吡啶胺基嘧啶衍生物、其制备方法及应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种选择性抑制突变形态的表皮生长因子受体（EGFR)活性的吡啶胺 基嘧啶衍生物及其药学上可接受的盐以及其制备方法，包含所述衍生物及其药学上可接受 盐的药物组合物，以及所述衍生物及其药学上可接受盐在治疗由某些突变形态的EGFR介 导的疾病以及制备用于治疗由某些突变形态的EGFR介导的疾病的药物方面的应用。
【背景技术】
[0002] 癌症被认为是细胞内信号传导系统或信号传导机制的疾病。癌症的最常见病因是 一系列的缺损，所述缺损可以是蛋白质的缺损（当其突变时），或者是对细胞内蛋白质的量 的调节的缺损，从而使蛋白质过度产生或产生不足。细胞表面受体的突变（该突变通常通 过酪氨酸激酶将信号传递到细胞内）可导致激酶在缺乏配体的条件下被激活，并传递事实 上并不存在的信号。或者，许多受体酪氨酸激酶可在细胞表面过度表达，导致对弱信号的过 强响应。
[0003] 表皮生长因子受体（EGFR)被确认为是在细胞生长和增值过程中至关重要的驱动 因素。表皮生长因子受体家族由EGFR(Erb-Bl)、Erb-B2 (HER-2/neu)、Erb-B3和Erb-B4组 成。表皮生长因子受体与大部分癌症的疾病进程有关，如肺癌、结肠癌、乳腺癌等。EGFR的 过度表达和突变已被明确证实是预后不好的乳腺癌的主要危险因素。此外，已证实该受体 家族的所有四个成员均可与该家族的其他成员聚合为异源二聚体，形成信号传导复合物， 如果该家族中有一个以上的成员在恶性肿瘤中过度表达，便可导致协同的信号传导作用。
[0004] EGFR属于蛋白酪氨酸激酶（PTK)家族，蛋白酪氨酸激酶是一类将磷酸基团从三磷 酸腺苷（ATP)催化转移到位于蛋白质底物的酪氨酸残基的酶。蛋白酪氨酸激酶在正常细胞 生长中起作用。EGFR的过度表达或突变，导致受体在缺乏配体的条件下被激活，使某些蛋白 发生磷酸化，产生了细胞分裂的信号。因此，EGFR通过自身酪氨酸激酶的作用，导致了弱信 号的过度放大，引起了细胞的过量增值。
[0005] 作为潜在的抗癌治疗药物的特异性PTK抑制剂备受关注。目前已经上市的EGFR 可逆性抑制剂的典型代表包括吉非替尼（Gefitinib)、埃罗替尼（Erlotinib)、拉帕替尼 (Lapatinib)，抑制EGFR野生型和激活型突变（例如19号外显子缺失激活突变、或L858R激 活突变），其结构如下，分别用于非小细胞肺癌（NSCLC)和乳腺癌的治疗。临床研究证明吉 非替尼、埃罗替尼对EGFR发生19号外显子缺失或L858R点突变的NSCLC患者有良好的治 疗作用。然而，它们的局限在于患者在接受治疗后产生耐药，使得此类抑制剂在临床上的进 一步应用受到限制。研究表明，50%的吉非替尼、埃罗替尼治疗后耐药性的产生与EGFR发 生二次突变（T790M)相关（PaoW.等，PlosMed.，2 :1-11，2005)，可逆抑制剂失去疗效。
[0006]
[0007] T790M位于EGFR与ATP结合口袋的入口，其边链的大小直接影响EGFR和ATP的 结合能力。T790M突变在空间上阻碍EGFR抑制剂与ATP结合位点的作用，增加EGFR对ATP 的亲和力，使细胞对EGFR抑制剂产生耐药。
[0008] 与可逆性EGFR抑制剂相比，不可逆EGFR抑制剂具有非常突出的优点。不可逆 EGFR抑制剂可长时间的抑制EGFR，只受到受体再结合（也称为回复）的正常速率的限制。 有研究发现，不可逆EGFR抑制剂可通过麦克尔加成反应与EGFR上半胱氨酸残基（Cys797) 共价结合，使不可逆EGFR抑制剂与ATP结合位点扩大，从而能在一定程度上克服T790M突 变引起的耐药性（LiD等，0ncogene，27:4702-4711，2008)。目前已上市的不可逆EGFR抑 制剂有BIBW-2992(Afatinib)，在研的包括HKI-272(Neratinib)、EKB-569(Pelitinib)、 PR)0299804(Dacomitinib)等，其结构如下。
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[0011] 然而，这类能够抑制EGFRT790M的不可逆EGFR抑制剂，对野生型EGFR的抑制 作用也很大，带来较大的毒副作用，如腹泻、皮疹、恶心、厌食，虚弱无力（BeSSe，B.等Eur.J.CancerSuppl. , 6,64,abstr. 203, 2008 ;Janne,Ρ·Α·等，J.Clin.Oncol. , 25 :3936-3944, 2007)，因此虽然据文献报道，在临床前BIBW2992 (Afatinib)和PF00299804 (Dacomitinib) 显示具有显著的抗肿瘤活性，能抑制EGFR和EGFRT790M的活性，但在临床过程中因为这些 不良反应的发生，最终限制了其临床给药剂量及有效血药浓度，使得BIBW2992 (Afatinib) 和PF00299804 (Dacomitinib)在克服T790M耐药突变方面未能取得令人瞩目的进展 (KatakamiN,AtagiS,GotoK,etal. [J].JournalofClinicalOncology,2013,31 (27)： 3335-3341.；JannePA,BossDS,CamidgeDR,etal. [J].ClinicalCancerResearch, 2011,17(5) ：1131-1139.；LandiL,CappuzzoF. [J].TranslationalLungCancer Research,2013,2(1) :40-49.)。
