膦过渡金属配位化合物、其制造方法和抗癌剂的制作方法

专利名称：：膦过渡金属配位化合物、其制造方法和抗癌剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及新的膦过渡金属配位化合物、其制造方法和含有该膦过渡金属配位化合物的抗癌剂。
背景技术：
：一直以来，顺铂作为对癌细胞具有高抗癌活性的物质己经得到充分的认识，现在正逐渐成为主要的抗癌剂。另外，作为其它高活性抗癌剂，已知有泰素。另外，已知以1,2—双(二苯基膦)乙烷为首的具有特定结构的膦过渡金属配位化合物是具有与顺铂相匹敌的抗癌作用的化合物(专利文献12)。例如，在专利文献1或专利文献2中，提出了下述通式(4)所示的膦过渡金属配位化合物。在专利文献l中，提出了RSW为相同或不同基的、选自苯基、取代苯基、4一吡啶基、3—吡啶基、2—吡啶基的基，A为一(CH2)n—或者顺一CH二CH—，M，为金、银、铜，B为氯等卤原子的膦过渡金属配位化合物，另外，在专利文献2中，提出了116119为相同基的、选自苯基、乙基或单取代苯基，A为(CH2)n-或者顺一CH二CH—，M，为金、银、铜，B为卤、PF6、N03的膦过渡金属配位化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>(4)专利文献l:日本特表平10—509957号公报专利文献2:日本特开昭61—10594号公报
发明内容但是，近年，要求开发具有比顺铂更高的抗癌活性的抗癌剂。另外，一般而言，已知化合物的抗癌活性和抗癌谱依赖于化学结构，其效果也因个体不同而有所差别。例如，即使是作为具有高活性的抗癌剂已知的泰素，其有效率也是30%左右。因此，希望开发化学结构不同的各种新的抗癌剂。因此，本发明的课题在于提供一种具有新的化学结构、并且抗癌活性高的抗癌剂。本发明的发明人在这样的实际情况中，对具有抗癌作用的新的膦过渡金属配位化合物进行了反复深入的研究，结果发现，具有特定结构的膦过渡金属配位化合物具有优异的抗癌活性，从而完成了本发明。艮口，本发明(1)提供一种膦过渡金属配位化合物，其特征在于，以下述通式(1)表示。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(式中，W和RS表示直链状或支链状的烷基、环烷基、具有取代基的环垸基、金刚烷基、苯基或具有取代基的苯基，碳原子数为110，既可以是相同的基，也可以是不同的基。W和W表示氢原子或者直链状或支链状的烷基，碳原子数为16，既可以是相同的基，也可以是不同的基。RS和R"可以相互结合，形成饱和或不饱和的环，该饱和或不饱和的环可以具有取代基。M表示选自金、铜和银的过渡金属原子。X_表示阴离子。)此外，本发明(2)提供一种上述本发明(1)的膦过渡金属配位化合物，其特征在于，以下述通式(2)表示。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>(2>(式中，R'和W表示直链状或支链状的烷基、环烷基、具有取代基的环垸基、金刚烷基、苯基或具有取代基的苯基，碳原子数为110，既可以是相同的基，也可以是不同的基。RS表示一价的取代基。n表示04的整数。M表示选自金、铜和银的过渡金属原子。X—表示阴离子。)此外，本发明(3)提供一种上述本发明(1)或(2)中任一项所述的膦过渡金属配位化合物，其特征在于，R'是叔丁基或金刚烷基，R2是甲基。此外，本发明(4)提供一种膦过渡金属配位化合物的制造方法，其特征在于，使下述通式(3)所示的膦衍生物与金、铜或银的过渡金属盐反应，得到下述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>(式中，R和W表示直链状或支链状的烷基、环垸基、具有取代基的环垸基、金刚烷基、苯基或具有取代基的苯基，碳原子数为110，既可以是相同的基，也可以是不同的基。113和114表示氢原子或者直链状或支链状的烷基，碳原子数为16。W和W可以相互结合，形成饱和或不饱和的环，该饱和或不饱和的环可以具有取代基。)