吡咯并[3,2]嘧啶衍生物作为人类干扰素诱导剂的制作方法

吡咯并[3,2]嘧啶衍生物作为人类干扰素诱导剂的制作方法
【专利摘要】式(I)的化合物及其盐是人类干扰素的诱导剂：其中R1是氢、甲基或–(CH2)2OR3，R2是甲基或–(CH2)2OR4，或R1和R2与它们相连的氮原子一起连接形成5-或6-元杂环基，其中所述6-元杂环基任选被两个羟基取代基取代；R3和R4各自独立地为氢或甲基；且n是具有5或6的整数。诱导人类干扰素的化合物可用于治疗或预防各种障碍，例如治疗或预防过敏性疾病和其它炎性状况，例如过敏性鼻炎和哮喘、传染病和癌症，并且也可用作疫苗佐剂。
【专利说明】口比略并[3,2]略暗衍生物作为人类干扰素诱导剂
[0001]本发明的技术领域 本发明设及化合物、它们的制备方法、含有它们的组合物、它们在各种障碍，特别是过 敏性疾病和其它炎性状况，例如过敏性鼻炎和哮喘，传染病和癌症的治疗或预防中和作为 疫苗佐剂的用途。
[醒]发明背景 脊椎动物一直受微生物侵入威胁并已进化出免疫防御机制W清除传染性病原体。在哺 乳动物中，运种免疫系统包含两个分支;先天免疫和获得性免疫。宿主防御的第一线是由巨 隧细胞和树突细胞介导的先天免疫系统。获得性免疫设及在感染后期清除病原体并也能生 成免疫记忆。由于大量具有已发生基因重排的抗原特异性受体的淋己细胞指令 (rep&rtoire)，获得性免疫是高度特异性的。
[0003] 在哺乳动物体内生成有效先天免疫应答的关键是导致诱导干扰素和在作用于细 胞时诱发许多效应的其它细胞因子的机制。在人类中，I型干扰素是由染色体9上的基因编 码并编码干扰素 a(IFNa)的至少13个亚型和干扰素 β(ΙΡΝβ)的一个亚型的相关蛋白质家族。 干扰素最初被描述为可保护细胞免受病毒感染的物质（/saacs Zinc/emann，/. Kirus Interference. Proc. R. Soc. Lon. Ser. B. Biol. Sci. 1957: 147, 258-267X畫邀 IFNa是最早批准的生物疗法并已成为病毒感染和癌症中的重要疗法。除对细胞的直接抗病 毒活性外，干扰素还已知是作用于免疫系统的细胞的有力的免疫应答调节剂（仿wzaJez- Navajas J.Μ.等人Na1:ure Reviews Immunology, 2012 .2, 125-35)。
[0004] Toll样受体(TLR)是在人类中描述的10种模式识别受体的家族（仿7, W./.等A， 心打^/. ，説》口7.·斯，7也-76筑。化3主要由先天免疫细胞表达，其中它们的 作用是监测感染信号的环境并在活化时调动旨在清除入侵病原体的防御机制。由化R触发 的早期先天免疫应答限制感染的传播，而它们诱发的促炎性细胞因子和趋化因子导致抗原 呈递细胞、B细胞和T细胞的募集和活化。TLR可W调节适应性免疫应答的性质W经由树突细 胞活化和细胞因子释放提供适当的保护(心TJ'ra义掌乂，Wai. iffl皿moJ.，WW.·义675- 口 i从不同TLR激动剂中看出的应答状况取决于活化的细胞类型。
[000引TLR7是定域在已专口化为检测非自核酸的细胞的内涵体小室（eηd0 Soma 1 compartment)中的化R亚类(TLR 3、7、8和9 )的成员。TLR7在经由ssRNA的识别的抗病毒防御 中起到关键作用（化eAoJc/义义掌A，5fcie打ce，之口口J口义7慰巧心/打(6//.似.掌 乂，户ΛΚ& W口7W，55W-56WiTLR7在人类中具有受限表达曲线并主要由B细胞和浆 细胞样树突状细胞表达(pDC)并在较低程度上由单核细胞表达。浆细胞样DC是淋己衍生的 树突细胞的一个独特群体(0.2-0.8%的外周血单核细胞(PBMC))，其是响应病毒感染分泌高 含量的干扰素-a(IFNa)和干扰素-β(ΙΡΝβ)的原发性(prima巧)1型干扰素产生细胞(Ziu _r- J, Annu. Rev. Immunol., 2005: 23, 275-306 X
[0006]可W经由Toll样受体刺激先天免疫应答，包括I型干扰素和其它细胞因子的活化 的小分子化合物的给药可W成为用于治疗或预防人类疾病的重要策略。已经描述了可W在 动物和人类中诱导干扰素〇的化37的小分子激动剂（7'3女6扣掌乂， iffl皿moJ.，之W义·分，化R7激动剂包括咪挫并哇嘟化合物，如咪哇莫特和雷西莫 特(resiquimod)、氧代腺嚷岭(oxoadenine)类似物W及核巧类似物，如洛索立宾和7-硫代- 8-氧桥鸟嚷岭（7-thia-8-〇xoguanosine)，它们早就已知诱导干扰素 α(仿arniecAi.似.， J. Med, Chem. , 2008: 51, 6621-6626 -Jiedayat M.^A, Medicinal Research TfeWers，义?，J?%-义巧）。运种类型的免疫调节策略具有识别可用于治疗过敏性疾 '病iMoisan J.等人，Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol., 2006: 290, L987- 995 λ'病毒感-染(Morcroft N.J.等人，J. Antimicrob. Chemther, 2012: 67, 789-80D、 癌症(ZriegA，Curr.化coJ.化/7.，WM.· 人做-95；·其它炎性状况，如肠易激综 合租(Rakoff-Nahoum S.，Cell.，2004，23，118(2): 229-41 夭Μ导为、按短化萌KPersing 等人 Trends Microbiol. 2002: 10(10 Suppl)，S32-7航化合卿椒雜力。
[0007] 更具体地，过敏性疾病与对过敏原的化2-偏性(biased)免疫应答相关联。化2应答 与提高的I巧水平相关联，所述I巧经由其对肥大细胞的作用促进对过敏原的超敏反应，产 生例如在哮喘和过敏性鼻炎中所见的症状。在健康个体中，对过敏原的免疫应答用混合 化2/化1和调节性T细胞应答更平衡。TLR7配体已显示出在体外降低化2细胞因子和增强化1 细胞因子释放并在体内改善过敏性肺模型中的化2型炎性反应(化/ecAs似./.，户山皿Maiy Pharmacology & Therapeutics, 2011: 24, 203-214 fill L.等人，J. All. Clin. Immunol.，2006: 118，511-517 ;Tao等人，Chin. Med. J.，2006: 119，640-648 化η Z.户.化/r. /. 之口以.·如，因此TLR7配体具有再平衡在过敏个体 中所见的免疫应答并导致疾病修饰的潜力。最近使用化R7激动剂的临床研究已显示在患有 过敏性鼻炎和过敏性哮喘两者的患者中TLR7的反复鼻内刺激W产生对过敏原的应答性的 境壌稱极Wreiff L. Respiratory Research, 2012: 13, 53 Leaker B.R.等人，Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2012: 185, AAISA。
[0008] 在对人类干扰素 IFNa的新型小分子诱导剂的探索中，已经开发出基于用化合物刺 激原发性人类供体细胞或全血的表征小分子(无论机制如何)的测定策略并公开在本文中。
[0009] 发明概述 在第一方面，本发明设及式(I)的化合物及其盐：
其中r1、R2和η如下定义。
[0010] 本发明的某些化合物已显示是人类干扰素的诱导剂并与人类干扰素的已知诱导 剂相比可具有期望的可发展状况(developabilityp;rofile)。在一个实施方案中，本发明 的某些化合物可相对于TWa表现出对IF化的选择性。在一个进一步实施方案中，本发明的 某些化合物可适合发展，因为它们可比人类干扰素的其它诱导剂较不强效。
[0011] 诱导人类干扰素的化合物可用于治疗或预防各种障碍，例如治疗或预防过敏性疾 病和其它炎性状况，例如过敏性鼻炎和哮喘，治疗或预防传染病和癌症。因此，本发明进一 步设及包含式（I)的化合物或其药物上可接受的盐的药物组合物。本发明进一步设及使用 式（I)的化合物或其药物上可接受的盐或包含式（I)的化合物或其药物上可接受的盐的药 物组合物治疗或预防与其相关的障碍的方法。
[0012] 本发明的化合物还可用作疫苗佐剂。因此，本发明进一步设及包含式（I)的化合物 或其药物上可接受的盐和抗原或抗原组合物的疫苗组合物。
[0013] 本发明的某些化合物可W是强效免疫调节剂，且因此在它们的操作中应该小屯、注 古- >旨、〇
[0014] 发明详述 在第一方面，本发明设及式(I)的化合物及其盐：
其中： R堪氨、甲基或-(C也)20R3， R2是甲基或-(C也)20R4,或 R1和R2与它们相连的氮原子一起连接形成5-或6-元杂环基化eterocyclyl)，其中所述 6-元杂环基任选被两个径基取代基取代； R3和R4各自独立地为氨或甲基;且 η是具有5或6的整数。
[001引在一个实施方案中，R堪氨、甲基或-(C也)20R3,且R2是甲基或-(C也)20R 4。在另一实 施方案中，R堪氨且R2是-(C也)20R4,例如-(C也)20H。在另一实施方案中，R哺R 2都是甲基。在 另一实施方案中，R墙-(C也)20护且R2是-(C也)20R4。
[0016]在一个实施方案中，Ri和R2与它们相连的氮原子一起连接形成5-或6-元杂环基，其 中所述6-元杂环基任选被两个径基取代基取代。在另一实施方案中，Ri和R2与它们相连的氮 原子一起连接形成化咯烧。在另一实施方案中，Ri和R2与它们相连的氮原子一起连接形成任 选被两个径基取代基取代的赃晚。在另一实施方案中，Ri和R2与它们相连的氮原子一起连接 形成赃晚-3,5-二醇。
[0017]在一个实施方案中，当Ri是-(C也)2〇护且R2是-(C也)20R咐，R 3和R4都是氨。在另一 实施方案中，当Ri是-(C也)2〇护且R2是-(C也)20R咐，R3是氨且R4是甲基。在另一实施方案中， 当Ri是-(C也)2〇护且R2是-(C也)20R咐，R3和R4都是甲基. 在一个实施方案中，η是5。在另一实施方案中，η是6。
[0018]式(I)的化合物的实例提供在下列列表中，并形成本发明的另一方面： 2.6- 二甲基-7-(6-(赃晚-1-基）己基)-5W -化咯并[3,2-c/ ]喀晚-4-胺； 2.6- 二甲基-7-(5-(邮咯烧-1-基)戊基)-5W -化咯并[3,2-c/ ]喀晚-4-胺； 2,2'-((5-(4-氨基-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2-c/ ]喀晚-7-基）戊基）亚氨基 (azanediyl))二乙醇； 2,2'-((6-(4-氨基-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2-c/ ]喀晚-7-基化基)亚氨基)二乙 醇； 2-((6-(4-氨基-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2-c/ ]喀晚-7-基）己基）（2-甲氧基乙基） 氨基）乙醇； 7-(6-(双(2-甲氧基乙基)氨基化基)-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2-c/ ]喀晚-4-胺； 2-((6-(4-氨基-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2-c/ ]喀晚-7-基化基)氨基）乙醇； (37?，5S )-1-(6-(4-氨基-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-c/ ]喀晚-7-基）己基)赃晚- 3.5- 二醇； (37?，57? )-1-(6-(4-氨基-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-c/ ]喀晚-7-基）己基)赃晚- 3.5- 二醇;和 7-(6-(二甲基氨基化基)-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-]喀晚-4-胺； 和它们的盐。
