一种基于高通量测序同时检测T细胞和B细胞免疫组库的方法与流程

文档序号:12412849阅读:来源:国知局
技术总结
本发明属于分子生物学检测领域,特别是涉及一种基于高通量测序同时检测T细胞和B细胞免疫组库的方法,包括获取人血液样本10mL于EDTA抗凝管、利用淋巴细胞分离液Ficoll‑1077进行外周血单核细胞(PBMC)的分离、利用Trizol的方法提取PBMC的总RNA,所用试剂为RNAzol RT、RNA反转录成cDNA,并同时在cDNA 5’端添加接头、PCR1、PCR2和纯化和进行高通量测序等步骤。通过从接头的上游引物到C区的下游引物,获得淋巴细胞中TCR (Alpha链或Beta链)和BCR(Heavy链或Light链)的基因序列的全长信息。

技术研发人员:孙涛;刘潇
受保护的技术使用者:孙涛
文档号码:201611202242
技术研发日:2016.12.23
技术公布日:2017.05.31

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