以下步骤：
[0157] (11)化合物12a的制备。
[0158] 将 0? 52mmol 化合物 Ila 溶于 7mL 乙臆，加入 3_ 氛基 _1_ 丙醇（0? 084mL, I. Immol) 和Et3N(0. 153mL, I. lmmol)。室温搅拌反应2h，减压蒸出溶剂。加入乙酸乙酯，以IM HCl 洗涤。有机相合并，分别用NaHC03饱和溶液和盐水洗涤，MgS04干燥，抽滤，减压蒸除溶剂， 柱层析进一步纯化得化合物12a。
[0159] (12)化合物14d的制备：同化合物14a，不同的是将化合物12b替换成化合物12a。
[0160] (13)化合物16d的制备：同化合物16a，不同的将化合物14a替换成化合物14d。
[0161] (14)目标化合物18c的制备：同化合物18a，不同的是将化合物16b换成化合物 16d〇
[0162] 该目标化合物18c的表征数据为：LC-MS m/z677[M+H]+。
[0163] 实施例9
[0164] 化合物18d的制备，以实施例6中制备化合物18a的方法制备化合物18d，其中，得 到实施例8中化合物12a后再进行以下步骤：
[0165] (12)化合物14e的制备：同化合物14a，不同的是将化合物12b替换成化合物12a， 并将3, 4-二羟基苯甲酸替换成苯并[d] [1，3]二恶唑-5-甲酸。
[0166] (13)化合物16e的制备：同化合物16a，不同的将化合物14a替换成化合物14e。
[0167] (14)目标化合物18d的制备：同化合物18a，不同的是将化合物16b换成化合物 16e〇
[0168] 该目标化合物18d的表征数据为：LC-MS m/z690 [M+H]+。
[0169] 实施例10
[0170] 化合物18e的制备，以实施例6中制备化合物18a的方法制备化合物18e，其中，得 到实施例8中化合物12a后再进行以下步骤：
[0171] (12)化合物14f的制备：同化合物14a，不同的是将化合物12b替换成化合物12a， 并将3, 4-二羟基苯甲酸替换成1-羟基-2-萘甲酸。
[0172] (13)化合物16f?的制备：同化合物16a，不同的将化合物14a替换成化合物14f。
[0173] (14)目标化合物18e的制备：同化合物18a，不同的是将化合物16b换成化合物 16f〇
[0174] 该目标化合物18e的表征数据为：LC_MS m/z712 [M+H]+。
[0175] 实施例11
[0176] 化合物18f的制备，以实施例6中制备化合物18a的方法制备化合物18e，其中，得 到实施例1中化合物8后再进行以下步骤：
[0177] (8)化合物9e的制备。
[0178]将化合物 8 (0. 2mmol)，EDCI (0. 3mmol), Et3N (0. 3mmol)溶于 5mL 二氯甲烧，加入等 当量的氨基异戊酸，室温搅拌24h，TLC显示原料8消失后，减压下旋蒸除去二氯甲烷，柱层 析进一步纯化得化合物9e。
[0179] (9)化合物IOe的制备：同化合物10a，不同的是将化合物9a替换成化合物9e。
[0180] (10)化合物lie的制备：同化合物11a，不同的是将化合物IOa替换成化合物IOe。
[0181] (11)化合物12e的制备：同化合物12a，不同的是将化合物Ila替换成化合物lie。
[0182] (12)化合物14g的制备：同化合物14a，不同的是将化合物12b替换成化合物12e， 并将3, 4-二羟基苯甲酸替换成1-羟基-2-萘甲酸。
[0183] (13)化合物16g的制备：同化合物16a，不同的将化合物14a替换成化合物14g。
[0184] (14)目标化合物18f的制备：同化合物18a，不同的是将化合物16b换成化合物16g。
[0185] 该目标化合物18f的表征数据为：LC-MS m/z718[M+H]+。
[0186] 实施例12
[0187] 化合物18g的制备，以实施例6中制备化合物18a的方法制备化合物18g，其中，得 到实施例11中化合物12e后再进行以下步骤：
[0188] (12)化合物14h的制备：同化合物14a，不同的是将化合物12b替换成化合物12e， 并将3, 4-二羟基苯甲酸替换成5-氨基-2-羟基苯甲酸。
[0189] (13)化合物16h的制备：同化合物16a，不同的将化合物14a替换成化合物14h。
[0190] (14)目标化合物18g的制备：同化合物18a，不同的是将化合物16b换成化合物 16h〇
[0191] 该目标化合物18g的表征数据为：LC-MS m/z683[M+H]+。
[0192] 实施例13
[0193] 流感病毒神经氨酸酶活性测定。
[0194] 实验材料：NA酶（神经氨酸酶）液：流感病毒感染鸡胚的尿囊液
[0195] 酶促反应体系：330mmol/L的MES缓冲液（pH3. 5)
[0196] 200Umol/L 的突光底物 MUNANA (2' -(4-methylumbel liferyl)-a -D-N-acetylneuraminic acid)