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>(1〉(式中，R'和R"表示直链状或支链状的烷基、环烷基、具有取代基的环烷基、金刚垸基、苯基或具有取代基的苯基，碳原子数为110，既可以是相同的基，也可以是不同的基。RS和R"表示氢原子或者直链状或支链状的烷基，碳原子数为16，既可以是相同的基，也可以是不同的基。113和114可以相互结合，形成饱和或不饱和的环，该饱和或不饱和的环可以具有取代基。M表示选自金、铜和银的过渡金属原子。X_表示阴离子。)此外，本发明(5)提供一种抗癌剂，其特征在于，含有上述本发明(1)(3)中任一项所述的膦过渡金属配位化合物。具体实施例方式本发明的膦过渡金属配位化合物是上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物。上述通式(1)中，R'和f表示直链状或支链状的烷基、环烷基、具有取代基的环垸基、金刚烷基、苯基或具有取代基的苯基。此外，R'和R"的碳原子数为110。而且，Ri和I^既可以是相同的基，也可以是不同的基。作为R"和W相关的烷基，例如，可以列举甲基、乙基、异丙基、正丙基、异丁基、正丁基、仲丁基、叔丁基、异庚基、正庚基、异己基、正己基。此外，作为R'和W相关的环烷基，可以列举环戊基、环己基。此外，当R1和W为具有取代基的环烷基或具有取代基的苯基时，作为具有取代基的环垸基或具有取代基的苯基相关的取代基，可以列举烷基、硝基、氨基、羟基、氟基、氯基、溴基、碘基。此外，R1是叔丁基或金刚烷基、112是甲基时抗癌活性变高，因而优选。上述通式(1)中的113和114表示氢原子或者直链状或支链状的烷基。此外，RS和W的碳原子数为16。而且，R和W既可以是相同的基，也可以是不同的基。而且，尺3和114可以相互结合，形成饱和或不饱和的环，当RS和R"相互结合形成饱和或不饱和的环时，饱和或不饱和的环也可以具有取代基。作为RS和W相关的烷基，例如，可以列举乙基、异丙基、正丙基、异丁基、正丁基、仲丁基、叔丁基、异庚基、正庚基、异己基、正己基、环戊基、环己基等。此外，当RS和W相互结合形成饱和或不饱和的环时，作为W和R"相互结合形成的环，可以列举饱和或不饱和的五元环或六元环，例如，苯基、环己基、环戊基等。此外，RS和R"相互结合形成的环也可以具有一价的取代基，作为R3和R"相互结合形成的环具有的一价取代基，例如，可以列举直链状或支链状且碳原子数为15的垸基、硝基、氨基、羟基、氟基、氯基、溴基、碘基。上述通式(1)中，M表示选自金、铜和银的过渡金属原子。M是金原子时抗癌活性变高，因而优选。上述通式(1)中，X—表示阴离子，例如，可以列举氯离子、溴离子、四氟化硼离子、六氟化磷酸离子、高氯酸离子等。其中，X—是氯离子、溴离子、碘离子时抗癌活性变高，因而优选。在上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物中，W和R"相互结合形成苯环时抗癌活性变高，因而优选。所谓W和114相互结合形成苯环时的膦过渡金属配位化合物，是上述通式(2)所示的膦过渡金属配位化合物。上述通式(2)中，R1、R2、M和X—与上述通式(1)中的R1、R2、M和X—的意义相同。上述通式(2)中，rS表示一价的取代基。作为r"相关的取代基，例如，可以列举直链状或支链状且碳原子数为15的烷基、硝基、氨基、羟基、氟基、氯基、溴基、碘基。此外，n表示04的整数。在本发明中，上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物，当式中的R'和I^为互不相同的基时，成为下述通式(5)所示的在磷原子上具有不对称中心的膦过渡金属配位化合物。X"(5)上述通式(5)中，R1、R2、R3、R4、M和X—与上述通式(1)中的R1、R2、R3、R4、M和X—的意义相同。星号(*)表示不对称磷原子。上述通式(5)所示的膦过渡金属配位化合物由于具有4个不对称磷原子，所以存在数量众多的异构体，但在本发明中，对这些异构体R，？