加入甲基红指示剂培养液上层呈 红色，因此此批酱油中不存在引起浑浊、生花及产气的微生物。
[0035] 实施例2
[0036] -、培养基的制备：
[0037] 称量原料：蛋白胨15g、酪蛋白8g、酵母膏5g、牛肉膏5g、葡萄糖26g、氯化钠6g;将 这些原料加入蒸馏水中搅拌、溶解后定容到lOOOmL，调节pH值至5. 0±0. 2即得培养基。
[0038] 二、酱油中引起浑浊、生花及产气的微生物的检测：
[0039] 取8支洁净试管，内置倒立的杜氏小管，每支试管分别装入27mL上述培养基，塞上 试管塞并用牛皮纸将试管包扎好，于121°C灭菌30min，选择灭菌后杜氏小管内无气泡的试 管作为试管无菌培养基备用。
[0040] 在无菌操作下，取装有3颗玻璃珠的无菌三角瓶，加入待测酱油样品，保持自然 PH，充分振荡摇匀，取步骤A中的1支试管无菌培养基作为空白对照，然后再取3支试管无 菌培养基各接种3mL所述待测酱油样品，振荡均匀。
[0041] 将上述作为空白对照的试管无菌培养基和接种了 3mL所述待测酱油样品的试管 无菌培养基置于35°C恒温箱中培养48h，观察未发现气泡、浑浊、菌膜，培养48h后，沿试管 壁缓慢加入甲基红指示剂，禁止摇动试管，观察培养液上层，发现培养液上层变黄，处于同 样条件下的空白对照试管没有出现气泡、浑浊、菌膜，沿试管壁缓慢加入甲基红指示剂培养 液上层呈红色，因此此批酱油中存在引起酱油涨瓶、涨袋的微生物。
[0042] 实施例3
[0043] 一、培养基的制备：
[0044] 称量原料：蛋白胨10g、酪蛋白8g、酵母膏10g、牛肉膏2g、葡萄糖20g、氯化钠8g; 将这些原料加入蒸馏水中搅拌、溶解后定容到lOOOmL，调节pH值至5. 0±0. 2即得培养基。
[0045] 二、酱油中引起浑浊、生花及产气的微生物的检测：
[0046] 取5支洁净试管，内置倒立的杜氏小管，每支试管分别装入27mL上述培养基，塞上 试管塞并用牛皮纸将试管包扎好，于121°C灭菌30min，选择灭菌后杜氏小管内无气泡的试 管作为试管无菌培养基备用。
[0047] 在无菌操作下，取装有4颗玻璃珠的无菌三角瓶，加入待测酱油样品，保持自然 PH，充分振荡摇匀，取步骤A中的1支试管无菌培养基作为空白对照，然后再取3支试管无 菌培养基各接种3mL所述待测酱油样品，振荡均匀。
[0048] 将上述作为空白对照的试管无菌培养基和接种了 3mL所述待测酱油样品的试管 无菌培养基置于37°C恒温箱中培养48h，观察发现两只试管中出现气泡，沿试管壁缓慢加 入甲基红指示剂，禁止摇动试管，观察培养液上层，发现培养液上层变黄，处于同样条件下 的空白对照试管没有出现气泡、浑浊、菌膜，沿试管壁缓慢加入甲基红指示剂培养液上层呈 红色，因此此批酱油中存在引起浑浊、生花及产气的微生物。
[0049] 实施例4
[0050] 一、培养基的制备：
[0051] 称量原料：蛋白胨5g、酪蛋白3g、酵母膏10g、牛肉膏7g、葡萄糖30g、氯化钠8g;将 这些原料加入蒸馏水中搅拌、溶解后定容到lOOOmL，调节pH值至5. 0±0. 2即得培养基。
[0052] 二、酱油中引起浑浊、生花及产气的微生物的检测：
[0053] 取5支洁净试管，内置倒立的杜氏小管，每支试管分别装入27mL上述培养基，塞上 试管塞并用牛皮纸将试管包扎好，于121°C灭菌30min，选择灭菌后杜氏小管内无气泡的试 管作为试管无菌培养基备用。
[0054] 在无菌操作下，取装有4颗玻璃珠的无菌三角瓶，加入待测酱油样品，保持自然 PH，充分振荡摇匀，取步骤A中的1支试管无菌培养基作为空白对照，然后再取3支试管无 菌培养基各接种3mL所述待测酱油样品，振荡均匀。