[0019] 本文所用的术语"杂环基"是指含有指定数量的碳原子和一个杂原子的单环饱和 杂环，该杂原子是氮。运样的杂环是化咯烧或赃晚。
[0020] 要理解的是，在本文中提到本发明的化合物是指作为游离碱或作为盐，例如药物 上可接受的盐的式（I)的化合物。
[0021] 在本发明的一个方面中，式（I)的化合物是游离碱的形式。在本发明的另一方面 中，式(I)的化合物是药物上可接受的盐的形式。
[0022] 式（I)的化合物的盐包括药物上可接受的盐和药物上不可接受但可用于制备式 (I)的化合物及其药物上可接受的盐的盐。在本发明的一个方面中，式（I)的化合物是药物 上可接受的盐的形式。盐可衍生自某些无机或有机酸。
[0023] 盐的实例是药物上可接受的盐。药物上可接受的盐包括酸加成盐。关于合适的盐 热综诺，参化Bewe等人，J. Miarm. Sci.，66:1-19 (1977)。
[0024] 式（I)的化合物的药物上可接受的酸加成盐的实例包括无机酸，例如盐酸、氨漠 酸、正憐酸、硝酸、憐酸或硫酸，或有机酸，例如甲横酸、乙横酸、对甲苯横酸、乙酸、丙酸、乳 酸、巧樣酸、富马酸、苹果酸、班巧酸、水杨酸、马来酸、甘油憐酸、酒石酸、苯甲酸、谷氨酸、天 冬氨酸、苯横酸、糞横酸，如2-糞横酸，己酸或乙酷水杨酸。
[0025] 本发明在其范围内包括式（I)的化合物的盐的所有可能的化学计量和非化学计量 形式。
[0026] 可W使用本领域中公知的技术形成盐，例如通过从溶液中沉淀，接着过滤，或通过 溶剂的蒸发。
[0027] 通常，可W通过式(I)的化合物与合适的酸(如氨漠酸、盐酸、硫酸、马来酸、对甲苯 横酸、甲横酸、糞横酸或班巧酸)任选在合适的溶剂，如有机溶剂中反应W产生盐而形成药 物上可接受的酸加成盐，其通常例如通过结晶和过滤分离。
[0028] 要认识到，许多有机化合物可与它们在其中反应或从中沉淀或结晶的溶剂形成络 合物。运些络合物被称作"溶剂合物"。例如，与水的络合物被称作"水合物"。具有高沸点的 溶剂和/或具有高的形成氨键的倾向的溶剂，如水、乙醇、异丙醇和甲基化咯烧酬可用于 形成溶剂合物。识别溶剂合物的方法包括，但不限于，NMR和微量分析。式（I)的化合物的溶 剂合物在本发明的范围内。本文所用的术语溶剂合物包括游离碱化合物及其任何盐的溶剂 合物。
[0029] 本发明的某些化合物可含有手性原子，且因此可W-种或多种立体异构形式存 在。本发明包括本发明的化合物的所有立体异构体，包括旋光异构体，无论作为独立立体异 构体还是作为它们的混合物，包括外消旋变体。任何立体异构体可含有少于10重量％，例如 少于5重量%或少于0.5重量％的任何其它立体异构体。例如，任何旋光异构体可含有少于10 重量％，例如少于5重量%或少于0.5重量%的其对映体。
[0030] 本发明的某些化合物可W互变异构形式存在。要理解的是，本发明包括本发明的 化合物的所有互变异构体，无论作为独立互变异构体还是作为它们的混合物。
[0031] 本发明的化合物可W为结晶或无定形形式。此外，本发明的化合物的一些晶形可 作为多晶型物存在，运些都包括在本发明的范围内。本发明的化合物的最热力学稳定的一 种或多种多晶型形式特别受关注。
[0032] 本发明的化合物的多晶型形式可W使用许多常规分析技术表征和区分，所述分析 技术包括但不限于X-射线粉末衍射(XRPD)、红外光谱（IR)、拉曼光谱、差示扫描量热法 (DSC)、热重分析(TGA)和固态核磁共振(ssNMR)。
[0033] 本发明还包括式（I)的化合物或其药物上可接受的盐的所有合适的同位素变体。 式(I)的化合物或其药物上可接受的盐的同位素变体是指其中至少一个原子被具有相同原 子序数但具有与自然界中通常发现的原子质量不同的原子质量的原子替代。可并入本发明 的化合物中的同位素的实例包括氨、碳、氮、氧、氣和氯的同位素，分别例如2H、化、1化、1化、 1^、17〇、18〇、1中和3吃1。式（1)的化合物或其盐或溶剂合物的某些同位素变体，例如其中并入 放射性同位素，如化或1化的那些，可用于药物和/或底物组织分布研究。氣化(即3H)和碳-14 (即14C)同位素由于它们易于制备和检测而特别优选。此外，被気（即2h)之类的同位素取代 可提供由更大的代谢稳定性带来的某些治疗优点，例如提高的体内半衰期或降低的剂量要 求，并因此在一些情况下可优选。式（I)的化合物或其药物上可接受的盐的同位素变体通常 可通过常规程序，如通过示例性方法或通过下文的实施例中描述的制备、使用合适的试剂 的适当同位素变体制备。
[0034] 将从上文认识到，式（I)的化合物及其盐和溶剂合物的溶剂合物、水合物、异构体 和多晶型形式包括在本发明的范围内。
[00对化合物制备 式(I)的化合物及其盐可通过下述方法制备，其构成本发明的进一步方面。
[0036]因此，提供式(I)的化合物或其盐的制备方法：
其中Ri、R2和η如上定义的，所述方法包括式(II)的化合物的脱保护：
其中Ri、R2和η如上文对式（I)的化合物所定义，且PG是保护基，如节氧基甲基(BOM)或 对甲苯横酷基，且此后，如果需要，制备式(I)的化合物的盐。
[0037] 例如，将其中PG相当于B0M的式(II)的化合物溶解在合适的溶剂，例如甲醇或乙醇 中，并在合适的流动氨化装置，如化ales H-cube ?中，在合适的溫度，例如20-60°C下，在氨 气存在下经过合适的催化剂，例如10%钮碳。通过除去溶剂和视需要提纯分离产物(I)。
[0038] 式(II)的化合物可通过式(III)的化合物与氨气在催化剂存在下的反应制备：
其中Ri、R2和η如上文对式(II)的化合物所定义的，且PG是保护基。
[0039] 例如，将式（III)的化合物溶解在合适的溶剂，例如甲醇或乙醇中，并在合适的流 动氨化装置，如化ales H-Cube ?中，在合适的溫度，例如20-60°C下，在氨气存在下经过合 适的催化剂，例如10%钮碳。通过除去溶剂和视需要提纯分离产物(II)。
[0040] 当保护基是节氧基甲基(B0M)时，还原烘的反应可导致同时除去该保护基W直接 提供式(I)的化合物。
[0041] 式(III)的化合物可通过式(IV)的化合物与式(V)的化合物的反应制备：
其中Y是离去基团，例如面素，如舰或漠，或烷基横酸根，如Ξ氣甲横酸根，且PG是保护 基，
其中Ri、R2和η如对式(I)的化合物所定义的。
[0042] 例如，在舰化铜（I )、合适的催化剂，例如双(Ξ苯基麟)二氯化钮（II)和合适的碱， 例如Ξ乙胺存在下，将式(IV)的化合物和式(V)的化合物溶解在合适的溶剂，例如W，W -二 甲基甲酯胺中，并在合适的溫度，例如20-55°C下加热合适的时间，例如0.5-17小时。在水性 后处理和提纯后分离产物（III)。
[0043] 式(V)的化合物可通过式(VI)的化合物与式(VII)的化合物的反应制备：
其中η如对式（I)的化合物所定义的，且X是离去基团，如面素，例如氯、漠或舰，或烷基 横酸根，如对甲苯横酸根，
其中Ri和R2如对式(I)的化合物所定义的。
[0044] 例如，将式(VI)的化合物和式(VII)的化合物和合适的碱，例如碳酸氨钢溶解在合 适的溶剂，例如WW -二甲基甲酯胺中，并在合适的溫度，例如80-100°C下加热合适的时 间，例如16-18小时。在水性后处理和提纯后分离产物(V)，例如通过合适的结晶盐，例如草 酸盐的分离。
[0045] 式(VI)和式(VII)的化合物可商业购得或可通过文献中描述的方法制备。
[0046] 或者，式（III)的化合物可通过式(VIII)的化合物与式(VII)的化合物的反应制 备：
其中η如上文对式(I)的化合物所定义的，X是如对式(VI)的化合物所定义的离去基团， 且PG是保护基。
[0047] 例如，将式(VIII)的化合物、式(VII)的化合物和合适的碱，例如Ξ乙胺溶解在合 适的溶剂，例如乙腊中并在合适的溫度，例如60-80°C下加热合适的时间，例如16-26小时。 在水性后处理和提纯后分离产物(III)。
[0048] 式(VIII)的化合物可通过式（IV)的化合物与式(VI)的化合物的反应制备。例如， 在舰化铜（I)、合适的催化剂，例如双(Ξ苯基麟)二氯化钮（II)和合适的碱，例如Ξ乙胺存 在下，将式（IV)的化合物和式(VI)的化合物溶解在合适的溶剂，例如W，W -二甲基甲酯胺 中，并在合适的溫度，例如65°C下加热合适的时间，例如18-20小时。在水性后处理和提纯后 分离产物(VIII)。
[0049] 式(IV)的化合物可通过式(IX)的化合物与氨溶液的反应制备：
其中Υ如对式(IV)的化合物所定义的，且PG是保护基。
[0050] 例如，将氨水溶液(0.88)添加到式（IX)的化合物在合适的溶剂，例如异丙醇中的 溶液中。然后将所得混合物在微波加热器中在合适的溫度，例如120-150°C下加热合适的时 间，例如1-2小时。在水性后处理和提纯后分离产物(IV)。
[0051] 式(IX)的化合物可通过式(X)的化合物与式(XI)的化合物的反应制备：
其中Y如对式(IV)的化合物所定义的，
其中式(XI)的化合物是保护基PG的合适的前体，例如苄基氯甲基酸。
[0052] 例如，用合适的碱，例如氨化钢的油悬浮液处理在合适的溶剂，例如W，W -二甲基 甲酯胺或四氨巧喃中的式(X)的化合物。加入式(XI)的化合物，例如苄基氯甲基酸并将反应 混合物在合适的溫度，例如20°C下揽拌合适的时间，例如1-4小时。在水性后处理和提纯后 分离产物(IX)。
[0053] 式(X)的化合物可通过式(XII)的化合物与面化剂，例如W -舰代班巧酷亚胺的反 应制备：
[0054] 例如，将式(XII)的化合物溶解在合适的溶剂，例如四氨巧喃中，在合适的溫度，例 如20°C下与W -舰代班巧酷亚胺反应合适的时间，例如1-2小时。在水性后处理和提纯后分 离产物(X)。
[0055] 式(XII)的化合物可通过式(XIII)的化合物与氯化剂，例如Ξ氯氧化憐的反应制 备：
[0056] 例如，将式(XIII)的化合物悬浮在Ξ氯氧化憐中并在合适的溫度，例如90-120°C 下加热合适的时间，例如3-30小时。可W在真空中除去过量的Ξ氯氧化憐，然后将残留物倒 在冰上并将该混合物的pH调节至7-9。然后将产物萃取到合适的有机溶剂，例如乙酸乙醋 中。通过除去溶剂和视需要提纯分离产物(XIII)。