[0012] 上述上市或在研的可逆或不可逆EGFR抑制剂主要结构类型为喹唑啉类化合物， 目前已报道的喹唑啉类EGFR抑制剂均为野生型EGFR的ATP竞争性抑制剂，由此导致一些 副反应的发生。2009年，研究人员报道了一类嘧啶类的特异性作用于EGFRT790M的不可 逆EGFR抑制剂，结构如下所示。与现有的苯胺喹唑啉EGFR抑制剂相比，此类嘧啶化合物对 EGFRT790M的抑制活性提高了 30-100倍，对野生型EGFR的抑制活性降低了 100倍（Wenjun Zhou等，Nature，462 :1070-1074, 2009)，但后期该类嘧啶化合物未进入临床研究。
[0013]
[0014] AvilaTherapeutics申请的国际专利W0 2012/061299A1中公开了另一系列啼陡 类化合物，结构式如下，其中代表性的化合物为C01686。据文献报道，C01686能够选择性作 用于EGFR激活型突变和T790M耐药型突变，而对野生型EGFR抑制作用较弱（WalterA0， SjinRTT,HaringsmaHJ,etal· [J].Cancerdiscovery,2013,3(12) :1404_1415·)。目 前准备进入临床II期阶段。
[0015]
123 ASTRAZENECAAB申请的国际专利W0 2013/014448A1中也公开了一系列嘧啶类化 2 合物，结构式如下，其中代表性的化合物为AZD9291，相对于野生型EGFR对EGFR激活型突变 3 和T790M耐药型突变有更好的抑制作用，目前处在I期临床阶段。
[0017]
[0018] 为克服临床中常见的EGFR耐药性突变（例如T790M突变）以及现有EGFR抑制剂 的毒副作用问题，即开发更多的对某些激活突变体和耐药型突变体形式的EGFR显示较高 的抑制同时对野生型EGFR显示相对较低的抑制的小分子抑制剂已经是当前抗肿瘤领域的 迫切需要。本发明人在研究EGFR抑制剂的过程中，惊喜地发现了一类吡啶胺基嘧啶衍生 物，对EGFR激活型突变（如19号外显子缺失激活突变、或L858R激活突变）和T790M耐药 型突变的抑制活性显著高于对野生型EGFR(WTEGFR)的抑制活性，有很好的选择性，并且毒 副作用较低，安全性好。预期此类抑制剂将会有好的疗效，有望克服耐药性问题及毒副作用 问题，具有良好的开发前景。
【发明内容】
[0019] 本发明提供如下通式（I)化合物，或其药学上可接受的盐：
[0020] 1234567
式中： 2 环A为芳基尤， 3 札选自氢、卤素、烷基、卤代烷基、C2_C6烯基、C2_C6炔基或-CN; 4 R2 选自C「C4 烷基、卤代C「C4 烷基、C2_C6 烯基、-(CH2)q0R7、_ (CH2)qNR7R/ 或-(CH2) qC(0)R7 ； 5 R4 6 每个R5独立地为卤素、烷基、卤代烷基、C2_C6烯基、C2_C6炔 基、-or6、-c(0)r7、-c(0)NR7R/、-or7、-nr7r/、-CN或-no2 ; 7 R3 选自卤素、-CN、-N02、C「C4 烷基、卤代C「C4 烷基、-C(0)R6、-C(0)R7、-C(0) NR7R7，、-0R7、-0R6、-NHR7、-NR7- (CfC4 烷基）、-NR7-(卤代CfC4 烷基）、-nr7 (CH2)nC(0) r6、-nr6r7、-NR7_未取代或被1~2个选自R7取代基取代的杂环烷基或_NR7S02R7，或未取代 或被1~3个选自卤素、CfC4烷基、卤代CfC4烷基、-(CH2)n0H、-NR7R/、-0R7或-C(0)R7的 取代基取代的杂环烷基；
[0028]其中，R6为-(CH2)q0R7、-(CH2)qNR7R/、- (CH2)qNR7C(0)R7、-(CH2)qC(0)R7或-(CH2) qC(0)NR7R/；
[0029] R7和R/分别独立地为氢、烷基、C2_C6烯基、C2_C6炔基或卤代烷基， 或R7、R/与所相连的氮原子一起环合形成未取代或被1~3个选自卤素、Ci-Q烷基、卤代 C「C4烷基、_(CH2)n0H、_NR7R7,、_0R7或_C(0)R7的取代基取代的杂环烷基；
[0030]m为 1、2 或 3;
[0031]η为 0、1、2、3 或 4;
[0032]q为 0、1、2、3 或 4。
[0033] 本发明提供通式（I)化合物，其能够抑制一种或多种EGFR激活型或耐药型突变， 例如L858R激活突变体、19号外显子缺失激活突变体、T790M耐药型突变体。有利地，这种 化合物可用于对基于EGFR抑制剂的现有疗法已产生一定程度的耐药性患者的癌症治疗。
[0034] 本发明提供通式（I)化合物，其对激活或耐药型突变体形式的EGFR显示比野生型 EGFR更高的抑制。由于与野生型EGFR抑制相关的毒性降低，因而预期这种化合物更适于用 作治疗剂，尤其适用于癌症的治疗。
[0035] 本发明还提供了通式（I)化合物的制备方法。
[0036] 本发明还提供药物组合物，它含有上述本发明通式（I)化合物或其药学上可接受 的盐、以及药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
[0037] 本发明还提供本发明通式（I)化合物或其药学上可接受的盐在治疗哺乳动物尤 其人类由EGFR激活型或耐药型突变体介导的疾病、特别是癌症方面的应用。
[0038] 本发明还提供本发明通式（I)化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗哺乳动 物尤其人类由EGFR激活型或耐药型突变体介导的疾病、特别是癌症的药物的应用。