2f.R1入的种类没有特别的限制。具体而言，这些异构体，在磷原子上的立体可以如(R，R)(R，R)、(S，S)(S，S)那样由单一的对映体构成，或者也可以如(R,R)(S,S)那样由配位基的外消旋体构成，或者也可以如(R，S)(S，R)那样由互相的内消旋体构成，还可以如(R,R)(S，R)那样由1个对映体及其内消旋体构成。上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物通过使上述通式(3)所示的膦衍生物与金、铜或银的过渡金属盐反应而制造。艮口，本发明的膦过渡金属配位化合物的制造方法，是使上述通式(3)所示的膦衍生物与金、铜或银的过渡金属盐反应，得到上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物的膦过渡金属配位化合物的制造方法。上述通式(3)中，R1、R2、113和114与上述通式(1)中的R1、R2、113和R4的意义相同。B卩，上述通式(3)中的R1、R2、R和R4分别与上述通式(1)中的R1、R2、RS和W相同。上述通式(3)所示的膦衍生物，例如，如下述反应式(9)中表示的那样，，通过使2，3—二氯喹喔啉(6)和膦—硼烷(7)反应，得到双(膦一硼烷)喹喔啉.(8)，接着，使得到的双(膦一硼烷)喹喔啉(8)进行脱硼垸化反应而制造。在上述反应式(9)中，2，3—二氯喹喔啉(6)和膦一硼垸(7)的反应，例如，通过在正丁基锂等碱的存在下，在四氢呋喃等惰性溶剂中，在一7830'C下反应124小时而进行。2，3—二氯喹喔啉(6)和膦一硼烷(7)采用公知的方法制造。另夕卜，2，3—二氯喹喔啉(6)已在市场上销售，而膦一硼垸(7)，例如，可以采用日本特开2003—300988号公报、日本特开2001—253889号公报、J,Org.Chem.，2000，vol.65，P4185-4188等中记载的方法制造。此外，双(膦一硼垸)喹喔啉(8)的脱硼烷化反应，通过在含有双(膦—硼烷)喹喔啉(8)的反应体系中添加N,N，N，，N，一四甲基乙二胺(TMEDA)等脱硼烷化剂，在010(TC下反应10分钟3小时而进行。本发明的膦过渡金属配位化合物的制造方法相关的过渡金属盐为金离子、铜离子或银离子与阴离子的盐，可以列举金、铜或银的卤化物、硝酸盐、高氯酸盐、四氟硼酸盐、六氟磷酸盐等。此外，金、铜或银的过渡金属盐中的过渡金属离子的价数是一价。此外，金、铜或银的过渡金属盐也可以是过渡金属种类或阴离子的任一方或双方不同的两种以上的过渡金属盐。作为优选的金的过渡金属盐，例如，可以列举氯化金(I)酸、氯化金(I)或四丁基氯化铵氯化金(I)等(参照《第5版实验化学讲座21》，编者社团法人日本化学会，发行所丸善，发行日平成16年3月30日，p366380;Aust.J.Chemm.,1997，50，775-778页)。此外，作为优选的铜的过渡金属盐，例如，可以列举氯化铜(I)、溴化铜(I)、碘化铜(I)等(参照《第5版实验化学讲座21》，编者社团法人日本化学会，发行所丸善，发行日平成16年3月30日，p349361)。此外，作为优选的银的过渡金属盐，可以列举氯化银(I)、溴化银(I)、碘化银(I)等(参照《第5版实验化学讲座21》，编者社团法人日本化学会，发行所丸善，发行日平成16年3月30日，p361366)等。另外，本发明的膦过渡金属配位化合物的制造方法相关的过渡金属盐既可以是无水物，也可以是含水物。这样，在丙酮、乙腈、甲醇、乙醇等溶剂中，在反应温度一2060°C、优选025'C，反应时间0.548小时、优选13小时的条件下，以上述通式(3)所示的膦衍生物相对于金、铜或银的过渡金属盐的摩尔比为15倍摩尔、优选为1.82.2倍摩尔的量，使上述通式(3)所示的膦衍生物与金、铜或银的过渡金属盐反应，由此能够得到上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物。然后，反应结束后，根据需要，能够以通常方法进行精制。