一种新的齐墩果烷型三萜化合物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从干燥的满山红中分离得到的一种具有治疗 神经胶质瘤作用的齐墩果烷型三萜类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 满山红为杜鹃花科杜鹃花属植物兴安杜鹃的干燥叶，俗称映山红、达子香等。秋、 冬采，晒干，分布于黑龙江、吉林、内蒙古等地，生于山脊、山坡及林下酸性土壤上。始载于 《东北常用中草药手册》，其味辛、苦、性寒，具有止咳、祛痰的功效，主要用于治疗急(慢)性 支气管炎和哮喘，且镇咳、祛痰效果较好。以满山红为原料制成的制剂主要有:消咳喘、映山 红片、复方满山红糖浆、止咳喘冲剂、复方满山红胶囊、复方满山红片等。
[0003] 近些年，相关学者对满山红所含化学成分进行了大量的研究，从中分离鉴定了数 十种化合物。其中主要类型有黄酮类、挥发油类、香豆素类、酚酸类、三萜类等。
[0004] 现代药理研究表明满山红具有镇咳、平喘祛痰作用，降压、利尿作用，镇痛作用，对 中枢抑制作用等。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从干燥的满山红中分离得到的一种具有治疗神经胶质 瘤作用的齐墩果烷型三萜类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物(I)，
[0008]
[0009]所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将干燥的满山红粉碎，用75 ~85%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的 正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中乙酸 乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇洗脱10个柱体 积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸 膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1、40:1、20:1、12 :1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、12:1和 5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反 相硅胶分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~10个柱体积洗脱液， 洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(I)。
[0010] 进一步地，步骤(a)中，用80%乙醇热回流提取，合并提取液。
[0011] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0012] 药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物(I)和药学上可接受的载体。
[0013] 所述的化合物(I)在制备治疗神经胶质瘤的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备治疗神经胶质瘤的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、对 人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等;用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018] 图1为化合物(I)结构式；
[0019] 图2为化合物（I)理论ECD值与实验ECD值比较；
[0020] 图3为化合物（I)处理后U251细胞洞凋亡率的变化。
【具体实施方式】
[0021]下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0022]实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0023] 试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0024] 制备方法：（a)干燥的满山红（10kg)粉碎，用80 %乙醇热回流提取（25L X 3次），合 并提取液，浓缩至无醇味(3L)，依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱和的正 丁醇(3LX3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(398g)和正丁醇萃取物；（b) 步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用 75%乙醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏（163g); (c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸膏用200-300目正相硅胶分离，依次用体积比为85:1(8个柱 体积）、40:1 (8个柱体积）、20:1 (8个柱体积）、12:1 (10个柱体积)和1:1 (5个柱体积）的二氯 甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4(49g)用200-300目正相硅胶进一步 分离，依次用体积比为20:1(8个柱体积）、12:1(10个柱体积)和5:1(5个柱体积）的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2(25g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶 ODS-C18分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~10个柱体积洗脱液， 洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(I) (44mg)。
[0025] 结构确证:褐色无定形粉末;HR-ESMS显示[M+Na]+为m/z 523.3416，结合核磁特 征可得分子式为C31H48O5，不饱和度为8。核磁共振氢谱数据δΗ(ρρηι，DMS0_d6，500MHz): H-1 (1.57，m)，H-l(2.39，m)，Η-2(2·10，m)，H-2(2.52，m)，H-5(1.94，m)，H-6(1.46，m)，H-6 (1.51，m)，H-7(1.18，m)，H-7(1.42，m)，H-9(1.82，dd，J=10.9,6.6)，H-ll(1.92，m)，H-ll (2.01，m)，H-12(5.41，t，J = 3.5)，H-15(1.64，d，J=14.0)，H-15(2.68，d，J=14.1)，H-18 (2.51，dd，J=14.1，3.4)，H-19(1.15，m)，H-19(1.50，m)，H-21(1.41，m)，H-21(1.52，m)，H-22(1.14，m)，H-22(2.26，m)，H-23(1.81，s)，H-24(4.85，s)，H-24(5.06，s)，H-25(1.08，s)， H-26(l .06，s)，H-27(1 · ll，s)，H-28(3.39，d，J=10.9)，H-28(3.92，d，J=10.9)，H-29 (3 · 08，br，s，2H)，H-30 (0 · 87，s)，3-0Me (3 · 54，s);核磁共振碳谱数据δ。（卯m，DMS〇-d6， 125MHz) :35.1(CH2，l-C)，29.3(CH2,2-C)，174.8(C，3-C)，147.9(C，4-C)，38.2(CH，5-C)， 26.4(CH2,6-C)，32.3(CH2,7-C)，40.2(C，8-C)，38.5(CH，9-C)，41.1(C，10-C)，23.7(CH2，11-C)，124.6(CH，12-C)，141.9(C，13-C)，48.3(C，14-C)，44.2(CH 2，15-C)，213·1(C，16-C)， 54.2(C，17-C)，46.3(CH，18-C)，43.0(CH 2，19-C)，36.4(C，20-C)，30.3(CH2,21-C)，25.5 (CH 2,22-C)，22.2(CH3,23-C)，113.7(CH2,24-C)，20.3(CH 3,25-C)，17.5(CH3,2