[0039] 本发明还提供一种治疗哺乳动物尤其人类由EGFR激活型或耐药型突变体介导的 疾病、特别是癌症的方法，所述方法包括对患者施用通式（I)化合物或其药学上可接受的 盐、或包括治疗有效量的通式（I)化合物和药物可接受载体、赋形剂或稀释剂的药物组合 物。
[0040] 本发明还提供一种相比于野生型EGFR(WTEGFR)选择性地抑制EGFR激活型或耐 药型突变的方法，所述方法包括使生物样品接触或向患者投与通式（I)化合物或其药学上 可接受的盐或其药物组合物。
[0041] 本发明所提及癌症，可以选自肺癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、胰 腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、黑色素瘤、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、肝细 胞癌、胃肠道基质瘤（GIST)、甲状腺癌、胆管癌、子宫内膜癌、肾癌、间变性大细胞淋巴瘤、急 性髓细胞白血病（AML)、多发性骨髓瘤、间皮瘤。
[0042] 在本发明式（I)化合物或其药学上可接受的盐的一个优选实施方案中，环A为杂 芳基。
[0043] 在本发明式（I)化合物或其药学上可接受的盐的一个更优选的实施方案中，环A 为吲哚基、剛唑基、吡咯[2, 3-c]骈吡啶基、吡咯[3, 2-c]骈吡啶基、吡咯[2, 3-b]骈吡啶 基、吡咯[3, 2-b]骈吡啶基、吡咯[2, 3-b]骈吡嗪基、剛哚啉-2-酮基、吡啶基、吡唑基或嘧 啶基。
[0044] 在本发明式（I)化合物或其药学上可接受的盐的一个优选实施方案中，&为氢、卤 素或卤代烷基。
[0045] 在本发明式（I)化合物或其药学上可接受的盐的一个更优选的实施方案中，札为 氢、氯、氟或三氟甲基。
[0046] 在本发明式（I)化合物或其药学上可接受的盐的一个优选实施方案中，R2为CfQ
烷基或卤代Q-C；烷基，优选为C2_C4烷基或卤代C2_C4烷基，更优选为异丙基或三氟乙基。rmul 龙太劳日曰才（τ)化合物或其药学上可接受的盐的一个优选实施方案中，R4为 I和R/分别独立地为氢或烷基。 L0048」仕不友明瓦U)化合物或其药学上可接受的盐的一个更优选的实施方案中，&为 '/v^\R7，R7 为氢。
[0049] 在本发明式（I)化合物或其药学上可接受的盐的一个优选实施方案中，R3选自卤 素、-CN、-N02、CfC4 烷基、卤代C「C4 烷基、-C(0)R7、-C(0)NR7R/、-0R7、-NHR7、-NR7_ (CfC4 烷基）、_NR7 (CH2)nC(0)R6或-NR6R7，或未取代或被1~3个选自卤素、CfQ烷基、卤代CfQ 烷基、-(CH2)n0H、-NR7R/、-0R7或-C(0)R7的取代基取代的杂环烷基；
[0050] 其中，R6 为-(CH2)q0R7、- (CH2)qNR7R/、- (CH2)qC(0)R7 或-(CH2)qC(0)NR7R/ ;
[0051] RJPR/分别独立地为氢、C「C4烷基或卤代C「C4烷基，或R7、R/与所相连的氮 原子一起环合形成杂环烷基；
[0052] η为 0、1、2、3 或 4;
[0053] q为 0、1、2、3 或 4。
[0054] 在本发明式（I)化合物或其药学上可接受的盐的一个更优选的实施方案中，R3 为-NR6R7，其中R6为-(CH2)qNR7R/，R7和R/分别独立地为氢或C「C4烷基，q为2。
[0055] 在本发明式（I)化合物或其药学上可接受的盐的一个更优选的实施方案中，R3为 被1个选自卤素、烷基、卤代烷基或_NR7R/的取代基取代的杂环烷基，R7和R/ 分别独立地为氢或烷基；更优选的杂环烷基为四氢吡咯基。
[0056] 在本发明式（I)化合物或其药学上可接受的盐的一个优选实施方案中，每个1?5独 立地为卤素、烷基、卤代烷基、_0R7、_NR7R/、-CN或-N02,R7和R/分别独立地 为氢或烷基，m为1、2或3。
[0057] 在本发明式（I)化合物或其药学上可接受的盐的一个更优选的实施方案中，每个 R5独立地为卤素、(；-(；烷基、-0R7或-NR7R/，R7和R/分别独立地为氢或烷基，m为 1、2 或 3。
[0058] 在本发明中，具体优选的通式（I)化合物或其药学上可接受的盐，包括如下：
[0059] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-异丙氧基-5- {5-氯-[4- (1-甲 基-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0060] N-{2-{[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-异丙氧基-5-{[4-(1-甲基-1H-吲 哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0061]N-{2-{[2_(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-(2,2,2_二氟乙氧 基）-5- {[4- (1-甲基-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0062]N-{2-{[2_(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-(2,2,2_二氟乙氧 基）-5_ {5-氯-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰 胺；