[0057]式(XIII)的化合物可通过式(XIV)的化合物与合适的碱，例如氨氧化钢的反应制 备：
[005引例如，用氨氧化钢水溶液处理式(XIV)的化合物在合适的溶剂，例如乙醇中的溶 液，并将反应混合物在合适的溫度，例如80-100°C下揽拌合适的时间，例如2 - 18小时。在 水性后处理和提纯后分离产物(XIII)。
[0059] 式(XIV)的化合物可通过式(XV)的化合物与乙腊的反应制备：
[0060] 例如，用氯化氨在合适的溶剂中的溶液，例如氯化氨在1,4-二氧杂环己烧中的溶 液处理式(XV)的化合物在乙腊中的悬浮液并在合适的溫度50-70°C下加热合适的时间，例 如16-96小时。在过滤后分离产物(XIV)。
[0061 ]式（￥1)、（￥11)、（乂1)和^￥)的化合物是文献中已知的或可商购自例如公^>扭3- ^c/ricA，細，或可^用已知程序，例如合成方法的标准参考文本，如/. #arcA， Organic Chemistry,第6版（2007), Wi leyB la ckwe 11或 Comprehensive Organic Synthesis (Trost B.M.和Fleming I.,化ds. ), Pergamon Press, 1991K容赵殖往弓\访 并入本文，因为其设及运样的程序）中公开的那些类推制备。
[0062] 可用于本文所述的合成路径的其它保护基及其除去方法的实例可见于Γ. r. Greene 'Protective Groups in Organic Synthesis 第4版,J. Wiley and Sons, 口口 6,通过引用并入本文，因为其设及运样的程序。
[0063] 对于任何上述反应或方法，可W使用常规加热和冷却方法，分别例如调溫油浴或 调溫热块，和冰/盐浴或干冰/丙酬浴。可W使用常规分离方法，例如从或向水性或非水性溶 剂中萃取。可W使用干燥有机溶剂、溶液或萃取物的常规方法，如与无水硫酸儀或无水硫酸 钢一起摇振或经过疏水玻璃料。可W按需要使用常规提纯方法，例如结晶和色谱法，例如二 氧化娃色谱法或反相色谱法。可W使用常规溶剂，如乙酸乙醋、甲醇、乙醇或下醇或它们的 水性混合物进行结晶。要认识到，通常可通过反应监测技术，例如薄层色谱法和LC-MS确定 具体反应时间溫度。
[0064] 如果适当，可W使用常规程序，如非对映异构体衍生物的分级结晶或手性高效液 相色谱法(手性HPLC)作为独立异构体制备本发明的化合物的独立异构形式。
[0065] 可W使用常规方法，如X-射线晶体学测定化合物的绝对立体化学。
[0066] 使用方法 式(I)的化合物及其药物上可接受的盐在其中具有潜在有益作用的病状的实例包括过 敏性疾病和其它炎性状况，例如过敏性鼻炎和哮喘、传染病和癌症。式（I)的化合物及其药 物上可接受的盐也有可能用作疫苗佐剂。
[0067] 作为免疫应答调节剂，式（I)的化合物及其药物上可接受的盐也可用于治疗和/或 预防免疫介导障碍，包括但不限于炎性或过敏性疾病，如哮喘、过敏性鼻炎和结膜炎、食物 过敏、超敏性肺病、嗜酸性细胞肺炎、迟发型超敏障碍、动脉粥样硬化、膜腺炎、胃炎、结肠 炎、骨关节炎、牛皮癖、肉状瘤病(sarcoidosis)、肺纤维化、呼吸窘迫综合征、细支气管炎、 慢性阻塞性肺病、鼻窦炎、囊性纤维化、光化性角化病、皮肤异生、慢性等麻疹、湿疹和所有 类型的皮炎。
[0068] 式（I)的化合物及其药物上可接受的盐也可用于治疗和/或预防对呼吸道感染的 反应，包括但不限于呼吸道病毒恶化和扁桃体炎。该化合物也可用于治疗和/或预防自身免 疫病，包括但不限于类风湿性关节炎、银屑病关节炎、全身性红斑狼疮、Sjeegrens病、强直 性脊柱炎、硬皮病、皮肌炎、糖尿病、移植物排斥，包括移植物抗宿主病、炎性肠病，包括但不 限于克罗恩氏病和溃瘍性结肠炎。
[0069] 式（I)的化合物及其药物上可接受的盐也可用于治疗或预防传染病，包括但不限 于由肝炎病毒(例如乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒）、人类免疫缺陷病毒、乳头状瘤病毒、瘤 疹病毒、呼吸道病毒（例如流感病毒、呼吸道合胞体病毒、鼻病毒、偏肺病毒、副流感病毒、 SARS)和西尼罗河病毒造成的那些。式（I)的化合物及其药物上可接受的盐也可用于治疗或 预防由例如细菌、真菌或原生动物造成的微生物感染。运些包括，但不限于，结核、细菌性肺 炎、曲霉病、组织胞浆菌病、念珠菌病、肺囊虫病、麻风病、衣原体病、隐球菌病、隐抱子虫病、 弓形体病、利什曼原虫病、追疾和锥虫病。
[0070] 式（I)的化合物及其药物上可接受的盐也可用于治疗或预防各种癌症，特别是治 疗或预防已知响应免疫疗法的癌症，且包括但不限于肾细胞癌、肺癌、乳腺癌、结肠直肠癌、 膀脫癌、黑素瘤、白血病、淋己瘤和卵巢癌。
[0071] 本领域技术人员会认识到，在本文中提到的治疗是指治疗既有状况。但是，根据情 况，式（I)的化合物及其药物上可接受的盐也可用于预防某些疾病。因此，在一个实施方案 中，提供疾病的治疗或预防。在另一实施方案中，提供疾病的治疗。在另一实施方案中，提供 疾病的预防。
[0072] 因此作为本发明的另一方面提供用于疗法的式（I)的化合物或其药物上可接受的 丈h πττ. ο
[0073] 要认识到，当式（I)的化合物或其药物上可接受的盐用于疗法时，其用作活性治疗 剂。
[0074] 因此还提供用于治疗或预防过敏性疾病和其它炎性状况、传染病和癌症的式（I) 的化合物或其药物上可接受的盐。
[0075] 因此还提供用于治疗或预防过敏性鼻炎的式（I)的化合物或其药物上可接受的 ±h ΠΤΤ. ο
[0076] 因此还提供用于治疗或预防哮喘的式(I)的化合物或其药物上可接受的盐。
[0077] 进一步提供式（I)的化合物或其药物上可接受的盐在制造用于治疗或预防过敏性 疾病和其它炎性状况、传染病和癌症的药物中的用途。
[0078] 进一步提供式（I)的化合物或其药物上可接受的盐在制造用于治疗或预防过敏性 鼻炎的药物中的用途。
[0079] 进一步提供式（I)的化合物或其药物上可接受的盐在制造用于治疗或预防哮喘的 药物中的用途。
[0080] 进一步提供治疗或预防过敏性疾病和其它炎性状况、传染病和癌症的方法，所述 方法包括将治疗有效量的式(I)的化合物或其药物上可接受的盐给药至有此需要的人类对 象。
[0081] 进一步提供治疗或预防过敏性鼻炎的方法，所述方法包括将治疗有效量的式（I) 的化合物或其药物上可接受的盐给药至有此需要的人类对象。
[0082] 进一步提供治疗或预防哮喘的方法，所述方法包括将治疗有效量的式（I)的化合 物或其药物上可接受的盐给药至有此需要的人类对象。
[0083] 式(I)的化合物及其药物上可接受的盐也有可能用作疫苗佐剂。
[0084] 因此作为本发明的另一方面提供用于疗法的包含式(I)的化合物或其药物上可接 受的盐和抗原或抗原组合物的疫苗组合物。
[0085] 因此作为本发明的另一方面提供式(I)的化合物或其药物上可接受的盐和抗原或 抗原组合物在制造用于疗法的药物中的用途。
[0086] 进一步提供治疗或预防疾病的方法，其包括将包含式（I)的化合物或其药物上可 接受的盐和抗原或抗原组合物的疫苗组合物给药至患有或易患疾病的人类对象。
[0087] 组合物 通常，但不是必须在给药至患者前将式（I)的化合物及其药物上可接受的盐配制成药 物组合物。因此，在本发明的另一方面中，提供包含式（I)的化合物或其药物上可接受的盐 和一种或多种药物上可接受的赋形剂的药物组合物。
[0088] 式（I)的化合物及其药物上可接受的盐可W配制用于W任何方便的方式给药。式 (I)的化合物及其药物上可接受的盐可W例如配制用于口服、局部、吸入、鼻内、口腔含化、 肠胃外(例如静脉、皮下、皮内或肌肉内）或直肠给药。在一方面，式(I)的化合物及其药物上 可接受的盐配制用于口服给药。在另一方面，式（I)的化合物及其药物上可接受的盐配制用 于局部给药，例如鼻内或吸入给药。
[0089] 用于口服给药的片剂和胶囊可含有常规赋形剂，如粘合剂，例如糖浆、阿拉伯树 胶、明胶、山梨糖醇、黄著胶、淀粉粘胶、纤维素或聚乙締化咯烧酬;填料，例如乳糖、微晶纤 维素、糖、玉米淀粉、憐酸巧或山梨糖醇；润滑剂，例如硬脂酸儀、硬脂酸、滑石、聚乙二醇或 二氧化娃;崩解剂，例如马铃馨淀粉、交联簇甲基纤维素钢或淀粉乙醇酸钢;或润湿剂，如十 二烷基硫酸钢。可根据本领域中公知的方法包衣该片剂。
[0090] 口服液体制剂可W是例如水性或油性悬浮液、溶液、乳剂、糖浆或馳剂的形式，或 可W呈现为在使用前用水或其它合适的载体构造的干燥产品。运样的液体制剂可含有常规 添加剂，如悬浮剂，例如山梨糖醇糖浆、甲基纤维素、葡萄糖/糖糖浆、明胶、径甲基纤维素、 簇甲基纤维素、硬脂酸侣凝胶或氨化食用脂肪;乳化剂，例如卵憐脂、脱水山梨糖醇单油酸 醋或阿拉伯树胶;非水性载体(其可包括食用油），例如杏仁油、分馈挪子油、油醋、丙二醇或 乙醇;或防腐剂，例如对径基苯甲酸甲醋或丙醋或山梨酸。该制剂还可酌情含有缓冲盐、调 味剂、着色剂和/或甜味剂(例如甘露醇）。
[0091] 用于鼻内给药的组合物包括通过滴剂或通过加压累向鼻给药的水性组合物。合适 的组合物含有水作为用于此用途的稀释剂或载体。向肺或鼻给药的组合物可含有一种或多 种赋形剂，例如一种或多种悬浮剂、一种或多种防腐剂、一种或多种表面活性剂、一种或多 种张力调节剂、一种或多种助溶剂并可包含控制该组合物的pH的组分，例如缓冲体系。此 夕h该组合物可含有其它赋形剂，如抗氧化剂，例如焦亚硫酸钢，和掩味剂。该组合物也可通 过雾化向鼻或呼吸道的其它区域给药。
[0092] 鼻内组合物可允许将一种或多种式(I)的化合物或其一种或多种药物上可接受的 盐递送至鼻腔的所有区域(祀组织)并进一步可允许一种或多种式(I)的化合物或其一种或 多种药物上可接受的盐与祀组织保持接触更长时间。鼻内组合物的合适剂量方案将是让患 者在清理鼻腔后经鼻缓慢吸入。在吸入过程中，在用手压紧另一鼻孔的同时向一个鼻孔给 药组合物。然后对另一鼻孔重复运一程序。通常，每日一次、两次或Ξ次，理想地每日一次通 过上述程序向每个鼻孔1或2次喷雾给药。适合每日一次给药的鼻内组合物特别受关注。
[0093] 如果包含一种或多种悬浮剂，其通常将W基于该组合物总重量的0.1至5% (w/w)， 如1.5%至2.4% (w/w)的量存在。药物上可接受的悬浮剂的实例包括，但不限于，Avicel?(微 晶纤维素和簇甲基纤维素钢）、簇甲基纤维素钢、娃酸儀侣(veegum)、黄著胶、膨润±、甲基 纤维素、黄原胶、卡波姆和聚乙二醇。
[0094] 用于向肺或鼻给药的组合物可含有一种或多种赋形剂，可通过包含一种或多种防 腐剂防止微生物或真菌污染和生长。药物上可接受的抗微生物剂或防腐剂的实例包括，但 不限于，季锭化合物(例如苯扎氯锭、节索氯锭、漠栋Ξ甲锭、西化氯锭、劳拉氯锭和咪化氯 锭(myristyl picolinium chloride))、隶剂(例如硝酸苯隶、醋酸苯隶和硫柳隶）、醇剂(例 如氯下醇、苯乙醇和节醇）、抗菌醋（例如对径基苯甲酸的醋）、馨合剂，如乙二胺四乙酸二钢 (EDTA)和其它抗微生物剂，如氯己定、氯甲酪、山梨酸及其盐(如山梨酸钟)和多粘菌素。药 物上可接受的抗真菌剂或防腐剂的实例包括，但不限于，苯甲酸钢、山梨酸、丙酸钢、对径基 苯甲酸甲醋、对径基苯甲酸乙醋、对径基苯甲酸丙醋和对径基苯甲酸下醋。如果包含一种或 多种防腐剂，其可W W基于该组合物总重量的0.001至1% (w/w)，如0.015%至0.5% (w/w)的 量存在。