此外，将由本发明的膦过渡金属配位化合物的制造方法得到的上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物的阴离子变换为其它阴离子，则能够制造具有所希望的阴离子的上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物。例如，首先，通过本发明的膦过渡金属配位化合物的制造方法合成上述通式(1)中的X—为卤离子的膦过渡金属配位化合物，接着，在适当的溶剂中使上述通式(1)中的X—为卤离子的膦过渡金属配位化合物与具有所希望的阴离子的无机酸、有机酸或它们的碱金属盐反应，由此能够得到上述通式(1)中的x—为所希望的阴离子的膦过渡金属配位化合物(参照日本特开平10—1475卯号公报、日本特开平10—114782号公报、日本特开昭61—10594号公报)。此外，光学活性的膦过渡金属配位化合物能够通过下述方法制造在上述反应式(9)中，将光学活性的膦一硼垸(7)作为起始原料使用，由此得到光学活性的上述通式(3)所示的膦衍生物，接着，使得到的光学活性的上述通式(3)所示的膦衍生物与金、铜或银的过渡金属盐反应。光学活性的膦一硼烷(7)可以采用例如日本特开2001—253889号公报、日本特开2003—300988号公报、J，Org.Chem.，2000,vol.65，2000，P4185-4188等的方法制造。此外，通过将式中的R'和R"互不相同的膦一硼烷(7)作为起始原料使用，可以制造上述通式(5)所示的膦过渡金属配位化合物。本发明的膦过渡金属配位化合物如后述那样具有高抗癌活性，所以能够作为抗癌剂利用。艮口，本发明的抗癌剂含有上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物的一种或两种以上。此外，上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物中，当为在磷原子上具有不对称中心的膦过渡金属配位化合物，即，上述通式(5)所示的膦过渡金属配位化合物时，如上所述，存在数量众多的异构体，本发明的抗癌剂可以是这些异构体中的任1种或2种以上。本发明的抗癌剂适用的癌的种类没有特别的限定，例如，可以列举恶性黑色素瘤、恶性淋巴瘤、消化器官癌、肺癌、食管癌、胃癌、大肠癌、直肠癌、结肠癌、输尿管肿瘤、胆囊癌、胆管癌、胆道癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、睾丸肿瘤、上颚癌、舌癌、口唇癌、口腔癌、咽癌、喉癌、卵巢癌、子宫癌、前列腺癌、甲状腺癌、脑肿瘤、卡波西肉瘤、血管瘤、白血病、真性红细胞增多症、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、骨髓瘤、膀胱肿瘤、肉瘤，骨肉瘤、肌肉瘤、皮肤癌、基底细胞癌、皮肤附属器癌、皮肤转移癌、皮肤黑色素瘤等，而且，不仅可以适用于恶性肿瘤，也可以适用于良性肿瘤。此外，本发明的抗癌剂也能够用于抑制癌转移，特别是作为手术后的癌转移抑制剂是有用的。在本发明的抗癌剂的使用中，可以采用各种方式向人或动物给药，作为本发明的抗癌剂的给药方式，既可以口服给药，也可以向静脉内、肌肉内、皮下或皮内等注射、直肠内给药、经粘膜给药等非口服给药。作为适合于口服给药的给药方式，例如，可以列举片剂、丸剂、颗粒剂、散剂、胶囊剂、液剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂等，作为适合于非口服给药的医药组合物，例如，可以列举注射剂、点滴剂、滴鼻剂、喷雾剂、吸入剂、栓剂、或软膏、乳膏、粉末擦剂、液体擦剂、贴剂等经皮吸收剂等。此外，作为本发明的抗癌剂的剂型，还可以例举作为植入片剂或以公知的技术制成的长效制剂。在上述中，优选的给药方式和剂型等根据患者的年龄、性别、体质、症状、处置时期等，由医生适当选择。