一种有效降解菌糠的混合菌剂及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及了食用菌工业废弃物的降解领域，尤其涉及一种有效降解菌糠的混合菌剂及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002]菌糠，又叫菌渣，是指栽培食用菌后所产生的培养基废弃物，主要包括棉仔壳、木肩和秸杆等纤维素成分。近年来，随着我国食用菌产业的不断扩大，人们对食用菌需求量的不断增加，使得菌糠的产量也随之增加。菌糠如若随意丢弃或燃烧掉，容易造成环境污染和引起资源浪费现象。因此，菌糠的合理开发利用对纤维素资源循环利用和减少环境污染至关重要。菌糠主要由粗纤维、粗蛋白和粗脂肪构成。此外，还含有丰富的氨基酸和Ca等矿质元素。目前菌糠常被用作基质、肥料和饲料等。但菌糠饲料还未被大面积推广利用，原因在于菌糠中的粗纤维含量较高，难以降解。只有将菌糠中的粗纤维成分进一步降解，菌糠才能用作动物饲料。利用混合菌剂降解菌糠中的粗纤维成分，可以使菌糠饲料更易被动物消化和吸收。
【发明内容】
[0003]为了解决上述的技术问题，本发明的一个目的是提供一种有效降解菌糠的混合菌剂及其制备方法，本发明的另外一个目的是提供上述的混合菌剂的应用。本发明利用微生物降解菌糠无毒，操作简单，菌糠降解效果明显，不会给动物带来安全隐患，经济效益明显。降解过程不会影响菌糠饲料口感，更为重要的是降解过程属于密封发酵，不会引起环境污染，利于环境保护。
[0004]为了实现上述的第一个目的，本发明采用了以下的技术方案:
一种有效降解菌糠的混合菌剂，该混合菌剂由秸杆发酵菌液与粗纤维降解专用菌液分别以1:5-5:1比例混合制备混合菌剂原液，然后以0.25%~1.0%的混合原液接种于无菌蒸馏水中，同时加入1.0-5.0%无菌蒸馏水重量由黑曲霉、青霉组成的混合发酵液稳定混合培养2 ~3 d，得到；
所述的混合发酵液的制备方法如下:将黑曲霉菌株、青霉分别接入到PDA斜面培养基上培养3-4 d后，用无菌水将斜面上的孢子洗下，制成孢子悬浮液，活菌数106 CFU/mL ;将黑曲霉、青霉按照15%~25%的比例液体发酵培养7~8 d后得到混合发酵液；
所述的秸杆发酵菌液制备方法如下:先配置培养基，培养基原材料配方是:红糖100g，无菌水1000 mL ;加入5 g秸杆发酵菌装入含1000 mL培养基的塑料桶内，密封，在35°C条件下厌氧发酵3 d变酸后即可得到秸杆发酵菌液；
所述的粗纤维降解专用菌液制备方法如下:取0.5 g粗纤维降解专用菌剂，添加到含1000 mL蒸馏水的塑料桶内，密封，于28°C培养10 h后即制备得到粗纤维降解专用菌液。
[0005]上述的混合菌剂的制备方法，该方法包括以下的步骤:
I)将黑曲霉菌株、青霉分别接入到PDA斜面培养基上培养3-4 d后，用无菌水将斜面上的孢子洗下，制成孢子悬浮液，活菌数16 CFU/mL ;将黑曲霉、青霉按照15%~25%的比例液体发酵培养7?8 d后得到混合发酵液；
2)先配置培养基，培养基原材料配方是:红糖100g，无菌水1000 mL ;加入5 g稻杆发酵菌装入含1000 mL培养基的塑料桶内，密封，在35°C条件下厌氧发酵3 d变酸后即可得到秸杆发酵菌液；
3)取0.5 g粗纤维降解专用菌剂，添加到含1000 mL蒸馏水的塑料桶内，密封，于28°C培养10 h后即制备得到粗纤维降解专用菌液；
4)秸杆发酵菌液与粗纤维降解专用菌液分别以1:5~5:1比例混合制备混合菌剂原液，然后以0.25%~1.0%的混合原液接种于无菌蒸馏水中，同时加入1.0-5.0%无菌蒸馏水重量由黑曲霉、青霉组成的混合发酵液稳定混合培养2 ~3 d，得到混合菌剂。
[0006]为了实现上述的第二个目的，本发明采用了以下的技术方案:
上述的混合菌剂用于降解菌糠的应用。
[0007]本发明的的混合菌剂降解菌糠操作方便，降解效果明显。采用混合菌剂降解的菌糠，粗纤维含量减少，使菌糠饲料更易于动物消化和吸收。此外，菌糠饲料的应用可以减少菌糠的丢弃及燃烧，减少环境污染，给环保工作带来了很大的好处。
【具体实施方式】
[0008]I)将黑曲霉菌株、青霉(均采购沂源康源生物科技有限公司)分别接入到PDA斜面培养基上培养3 d后，用无菌水将斜面上的孢子洗下，制成孢子悬浮液，活菌数16 CFU/mL ;将黑曲霉、青霉按照20%的比例液体发酵培养7 d后得到混合发酵液；
2)先配置培养基，培养基原材料配方是:红糖100g，无菌水1000 mL ;加入5 g稻杆发酵剂(采购农富康生物科技有限公司)装入含1000 mL培养基的塑料桶内，密封，在35°C条件下厌氧发酵3 d变酸后即可得到秸杆发酵菌液；
3)取0.5 g粗纤维降解专用菌剂(采购广州农冠生物科技有限公司)，添加到含1000mL蒸馏水的塑料桶内，密封，于28°C培养10 h后即制备得到粗纤维降解专用菌液；