[0063]N-{2-{[2_(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}_6_异丙氧基-5-{[4-(l-甲 基-5-氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0064]N-{2-{[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-异丙氧基-5-{[4-(1-甲基-5， 6-二氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0065] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-异丙氧基-5- {5-氯-[4- (1-甲 基-6-氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0066] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-异丙氧基-5- {5-氯-[4- (1-甲 基-5,6-二氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0067]N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-异丙氧基-5- {5-氯-[4- (1-甲 基-5-氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0068]N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-异丙氧基-5- {5-氟-[4- (1-甲 基-5-氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0069]N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-异丙氧基-5- {5-氟-[4- (1-甲 基-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0070]N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-异丙氧基-5- {5-氟-[4- (1-甲 基-5,6-二氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0071] N-{2-{[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-异丙氧基-5-{[4-(l-甲 基-6-氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0072]N-{2-{[2_(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-(2,2,2_二氟乙氧 基）-5_ {5-氟-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰 胺；
[0073]N-{2-{[2_(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-(2,2,2_二氟乙氧 基）-5-{[4-(1-甲基-5-氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰 胺；
[0074]N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-异丙氧基-5- {5-氯-[4- (1-甲 基-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺甲磺酸盐；
[0075] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-异丙氧基-5- {5-氯-[4- (1-甲 基-5,6-二氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺甲磺酸盐； [0076]N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-异丙氧基-5- {[4- (1-甲基-5， 6-二氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺甲磺酸盐；
[0077] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-异丙氧基-5- {[5-氯-4- (1-甲 基-1H-批略[2, 3_b]批陡-3-基）啼陡-2-基]胺基}批陡-3-基}丙烯酰胺；
[0078] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-异丙氧基-5- {[5-氯-4- (1-甲 基-1H-吡咯[2, 3-b]吡啶-5-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0079] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