当本发明的抗癌剂为片剂、丸剂、散剂、粉剂、颗粒剂等固体制剂时，这些固体制剂可以将上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物按照通常方法与适当的添加剂，例如乳糖、蔗糖、D—甘露醇、玉米淀粉、合成或天然胶、结晶纤维素等赋形剂，淀粉、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、阿拉伯胶、明胶、聚乙烯吡咯烷酮等粘合剂，羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠、淀粉、玉米淀粉、藻酸钠等崩解剂，滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钠等润滑剂，碳酸钙、碳酸钠、磷酸钙、磷酸钠等填充剂或稀释剂等适当混合而制造。片剂等，根据需要，也可以使用羟丙基甲基纤维素、白糖、聚乙二醇、氧化钛等包衣剂，施加糖衣、明胶、肠溶膜、薄膜包衣等。当将本发明的抗癌剂制成注射剂、滴眼剂、滴鼻剂、吸入剂、喷雾剂、洗剂、糖浆剂、液剂、混悬剂、乳剂等液体制剂时，将上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物溶解于精制水、磷酸缓冲液等适当的缓冲液、生理食盐水、林格氏液、洛克氏液等生理盐类溶液、可可脂、芝麻油、橄榄油等植物油、矿物油、高级醇、高级脂肪酸、乙醇等有机溶剂等中，根据需要，适当添加胆甾醇等乳化剂、阿拉伯胶等助悬剂、分散助剂、浸润剂、聚氧乙烯硬化蓖麻籽油类、聚乙二醇类等表面活性剂、磷酸钠等增溶剂、糖、糖醇、白蛋白等稳定剂、对羟基苯甲酸酯等保存剂、氯化钠、葡萄糖、甘油等等渗剂、缓冲剂、无痛剂、防吸附剂、保湿剂、抗氧化剂、着色剂、甜味剂、香料、芳香物质等，由此可以调整为灭菌的水溶液、非水溶液、混悬液、脂质体或乳剂。此时，注射剂优选具有生理学的pH，特别优选具有68的范围内的pH。当将本发明的抗癌剂制成洗剂、乳膏、软膏等半固体制剂时，可以通过将上述通式(l)所示的膦过渡金属配位化合物和脂肪、脂肪油、羊毛脂、凡士林、石蜡、蜡、硬膏剂、树脂、塑料、二醇类、高级醇、甘油、水、乳化剂、助悬剂等适当混合而制造。本发明的抗癌剂中所含有的上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物的含量，根据给药方式、病重程度和目的给药量等而各不相同，一般而言，相对于本发明的抗癌剂的全部质量，为0.00180质量％，优选为0.150质量％。本发明的抗癌剂的给药量，例如，根据患者的年龄、性别、体重、症状和给药途径等条件，由医生适当决定，一般而言，作为成人每曰的有效成分量，为从l吗/kg至1000mg/kg左右的范围，优选为从10^ig/kg至10mg/kg左右的范围。上述给药量的抗癌剂既可以l日1次给药，也可以分为数次(例如24次)给药。在本发明的抗癌剂的使用中，本发明的抗癌剂也能够和已知的化学疗法、外科疗法、放射线疗法、温热疗法、免疫疗法等组合使用。相比于在专利文献1或专利文献2中提出的膦过渡金属配位化合物，上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物的水溶性高，因此，当制成抗癌剂时，无论何种给药方式和剂型，以少量就对患部有效地发挥作用，因此具有能够减少用量的优点。以下，通过实施例对本发明进行更详细地说明，但本发明并不受这些实施例的限定。实施例(合成例1)<叔丁基甲基膦一硼垸(7a)的合成>按照下述反应式(11)进行叔丁基甲基膦一](7a)的合成,H3t-Bir^p\^OH"0)过硫酸钾BH3t-Bu"P\CH3H(7a在72mL丙酮中溶解叔丁基(羟甲基)甲基膦一硼烷(10)(1.78g，12.0mmol)，得到丙酮溶液。接着，调制在150mL水中溶解有氢氧化钾(13.5g，240mmol)、过硫酸钾(19.4g，72.0mmol)和三氯化钌三水合物(624mg，2.4mmol)的水溶液，在剧烈搅拌该水溶液的状态下，在O'C慢慢加入上述丙酮溶液。经过2小时后，以3M的盐酸中和反应混合液，以乙醚提取3次。以饱和食盐水洗净有机相，以硫酸钠脱水。用旋转蒸发器在室温下除去溶剂，将残渣用硅胶柱色谱法(移动相苯/乙醚二8/l)精制，得到叔丁基甲基膦一硼烷(7a)。