地包括得自其它细胞的cDNA文库。
本领域技术人员显而易见的是可以由具有S1P/Edg活性的细胞或细胞系制备适宜的cDNA文库。可以通过首先用用于该类目的的任何可获得的已知试验测量与细胞有关的S1P/Edg活性来对用于制备用来分离出编码S1P/Edg的cDNA的cDNA文库的细胞或细胞系进行选择。
可以用现有技术公知的标准技术来进行cDNA文库的制备。例如可以在Sambrook等人，1989，分子克隆实验室手册(Molecular CloningA Laboratory Manual)；Cold Spring Harbor Laboratory，Cold SpringHarbor，纽约中找到众所周知的cDNA文库构建技术。互补DNA文库还可以由许多商业来源获得，所述商业来源非限制性地包括ClontechLaboratories，Inc.和Stratagene。
对于S1P/Edg在重组宿主细胞中的表达而言，可以使用包含编码S1P/Edg-样蛋白的DNA的表达载体。可以将该类重组宿主细胞在适宜的条件下进行培养从而制备出S1P/Edg或生物学等值的形式。表达载体可以非限制性地包括克隆载体、改性的克隆载体、特定设计的质粒或病毒。通过商业途径获得的哺乳动物表达载体可能适用于重组的S1P/Edg表达。
重组的宿主细胞可以是原核或真核细胞，非限制性地包括细菌如大肠杆菌、真菌细胞如酵母菌、哺乳动物细胞，非限制性地包括牛、猪、猴子和啮齿动物源的细胞系；和昆虫细胞，非限制性地包括得自果蝇和蚕的细胞系。
各种S1P/Edg受体的核苷酸序列在现有技术中是已知的。例如可参见下面的文献S1P1/Edg1人Ela，T.和T.Maciag 1990，在分化的人内皮细胞中诱导的大量转录物编码了具有与G-蛋白偶合受体的结构相似结构的多肽(An abundanttranscript induced in differentiating human endothelial cells encodes apolypeptide with structural similarities to G-protein coupled receptors).J.Biol Chem.2659308-9313，其在这里被全部引入作为参考。
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S1P1/Edg1大鼠Lado，D.C.，C.S.Browe，A.A.Gaskin，J.M.Borden，和A.J.MacLennan.1994，大鼠edg-1即早基因的克隆表达方式表明了功能的多样性(Cloning of the rat edg-1 immediate-early geneexpressionpattern suggests diverse functions).Gene 149331-336，其在这里被全部引入作为参考。
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S1P4/Edg6人Graler，M.H.，G.Bernhardt，M.Lipp 1998 EDG6，一种在淋巴组织中被特定表达的与生物活性溶血磷脂受体有关的新型G蛋白偶合受体(a novel G-protein-coupled receptor related to receptors for bioactivelysophospholipids，is specifically expressed in lymphoid tissue).Genomics53164-169，其在这里被全部引入作为参考。
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S1P4/Edg6小鼠WO 00/15784，公开于2000年3月23日，其在这里被全部引入作为参考。
S1P5/Edg8人Im，D.-S.，J.Clemens，T.L.Macdonald，K.R.Lynch 2001，人和小鼠鞘氨醇1-磷酸酯受体，S1P5(Edg-8)的特性鞘氨醇1-磷酸酯受体的结构-活性的关系(Characterization of the human and mouse sphingosine1-phsophate receptors，S1P5(Edg-8)Structure-Activity relationship ofsphingosine 1-phsophate receptors).Biochemistry 4014053-14060，其在这里被全部引入作为参考。
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EP 1 090 925，公开于2001年4月11日，其在这里被全部引入作为参考。
