专利名称：降甲基齐墩果烷型三萜类化合物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及降甲基齐墩果烷型三萜类化合物及其制备方法和应用。
背景技术：
降甲基齐墩果烷型三萜基本母核为C-20位亚甲烯基取代或只有一个甲基取代的齐墩果烷型三萜。到目前为止，发现了大量的降甲基齐墩果烷型三萜类化合物，已经分离出的降甲基齐墩果烷型三萜类化合物主要来自植物界，如木通科的野木瓜属(Staimtonia )、木通科的木通属(Akeb)、苋科的珐菲亚属(Pfaffia)等。据文献报道，含有降甲基齐墩果烷型三萜类化合物的植物提取物具有一系列生物活性，如文献报道从野木瓜中分离得到一系列降甲基齐墩果烷型三萜皂苷类化合物具有保肝抗炎的作用；有学者研究发现唐松草中的总皂苷具有抗肿瘤活性；肉桂酰基取代的降甲基齐墩果烷型三萜单体化合物能够抑制自由基和环氧化酶I的活性；有学者从五叶木通中提取的皂苷类有清热利尿的功效；有报道从Pfaffia paniculate Kuntze中提取的皂苷类有抗癌的作用；文献报道从Akebiae Caulis中提取的皂苷类化合物有利尿的作用等。为了能更充分的研究这类天然产物的药理活性，我们总结发现了一种快速、大量从植物界分离制备降甲基齐墩果烷型三萜类化合物并检测其抗肿瘤、抗炎和利尿活性的方法。
发明内容
本发明的目的是提供了降甲基齐墩果烷型三萜类化合物及其制备方法和应用。本发明提供了降甲基齐墩果烷型三萜类化合物，该类化合物具有如下结构通式
权利要求
1.降甲基齐墩果烷型三萜类化合物，其特征在于所述化合物是以降甲基齐墩果烷型为母核的三萜苷元及其糖苷类化合物，其母核结构如下
2.根据权利要求1所述的降甲基齐墩果烷型三萜类化合物，其特征在于所述的糖片段中糖的数目为1-8个，糖的种类为呋喃糖，葡萄糖醛酸，葡萄糖，阿拉伯糖，半乳糖，木糖， 鼠李糖，甘露糖，岩藻糖，阿洛糖，来苏糖，核糖，果糖，糖的类型是呋喃糖或吡喃糖，糖之间的连接方式有1-2位连接，1-4位连接，1-3位连接和1-6位连接；呋喃糖上可有一个或二个酰基取代，酰基取代类型主要为乙酰基和/或当归酰基和/或惕恪酰基。
3.—种如权利要求1所述的降甲基齐墩果烷型三萜类化合物的制备方法，其特征在于(1)粉碎选定的中药，然后利用闪式提取技术，溶剂提取法或超声提取法，采用 20%-95%的乙醇提取，过滤，合并滤液，减压回收提取液至醇浓度低于5%，得总提取液；(2)将总提取液采用下述a)或b)方法之一对有效部位进行富集a.总提取液经非极性大孔树脂柱色谱处理，依次用水和醇梯度洗脱，各洗脱部位利用薄层色谱和HPLC技术(210nm检测)，筛选富集以去甲基齐墩果烷为母核的三萜类化合物的有效部位，得到10% -100%醇洗脱下来的流分为以去甲基齐墩果烷为母核的三萜类化合物的有效部位，即得粗总皂苷；b.将上述总提取液分别用氯仿或二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，收集得到氯仿或二氯甲烷萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物，正丁醇萃取物经非极性大孔树脂柱色谱处理，依次用水和醇梯度洗脱，各洗脱部位利用薄层色谱和HPLC技术(210nm检测)，筛选富集以去甲基齐墩果烷为母核的三萜类化合物的有效部位，得到10% -100%醇洗脱下来的流分为以去甲基齐墩果烷为母核的三萜类化合物的有效部位，即得粗总皂苷；(3)上述粗总皂苷采用正相硅胶柱色谱法分离，以不同比例的氯仿/二氯甲烷-甲醇-水，石油醚-丙酮或氯仿/ 二氯甲烷-甲醇作为洗脱剂洗脱，或反相柱色谱分离，或快速中低压反相柱色谱分离，以甲醇-水或乙醇-水梯度洗脱，减压回收溶剂，所得流分利用薄层色谱和HPLC技术(210nm检测)，筛选富集以去甲基齐墩果烷为母核的三萜类化合物的有效流分；(4)上述步骤(3)中所得有效流分经半制备或制备型HPLC色谱分离，以甲醇-水，乙腈-水或甲醇-乙腈-水为流动相洗脱，得到以去甲基齐墩果烷为母核的三萜类化合物。