收量是2.27g，收率是80%。<2,3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉(3a)的合成>按照下述反应式(12)合成2,3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉(3a)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>在4mL四氢呋喃中溶解236mg(2.0mmo1)叔丁基甲基膦一硼烷(7a)，得到溶液。用液氮将该溶液冷却至一78"C，向其中滴加1.25mL正丁基锂的己垸溶液(1.6M)。经过15分钟后，边剧烈搅拌边滴加在4mL四氢呋喃中溶解有133mg(0.67mmo1)的2，3—二氯喹喔啉(6a)(关东化学社生产)，得到的溶液。用l小时将液温变为室温(25°C)后，搅拌3小时。接着，添加lmL的TMEDA，再继续搅拌2小时。添加1M的盐酸使反应结束，以己垸提取反应液。以1M的盐酸和饱和食盐水洗净有机相，以硫酸钠脱水。通过抽真空除去溶剂，将残渣用硅胶柱色谱法(移动相己垸/醋酸乙酯=30/1)精制，得到橙色的固体物。用热甲醇(1.7mL)将该固体物再结晶。由此，得到2，3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉(3a)的橙色结晶。此时的收率是80%。得到的2，3一双(叔丁基甲基膦)喹喔啉(3a)的物性值如下。(鉴定数据)'H画R(395.75MHz,CDCl3):f31.00—1.03(m，18H)、1.42—1.44(m,6H)、7.70—7.74(m，2H)、8.08—8.12(m，2H);13CNMR(99,45MHz，CDC13):(34.77(t，J二4.1Hz)、27.59(t,J二7.4Hz)、31.90(t，J二7.4Hz)、129.50、129.60、141.63、165.12(dd,J二5.7,2.4Hz);3'PNMR(202.35MHz,CDCl3):(3—17.7(s);IR(KBR)2950、1470、780cm—1;HRMS(FAB)计算值(C18H29N2P2(Nf+H))335.1809、实测值335.1826(实施例1)<双(2,3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉)金(I)氯化物(la)的合成>在以氮气置换过的25ml二口烧瓶中，加入1.33g(3.98mmo1)在上述合成例1中调制的2,3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉(3a)和经过脱气的THF。向其中加入1.02mg(1.99mmo1)四丁基铵金(I)二氯化物，室温下搅拌20小时。过滤分离沉淀，使滤液干固。将得到的褐色固体在减压下干燥，得到1.46g下式(la)所示的双(2,3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉)金(I)氯化物(la)。此时的收率是82%。H,.C,t-Sut-Bu,CH3N、V"P、H3C-t-But-BuCH3CI.3(鉴定数据)31PNMR(121.55MHz,CDC13):8.8(s)MS(ESI、POS)m/z866(M+—C厂)<抗癌话性的评价〉如上所述得到的双(2，3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉)金(I)氯化物(la)对肿瘤细胞的活性评价试验如下所述实施。此外，作为比较对象，对顺铂(比较例l)也实施同样的试验。癌细胞使用HL-60(人急性骨髓性白血病细胞)，在补充了10%胎牛血清、1%抗生素和抗真菌剂的RosewellParkMemorialInstitute培养基(RPMI1640)中，在5%二氧化碳气氛下，在湿润的孵箱中，37°C下进行培养。