S1P5/Edg8大鼠Im，D.-S.，C.E.Heise，N.Ancellin，B.F.O′Dowd，G.-J.Shei，R.P.Heavens，M.R.Rigby，T.Hla，S.Mandala，G.McAllister，S.R.George，K.R.Lynch 2000，新型鞘氨醇1-磷酸酯受体，Edg-8的特性(Characterizationof a novel sphingosine 1-phsophate receptors，Edg-8).J.Biol.Cbem.27514281-14286，其在这里被全部引入作为参考。
WO 01/05829，公开于2001年1月25日，其在这里被全部引入作为参考。
心血管作用的测量可以用下面的方法来评估本发明化合物对心血管参数的作用用具有股动脉和静脉导管的仪器装备成年雄性大鼠(体重大约为350g)来分别测量动脉压和静脉内给药化合物。将动物用戊巴比妥(55mg/kg，ip)麻醉。在Gould Po-Ne-Mah数据采集系统上记录其血压和心率。心率是由动脉脉冲波获得的。在适应期后，进行基准读数(大约20分钟)并将该数据平均。将化合物静脉内给药(大约5秒的推注或持续输注15分钟)，在将化合物给药后每隔一分钟对数据进行记录，记录60分钟。以心率中的峰改变或平均动脉压的形式来对数据进行计算或者用心率或血压改变对时间作图的曲线下面积形式来进行计算。将数据表示为均值±SEM。用单侧斯图登成对t-检验来将其与基准值进行统计学比较，并且认为在p＜0.05下有显著意义。
在Sugiyama，A.，N.N.Aye，Y.Yatomi，Y.Ozaki，K.Hashimoto 2000鞘氨醇-1-磷酸酯——一种天然存在的生物学活性溶血磷脂对大鼠心血管系统的作用(Effects of Sphingosine-1-Phosphate，a naturally occurringbiologically active lysophospholipid，on the rat cardiovascular system).Jpn.J.Pharmacol.82338-342中对S1P对大鼠心血管系统的作用进行了描述，其在这里被全部引入作为参考。
小鼠急性毒性的测量用0.1ml被溶解于无毒基质中的试验化合物对每只小鼠静脉内(尾静脉)给药并观察其毒性迹象。严重的迹象可能包括死亡、癫痫发作、麻痹或丧失意识(unconciousness)。还可能会发现轻微的中毒迹象，轻微的中毒迹象可以包括共济失调、呼吸缓慢、生气或相对于正常小鼠而言活性降低。在注意到这些迹象时，用相同的基质对给药溶液进行稀释。以相同的方式将该被稀释了的剂量给药于第二只小鼠并同样观察其迹象。重复该过程直至达到不产生任何迹象的剂量。认为其是估算的无作用的水平。以这种水平对另外一只小鼠进行给药以证实不存在迹象。
淋巴细胞减少的评估如小鼠急性毒性测量中所述的那样将化合物进行给药并在给药后3小时如下所述那样对小鼠的淋巴细胞减少进行评估。在用CO2使小鼠丧失意识时，打开其胸部，通过直接心脏穿刺取0.5ml血，立即用EDTA对血液进行稳定并用已进行了校准的用于进行鼠科动物白细胞分类计数的临床血液学自动分析仪(H2000，CARESIDE，Culver City CA)对其血液学进行评估。通过将三只小鼠的血液学参数与三只用基质处理的小鼠进行比较来确定试验治疗中淋巴细胞的降低。用上述稀释方法的变型通过耐受性来确定这种评估所用的剂量。对于此目的而言，希望无作用，可接受有轻微的作用，将产生严重毒性的剂量连续稀释至仅产生轻微的作用的水平。
实施例的体外活性正如通过在上述试验中测量出来的其作为S1P1/Edg1受体有效的选择性激动剂(相对于S1PR3/Edg3受体而言)活性所证明的那样，这里所公开的实施例可用作免疫调节剂。如在上述35S-GTPγS结合试验中估算的对S1P1/Edg1受体的EC50与对S1P3/Edg3受体的EC50的比例测得的那样，这里所公开的实施例特别是对S1P1/Edg1受体的选择性比对S1PR3/Edg3受体的选择性高100倍以上并且如通过上述35S-GTPγS结合试验估算出来的那样，其对S1P1/Edg1受体的结合的EC50低于50nM。
权利要求
1.式I化合物 或其可药用盐，其中n是0、1或2；m是0、1或2，这样当m是0时，A直接键合在式I中所示的氮杂环丁烷(n＝0)、吡咯烷(n＝1)或哌啶(n＝2)上；R1、R2、R3和R4独立地选自-H、-F、C1-C4烷基、C1-C4全氟代烷基、-Cl、-Br、C1-C8烷氧基和-OCF3；R5和R6独立地选自-H、-OH、-F、C1-C4烷基和C1-C4全氟代烷基；R7选自苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基和噻吩基，每一所述基团任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-OH、-NR8R9、-NO2、苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷氧基、C1-C6烷硫基和C2-C6酰氧基，其中所述苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷氧基、C1-C6烷硫基和C1-C6酰氧基分别任