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的中药选自木通科植物或富含以去甲基齐墩果烷为母核的三萜类化合物的药材。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述步骤O)的醇为乙醇，其梯度洗脱浓度为10% -100%。
6.根据权利要求3所述的的制备方法，其特征在于步骤(2)大孔吸附树脂选自XAD-4， Diaion HP-20，D101、D102、D401，D1、D2、D3、D4，HPD-100,X_5、D_201，HPD-300，AB-8XAD-6、 XAD-7、XAD-8、HPD400、HPD 600 中的一种。
7.根据权利要求3所述的的制备方法，其特征在于步骤(3)为粗总皂苷经正相硅胶柱色谱法处理，洗脱溶剂为氯仿或二氯甲烷-甲醇-水、石油醚-丙酮、氯仿/ 二氯甲烷-甲醇，洗脱比例分别为50:1 0. 1-1:5:1,10:1-1:1,20:1-1 1的洗脱部位为以去甲基齐墩果烷为母核的三萜类化合物的流分。
8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于步骤(3)中反相色谱柱的填料为 RP-18, RP-8 或 RP-2。
9.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于步骤O)的乙酸乙酯萃取物和总皂苷经反相柱色谱或快速中低压柱色谱法处理，洗脱溶剂为1:10-10:1的甲醇-水或乙醇-水，混合比例1:9-9:1的流分为以去甲基齐墩果烷为母核的三萜类化合物的流分。
10.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于步骤(4)为步骤(3)中所得流分经高效液相色谱分离，流动相为甲醇-水、乙腈-水或甲醇-乙腈-7jC，从甲醇-水混合溶剂比例为1 10-10 1、乙腈-水混合溶剂比例为1 10-3 1、甲醇-乙腈-水混合溶剂比例为 11 10-4:4:2的流分中得到以降甲基齐墩果烷为母核的三萜类单体化合物。
11.降甲基齐墩果烷型三萜类化合物在制备抗肿瘤、抗炎、利尿治疗药物中的应用。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，涉及降甲基齐墩果烷型三萜类化合物及其制备方法和应用。本发明通过用水或不同浓度的有机溶剂对选定的中药进行提取，过滤，回收溶剂得浓缩液，浓缩液经大孔吸附树脂，用水和有机溶剂进行洗脱，回收溶剂得降甲基齐墩果烷型三萜类化合物，或采用萃取的方法从正丁醇层中得到粗总皂苷，再进一步使用正相硅胶柱、反相柱或快速中低压反相柱和制备高效液相系统对总皂苷进行分离和纯化，最终得到降甲基齐墩果烷型三萜类化合物。本方法所制备的降甲基齐墩果烷型三萜类成分纯度高，药理作用显著，方法简便、实用、廉价、安全、适合工业化生产。降甲基齐墩果烷型三萜类化合物可用于制备抗肿瘤、抗炎、利尿的药物。
文档编号C07J63/00GK102485741SQ20101057080
公开日2012年6月6日 申请日期2010年12月3日 优先权日2010年12月3日
发明者孟大利, 张辘辘, 李宁, 李铣, 耿剑亮, 陈超 申请人:沈阳药科大学