细胞以PBS洗净，计算确定细胞数后，使用同样的培养基调制lX106细胞/ml的悬浮液。向灭菌的96孔微孔板中加入上述悬浮液，使其密度为50000细胞/孔。接着，加入完全溶解在水中的双(2，3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉)金(I)氯化物(la)溶液(实施例1)或者完全溶解在二甲基亚砜中的顺铂溶液(比较例l)，继续在孵箱中培养24小时。然后，通过Mosmann(T.Mosmann.J.ImmunnolMethod(1983)65，55—63)方法评价生存细胞数。即，加入四唑盐(3，[4,5-dimethylthiazole隱2-yl]隱2，5-diphenyltetrazoliumbromide,MTT:3,[4，5—二甲基噻唑一2—基]一2,5—二苯基四唑溴化物)溶液，再以同样条件培养3小时。以0.04mol/HCl/异丙醇溶解由细胞内的线粒体的酶活性而生成的甲臢结晶，使用酶标仪(Bio-Rad550)测定595nm的吸光度。为了排除背景，测定630nm的吸光度，从实际测定值中减去。将此作为生存细胞数进行评价，算出50%细胞生长抑制浓度(1(:50)。另外，在算出ICso时，采用同样实施的至少3次以上实验值的平均值。该结果表示在表1中。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>从表1的结果可知，双(2,3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉)金(I)氯化物(la)具有比顺铂更高的抗癌活性。(实施例2)以混合机混合50g与实施例1同样操作得到的双(2，3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉)金(I)氯化物(la)、400g乳糖和50g玉米淀粉，得到散剂。(实施例3)混合50g与实施例1同样操作得到的双(2，3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉)金(I)氯化物(la)、250g乳糖和50g低取代度羟丙基纤维素后，加入150g的10%羟丙基纤维素水溶液进行混炼。将其挤出，使用造粒机造粒、干燥，得到颗粒剂。(实施例4)以混合机混合50g与实施例1同样操作得到的双(2,3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉)金(I)氯化物(la)、250g乳糖、120g玉米淀粉、75g结晶纤维素和5g硬脂酸镁后，以压片机压片，得到片剂。(实施例5)使用V型混合机混合25g与实施例1同样操作得到的双(2，3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉)金(I)氯化物(la)、300g乳糖、170g玉米淀粉和5g硬脂酸镁后，在每个3号胶囊中填充180mg，得到胶囊剂。(实施例6)在2ml精制水中溶解100mg与实施例1同样操作得到的双(2，3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉)金(I)氯化物(la)和100mg葡萄糖后，过滤，在2ml安瓿中分别注入滤液，密封后灭菌，得到注射剂。(实施例7)在100ml精制水中混合溶解lg与实施例1同样操作得到的双(2，3一双(叔丁基甲基膦)喹喔啉)金(I)氯化物(la)、3g乙醇、0.2g羟乙基纤维素和0.1g对羟基苯甲酸甲酯，得到洗剂。(实施例8)将2g与实施例1同样操作得到的双(2，3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉)金(I)氯化物(la)、6g液体石蜡、2g蜂蜡、3g自乳化型单硬脂酸甘油酯和5g白凡士林加温溶解，使之分散，得到软膏剂。