[00M]组合物(例如其中至少一种化合物在悬浮液中）可包含一种或多种用于促进药物 粒子溶解在该组合物的水相中的表面活性剂。例如，所用表面活性剂的量是在混合过程中 不会造成发泡的量。药物上可接受的表面活性剂的实例包括脂肪醇、醋和酸，如聚氧乙締 (20)脱水山梨糖醇单油酸醋(聚山梨醇醋80)、聚乙二醇酸(macrogol ethers)和泊洛沙姆。 表面活性剂可W W基于该组合物总重量的大约0.01至10% (w/w)，如0.01至0.75% (w/w)， 例如大约0.5% (w/w)的量存在。
[0096] 可W包含一种或多种张力调节剂W达到与体液，例如鼻腔液的张力，从而降低刺 激水平。药物上可接受的张力调节剂的实例包括，但不限于，氯化钢、右旋糖、木糖醇、氯化 巧、葡萄糖、甘油和山梨糖醇。如果存在张力调节剂，其可基于该组合物总重量的0.1至 10〇/〇(>/\￥)，如4.5至5.5%(>/\￥)，例如大约5.0%(>/\￥)的量包含。
[0097] 本发明的组合物可W通过添加合适的缓冲剂，如巧樣酸钢、巧樣酸、氨基下Ξ醇、 憐酸盐，如憐酸二钢(例如十二水合物、屯水合物、二水合物和无水形式)或憐酸钢及其混合 物缓冲。
[009引如果存在缓冲剂，其可基于该组合物总重量的0.1至5% (w/w)，例如1至3% (w/w)的量包含。
[0099] 掩味剂的实例包括Ξ氯薦糖、薦糖、糖精或其盐、果糖、右旋糖、甘油、玉米淀粉、阿 斯己甜、安赛蜜-Κ、木糖醇、山梨糖醇、赤薛糖醇、甘草酸锭、奇甜蛋白、纽甜、甘露醇、薄荷 醇、按叶油、精脑、天然调味剂、人工调味剂及其组合。
[0100] 可W包含一种或多种助溶剂W助于溶解一种或多种药物化合物和/或其它赋形 剂。药物上可接受的助溶剂的实例包括，但不限于，丙二醇、二丙二醇、乙二醇、甘油、乙醇、 聚乙二醇(例如PEG300或PEG400)和甲醇。在一个实施方案中，该助溶剂是丙二醇。
[0101] 如果存在一种或多种助溶剂，其可基于该组合物总重量的0.05至30% (w/w)， 如1至25% (w/w)，例如1至10% (w/w)的量包含。
[0102] 用于吸入给药的组合物包括通过加压累或吸入器，例如储器型（reservoir)干粉 吸入器、单位剂量干粉吸入器、预计量式多剂量干粉吸入器、鼻吸入器或加压气雾剂吸入 器、雾化器或吹入器给药至呼吸道的水性、有机或水性/有机混合物、干粉或结晶组合物。合 适的组合物含有水作为用于此用途的稀释剂或载体并可W具有常规赋形剂，如缓冲剂、张 力改性剂等。水性组合物也可通过雾化给药至鼻和呼吸道的其它区域。运样的组合物可W 是借助合适的液化抛射剂从加压包，如定量吸入器递送的水性溶液或悬浮液或气雾剂。
[0103] 用于局部给药至鼻（例如用于治疗鼻炎）或肺的组合物包括通过加压累递送至鼻 腔的加压气雾剂组合物和水性组合物。非加压并适合局部给药至鼻腔的组合物特别受关 注。合适的组合物含有水作为用于此用途的稀释剂或载体。向肺或鼻给药的水性组合物可 W具有常规赋形剂，如缓冲剂、张力改性剂等。也可通过雾化向鼻给药水性组合物。
[0104] 通常可W使用流体分配器向鼻腔递送流体组合物。该流体组合物可W是水性或非 水性的，但通常是水性的。式（I)的化合物或其药物上可接受的盐可配制为悬浮液或溶液。 运样的流体分配器可具有分配喷嘴或分配孔，在施加使用者向流体分配器的累机构施力时 经其分配计量剂量的流体组合物。运样的流体分配器通常具有多个计量剂量的流体组合物 的储器，可在相继累驱动时分配剂量。或者，用于向鼻腔递送流体组合物的流体分配器可W 设计成限定剂量的，例如包含单剂量的一次性分配器。分配喷嘴或孔可配置成插入使用者 鼻孔内W将该流体组合物喷雾分配到鼻腔中。上述类型的流体分配器描述和例示在国际专 利申请公开W0 2005/044354(Glaxo Group Limited)中。该分配器具有外壳，其容纳具有安 装在用于容纳流体组合物的容器上的压缩累的流体排出装置。该外壳具有至少一个可用手 指操作的侧杆，其可相对于外壳向内移动W借助凸轮在外壳中向上移动容器W使累压缩并 经由外壳的鼻喷嘴从累杆中累出计量剂量的组合物。在一个实施方案中，该流体分配器具 有W0 2005/044354的图30-40中图示说明的一般类型。
[0105] 含有式(I)的化合物或其药物上可接受的盐的水性组合物也可W通过如国际专利 申请公开W02007/138084化laxo Group Limited)中公开的，例如如参照其图22-46公开的， 或如英国专利申请GB0723418.0(Glaxo Group Limited)中公开的，例如如参照其图7-32公 开的累递送。该累可通过如GB0723418.0的图1-6中公开的执行器驱动。
[0106] 通过吸入局部递送至肺的干粉组合物可W例如存在于例如明胶的胶囊和盒或例 如层压侣锥的泡罩包装中，W用于吸入器或吹入器。粉末渗和组合物通常含有式（I)的化合 物或其药物上可接受的盐和合适的粉末基料(载体/稀释剂/赋形剂物质），如单-、二-或多 糖(例如乳糖或淀粉)的吸入粉末混合物。干粉组合物除药物和载体外还可包含其它赋形剂 (例如Ξ元合剂，如糖醋，例如纤维二糖八乙酸醋、硬脂酸巧或硬脂酸儀。
[0107] 在一个实施方案中，适合吸入给药的组合物可并入在安装在合适的吸入装置内的 一个或多个药品包装上提供的多个密封剂量容器中。如本领域中已知的，该容器可W-次 一个地破裂、剥开或W其它方式打开并通过在吸入装置的管嘴上吸入给药干粉组合物的剂 量。该药品包装可采取许多不同形式，例如圆盘形或细长条。代表性的吸入装置是 GlaxoSmitWaine出售的DISKHALER ? 和DISKUS?装置。
[0108] 干粉可吸入组合物也可W大量储备在吸入装置中，该装置随之具有计量机构W从 该储器向吸入通道计量出一定剂量的组合物，其中在该装置的管嘴处吸气的患者能够吸入 该计量的剂量。运种类型的示例性市售装置是TURBUHALER ? (AstraZeneca)、TWISTHALER ? (Schering)和化ICKHAL邸 ? (Innovata)。
[0109] 干粉可吸入组合物的另一递送方法是在胶囊中提供计量剂量的组合物(每个胶囊 一剂），然后通常由患者按需要置于吸入装置中。该装置具有破裂、刺穿或W其它方式打开 胶囊的手段W便患者在装置管嘴处吸气时能将该剂量携带到患者肺中。作为运样的装置的 市售实例，可 W提到R0TAHALER ? (GlaxoSmithKline)和HANDIHALER ? (Boehringer Ingelheim)。
[0110] 适合吸入的加压气雾剂组合物可W是悬浮液或溶液并可含有式（I)的化合物或其 药物上可接受的盐和合适的抛射剂，如氣碳化合物或含氨氯氣控或其混合物，特别是氨氣 烧控，尤其是1，1，1，2-四氣乙烧、1，1，1，2，3，3，3-屯氣-正丙烷或其混合物。该气雾剂组合 物可任选含有本领域中公知的附加组合物赋形剂，如表面活性剂，例如W094/21229和W098/ 34596(Minneso1:a Mining and Manufacturing Company)中描述的例如油酸、卵憐脂或低 聚乳酸或其衍生物，和助溶剂，例如乙醇。加压组合物通常将装在用阀（例如计量阀）密封并 组装到具有管嘴的执行器中的罐子(例如侣罐)中。
[0111] 软膏剂、霜剂和凝胶可W例如在添加合适的增稠剂和/或胶凝剂和/或溶剂的情况 下用水性或油性基料配制。运样的基料因此可W例如包括水和/或油，如液体石蜡或植物 油，如花生油或藍麻油，或溶剂，如聚乙二醇。可根据基料的性质使用的增稠剂和胶凝剂包 括软石蜡、硬脂酸侣、嫁蜡硬脂醇、聚乙二醇、羊毛脂、蜂蜡、簇聚乙締 (carboxypolymethylene)和纤维素衍生物，和/或单硬脂酸甘油醋和/或非离子乳化剂。
[0112] 乳液可W用水性或油性基料配制并通常将还含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分 散剂、悬浮剂或增稠剂。
[0113] 外用粉剂可W借助任何合适的粉末基料，例如滑石、乳糖或淀粉形成。滴剂可W用 水性或非水性基料配制，其还包含一种或多种分散剂、增溶剂、悬浮剂或防腐剂。
[0114] 式（I)的化合物及其药物上可接受的盐可W例如配制用于将组合物经皮递送到贴 剂或向皮肤递送活性组分的其它装置(例如加压气体装置)中。
[0115] 对于口腔含化给药，该组合物可W采取W常规方式配制的片剂或锭剂的形式。
[0116] 式(I)的化合物及其药物上可接受的盐也可配制为栓剂，例如含有常规栓剂基料， 如可可脂或其它甘油醋。
[0117] 式（I)的化合物及其药物上可接受的盐也可配制用于通过推注（bolus inject ion)或连续输注肠胃外给药，并可表现为单位剂量形式，例如作为安飯、小瓶、小容 量输液剂或预装填注射器，或在含有添加的防腐剂的多剂量容器中。该组合物可W采取如 在水性或非水性载体中的溶液、悬浮液或乳剂之类的形式，并可含有配制剂，如抗氧化剂、 缓冲剂、抗微生物剂和/或张力调节剂。或者，该活性成分可W是在使用前用合适的载体，例 如无菌无热原水构造的粉末形式。可通过将无菌粉末无菌填充到独立无菌容器中或通过将 无菌溶液无菌填充到各容器中并冷冻干燥来制备干固体呈现形式。
[0118] 式(I)的化合物及其药物上可接受的盐也可作为佐剂与疫苗一起配制W调节它们 的活性。运样的组合物可含有一种或多种抗体或一种或多种抗体片段或抗原组分，包括但 不限于蛋白质、DNA、活或死细菌和/或病毒或病毒样颗粒，W及一种或多种具有佐剂活性的 组分，包括但不限于侣盐、油和水乳剂、热休克蛋白、脂质A制剂和衍生物、糖脂、其它化R激 动剂，如CpG DNA或类似试剂，细胞因子，如GM-CSF或比-12或类似试剂。
[0119] 在本发明的进一步方面中，提供包含式（I)的化合物或其药物上可接受的盐的疫 苗佐剂。
[0120] 进一步提供包含式(I)的化合物或其药物上可接受的盐和抗原或抗原组合物的疫 苗组合物。
[0121] 式（I)的化合物及其药物上可接受的盐可W单独或与其它治疗活性剂组合使用。 本发明在进一步方面中提供包含式（I)的化合物或其药物上可接受的盐W及至少一种其它 治疗活性剂的组合。
[0122] 式(I)的化合物及其药物上可接受的盐和其它一种或多种治疗活性剂可W-起或 分开给药，并在分开给药时，给药可W同时或W任何顺序相继进行发生。将选择一种或多种 式(I)的化合物或其一种或多种药物上可接受的盐和其它一种或多种治疗活性剂的量和给 药的相对时间安排W实现所需的联合治疗效果。式（I)的化合物或其药物上可接受的盐与 其它治疗剂的组合的给药可W通过在包含运两种化合物的单一药物组合物或各自包含化 合物之一的分开的药物组合物中同时给药。或者，该组合可W分开W相继方式给药，其中一 种治疗剂先给药，接着是另一种，或反之亦然。运样的相继给药可W在时间上接近或在时间 上远离。