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-OH和C1-C5烷氧基；R8和R9独立地选自C1-C6烷基、C1-C6链烯基和C1-C6炔基，每一所述基团任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-OH和C1-C5烷氧基，或者R8和R9可以与它们所连接的氮原子一起形成任选含有1或2个氧原子的具有3-8个原子的饱和单环，所述环任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-OH和C1-5烷氧基；X、Y和Z独立地选自-C＝、-CH-、-O-、-N＝、-NH-、-N(R10)-和-S-，这样所得环是芳杂环；R10选自C1-C6烷基、C1-C6链烯基和C1-C6炔基，每一所述基团任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-OH和C1-C5烷氧基；A选自-CO2H、-PO3H2、-PO2H2、-SO3H、-CONHSO2R11、-PO(R11)OH、 R11选自C1-C4烷基、苯基、-CH2OH和CH(OH)-苯基；并且每个R12独立地选自-H和-CH3。
2.权利要求1的化合物，其中A是-CO2H。
3.权利要求1的化合物，其中n是1。
4.权利要求1的化合物，其中m是1。
5.权利要求1的化合物，其中X是-N＝，Y是-N＝，且Z是-O-，这样所形成的环是1，2，4-二唑。
6.权利要求1的化合物，其中R7是苯基，所述苯基任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-OH、-NR7R8、-NO2、苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷氧基、C1-C6烷硫基和C2-C6酰氧基，其中所述苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷氧基、C1-C6烷硫基和C1-C6酰氧基分别任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I、-OH和C1-C5烷氧基。
7.权利要求1的化合物，其中所述化合物是式Ia代表的化合物 或其可药用盐，其中p是0、1或2；Ra选自苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6烷氧基和C3-C6环烷氧基，其中所述苯基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6烷氧基和C3-C6环烷氧基分别任选被1-3个独立地选自下列的取代基取代-F、-Cl、-Br、-I和-OH；且Rb选自-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-CH3、-OCH3、-CF3、乙炔基、-NO2和-NH2。
8.权利要求7的化合物，其中p是0或1，且Rb选自-F、-Cl和-CF3。
9.权利要求8的化合物，其中Ra选自C3-C5烷基、环戊基、环己基、C2-C4烷氧基、环戊氧基和环己氧基，每一所述基团任选被1-3个氟取代。
10.选自下表的化合物的立体异构体混合物或不含其它立体异构体的基本上纯形式的单独立体异构体 或任何上述化合物的可药用盐。
11.治疗需要该类治疗的哺乳动物患者中免疫调节异常的方法，所述方法包括以有效治疗所述免疫调节异常的量给所述患者施用权利要求1的式I化合物。
12.权利要求11的方法，其中所述免疫调节异常是选自全身性红斑狼疮、慢性类风湿性关节炎、I型糖尿病、炎性肠病、胆汁性肝硬化、葡萄膜炎、多发性硬化、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、大疱性类天疱疮、肉样瘤病、牛皮癣、自身免疫性肌炎、韦格纳氏肉芽肿、鱼鳞病、格雷夫斯氏眼病和哮喘的自身免疫性或慢性炎性疾病。
13.权利要求11的方法，其中所述免疫调节异常是骨髓或器官移植排斥或移植物抗宿主疾病。
14.权利要求11的方法，其中所述免疫调节异常选自器官或组织的移植、由移植造成的移植物抗宿主疾病、包括类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮在内的自身免疫性综合征、桥本氏甲状腺炎、多发性硬化、重症肌无力、I型糖尿病、葡萄膜炎、后葡萄膜炎、变应性脑脊髓炎、肾小球性肾炎、包括风湿热和感染后的肾小球性肾炎在内的感染后的自身免疫性疾病、炎性和过度增生性皮肤病、牛皮癣、特应性皮炎、接触性皮炎、湿疹性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔藓、天疱疮、大疱性类天疱疮、大疱性表皮松懈症、荨麻疹、血管性水肿、结节性脉管炎、红斑、皮肤上的嗜曙红细胞增多、红斑狼疮、痤疮、斑秃、角膜结膜炎、春季结膜炎、与贝切特氏病有关的葡萄膜炎、角膜炎、疱疹性角膜炎、圆锥形角膜、角