(实施例9)变加热边使2g与实施例1同样操作得到的双(2,3—双(叔丁基甲基膦)喹喔啉)金(I)氯化物(la)分散在2g单硬脂酸甘油酯、4g硬脂醇、2g辛基十二烷醇和5g单油酸聚氧乙烯脱水山梨糖醇酯中，向其中加入将0.1g对羟基苯甲酸甲酯、5g甘油和60g精制水加温溶解得到的溶解物，通过高速搅拌乳化，冷却，得到乳膏剂。产业上的可利用性如果根据本发明，则能够提供一种具有新的化学结构、并且抗癌活性高的抗癌剂。此外，如果根据本发明，则能够提供工业上有利的上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物的制造方法。权利要求1.一种膦过渡金属配位化合物，其特征在于以下述通式(1)表示，式中，R1和R2表示直链状或支链状的烷基、环烷基、具有取代基的环烷基、金刚烷基、苯基或具有取代基的苯基，碳原子数为1～10，既可以是相同的基，也可以是不同的基；R3和R4表示氢原子或者直链状或支链状的烷基，碳原子数为1～6，既可以是相同的基，也可以是不同的基；R3和R4可以相互结合，形成饱和或不饱和的环，该饱和或不饱和的环可以具有取代基；M表示选自金、铜和银的过渡金属原子；X-表示阴离子。2.如权利要求1所述的膦过渡金属配位化合物，其特征在于:以下述通式(2)表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>式中，W和W表示直链状或支链状的垸基、环垸基、具有取代基的环烷基、金刚烷基、苯基或具有取代基的苯基，碳原子数为110，既可以是相同的基，也可以是不同的基；115表示一价的取代基；n表示04的整数；M表示选自金、铜和银的过渡金属原子；X—表示阴离子。3.如权利要求1或2中任一项所述的膦过渡金属配位化合物，其特征在于W是叔丁基或金刚垸基，W是甲基,4.一种膦过渡金属配位化合物的制造方法，其特征在于-使下述通式(3)所示的膦衍生物与金、铜或银的过渡金属盐反应，得到下述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物，(3)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>式中，R'和W表示直链状或支链状的垸基、环烷基、具有取代基的环烷基、金刚烷基、苯基或具有取代基的苯基，碳原子数为110，既可以是相同的基，也可以是不同的基；113和114表示氢原子或者直链状或支链状的烷基，碳原子数为16;尺3和114可以相互结合，形成饱和或不饱和的环，该饱和或不饱和的环可以具有取代基，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(1)式中，W和f表示直链状或支链状的烷基、环垸基、具有取代基的环烷基、金刚烷基、苯基或具有取代基的苯基，碳原子数为110，既可以是相同的基，也可以是不同的基；W和R"表示氢原子或者直链状或支链状的垸基，碳原子数为16，既可以是相同的基，也可以是不同的基；RS和R"可以相互结合，形成饱和或不饱和的环，该饱和或不饱和的环可以具有取代基；M表示选自金、铜和银的过渡金属原子；X—表示阴离子。5.—种抗癌剂，其特征在于含有权利要求13中任一项所述的膦过渡金属配位化合物(全文摘要本发明提供一种具有新的化学结构、并且抗癌活性高的抗癌剂。一种膦过渡金属配位化合物，其特征在于，以上述通式(1)表示；以及一种抗癌剂，其特征在于，含有上述通式(1)所示的膦过渡金属配位化合物。(式中，R¹和R²表示直链状或支链状的烷基、环烷基、具有取代基的环烷基、金刚烷基、苯基或具有取代基的苯基，碳原子数为1～10，既可以是相同的基，也可以是不同的基。R³和R⁴表示氢原子或者直链状或支链状的烷基，碳原子数为1～6，既可以是相同的基，也可以是不同的基。R³和R⁴可以相互结合，形成饱和或不饱和的环，该饱和或不饱和的环可以具有取代基。M表示选自金、铜和银的过渡金属原子。X^-表示阴离子)。文档编号C07F9/6509GK101460512SQ20078002008公开日2009年6月17日申请日期2007年5月31日优先权日2006年6月1日发明者中对一博,儿玉浩明,大原宣彦,大渡启介,金田嘉郎申请人:日本化学工业株式会社