0 r/min下离心10 min，收集上清液，稀释3倍后测定ACE抑制活性。经过测定，谷朊蛋白酶解产物稀释液的ACE抑制率为66.012%。
[0013](3)配制3% (W/W)的谷朊蛋白悬浮液500 mL，放入带转子的20°C恒温水浴锅中搅拌50min，加入3800 U/g (E/S)碱性蛋白酶进行酶解，酶解过程中保持pH 9.0，温度50°C，酶解30 min，之后沸水浴灭酶lOmin，12000 r/min下离心10 min，收集上清液，稀释3倍后测定ACE抑制活性。经过测定，谷朊蛋白酶解产物稀释液的ACE抑制率为64.761%。
[0014](4)配制2% (W/W)的谷朊蛋白悬浮液500 mL，采用单频探头式超声波处理谷朊蛋白悬浮液，超声初始温度30 °C，功率896 W/L，脉冲时间4 S，间歇时间3 S，超声总时间30 min.超声结束后加入3800 U/g (E/S)碱性蛋白酶进行酶解，酶解过程中保持pH 9.0，温度50°C，酶解时间30 min，之后沸水浴灭酶10 min，12000 r/min下离心10 min，收集上清液，稀释2倍后测定ACE抑制活性。经过测定，谷朊蛋白酶解产物稀释液的ACE抑制率为70.770%。
[0015](5)配制2% (W/W)的谷朊蛋白悬浮液6 L，在机械搅拌的条件下，采用频率为20kHz、28kHz、35kHz，同步超声时间为10 S、间歇时间为5 s ;超声功率为50 W/L，初始温度为30°C的发散式同步三频超声波处理30 min;以3800 U/g的比例加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解的温度为50°C，pH为9.0，酶解30min ;酶解结束后，将酶解液煮沸10 min灭酶，12000r/min下离心10 min，收集上清液，即可得到蛋白降血压肽的提取液。谷朊蛋白降血压肽提取液稀释2倍后测定ACE抑制活性。经过测定，谷朊蛋白酶解产物稀释液的ACE抑制率为70.07%o
[0016]实施例1.配制2%的谷朊蛋白悬浮液6 L，在机械搅拌的条件下，采用频率为20kHz,28 kHz,35 kHz，三频超声时间为20s、20s、20s ;超声功率为16.67 W/L，初始温度为30度的发散式超声波处理30 min;以3800 U/g的比例加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解的温度为50°C，pH为9.0，酶解30min ;酶解结束后，将酶解液煮沸10 min灭酶，12000 r/min下离心10 min，收集上清液，即可得到蛋白降血压肽的提取液。谷朊蛋白降血压肽提取液稀释2倍后测定ACE抑制活性。
[0017]经过测定，有超声处理过程的酶解产物稀释液的ACE抑制率为73.80%，与对照(I)相比，降血压活性提高13.62%。与对照例(4)相比降血压活性提高4.29%，功率密度缩小53.75倍。与对照例(5)相比降血压活性提高5.32%，功率密度缩小3倍。
[0018]实施例2.配制3%的谷朊蛋白悬浮液6 L，在机械搅拌的条件下，采用频率为20kHz、28kHz、35kHz，三频超声时间为20s、20s、20s ;超声功率为16.67 W/L，初始温度为20度的发散式超声波处理30 min;以3800 U/g的比例加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解的温度为50°C，pH为9.0，酶解30 min ;酶解结束后，将酶解液煮沸10 min灭酶，12000 r/min下离心10 min，收集上清液，即可得到蛋白降血压肽的提取液。谷朊蛋白降血压肽提取液稀释3倍后测定ACE抑制活性。
[0019]经过测定，有超声处理过程的酶解产物稀释液的ACE抑制率为77.73%，与对照例
(2)相比降血压活性提高了 17.75%。
[0020]实施例3.配制3%的谷朊蛋白悬浮液6 L，在机械搅拌的条件下，采用频率为20kHz,28 kHz,35 kHz，单频超声时间为20s、20s、20s ;超声功率为16.67 W/L，初始温度为20°C的发散式超声波处理50 min;以3800 U/g的比例加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解的温度为50°0，？!1为9.0，酶解30 min ;酶解结束后，将酶解液煮沸10 min灭酶，12000 r/min下离心10 min，收集上清液，即可得到蛋白降血压肽的提取液。谷朊蛋白降血压肽提取液稀释3倍后测定ACE抑制活性。
[0021]经过测定，有超声处理过程的酶解产物稀释液的ACE抑制率为76.76%，与对照例
(3)相比降血压活性提高了 18.53%。
【主权项】
1.一种基于顺序超声强化酶解制备谷朊蛋白降血压肽的方法，其特征在于按照下述步骤进行:(1)将谷朊粉配制成质量浓度为3% (W/W)的悬浮液，施加顺序三频超声处理；(2)加蛋白酶酶解:加碱性蛋白酶进行酶解，酶解过程中保持PH 9.0，温度50 V ■ 酶解时间30 min, 100°C下灭酶10 min, 12000 r/min下离心10 min,收集上清液，即可得到蛋白降血压肽的提取液。
2.根据权利要求1所述的一种基于顺序超声强化酶解制备谷朊蛋白降血压肽的方法，其特征在于其中顺序三频超声频率为:20 KHz,28 KHz,35 KHz。
3.根据权利要求1所述的一种基于顺序超声强化酶解制备谷朊蛋白降血压肽的方法，其特征在于三频超声时间分别为20s、20s、20s。
4.根据权利要求1所述的一种基于顺序超声强化酶解制备谷朊蛋白降血压肽的方法，其特征在于超声功率为16.67 W/L，预处理时间10-60 min。
5.根据权利要求1所述的一种基于顺序超声强化酶解制备谷朊蛋白降血压肽的方法，其特征在于按照蛋白酶与底物谷朊粉为3800 U/g的比例加入碱性蛋白酶进行酶解。
【专利摘要】本发明一种基于顺序超声强化酶解制备谷朊蛋白降血压肽的方法，其涉及农副产品深加工技术领域。将谷朊蛋白悬浮液，施加超声处理，其中顺序三频超声频率为：20 KHz、28 KHz、35 KHz；超声功率为16.67W/L，预处理时间20-50 min。预处理后加蛋白酶酶解，酶解过程中保持pH9.0，温度50℃。酶解时间30min，100℃下灭酶10 min，12000 r/min下离心10min，收集上清液即可。本发明采用三频顺序超声波预处理谷朊蛋白悬浮液，提高了酶解效率，与其他类别的超声波预处理方式相比，酶解液的ACE抑制率提高13％～20％。能耗降低了3~53.75倍。
【IPC分类】C12P21-06
【公开号】CN104846046
【申请号】CN201510048637
【发明人】张艳艳, 马海乐, 任晓锋, 李云亮, 王蓓, 曲文娟, 王凯
【申请人】江苏大学
【公开日】2015年8月19日
【申请日】2015年1月30日