膜上皮营养不良、角膜白斑、眼天疱疮、莫伦氏溃疡、巩膜炎、格雷夫斯氏眼病、伏格特-小柳-原田三氏综合征、肉样瘤病、花粉变态反应、可逆性阻塞性气道疾病、支气管哮喘、变应性哮喘、内源性哮喘、外源性哮喘、粉尘性哮喘、慢性或慢性顽固性哮喘、晚期哮喘和气道高反应性、支气管炎、胃溃疡、由局部缺血性疾病和血栓形成造成的血管损害、局部缺血性肠疾病、炎性肠病、坏死性小肠结肠炎、与热灼伤有关的小肠损害、腹部疾病、直肠炎、嗜酸细胞性胃肠炎、肥大细胞增生病、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、偏头痛、鼻炎、湿疹、间质性肾炎、肺出血肾炎综合征、溶血性尿毒症综合征、糖尿病肾病、糖多发性肌炎、格-巴二氏综合征、美尼尔氏病、多发性神经炎、多神经炎、单神经炎、神经根病、甲状腺功能亢进、巴塞多氏病、单纯性红细胞再生障碍、再生障碍性贫血、再生不良性贫血、特发性血小板减少性紫癜、自身免疫性溶血性贫血、粒细胞缺乏症、恶性贫血、巨幼红细胞贫血、红细胞发生不能、骨质疏松症、肉样瘤病、纤维化肺、特发性间质性肺炎、皮肤肌炎、寻常性白斑病、寻常性鱼鳞病、光变应性敏感性、皮肤T细胞淋巴瘤、动脉硬化、动脉粥样硬化、大动脉炎综合征、结节性多动脉炎、非炎性心肌病、硬皮病、韦格纳氏坏死性肉芽肿、口腔干燥-风湿性关节炎综合征、肥胖症、嗜曙红细胞性筋膜炎、龈、牙周组织、牙槽骨的损害、substantia ossea dentis、肾小球性肾炎、男性型脱发或老年性脱发(通过预防脱发或提供头发萌芽和/或促进头发产生和头发生长)、肌营养不良、脓皮病和赛杂瑞氏综合征、阿狄森氏综合征、在保护、移植或局部缺血性疾病时发生的器官的局部缺血-再灌注性损伤、内毒素休克、假膜性结肠炎、由药物或辐射造成的结肠炎、局部缺血性急性肾功能不全、慢性肾功能不全、由肺-氧或药物造成的毒素病、肺癌、肺气肿、白内障、铁尘肺、视网膜色素变性、老年性黄斑变性、vitreal瘢痕形成、角膜强碱烧伤、多形性红斑皮炎、linear IgA ballous dermatitis和cement dermatitis、齿龈炎、牙周炎、脓毒症、胰腺炎、由环境污染造成的疾病、衰老、癌发生、癌转移和高空病、由组胺或白三烯-C4释放造成的疾病、贝切特氏病、自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、硬化性胆管炎、部分肝切除术、急性肝坏死、由毒素造成的坏死、病毒性肝炎、休克、或缺氧症、B-病毒肝炎、非-A/非-B型肝炎、肝硬化、酒精性肝硬化、肝衰竭、暴发性肝功能衰竭、晚期发作的肝衰竭、“acute-on-chronic”肝衰竭、化疗作用的强化、巨细胞病毒感染、HCMV感染、AIDS、癌症、老年性痴呆、创伤和慢性细菌感染。
15.权利要求11的方法，其中所述免疫调节异常选自下列病症1)多发性硬化，2)类风湿性关节炎，3)全身性红斑狼疮，4)牛皮癣，5)移植器官或组织的排斥，6)炎性肠病，7)淋巴来源的恶性肿瘤，8)急性和慢性淋巴细胞白血病和淋巴瘤以及9)胰岛素和非胰岛素依赖性糖尿病。
16.一种抑制需要免疫抑制的哺乳动物患者中免疫系统的方法，所述方法包括给所述患者施用免疫抑制有效量的权利要求1的化合物。
17.包含权利要求1的化合物和可药用载体的药物组合物。
18.一种治疗需要该类治疗的哺乳动物患者中呼吸疾病或病症的方法，所述方法包括以可有效治疗所述呼吸疾病或病症的量给所述患者施用权利要求1的化合物。
19.权利要求18的化合物，其中所述呼吸疾病或病症选自下列的上述方法哮喘、慢性支气管炎、慢性阻塞性肺病、成人呼吸窘迫综合征、婴儿呼吸窘迫综合征、咳嗽、嗜酸细胞性肉芽肿、呼吸道合胞体病毒细支气管炎、支气管扩张、特发性肺纤维化、急性肺损伤和阻塞性细支气管炎组织肺炎。
20.治疗在有此需要的患者中涉及血管完整性的疾病或病症的方法，其中所述疾病或病症选自血管水肿、结节性脉管炎、由缺血性疾病和血栓形成引起的血管损伤、缺血性肠病、炎性肠病、坏死性小肠结肠炎、与热烧伤引起的肠损伤、动脉硬化、动脉粥样硬化、主动脉炎综合征，在保藏、移植或缺血性疾病期间发生的缺血-再灌注损伤，内毒素休克、假膜性结肠炎、由药物或放射引起的结肠炎、缺血性急性肾功能不全、慢性肾功能不全、由肺氧或药物引起的毒素病、脓毒症、胰腺炎、由组胺或白三烯-C4释放引起的疾病、由毒素引起的坏死、病毒性肝炎、休克或缺氧症、老年痴呆和创伤，所述方法包括给所述患者施用能有效治疗疾病或病症的量的权利要求1的化合物。
21.治疗有此需要的患者中与脑或肺水肿有关的疾病或病症的方法，所述方法包括给所述患者施用能有效治疗疾病或病症的量的权利要求1的化合物。
22.权利要求21的方法，其中所述疾病或病症选自休克、脓毒症、急性呼吸窘迫综合征和脑水肿。
全文摘要
本发明涉及式I化合物及其可药用盐。所述化合物是S1P
文档编号C07D413/12GK101043887SQ200580036265
公开日2007年9月26日 申请日期2005年10月18日 优先权日2004年10月22日
发明者J·J·哈尔, 严林 申请人:默克公司