[0123] 式（I)的化合物及其药物上可接受的盐可W与一种或多种可用于预防或治疗病毒 感染的试剂组合使用。运样的试剂的实例包括但不限于：聚合酶抑制剂，如W0 2004/ 037818-A1 中公开的那些W及W0 2004/037818和W0 2006/045613中公开的那些;JTK-003、 111(-019、醒-283、肥￥-796、1?-803、1?1728、1?1626^及胖0 2006/018725、胖0 2004/074270、胖0 2003/095441、US2005/0176701、W0 2006/020082、W0 2005/080388、W0 2004/064925、W0 2004/065367、W0 2003/007945、W0 02/04425、W0 2005/014543、W0 2003/000254、EP 1065213、W0 01/47883、W0 2002/057287、W0 2002/057245中公开的那些和类似试剂;复制 抑制剂，如阿昔洛韦、泛昔洛韦、更昔洛韦、西多福韦、拉米夫定和类似试剂;蛋白酶抑制剂， 如HIV蛋白酶抑制剂沙奎那韦、利托那韦、巧地那韦、奈非那韦、安普那韦、福沙那韦、 brecanavir、阿扎那韦、替拉那韦、帕利那韦、拉西那韦和HCV蛋白酶抑制剂BILN206UVX- 950、SC册03034;和类似试剂;核巧和核巧酸逆转录酶抑制剂，如齐多夫定、地达诺新、拉米 夫定、扎西他滨、阿己卡韦、司他夫定、阿德福韦、阿德福韦醋、福齐夫定（fozivudine)、 todoxil、恩曲他滨、阿洛夫定、氨多索韦(amdoxovi;r)、elvuc;Uabine和类似试剂;非核巧逆 转录酶抑制剂(包括具有抗氧化活性的试剂，如怡妙康（immunocal)、奥替普拉等），如奈韦 拉平、地拉韦定、依法韦仑、洛韦胺、怡妙康、奥替普拉、卡普韦林、TMC-278、TMC-125、依曲韦 林和类似试剂；进入（ent巧）抑制剂，如恩夫韦地（1'-20)、1'-1249、？1?0-542、？1?0-140、了版- 355、BMS-806、5-化1 ix和类似试剂;整合酶抑制剂，如心870、180和类似试剂;芽殖抑制剂， 如PA-344和PA-457和类似试剂；趋化因子受体抑制剂，如vicriviroc(Sch-C)、Sch-D、 了八1(779、马拉维若（1]1(-427,857)、了41(449^及胖0 02/74769、胖0 2004/054974、胖0 2004/ 055012、W0 2004/055010、W0 2004/055016、W0 2004/055011 和WO 2004/054581 中公开的那 些和类似试剂;神经氨酸巧酶抑制剂，如CS-8958、扎那米韦、奥司他韦、帕拉米韦和类似试 剂;离子通道阻滞剂，如金刚烧胺或金刚乙胺和类似试剂;和干扰RNA和反义寡核巧酸和如 ISIS-14803和类似试剂；作用机制待定的抗病毒剂，例如WO 2005/105761、WO 2003/ 085375、W0 2006/122011中公开的那些、利己韦林和类似试剂。式（I)的化合物及其药物上 可接受的盐也可W与一种或多种可用于预防或治疗病毒感染的其它试剂，例如免疫疗法 (例如干扰素或其它细胞因子/趋化因子、细胞因子/趋化因子受体调节剂、细胞因子激动剂 或括抗剂和类似试剂）;和治疗性疫苗、抗纤维化剂、抗炎剂，如皮质类固醇或NSAID(非酱族 抗炎剂)和类似试剂组合使用。
[0124] 式（I)的化合物及其药物上可接受的盐可W与一种或多种可用于预防或治疗过敏 性疾病、炎性疾病、自身免疫病的其它试剂，例如抗原免疫疗法、抗组织胺、类固醇、NSAID、 支气管扩张剂(例如的激动剂、肾上腺素能激动剂、抗胆碱能剂、茶碱）、氨甲蝶岭、白Ξ締调 节剂和类似试剂;单克隆抗体疗法，如抗-I巧、抗-TNF、抗-化-5、抗-比-6、抗-化-12、抗-比- 1和类似试剂;受体疗法，例如依那西普和类似试剂;抗原非特异性免疫疗法(例如干扰素或 其它细胞因子/趋化因子、细胞因子/趋化因子受体调节剂、细胞因子激动剂或括抗剂、TLR 激动剂和类似试剂)组合使用。
[0125] 式（I)的化合物及其药物上可接受的盐可W与一种或多种可用于预防或治疗癌症 的其它试剂，例如化疗药物，如烷基化剂、拓扑异构酶抑制剂、抗代谢物、抗有丝分裂剂、激 酶抑制剂和类似试剂;单克隆抗体疗法，如曲妥珠单抗、吉妥珠单抗和其它类似试剂;和激 素疗法，如他莫昔芬、戈舍瑞林和类似试剂组合使用。
[01%]根据本发明的药物组合物也可W单独或与至少一种其它治疗剂组合用于其它治 疗领域，例如胃肠疾病。根据本发明的组合物也可W与基因替代疗法组合使用。
[0127] 本发明在进一步方面中包括包含式(I)的化合物或其药物上可接受的盐W及至少 一种其它治疗活性剂的组合。
[0128] 上文提到的组合可方便地W药物组合物的形式供给使用，因此包含如上定义的组 合W及至少一种药物上可接受的稀释剂或载体的药物组合物代表本发明的另一方面。
[0129] 式(I)的化合物或其药物上可接受的盐的治疗有效量将取决于许多因素。例如，接 受者的物种、年龄和体重、需要治疗的确切状况及其严重程度、该组合物的性质和给药途径 都是要考虑的因素。治疗有效量最终应由主治医师裁量。无论如何，用于治疗虚弱人类的本 发明的化合物的有效量通常应该在每日0.0001至100毫克/千克接受者体重的范围内。更通 常，有效量应该在每日0.001至10毫克/千克体重的范围内。因此，对于70千克成年人，每日 实际量的一个实例通常是7至700毫克。对于鼻内和吸入给药途径，用于70千克成年人的典 型剂量应该在每日0.1微克至1毫克的范围内，例如1微克、10微克或100微克。该量可每 日单剂量或每日多个（例如两个、Ξ个、四个、五个或更多个)分剂量给出W使总日剂量相 同。可作为式(I)的化合物或其药物上可接受的盐的有效量本身的比例确定式(I)的化合物 的药物上可接受的盐的有效量。类似剂量应该适合于治疗本文中提到的其它状况。
[0130] 式(I)的化合物及其药物上可接受的盐也可任何适当的频率，例如每周1-7次 给药。确切剂量方案当然取决于如治疗迹象、患者年龄和状况和所选的特定给药途径之类 的因素。在本发明的一个方面中，式(I)的化合物或其药物上可接受的盐可W每周一次给药 4至8周，例如4、5、6、7或8周。
[0131] 药物组合物可表现为每单位剂量含有预定量的活性成分的单位剂量的形式。作为 一个非限制性实例，运样的单位可根据治疗的状况、给药途径和患者年龄、体重和状况含有 0.5毫克至1克式（I)的化合物或其药物上可接受的盐。优选的单位剂量组合物是含有如上 文列举的日剂量或分剂量或其适当分数的活性成分的那些。运样的药物组合物可通过制药 行业中公知的任何方法制备。
[0132] 还提供制备运样的药物组合物的方法，其包括将式（I)的化合物或其药物上可接 受的盐与一种或多种药物上可接受的赋形剂渗和。
[0133] 参考下列实施例举例说明本发明的方面，不无论如何不受其限制。 实施例
[0134] 分析方法 iR NMR 在都在400 MHz下运行的化址er DPX 400或化址er Avance DRX, Varian Unity 400 波谱仪或巧化Delta上在CDCI3或DMSO-c/6中记录1h NMR波谱。所用内标是四甲基硅烷或 残余质子化溶剂，对〔0(：13而言为7.化卵111或对0150-^/6而言为2.50口口111。
[0135] LCMS 系统A 柱：50mm X 2.1mm ID, 1.7皿 Acquity UPLC 肥Η C18 流量：ImL/min. 溫度:40°C UV检测范围：210至350nm 质谱:在质谱仪上使用交替扫描正和负模式电喷雾电离记录 溶剂:A:0.1% v/v甲酸/水 B:0.1% v/v甲酸乙腊
[0。6」系统B
柱：50mm X 2.1mm ID, 1.7皿 Acquity UPLC 肥Η Ci8 流量：ImL/min. 溫度:40°C UV检测范围：210至350nm 质谱:在质谱仪上使用交替扫描正和负模式电喷雾电离记录 溶剂:A: lOmM碳酸氨锭/水，用氨溶液调节至pHlO B:乙腊
[0137] 质量定向自动制备型(Autopr邱arative)HPLC (MDAP) 在下文给出的条件下进行质量定向自动制备型HPLCdUV检测是来自210nm至350nm波长 的平均信号并在质谱仪上使用交替扫描正和负模式电喷雾电离记录质谱。
[0。引方法A 在Sunfire Ci8柱(通常150mm X 30mm i.d. 5皿填充直径)上在环境溫度下进行方法 A。 所用溶剂是： A = 0.1% v/v甲酸在水中的溶液 B = 0.1% v/v甲酸在乙腊中的溶液。
[0。9] 方法B 在XBridge Ci8柱(通常100mm X 30mm i.d. 5皿填充直径)上在环境溫度下进行方法 B。 所用溶剂是： A = 10 ml碳酸氨锭水溶液，用氨溶液调节至pH 10 B =乙腊。
[0140] 缩写 下列^提供本文所用的某些缩写的定义。要认识到，该列表不是穷举的，但本领域技 术人员将容易看出下文没有定义的那些缩写的含义。 DCM 二氯甲烧 DMF W，二甲基甲酯胺 DMS0 二甲亚讽 THF 四氨巧喃 化OAc 乙酸乙醋 MeOH 甲醇 化0H 乙醇 MeCN 乙腊 肥1 盐酸 HPLC 高效液相色谱法 MDAP 质量定向自动制备型HPLC SPE 固相萃取 MeOH 甲醇 TBME 叔下基甲基酸 TFA Ξ氣乙酸 DIPEA W，W-二异丙基乙胺。
[0141] 反应中间体 中间体1: 3-乙脉基(acetimidamido)-5-甲基-1"-助:咯-2-甲酸乙酯
向3-氨基-5-甲基-1W -化咯-2-甲酸乙醋（10.876克，64.7毫摩尔）在乙腊(200毫升） 中的悬浮液中加入在二氧杂环己烧中的4M肥1(81毫升，323毫摩尔）。将其在氮气气氛下在 60°C下加热4天。将反应混合物过滤W产生灰白色固体形式的标题化合物(12.738克）。
[0142] LCMS (系统B): tRET = 0.45，0.47 min;MH+ 210。
[01创 中间体2: 2,6-二甲基-3W -化咯并[3,2-c/ ]喀晚-4(5W )-酬
向3-乙脉基-5-甲基-1W -化咯-2-甲酸乙醋盐酸盐（12.7克，51.7毫摩尔)在乙醇(200 毫升）中的悬浮液中一次性加入5M化細(41.4毫升，207毫摩尔）。将其置于氮气气氛下并加 热至90°C 2小时。将反应混合物在真空中浓缩并向其中加入5%巧樣酸水溶液(200毫升)直 至中和抑。在pH 7下出现固体，将其过滤并用水洗涂^产生浅栋色固体形式的标题化合物 (6.806克）。
[0144] LCMS (系统B):tRET = 0.45 min;MH+ 164 将滤液在真空中浓缩并过滤W提供另一批标题化合物(0.5克）。
[0145] LCMS (系统B): tRET = 0.45 min;MH+ 164。
[01W 中间体3: 4-氯-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-c/ ]喀晚