[0197] 4mmol/L 的 CaCl2 溶液
[0198] 终止液：14mmol/L 的 NaOH 溶液（14mmol/L，83% 的乙醇）
[0199] 扎那米韦：lmmol/L
[0200] 酶活性测定：
[0201] NA酶液（不同稀释浓度）40 ill
[0202] MES (脂肪酸甲酯磺酸盐）（330mmol/L)
[0203] CaCl2 (4mmol/L) :10UI
[0204] MUNANA (200Umol/L)：10UI
[0205] H2O ：30 u I
[0206] 混匀孵育15min后，加入终止液：150 ill
[0207] EX=355nm XM=460nm
[0208] 注：为了验证酶反应系统是否正常，可以不加终止液，测定荧光值的动力曲线。
[0209] NA抑制剂筛选实验操作：
[0210] 1、扎那米韦或实施例1-12制备得到的化合物按I :10，1 :100，1 :1000,1 :10000稀 释。
[0211] 2、反应步骤：将NA酶液30 ill与扎那米韦或实施例1-12制备得到的化合物 IOu 1 混匀后孵育 30min，加入以下成分：MES(330mmol/L) ;CaCl2(4mmol/L) ; MUNANA (200 iimol/L) :10 ill ;H20 :30 ill。混匀后孵育 15min，再加入终止液：150 iil，最后 混匀后测定荧光值：EX = 355nm XM = 460nm。
[0212] 3、数据分析：采用 GraphPad Prism Demo 分析。
[0213] 表1 :流感病毒神经氨酸酶野生型抑制活性
[0214]
[0215]注：a: <10nM ;b: IOnM- IOOnM ;c: IOO-1000 nM ;d:>1000nM
[0216] 上述结果表明，本发明公开的化合物均对流感病毒有很好的抑制活性，且部分化 合物与对照药物扎那米韦相当，极大显示出了其在制备抗流感病毒药物方面的应用前景。
[0217] 以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并 不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员 来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保 护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
【主权项】
1.式I所示的唾液酸类似物或其药学上可接受的盐：其中： R选自：氣基，狐基，脉基； &，R2任选自：H，R4取代苄基，R5取代乙酸基； R4选自：氢，卤素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基； R5选自：氢，C1-C6烷基或不饱和烷基，含有0,N，S的C1-C6取代烷基或不饱和烷基， 取代芳基； R3 选自：氢，（CH2)JC0R6 ;n选自：1，2,3,4,5 ; R6选自：芳基，取代芳基，杂芳基，苯并杂环基； X选自：0，S，NH; Y选自：0,S，NH。2. 根据权利要求1所述的唾液酸类似物或其药学上可接受的盐，其特征在于，选自式 II所示化合物：其中：&，R2任选自：H，式III所示取代基，式IV所示取代基；3. 根据权利要求2所述的唾液酸类似物或其药学上可接受的盐，其特征在于，选自式 II所示化合物，其中： R选自：氨基； 札选自：H; R2选自：式III所示取代基，式IV所示取代基； 选自：卤素； R5选自：氢，C1-C6烷基； R3 选自：(CH2)JC0R6 ; r6选自：r7、r8二取代苯基，r7取代萘基，含氧五元杂环基；r7，r8任选自：羟基，氨基； X选自：NH; Y选自：0,S，NH。4.根据权利要求3所述的唾液酸类似物或其药学上可接受的盐，其特征在于，选自如 下化合物：5. 权利要求1-4任一项所述的唾液酸类似物或其药学上可接受的盐在制备抗流感病 毒药物中的应用。6. -种抗流感病毒的药物组合物，其特征在于，其活性成份包括权利要求1-4任一项 所述的唾液酸类似物或其药学上可接受的盐。
【专利摘要】本发明公开了一种Ⅰ所示的唾液酸类似物或其药学上可接受的盐及其应用，属于药物化学领域。该唾液酸类似物以扎那米韦为先导化合物，对其分子结构中的侧链进行改造，得到一系列新型唾液酸类似物。所述唾液酸类似物或其药学上可接受的盐对流感病毒神经氨酸酶具有很好的抑制活性。因此，本发明的唾液酸类似物可用于制备抗流感病毒药物。
【IPC分类】A61K31/351, A61P31/16, A61K31/36, C07D407/12, C07D309/28
【公开号】CN105085455
【申请号】CN201410201442
【发明人】张健存, 陈超南
【申请人】中国科学院广州生物医药与健康研究院
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2014年5月13日