600mL石油醚，搅拌30min，静置分层，虹吸分去石油醚层，石油醚层中为油月旨，再重复两次石油醚去油脂步骤。石油醚层经浓缩后回收石油醚，浓缩物为油脂，丢弃。70°C下真空浓缩甲醇层，加入500mL浓度为3%的氢氧化钠溶液，50°C下搅拌溶解，然后加入20mL双氧水，搅拌脱色5h，降至室温，稀盐酸调pH至3，过滤，滤渣在60°C下真空干燥至干燥失重<3%，粉碎，过200目筛网，得到40.2g胆汁酸粗品，高效液相色谱图如图1，经分析，其鹅去氧胆酸含量为63.8%。
[0033]取40g胆汁酸粗品，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为2%，在28MPa、60°C条件下萃取lh，然后于分离釜中降温减压至常温常压，收集析出物27.3g，高效液相色谱图如图2，经分析，其鹅去氧胆酸含量为93.4%。析出物用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品24.lg，高效液相色谱图如图3，经分析，其鹅去氧胆酸含量为98.3%。1000g鸡胆汁的鹅去氧胆酸收率为2.45%
[0034]实施例2
[0035]将1000g猪胆汁投入皂化反应釜，加入350g氢氧化钠，密闭升温至120°C，搅拌反应12h，然后静置降至室温，用稀盐酸调pH为3，过滤，滤渣在60°C下真空干燥至干燥失重彡3%，粉碎，过200目筛网，得到165.8g胆汁酸粗品，其鹅去氧胆酸含量为18.6%。
[0036]取160g胆汁酸粗品，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为2%，在28MPa、60°C条件下萃取lh，然后于分离釜中降温减压至常温常压，收集析出物31.7g，其鹅去氧胆酸含量为93.0%。析出物用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品28.5g，其鹅去氧胆酸含量为98.1%。1000g猪胆汁的鹅去氧胆酸收率为2.95%。
[0037]实施例3
[0038]将1000g鸡胆汁投入皂化反应釜，加入350g氢氧化钠，密闭升温至120°C，搅拌反应12h，然后静置降至室温，用稀盐酸调pH为4，得到黑色膏状物200g。向黑色膏状物中加入600mL甲醇，加热至50°C，搅拌至完全溶解，继续加入600mL石油醚，搅拌30min，静置分层，虹吸分去石油醚层，石油醚层中为油脂，再重复两次石油醚去油脂步骤。石油醚层经浓缩后回收石油醚，浓缩物为油脂，丢弃。65°C下真空浓缩甲醇层，加入500mL浓度为3%的氢氧化钠溶液，50°C下搅拌溶解，然后加入20mL双氧水，搅拌脱色5h，降至室温，稀盐酸调pH至4，过滤，滤渣在55°C下真空干燥至干燥失重彡3%，粉碎，过200目筛网，得到39.8g胆汁酸粗品，其鹅去氧胆酸含量为63.7%。
[0039]取30g胆汁酸粗品，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为2%，在28MPa、60°C条件下萃取lh，然后于分离釜中降温减压至常温常压，收集析出物20.2g，其鹅去氧胆酸含量为93.2%。析出物用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品18.0g，其鹅去氧胆酸含量为98.3%。1000g鸡胆汁的鹅去氧胆酸收率为2.39%。
[0040]尽管这里参照本发明的解释性实施例对本发明进行了描述，但是，应该理解，本领域技术人员可以设计出很多其他的修改和实施方式，这些修改和实施方式将落在本申请公开的原则范围和精神之内。更具体地说，在本申请公开的范围内，可以对主题组合布局的组成部件和/或布局进行多种变型和改进。除了对组成部件和/或布局进行的变型和改进外，对于本领域技术人员来说，其他的用途也将是明显的。
【主权项】
1.一种二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于包括以下步骤: (1)制备胆汁酸粗品 首先将胆汁皂化，稀盐酸调节pH为3?4，得到黑色膏状物；将黑色膏状物脱油脂并脱色后用稀盐酸调节pH为3?4再过滤，所得滤渣在60°C以下干燥，得到胆汁酸粗品； (2)制备鹅去氧胆酸精品 将所述胆汁酸粗品粉碎，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，所述二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为1.5%?2.5%，在27?29MPa、58?62°C条件下搅拌萃取0.5?lh，然后降温减压至常温常压，收集析出物，用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品。2.根据权利要求1所述的二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于包括以下步骤: (1)制备胆汁酸粗品 首先将胆汁皂化，稀盐酸调节pH为3?4，得到黑色膏状物；将黑色膏状物脱油脂并脱色后用稀盐酸调节pH为3?4再过滤，所得滤渣在55?60°C干燥，得到胆汁酸粗品； (2)制备鹅去氧胆酸精品 将所述胆汁酸粗品粉碎，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，所述二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为2%，在28MPa、60°C条件搅拌萃取lh，然后降温减压至常温常压，收集析出物，用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品。3.根据权利要求1或2所述的二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于所述胆汁是指从鸡或猪体内提取出来无异味、无霉变的胆汁。4.根据权利要求1或2所述的二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于所述将黑色膏状物脱油脂并脱色的方法是用甲醇溶解黑色膏状物，用石油醚脱去油月旨，接着浓缩甲醇层，用氢氧化钠溶液溶解浓缩物，然后加入双氧水脱色。5.根据权利要求1或2所述的二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于所述皂化是指将胆汁与氢氧化钠按照质量比100:35密闭升温至120°C，搅拌反应12h，然后降至室温。6.根据权利要求1或2所述的二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于所述干燥是指将胆汁酸粗品真空干燥至干燥失重< 3%。7.根据权利要求1或2所述的二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于所述粉碎得到的胆汁酸粉末粗品过200目筛网。
【专利摘要】本发明公开了一种二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，首先将胆汁皂化，稀盐酸调节pH为3～4，得到黑色膏状物；将黑色膏状物脱油脂并脱色后用稀盐酸调节pH为3～4再过滤，将滤渣干燥，得到胆汁酸粗品，粉碎，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为1.5％～2.5％，在27～29MPa、58～62℃条件下搅拌萃取0.5～1h，然后降温减压至常温常压，收集析出物，用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品。本发明结合了二氧化碳超临界萃取技术，简化了提取步骤，可以利用胆汁制备含量＞98％的鹅去氧胆酸精品，且鹅去氧胆酸精品收率提高，达到2.5％左右。
【IPC分类】C07J9/00
【公开号】CN105418715
【申请号】CN201511000480
【发明人】张秀芳, 高蓉
【申请人】成都市新功生物科技有限公司
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年12月28日