在圆底烧瓶中引入2,6-二甲基-3公-化咯并[3,2-^/]喀晚-4(5公）-酬(6.15克，37.7 毫摩尔）并将其溶解在P〇Cl3(70.3毫升，754毫摩尔）中。然后将反应混合物加热至90°C 30 小时。将反应混合物在真空中蒸发W产生栋色油。将其溶解在甲苯中并再蒸发W除去该混 合物中的剩余P0C13。然后将残留物在水(50毫升）中稀释并向其中加入碳酸氨钢直至pH达 到7-8。出现白色沉淀物并过滤，然后用水洗涂。将其干燥2小时W产生白色固体形式的标题 化合物巧.617克）。
[0147] LCMS (系统B): tRET = 0.59 min;MH+ 182 / 184 将滤液在真空中浓缩、过滤、洗涂并干燥W提供另一批标题化合物(0.22克）。
[014引 LCMS (系统B): tRET = 0.59 min;MH+ 182 / 184。
[0149] 中间体4: 4-氯-7-舰-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2-c/ ]喀晚
在氮气下在室溫下向4-氯-2,6-二甲基-5^-化咯并[3,2-^/]喀晚(6.68克，36.8毫摩 尔）在四氨巧喃（100毫升）中的揽拌溶液中逐份加入W -舰代班巧酷亚胺(9.52克，42.3毫 摩尔）。将反应混合物在氮气下在室溫下揽拌1小时。然后用TBME稀释该反应混合物。将其用 硫代硫酸钢溶液（150毫升)和盐水洗涂。然后将有机层经过疏水玻璃料并在真空中浓缩。将 该样品预吸收在florosil上并在二氧化娃(750克)上使用超过11倍柱体积的0-100% TBME- 环己烧梯度提纯。合并适当的级分并在真空中蒸发W产生黄色固体形式的标题化合物 (9.854克）。
[0150] LCMS (系统A): tRET = 0.75 min;MH+ 308 / 310。
[0巧1] 中间体5: 5-((节氧基）甲基)-4-氯-7-舰-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2-t/ ]喀 些
经5分钟向用冰浴冷却的4-氯-7-舰-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2-c/ ]喀晚（1.098 克，3.57毫摩尔）在W，W -二甲基甲酯胺（25毫升）中的溶液中逐份加入氨化钢(0.286克， 7.14毫摩尔）。在添加苄基氯甲基酸(0.891毫升，6.43毫摩尔）之前将反应混合物揽拌30分 钟。将反应混合物在室溫下在氮气气氛下揽拌1小时。将该反应混合物用水巧0毫升)巧灭并 在乙酸乙醋（200毫升）和水(200毫升）之间分配。将有机层用水和盐水(200毫升)洗涂并经 过疏水玻璃料，然后在真空中浓缩。将样品溶解在二氯甲烧中并在二氧化娃盒（silica cartridgeKyO g)上使用0-25%乙酸乙醋-环己烧梯度经40分钟提纯。合并适当的级分并在 真空中蒸发W产生白色固体形式的标题化合物(1.4克）。
[0152] LCMS (系统A): tRET = 1.18 min;MH+ 428 / 430。
[015：3] 中间体6: 5-((节氧基）甲基)-7-舰-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2-t/ ]喀晚-4- 篮
将5-((节氧基）甲基)-4-氯-7-舰-2,6-二甲基-5^-化咯并[3,2-^/]喀晚（3.458克） 分开在3个20毫升微波小瓶中。向各微波小瓶中加入1.15克起始材料并将其用IPAQO毫升） 稀释，然后各加入0.88氨(2.5毫升）。密封小瓶并在微波(Bio化ge)中在150°C(High Power) 下加热5小时。通过LCMS监测表明该反应在运Ξ个微波密封小瓶的两个中达到完全:向含有 未反应起始材料的小瓶中加入额外的0.88氨(2.5毫升)并将该混合物在微波中加热另外5 小时。合并运Ξ个小瓶的反应混合物并用ΙΡΑ洗涂小瓶。然后将其在真空中浓缩W产生澄色 油，将其用TBME(15毫升)研制W产生黄色固体形式的标题化合物(2.352克）。
[0154] LCMS (系统A): tRET = 0.69 min;MH+ 409 将滤液在真空中浓缩并用ΤΒΜΕαΟ毫升)再研制W产生第二批黄色固体形式的标题化 合物(267毫克）。
[015引 LCMS (系统A): tRET = 0.67 min;MH+ 409。
[0156] 中间体7: 1-(己-5-烘-1-基)赃晚
将6-氯己-1-烘巧毫升，41.3毫摩尔）、赃晚(4.08毫升，41.3毫摩尔）和碳酸氨钢(4.16 克，49.5毫摩尔)在DMF巧0毫升）中的溶液回流16小时。将该反应在真空中浓缩并将残留物 在酸（150毫升)和水（150毫升)之间分配。分离有机物，并将水相用二乙酸巧0毫升)反萃取。 将合并的有机物用盐水（150毫升)洗涂，干燥(MgS〇4)，过滤并在真空中浓缩W产生标题化 合物的粗样品（3.74克）。将草酸(2.161克，24毫摩尔）添加到粗产物中。将所得固体从乙醇 中重结晶，通过过滤收集并在真空中干燥W产生1-(己-5-烘-1-基)赃晚草酸盐(4.66克）。 将该固体在二乙酸(150毫升)和饱和碳酸氨钢水溶液（150毫升)之间分配。分离有机物并干 燥(MgS〇4)，过滤和在真空中浓缩^产生黄色油形式的标题化合物(1.93克）。
[0157] iR NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 2.31 - 2.52 (m, 6 Η) 2.18 - 2.26 (m, 2 Η) 1.92 - 1.96 (m, 1 Η) 1.40 - 1.72 (m, 10 Η)〇
[015引 中间体8: 5-((节氧基）甲基)-2,6-二甲基-7-(6-(赃晚-1-基）己-1-烘-1-基)-5W -化咯并[3,2-?Π 喀晚-4-胺
向5-((节氧基）甲基)-7-舰-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-c/ ]喀晚-4-胺(407毫克， 0.997毫摩尔）、舰化铜（1)(27.5毫克，0.145毫摩尔)和双(Ξ苯基麟)二氯化钮(IIK49.0毫 克，0.070毫摩尔）的揽拌脱气悬浮液中加入在无水DMF(8毫升）中的Ξ乙胺（0.221毫升， 1.595毫摩尔）。使该溶液揽拌30分钟，然后经5分钟逐滴加入1-(5-己烘-1-基)赃晚（247毫 克，1.495毫摩尔）在DMF( 2毫升）中的溶液。将该反应在55 °C下揽拌2小时，接着在60°C下揽 拌1小时。加入另一份1-(5-己烘-1-基)赃晚(247毫克，1.495毫摩尔)并将该反应在60°C下 揽拌1.5小时，然后将其在室溫下揽拌过夜。将该反应在真空中浓缩W产生栋色油。将该油 在DCMQOO毫升)和水（100毫升）之间分配，分离有机相，并将水相用DCMQOO毫升)反萃取。 将合并的有机萃取物使用疏水玻璃料干燥并在真空中浓缩W产生深澄色油(902毫克）。将 该粗材料溶解在二氯甲烧中并在二氧化娃盒（100 g)上使用0-25%甲醇-二氯甲烧梯度经60 分钟提纯。合并适当的级分并在真空中蒸发^产生两批标题化合物。
[0159] 批次1透明油（42 mg) LCMS (系统B): tRET = 1.08 min;MH+ 446 批次2浅黄色固体（117 mg) LCMS (系统B): tRET = 1.11 min;MH+ 446。
[0160] 中间体9: 5-((节氧基）甲基)-7-(5-氯戊-1-烘-1-基)-2,6-二甲基-5W-化咯并 [3,2-?Π 喀晚-4-胺
在氮气气氛下在室溫下向5-((节氧基）甲基)-7-舰-2,6-二甲基-5//-化咯并[3,2-c/ ]喀晚-4-胺(300毫克，0.735毫摩尔）在无水W，W -二甲基甲酯胺(7毫升）中的氮气脱气溶 液中加入舰化铜（1)(30.8毫克，0.162毫摩尔）、双(Ξ苯基麟）二氯化钮（II) (61.9毫克， 0.088毫摩尔）和最后Ξ乙胺(0.205毫升，1.470毫摩尔）。将该混合物在室溫下在氮气气氛 下揽拌10分钟，然后加入5-氯戊-1-烘(151毫克，1.470毫摩尔)在无水W，W-二甲基甲酯胺 (5毫升）中的溶液。将反应混合物在60°C下揽拌2小时。将该反应在真空中蒸发W产生栋色 油。将该油在水/盐水（1:1)(100毫升)和DCM( 100毫升)之间分配。分离有机层，经过疏水玻 璃料并在真空中蒸发W产生深澄色油巧38毫克）。将该材料溶解在50:50 DMS0/Me0H(6 X 1ml)中并通过MDAP(方法B)提纯。合并适当的级分并在真空中蒸发W产生浅黄色固体形式 的标题化合物（132毫克）。
[0161] LCMS (系统B): tRET = 1.10 min;MH+ 383。
[016。中间体10:5-((节氧基）甲基)-7-(6-氯己-1-烘-1-基)-2,6-二甲基-5W-化咯并 [3,2-?Π 喀晚-4-胺
在氮气气氛下在室溫下向5-((节氧基）甲基)-7-舰-2,6-二甲基-5//-化咯并[3,2-c/ ]喀晚-4-胺(482.7毫克，1.182毫摩尔）在无水W，W-二甲基甲酯胺(7毫升）中的氮气脱气 溶液中加入舰化铜（1)(49.5毫克，0.260毫摩尔）、双(Ξ苯基麟)二氯化钮（ΙΙ)αθΟ毫克， ο. 142毫摩尔）和最后Ξ乙胺(ο. 330毫升，2.365毫摩尔）。将该混合物在室溫下在氮气气氛 下揽拌10分钟，然后加入6-氯己-1-烘(276毫克，2.365毫摩尔)在无水W，W -二甲基甲酯胺 (1毫升）中的溶液。将反应混合物在65°C下揽拌15小时，然后将反应混合物在真空中浓缩。 将粗产物溶解在DMSO中并通过反相柱色谱法（120 g C18柱)使用超过12倍柱体积的35至 90%乙腊+ 0.1%氨/用氨溶液调节至抑10的水中的lOmM碳酸氨锭梯度提纯。合并适当的 级分并在真空中蒸发W产生浅黄色固体形式的标题化合物(215毫克）。
[016引 LCMS (系统B): tRET = 1.15 min;MH+ 397。
[0164] 实施例制备 实施例1:2,6-二甲基-7-(6-(赃晚-1-基）己基)-5公-化咯并[3,2-^/]喀晚-4-胺
将5-((节氧基）甲基)-2,6-二甲基-7-(6-(赃晚-1-基）己-1-烘-1-基)-5W -化咯并 [3,2-c/ ]喀晚-4-胺（159毫克，0.357毫摩尔)在乙醇（15毫升)和乙酸（1.5毫升）中的过滤溶 液使用H-cube(设置:60°C，充满出，1 mL/min流量)和10% Pd/C CatCad 30作为催化剂氨 化。将该溶液使用H-cube(设置:60°C，充满此，1 mL/min流量）和相同的10% Pd/C CatCart 30作为催化剂再氨化。将该溶液在真空中浓缩。将该固体溶解在50:50 DMSO/MeOH(2 X 1毫 升）中并通过MDAP(方法B)提出。合并适当的级分并在真空中蒸发W产生乳脂固体形式的極 题化合物(62毫克）。
[01 化]LCMS (系统B): tRET = 0.80 min;MH+ 330。
[01实施例2: 2,6-二甲基-7-(5-(化咯烧-1-基)戊基)-5W -化咯并[3,2-t/ ]喀晚- 4-胺马来酸盐
