专利名称：一种脂肽的水解方法
技术领域：
本发明涉及脂肽，尤其是涉及一种脂肽的水解方法。
背景技术：
脂肽是由肽链和脂肪链所组成的具有生物活性物质，脂肽在酸性、碱性、酶等条件下发生水解，水解的最终产物是氨基酸和脂肪酸。目前大部分行业，如化妆品，药品和食品行业，多采用酶法水解进行生产。该方法具有水解位点特定，反应时间短，PH温和等特点，但是酶制剂的成本偏高，对反应环境要求严格，还有后续灭活等问题。现有技术脂肽酸水解采用的条件6mol/L盐酸，110°C _150°C水解，现有技术存在主要问题是由于水解温度高，脂肽的羟基脂肪酸残基会脱水成为烯酸，导致副产物增多；工业生产操作困难，能耗大，反应需要压力容器控制，存在安全隐患。同样，碱性水解中也存在羟基脂肪酸脱水严重的问题。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种可在保证了水解率的同时，减少副反应的发生，提高产物的纯度的脂肽的水解方法。本发明的目的可以通过以下技术方案来实现一种脂肽的水解方法，其特征在于， 该方法包括以下步骤将脂肽加入酸溶液中，放置在加热装置中反应20h，即得脂肽水解液。所述的酸溶液为浓度为6. Omol/L的盐酸溶液。所述的加热装置温度为80°C、90°C、IOO0C。所述的加热装置温度为90°C。所述的脂肽与酸的质量比为1 (50 250)。所述的脂肽是由肽链和脂肪链所组成的具有生物活性物质。与现有技术相比，本发明使脂肽酸性水解的温度降低了 10-30°C，减少了副产物、 大幅度降低了能耗，解决了现有技术存在的上述缺陷。
图1本发明技术脂肽水解样品获得羟基脂肪酸甲脂化产物的总离子色谱图；图2现有技术脂肽水解样品获得羟基脂肪酸甲脂化产物的总离子色谱图；图3本发明技术羟基脂肪酸脱水产生的烯酸甲酯化产物的质谱图。
具体实施例方式下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。实施例1 脂肽水解取5. Omg脂肽样品于反应瓶中，加入l.OmL 6. Omol/L盐酸溶液使之溶解，分别放置在80°c、90°c、10(rc和110°C的烘箱中反应20h。反应完毕，用甲醇全部转移至25mL 比色管。加入4倍体积的去离子水，混勻后，用乙醚萃取三次，收集有机层并用水洗涤，常温常压干燥除去溶剂和水分。干燥后，加入1.0mol/LH2S04/CH30H(l/10, v/v)，55°C下酯化6小时。用乙醚萃取三次，收集有机层并用水洗涤，常温常压干燥除去溶剂和水分，待测GC-MS。使用Agilent的气相色谱质谱联用仪(6890GC，5975MSD)，使用HP-5MS色谱柱 (30mX0. 25mmX0. 25 μ m, Agilent)进行检测。本发明技术90°C和现有技术110°C条件下水解得到的色谱图结果分别如图1和图2所示。图1-2中分别标示了 6个β -羟基脂肪酸酯和4个脱水烯酸酯，这4个峰的质谱图如图3所示。对羟基脂肪酸酯和烯酸酯的色谱峰进行积分，以峰面积进行计算，定义如下公式烯酸峰面积总量(U)=烯酸峰面积总和(Un-isoC14+Un_n C14+Un_iso C15+Un_anti
C15)羟基脂肪酸峰面积总量(H)=羟基脂肪酸峰面积总和(iso C13+anti C13+iso C14+n C14+iso C15+anti C15)注公式中Un-iso Cw为脱水异构十四碳羟基脂肪酸；Un-n C14为脱水正构十四碳羟基脂肪酸，Un-iso C15为脱水异构十五碳羟基脂肪酸；Un-anti C15为脱水反异构十五碳羟基脂肪酸。iso C13为异构十三碳羟基脂肪酸；anti C13为反异构十三碳羟基脂肪酸；iso C14 为异构十四碳羟基脂肪酸；η C14为正构十四碳羟基脂肪酸；iso C15为异构十五碳羟基脂肪酸，anti C15为反异构十五碳羟基脂肪酸。按下式计算脱水率
脱水率(D)
U+ H表1脂肽酸性水解数据表
水解条件
盐酸溶液·时间温度■ UHDhr0C(χ:106)%800.2010.7026.0 mol/L20发明技术90 1000.69 2.2212.60 10.905 17现有技术1104.188.0934 由表1可见，在酸解条件下，本发明技术80°C、9(TC、10(rC水解得到的羟基脂肪酸总量(H)是现有技术110°C水解得到羟基脂肪酸总量的1.3 1.6倍，并且本发明技术 80°C、90°C、100°C水解的脱水率(D)为现有技术110°C下水解脱水率的1/17 1/2。
实施例2一种脂肽的水解方法，该方法包括以下步骤将脂肽加入6. Omol/L的盐酸溶液中，脂肽与盐酸的质量比为1 250，放置在加热装置中于90°C加热反应20h，即得脂肽水解液。实施例3一种脂肽的水解方法，该方法包括以下步骤将脂肽加入6. Omol/L的盐酸溶液中，脂肽与盐酸的质量比为1 50，放置在加热装置中于80°C加热反应20h，即得脂肽水解液。实施例4一种脂肽的水解方法，该方法包括以下步骤将脂肽加入6. Omol/L的盐酸溶液中，脂肽与盐酸的质量比为1 150，放置在加热装置中于80°C加热反应20h，即得脂肽水解液。实施例4一种脂肽的水解方法，该方法包括以下步骤将脂肽加入6. 0mol/L的盐酸溶液中，脂肽与盐酸的质量比为1 200，放置在加热装置中于80°C加热反应20h，即得脂肽水解液。
权利要求
1.一种脂肽的水解方法，其特征在于，该方法包括以下步骤将脂肽加入酸溶液中，放置在加热装置中反应20h，即得脂肽水解液。
2.根据权利要求1所述的一种脂肽的水解方法，其特征在于，所述的酸溶液为浓度为 6. Omol/L的盐酸溶液。
3.根据权利要求1所述的一种脂肽的水解方法，其特征在于，所述的加热装置温度为 80°C、90°C、100°C。
4.根据权利要求3所述的一种脂肽的水解方法，其特征在于，所述的加热装置温度为 90 "C。
5.根据权利要求1所述的一种脂肽的水解方法，其特征在于，所述的脂肽与酸的质量比为 1 (50 250)。
6.根据权利要求1所述的一种脂肽的水解方法，其特征在于，所述的脂肽是由肽链和脂肪链所组成的具有生物活性物质。
全文摘要
本发明涉及一种脂肽的水解方法，该方法包括以下步骤将脂肽加入酸溶液中，放置在加热装置中反应20h，即得脂肽水解液。与现有技术相比，本发明具有可在保证了水解率的同时，减少副反应的发生，提高产物的纯度等优点。
文档编号C07K1/12GK102276685SQ20111023054
公开日2011年12月14日 申请日期2011年8月11日 优先权日2011年8月11日
发明者刘金峰, 杨世忠, 牟伯中, 赵越 申请人:华东理工大学