4)秸杆发酵菌液与粗纤维降解专用菌液分别以1:3比例混合制备混合菌剂原液，然后以0.25%~1.0%的混合原液接种于无菌蒸馏水中，同时加入5.0%无菌蒸馏水重量由黑曲霉、青霉组成的混合发酵液稳定混合培养2 d，得到有效降解菌糠的混合菌剂。
[0009]分别利用秸杆发酵菌液、粗纤维降解专用菌种以及不同比例制备的复合发酵菌液，按照每10 mL菌剂喷洒I kg菌糠的比例喷洒，24 h喷洒一次，翻倒I次，35°C下培养3d后，测定菌糠的降解率。
[0010]经不同菌剂的处理，平菇菌糠和杏鲍菇菌糠以不同的比例降解。结果表明利用粗纤维降解专用菌种降解平菇菌糠3 d时，平菇菌糠降解率最大值可达19.8% ;利用混合菌剂(秸杆发酵剂与粗纤维降解专用菌种混合比例为4:2)降解杏鲍菇菌糠3 d时，可以使杏鲍菇菌糠降解率最大值达13.7%。利用黑曲霉、青霉组成的混合发酵液与混合菌剂(秸杆发酵剂与粗纤维降解专用菌种混合比例为4:2)共同降解菌糠3 d后，平菇菌糠及杏鲍菇菌糠降解率分别达到30.2%和23.2%，分别是是未添加黑曲霉及青霉发酵液前的降解率的1.8倍、1.7倍。故黑曲霉、青霉与秸杆降解菌剂等混合共同降解菌糠，菌糠降解效果最好。利用黑曲霉、青霉与秸杆降解菌剂等混合共同降解菌糠不仅简单方便，可行性较高。此外，相同条件下利用不同菌降解平菇菌糠及杏鲍菇菌糠，平菇菌糠的降解率均大于杏鲍菇菌糠的降解率。因此，平菇菌糠相较于杏鲍菇菌糠更易于降解，即平菇菌糠更适合用于动物饲料。
【主权项】
1.一种有效降解菌糠的混合菌剂，其特征在于该混合菌剂由秸杆发酵菌液与粗纤维降解专用菌液分别以1:5~5:1比例混合制备混合菌剂原液，然后以0.25%~1.0%的混合原液接种于无菌蒸馏水中，同时加入1.0-5.0%无菌蒸馏水重量由黑曲霉、青霉组成的混合发酵液稳定混合培养2 ~3d，得到； 所述的混合发酵液的制备方法如下:将黑曲霉菌株、青霉分别接入到PDA斜面培养基上培养3-4 d后，用无菌水将斜面上的孢子洗下，制成孢子悬浮液，活菌数16 CFU/mL ;将黑曲霉、青霉按照15%~25%的比例液体发酵培养7~8d后得到混合发酵液； 所述的秸杆发酵菌液制备方法如下:先配置培养基，培养基原材料配方是:红糖100g，无菌水1000 mL ;加入5 g秸杆发酵菌装入含1000 mL培养基的塑料桶内，密封，在35°C条件下厌氧发酵3 d变酸后即可得到秸杆发酵菌液； 所述的粗纤维降解专用菌液制备方法如下:取0.5 g粗纤维降解专用菌剂，添加到含1000 mL蒸馏水的塑料桶内，密封，于28°C培养10 h后即制备得到粗纤维降解专用菌液。2.权利要求1所述的混合菌剂的制备方法，其特征在于该方法包括以下的步骤: 1)将黑曲霉菌株、青霉分别接入到PDA斜面培养基上培养3-4d后，用无菌水将斜面上的孢子洗下，制成孢子悬浮液，活菌数16 CFU/mL ;将黑曲霉、青霉按照15%~25%的比例液体发酵培养7?Sd后得到混合发酵液； 2)先配置培养基，培养基原材料配方是:红糖100g，无菌水1000 mL ;加入5 g稻杆发酵菌装入含1000 mL培养基的塑料桶内，密封，在35°C条件下厌氧发酵3 d变酸后即可得到秸杆发酵菌液； 3)取0.5 g粗纤维降解专用菌剂，添加到含1000 mL蒸馏水的塑料桶内，密封，于28°C培养10 h后即制备得到粗纤维降解专用菌液； 4)秸杆发酵菌液与粗纤维降解专用菌液分别以1:5~5:1比例混合制备混合菌剂原液，然后以0.25%~1.0%的混合原液接种于无菌蒸馏水中，同时加入1.0-5.0%无菌蒸馏水重量由黑曲霉、青霉组成的混合发酵液稳定混合培养2 ~3d，得到混合菌剂。3.权利要求1所述的混合菌剂用于降解菌糠的应用。
【专利摘要】本发明涉及一种有效降解菌糠的混合菌剂，该混合菌剂由秸秆发酵菌液与粗纤维降解专用菌液分别以1:5~5:1比例混合制备混合菌剂原液，然后以0.25%~1.0%的混合原液接种于无菌蒸馏水中，同时加入1.0~5.0%无菌蒸馏水重量由黑曲霉、青霉组成的混合发酵液稳定混合培养2~3d，得到；混合发酵液的制备方法如下：将黑曲霉菌株、青霉分别接入到PDA斜面培养基上培养3-4？d后，用无菌水将斜面上的孢子洗下，制成孢子悬浮液，活菌数106？CFU/mL；将黑曲霉、青霉按照15%~25%的比例液体发酵培养7~8d后得到混合发酵液；本发明的混合菌剂降解菌糠操作方便，降解效果明显。
【IPC分类】A23K1/14, C12R1/685, A23K1/00, C12N1/14, C12R1/80
【公开号】CN105087398
【申请号】CN201510569108
【发明人】蔡妙珍, 张丽影, 邢承华, 潘婷, 陈碧春
【申请人】浙江师范大学
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2015年9月9日