向5-((节氧基）甲基)-7-(5-氯戊-1-烘-1-基)-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-c/ ]喀 晚-4-胺(251毫克，0.656毫摩尔)在无水乙腊(4毫升）中的溶液中加入化咯烧(0.164毫升， 1.967毫摩尔）和Ξ乙胺(0.274毫升，1.967毫摩尔）。将该反应在70°C下揽拌22小时。加入另 一份化咯烧（1.5当量)和Ξ乙胺（1.5当量)并将该混合物揽拌另外24小时。该反应在真空中 浓缩W产生栋色油。将该油在化OAc和水之间分配。分离有机相，并将水相用化OAc反萃取。 将合并的有机萃取物使用疏水玻璃料干燥并在真空中浓缩W产生栋色油(315毫克）。将该 粗产物溶解在乙醇（40毫升）中并使用H-cube (设置：25 °C，充满出，1 mL/miη流量）和10% Pd/C Cat^d 30作为催化剂氨化。将该溶液在真空中浓缩W产生浅黄色油（275毫克）。将 该材料溶解在二氯甲烧中并在二氧化娃盒(20 g)上使用0-50%甲醇-二氯甲烧梯度经40分 钟提纯。合并含所需产物的级分并在真空中浓缩W产生174毫克黄色油。将该材料再溶解在 EtOH(25毫升)和乙酸(2.5毫升）中并流经Hcube(设置:6(rC，充满此，l血/min流量)和作 为催化剂的10% Pd/C化tCart 30。使该溶液流经Η cube直至反应达到完全并已完全除去 BOM基团（使用相同设置3次）。将该乙醇溶液蒸发至干燥W产生透明油（149毫克）。将该材料 溶解在50:50 DMSO/MeOH(2 X 1毫升）中并通过MDAP(方法B)提纯。合并适当的级分并在真 空中蒸发^产生白色固体形式的标题化合物的游离碱(60毫克）。
[0167] LCMS (系统B): tRET = 0.65 min;MH+ 302 将2,6-二甲基-7-(5-(邮咯烧-1-基)戊基)-5公-化咯并[3,2-^/]喀晚-4-胺（11.3毫 克，0.037毫摩尔）溶解在MeOH/DCM中并加入马来酸(6.53毫克，0.056毫摩尔）。将该溶液蒸 发至干燥^产生透明油形式的作为马来酸盐的标题化合物(16.7毫克） LCMS (系统B): tRET = 0.66 min;MH+ 302。
[01側 实施例3: 2,2'-((5-(4-氨基-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2-t/ ]喀晚-7-基)戊 基)亚氨基)二乙醇甲酸盐
向5-((节氧基）甲基)-7-(5-氯戊-1-烘-1-基)-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-c/ ]喀 晚-4-胺（132毫克，0.345毫摩尔)在W，W -二甲基甲酯胺(3毫升）中的揽拌溶液中加入Ξ乙 胺(0.144毫升，1.034毫摩尔）和二乙醇胺（109毫克，1.034毫摩尔）。将所得混合物在70°C下 加热22小时。向反应混合物中进一步加入二乙醇胺（109毫克，1.034毫摩尔）和Ξ乙胺 (0.144毫升，1.034毫摩尔）并在70°C下继续加热48小时。将该反应混合物在真空中浓缩，并 将残留物溶解在Me0H(25毫升）中并加入乙酸(2毫升）。将该溶液使用H-cube(设置:60°C，充 满也，1 mL/min流量)和10% Pd/C化tCart 30作为催化剂氨化。使该甲醇溶液再流经使用 与上述相同的设置的H-cube。将该甲醇溶液蒸发至干燥并将该粗材料溶解在50:50 DMS0/ Me0H(6 X 1毫升）中并通过MDAP(方法B)提纯。合并适当的级分并在真空中蒸发W产生白色 固体形式的标题化合物(82毫克)。
[0169] LCMS (系统B):tRET = 0.59 min;MH+ 336。
[0170] 实施例4: 2,2'-((6-(4-氨基-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-y ]喀晚-7-基）己 基)亚氨基)二乙醇甲酸盐
类似于实施例3由5-((节氧基）甲基)-7-(6-氯己-1-烘-1-基)-2,6-二甲基-5W -化咯 并[3,2-c/ ]喀晚-4-胺和二乙醇胺制备。
[0171] LCMS (系统B):tRET = 0.64 min;MH+ 350。
[017。实施例5: 2-((6-(4-氨基-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2-t/ ]喀晚-7-基）己基) (2-甲氧基乙基)氨基）乙醇
向5-((节氧基）甲基)-7-(6-氯己-1-烘-1-基)-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-c/ ]喀 晚-4-胺(215毫克，0.542毫摩尔)在W，W -二甲基甲酯胺(4毫升）中的揽拌溶液中加入Ξ乙 胺(0.226毫升，1.625毫摩尔）和2-((2-甲氧基乙基)氨基）乙醇(0.191毫升，1.625毫摩尔）。 将所得混合物在70°C下加热40小时。向反应混合物中进一步加入2-((2-甲氧基乙基)氨基） 乙醇(0.191毫升，1.625毫摩尔）和Ξ乙胺(0.226毫升，1.625毫摩尔）并在75°C下继续加热 24小时。该反应混合物在真空中浓缩，并将残留物溶解在Me0H(25毫升）中，然后加入乙酸(2 毫升）。将该溶液使用H-cube(设置:60°C，充满也，lmL/min流量)和10% Pd/C CatCad 30作 为催化剂氨化。
[0173] 使该溶液再流经使用与上述相同的设置的H-cube3次。在真空中蒸发溶剂。将该粗 材料溶解在50:50 DMS0/Me0H(4 X 1毫升）中并通过MDAP(方法B)提纯。合并适当的级分并 在真空中蒸发W产生浅黄色油(93毫克）。将该油通过MDAP(方法B)再提纯。合并适当的级分 并在真空中蒸发^产生标题化合物(27毫克）。
[0174] LCMS (系统B): tRET = 0.70 min;MH+ 364。
[01巧]实施例6: 7-(6-(双(2-甲氧基乙基)氨基）己基)-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2- y ]喀晚-4-胺
向5-((节氧基）甲基)-7-(6-氯己-1-烘-1-基)-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-c/ ]喀 晚-4-胺(315.6毫克，0.795毫摩尔)在W，W -二甲基甲酯胺巧毫升）中的揽拌溶液中加入Ξ 乙胺(0.332毫升，2.385毫摩尔)和双(2-甲氧基乙基)-胺(0.349毫升，2.385毫摩尔）。将所 得混合物在70°C下加热20小时.向反应混合物中进一步加入双(2-甲氧基乙基)-胺(0.349 毫升，2.385毫摩尔）和Ξ乙胺(0.332毫升，2.385毫摩尔)并在70°C下继续加热32小时。将该 反应混合物在真空中浓缩，并将残留物溶解在Me0H(40毫升）中并加入乙酸(4毫升）。将该溶 液使用H-cube(设置：65°C，充满也，lmL/min流量）和10% Pd/C CatCad 30作为催化剂氨 化。使该溶液再流经使用与上述相同的设置的H-cube 3次并且每次流经时改变catcart。在 真空中蒸发甲醇。将该粗材料溶解在50:50 DMSO/MeOH(3 X 1毫升）中并通过MDAP(方法B) 提纯。合并适当的级分并在真空中蒸发^产生标题化合物(84.5毫克）。
[0176] LCMS (系统B):tRET = 0.82 min;MH+ 378。
[0177] 实施例7: 2-((6-(4-氨基-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-y ]喀晚-7-基）己基) 氨基）乙醇
向5-((节氧基）甲基)-7-(6-氯己-1-烘-1-基)-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-c/ ]喀 晚-4-胺（220.6毫克，0.556毫摩尔）在乙腊(4毫升）中的揽拌溶液中加入Ξ乙胺(0.232毫 升，1.667毫摩尔)和2-氨基乙醇(0.101毫升，1.667毫摩尔）。将所得混合物在70°C下加热21 小时。向反应混合物中进一步加入2-氨基乙醇(0.101毫升，1.667毫摩尔）和Ξ乙胺(0.232 毫升，1.667毫摩尔)并在70°C下继续加热46小时。将该反应混合物在真空中浓缩，并将残留 物溶解在MeOH(25毫升）中并加入乙酸(2毫升）。将该溶液使用H-cube(设置:60°C，充满出，1 mL/min流量)和10% Pd/C Cathd 30作为催化剂氨化。使该甲醇溶液再流经使用与上述相 同的设置的H-cube两次。在真空中蒸发甲醇。将该粗材料溶解在50:50 DMSO/MeOH巧X 1毫 升）中并通过MDAP(方法B)提纯。合并适当的级分并在真空中蒸发^产生透明油形式的标题 化合物(43.7毫克）。
[017引 LCMS (系统B): tRET = 0.55 min;MH+ 306。
[0179]实施例8: (37?，5S )-1-(6-(4-氨基-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2-c/ ]喀晚-7- 基)己基)赃晚-3,5-二醇
向5-((节氧基）甲基)-7-(6-氯己-1-烘-1-基)-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-c/ ]喀 晚-4-胺(215毫克，0.542毫摩尔)在W，W -二甲基甲酯胺(4毫升）中的揽拌溶液中加入Ξ乙 胺(0.226毫升，1.625毫摩尔）和(37?，5S )-赃晚-3,5-二醇(250毫克，1.625毫摩尔）。将所 得混合物在70°C下加热16小时。向反应混合物中进一步加入（37?，5S )-赃晚-3，5-二醇 (250毫克，1.625毫摩尔)和Ξ乙胺(0.226毫升，1.625毫摩尔)并在75 °C下继续加热72小时。 将该反应混合物在真空中浓缩，并将残留物溶解在甲醇(45毫升）中并加入乙酸巧毫升）。将 该溶液使用H-cube(设置:60°C，充满此，1 mL/min流量）和10% Pd/C CatCad 30作为催化 剂氨化。使该甲醇溶液再流经使用与上述相同的设置的H-cube两次，然后在真空中蒸发。将 该粗材料溶解在50:50 DMSO/MeOH(8 X 1毫升）中并通过MDAP(方法B)提纯。合并适当的级 分并在真空中蒸发W产生乳脂固体形式的标题化合物(160.7毫克）。
[0180] LCMS (系统B): tRET = 0.60 min;MH+ 362。
[0181] 实施例9: (37?，57? )-1-(6-(4-氨基-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-c/ ]喀晚-7- 基)己基)赃晚-3,5-二醇