[0055] 将上述作为空白对照的试管无菌培养基和接种了 3mL所述待测酱油样品的试管 无菌培养基置于35°C恒温箱中培养48h，观察发现一只试管中出现少量气泡，沿试管壁缓 慢加入甲基红指示剂，禁止摇动试管，观察培养液上层，发现培养液上层呈红色，处于同样 条件下的空白对照试管没有出现气泡、浑浊、菌膜，沿试管壁缓慢加入甲基红指示剂培养液 上层呈红色，此种情况下不好准确判断酱油中是否含有产气微生物，需要延长培养时间继 续观察，或者更换同批次的待测酱油样品，重新检测。
[0056] 尽管这里参照本发明的多个解释性实施例对本发明进行了描述，但是，应该理解， 本领域技术人员可以设计出很多其他的修改和实施方式，这些修改和实施方式将落在本申 请公开的原则范围和精神之内。更具体地说，在本申请公开的范围内，可以对主题组合布局 的组成部件和/或布局进行多种变型和改进。除了对组成部件和/或布局进行的变型和改 进外，对于本领域技术人员来说，其他的用途也将是明显的。
【主权项】
1. 一种用于检测引起酱油变质的微生物的培养基，所述变质是指酱油浑浊、生花或者 产气，其特征在于它包括以下原料： 蛋白胨5-15g 酪蛋白3-8g 酵母膏5-10g 牛肉膏2-7g 葡萄糖10-30g 氯化钠3-8g ; 将上述原料加入蒸馏水中搅拌、溶解后定容到lOOOmL，调节pH值至5. 0±0. 2即得培养 基。2. 根据权利要求1所述的用于检测引起酱油变质的微生物的培养基，其特征在于它包 括以下原料： 蛋白胨15g 酪蛋白8g 酵母膏5g 牛肉膏5g 葡萄糖26g 氯化钠6g ; 将上述原料加入蒸馏水中搅拌、溶解后定容到lOOOmL，调节pH值至5. 0±0. 2即得培养 基。3. 酱油中引起浑浊、生花及产气的微生物的检测方法，采用如权利要求1或2所述的培 养基，其特征在于它包括以下步骤： A、 培养基分装、灭菌 取洁净试管，内置倒立的杜氏小管，每支试管分别装入27mL上述培养基，塞上试管塞 并用牛皮纸将试管包扎好，于121°C灭菌30min，选择灭菌后杜氏小管内无气泡的试管作为 试管无菌培养基备用； B、 接种培养 在无菌操作下，取装有3~5颗玻璃珠的无菌三角瓶，加入待测酱油样品，保持自然PH， 充分振荡摇匀，取步骤A中的1支试管无菌培养基作为空白对照，然后再取3支试管无菌培 养基各接种3mL所述待测酱油样品，振荡均匀； C、 培养 将步骤B作为空白对照的试管无菌培养基和接种了 3mL所述待测酱油样品的试管无菌 培养基置于30-37°C恒温箱中培养48h，观察试管中是否出现气泡、浑浊、菌膜，沿试管壁缓 慢加入甲基红指示剂，禁止摇动试管，观察培养液上层是否变黄； D、 结果判定 培养48h后，接种了待测酱油样品的试管无菌培养基无气泡、浑浊、菌膜产生，加入甲 基红指示剂后培养液上层呈红色，且空白对照试管无任何染菌现象则表示酱油中不存在引 起浑浊、生花及产气的微生物；或者培养48h后，接种了待测酱油样品的至少两根试管无菌 培养基出现浑浊、气泡、菌膜和加入甲基红指示剂后培养液上层变黄的任意一种现象，且空 白对照试管无任何染菌现象则表示酱油中存在引起浑浊、生花及产气的微生物。
【专利摘要】本发明公开了一种用于检测引起酱油变质的微生物的培养基及检测方法。培养基采用蛋白胨5-15g、酪蛋白3-8g、酵母膏5-10g、牛肉膏2-7g、葡萄糖10-30g、氯化钠3-8g为原料用蒸馏水溶解定容到1000mL，调节pH值至5.0±0.2后获得。检测方法是将培养基分装到试管中，灭菌后接种待测酱油样品，在30-37℃恒温培养48h，观察是否出现气泡、浑浊、菌膜，沿试管壁缓慢加入甲基红指示剂，禁止摇动试管，观察培养液上层是否变黄。本发明的培养基利于产气微生物在较短的时间内繁殖和释放气体，同时有利于产膜微生物在短时间内繁殖和产生菌膜，检测方法简单，结果准确。
【IPC分类】C12Q1/04
【公开号】CN105002260
【申请号】CN201510507662
【发明人】杨莉, 薛建华, 甘学锋, 王福中, 李磊, 谭檑, 张建林, 李勇, 刘刚, 许平
【申请人】四川清香园调味品股份有限公司
【公开日】2015年10月28日
【申请日】2015年8月18日