向5-((节氧基）甲基)-7-(6-氯己-1-烘-1-基)-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-c/ ]喀 晚-4-胺（165毫克，0.416毫摩尔)在W，W -二甲基甲酯胺(3毫升）中的揽拌溶液中加入Ξ乙 胺（0.174毫升，1.247毫摩尔）和（37?，57?)-赃晚-3,5-二醇（192毫克，1.247毫摩尔） (Tetrahe化on 67(7)，1485，2011)。将所得混合物在70°C下加热32小时。向反应混合物中 加入另外的（37?，57?)-赃晚-3,5-二醇（192毫克，1.247毫摩尔）和另外的Ξ乙胺(0.174毫 升，1.247毫摩尔）并在75°C下继续加热5小时。将该反应混合物在真空中浓缩，并将残留物 溶解在Me0H(30毫升）中并加入乙酸（3毫升）。将该溶液使用H-cube(设置：60°C，充满出， ImL/min流量)和10% Pd/C化tCart 30作为催化剂氨化。使该甲醇溶液再流经使用与上述 相同的设置的H-cube两次，然后在真空中蒸发。将该粗材料溶解在50:50 DMS0/Me0H(7 X 1 毫升）中并通过MDAP(方法B)提纯。合并适当的级分并在真空中蒸发W产生透明油形式的極 题化合物(95.2毫克）。
[0182] LCMS (系统B): tRET = 0.62 min;MH+ 362。
[018：3] 实施例10: 7-(6-(二甲基氨基）己基)-2,6-二甲基-5W -化咯并[3,2-]喀晚-4- 篮
向5-((节氧基）甲基)-7-(6-氯己-1-烘-1-基)-2,6-二甲基-5W-化咯并[3,2-c/ ]喀 晚-4-胺（183.7毫克，0.463毫摩尔)在W，W -二甲基甲酯胺(3毫升）中的揽拌溶液中加入Ξ 乙胺(0.194毫升，1.388毫摩尔)和2-氨基乙醇(0.084毫升，1.388毫摩尔）。将所得混合物在 70°C下加热18小时。将该反应混合物在真空中浓缩并将粗材料溶解在50: 50 DMSO/MeOH(3 X ImL)中并通过MDAP(方法B)提纯。合并含所需产物的级分并浓缩W产生浅黄色油（73毫 克）。将该油溶解在Me0H(20毫升）中并使用H-cube(设置:60°C，充满也，lmL/min流量)和10% Pd/C Cat^d 30作为催化剂氨化。在真空中蒸发甲醇并将该粗材料溶解在50:50 DMSO/ MeOHQ毫升）中并通过MDAP(方法B)提纯。合并适当的级分并在真空中蒸发W产生乳脂固体 形式的标题化合物(24.2毫克）。
[0184] LCMS (系统B):tRET = 0.66 min;MH+ 290。
[01化]生物评估 根据下列测定法测试本发明的化合物的体外生物活性。
[01化]使用新鲜人类全血(WB)测定干扰素 -α和TNF-a的诱导 化合物制备 在平底微滴定板中在1.5微升体积下在DMS0中WlOOx所需浓度制备化合物。第1-10列 含有受试化合物的1比4连续稀释。在各板上包含化R7/8激动剂雷西莫特的连续稀释作为标 准，且第11列含有1.5微升的200μΜ雷西莫特(得出2μΜ最终浓度，用于限定对雷西莫特的近 似最大响应）。对于各供体一式两份测定各化合物。
[0187] 培养和对干扰素 -α和TNF-a的测定 将来自Ξ个人类供体的血样收集到肝素钢(lOU/ml)中。将150微升全血分配到含有1.5 微升在DMS0中的受试化合物或标准的测定板的Col 1至11中。将板在培养器中放置过夜(37 °C ,95%空气，5% 0)2)。在培养过夜后，将板从培养器中取出并在定轨摇床上混合大约1分 钟。将100微升的0.9%盐水添加到各孔中并将板在定轨摇床上再次混合。然后将板离屯、 (2500;rpm，10 min),此后使用Biomek FX移除血浆样品并使用MSD(Mesoscale Discovery) 电化学发光测定平台测定IFN-α和TNF-α两者。IFN-α测定类似于上文所述进行。TNF-α测定 根据试剂盒说明书(化t No K111B皿)进行。
[0188] 释放的细胞因子作为2μΜ雷西莫特对照物(第11列）的百分比表示。将该百分比相 对于化合物浓度和通过非线性最小二乘法曲线拟合测定的响应祀Cso绘图。对于IFN-a响应， 通常选择4参数逻辑模型。对于TNF-a响应一-其中获得清楚的最大响应（即在该响应中观 察到界限分明的平台），则通常使用4参数模型。如果该曲线的上渐近线不是界限分明的，贝U 通常将该曲线拟合约束到100%的最大响应（即约束到对化Μ雷西莫特的响应)或如果运大于 雷西莫特响应，则约束到最高受试浓度的响应。一些曲线对一种或运两种细胞因子而言是 钟形的并通常从该拟合中排除该钟形响应的向下斜线上的细胞因子数据（即产生最大响应 的那些浓度上方的浓度），通常刚刚高于峰值响应的浓度除外。曲线拟合由此集中在该剂量 响应曲线的向上斜线上。
[0189] 实施例1至10具有《5.7的对IFN-a的平均祀C50。
[0190] 实施例1至10具有《4.3的对TNF-a的平均祀C50。
[0191] 使用新鲜人类外周血单核细胞(PBMC)测定干扰素-α和TNF-a的诱导 化合物制备 在DMS0中WlOOx所需浓度分配化合物(在平底96孔细胞培养板中1微升/孔）。对于各供 体一式两份测定各化合物。各板含有化R7/8激动剂雷西莫特的稀释系列作为标准，第11列 含有1微升的200μΜ雷西莫特(得出2μΜ最终浓度，用于限定对雷西莫特的近似最大响应）。 [019。 reMC的制备 将来自Ξ个人类供体的血样收集到肝素钢（lOU/ml)中。将25毫升体积的全血覆盖到 Leucosep管中的15毫升Histopaque上，将该管在400g下离屯、30分钟，并将血浆/histopaque 界面处的条带(band)小屯、移除到无菌50毫升锥形管中。用无菌DPBS(Du化ecco的憐酸盐缓 冲盐水，-CaCWMgCl2)将管中的体积补充至50毫升并在300g下离屯、10分钟。将该细胞团块 再悬浮在20毫升培养基（RPMI 1640(低内毒素），补充10% v/v胎牛血清(FCS，低内毒素） lOOU/mL青霉素 G、100yg/mL链霉素 、lOmM 1^-谷氨酷胺和lx非必需氨基酸）中并使用 Nucleoview 3000(化emometec, Via-1 Cassette)计数细胞。调节PBMC浓度W产生2xl0V mL的最终浓度并将100微升该细胞悬浮液添加到含有1微升稀释的受试化合物的孔中。 [。"引干扰素-α和TNF-a的培养和测定 将该细胞制品培养24小时（37°C ,95%空气，5% 0)2)，此后使用Biomek FX移除上清液样 品并使用MSD(Mesoscale Discovery)电化学发光测定平台测定IFN-a和TNF-a两者。IFN-a 测定类似于上文所述进行。TNF-a测定根据试剂盒说明书(Xat No K111B皿)进行。
[0194] 释放的细胞因子作为2μΜ雷西莫特对照物(第11列）的百分比表示。将该百分比相 对于化合物浓度和通过非线性最小二乘法曲线拟合测定的响应祀C50绘图。对于IFN-a响应， 通常选择4参数逻辑模型。对于TNF-a响应一-其中获得清楚的最大响应（即在该响应中观 察到界限分明的平台），则通常使用4参数模型。如果该曲线的上渐近线不是界限分明的，贝U 通常将该曲线拟合约束到100%的最大响应（即约束到对化Μ雷西莫特的响应)或如果运大于 雷西莫特响应，则约束到最高受试浓度的响应。一些曲线对一种或运两种细胞因子而言是 钟形的并通常从该拟合中排除该钟形响应的向下斜线上的细胞因子数据（即产生最大响应 的那些浓度上方的浓度），通常刚刚高于峰值响应的浓度除外。曲线拟合由此集中在该剂量 响应曲线的向上斜线上。
[0195] ^ 实施例1至9具有5.4至6.3的对IFN-a的平均祀C50。
[0196] 实施例1至9具有《4.3的对TNF-a的平均祀C50。
【主权项】
1. 式(I)的化合物或其盐： 其中：R1是氢、甲基或-(CH2)2OR3， R2是甲基或-(CH2)2〇R4,或 R1和R2与它们相连的氮原子一起连接形成5-或6-元杂环基，其中所述6-元杂环基任选 被两个羟基取代基取代； R3和R4各自独立地为氢或甲基;且 n是具有5或6的整数。2. 根据权利要求1的化合物或其盐，其中R1是氢、甲基或-(CH2)2OR 3,且R2是甲基或-(CH2)2〇R4。3. 根据权利要求1的化合物，其中R1和R2与它们相连的氮原子一起连接形成5-或6-元杂 环基，其中所述6-元杂环基任选被两个羟基取代基取代。4. 根据前述权利要求任一项的化合物，其中η是5。5. 根据权利要求1至3任一项的化合物，其中η是6。6. -种化合物或其盐，其选自： 2,6_二甲基-7-(6-(哌啶-1-基）己基)-5"-吡咯并[3,2-c/ ]嘧啶-4-胺； 2,6_二甲基-7-(5-(啦咯烷-1-基)戊基)-5"-吡咯并[3,2-c/ ]啼啶-4-胺； 2,2'-((5-(4_氨基-2,6-二甲基-5"-吡咯并[3,2-c/ ]嘧啶-7-基)戊基）亚氨基）二乙 醇； 2,2'-((6-(4_氨基-2,6-二甲基-5"-吡咯并[3,2-c/ ]嘧啶-7-基）己基）亚氨基）二乙 醇； 2-((6-(4-氨基-2,6-二甲基-5"-吡咯并[3,2-c/ ]嘧啶-7-基）己基）（2-甲氧基乙基） 氨基）乙醇； 7-(6-(双(2-甲氧基乙基)氨基）己基)-2,6_二甲基-5"-吡咯并[3,2-c/ ]啼啶-4-胺； 2-((6-(4-氨基-2,6-二甲基-5"-吡咯并[3,2-c/ ]啼啶-7-基）己基)氨基）乙醇； (37?，5S )-1-(6-(4-氨基-2,6-二甲基-5"-吡咯并[3,2-c/ ]嘧啶-7-基）己基）哌啶-3，5_ 二醇； (37?，57? )-1-(6-(4-氨基-2,6-二甲基-5"-吡咯并[3,2-c/ ]嘧啶-7-基）己基）哌啶-3，5_二醇;或 7-(6-(二甲基氨基）己基)-2,6_二甲基-5"-吡咯并[3，2_]啼啶-4-胺。7. 根据权利要求1至6任一项的化合物，其是药物上可接受的盐的形式。8. 根据权利要求1至6任一项的化合物，其是游离碱的形式。9. 一种药物组合物，其包含如权利要求1至6任一项中所述的化合物或其药物上可接受 的盐和一种或多种药物上可接受的赋形剂。10. -种疫苗组合物，其包含如权利要求1至6任一项中所述的化合物或其药物上可接 受的盐和抗原或抗原组合物。11. 如权利要求1至6任一项中所述的化合物或其药物上可接受的盐，其用于治疗。12. 如权利要求1至6任一项中所述的化合物或其药物上可接受的盐，其用于治疗或预 防过敏性疾病或其它炎性状况、传染病或癌症。13. 如权利要求1至6任一项中所述的化合物或其药物上可接受的盐在制造用于治疗或 预防过敏性疾病或其它炎性状况、传染病或癌症的药物中的用途。14. 一种治疗或预防过敏性疾病或其它炎性状况、传染病或癌症的方法，所述方法包括 将治疗有效量的如权利要求1至6任一项中所述的化合物或其药物上可接受的盐给药至有 此需要的人类对象。
【文档编号】A61P29/00GK106029668SQ201580009463
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2015年2月18日
【发明人】K.比加迪克, A.C.钱皮希尼, D.M.科厄, D.T.塔普, S.A.史密斯
【申请人】葛兰素史克知识产权第二有限公司