一种新的三萜类化合物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体设及从夏枯草的干燥成熟果穗中分离得到的一种 具有治疗神经胶质瘤作用的=祗类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002]夏枯草（拉下学名：Prunellavulgaris)，俗称牛对头，又称九重楼、铁色草、大头 花、棒柱头花、羊肠菜、鞍键草、六月干、棒头柱等；多年生草本植物。甸筒茎，节上长有须根。 生长在山沟水湿地或河岸两旁湿草丛、荒地、路旁，广泛分布于中国各地，W河南、安徽、江 苏、湖南等省为主要产地。临床上主要W其干燥成熟果穗入药，可W清火明目，能治目赤肿 痛、头痛等作用。
[0003] 夏枯草具有多种活性成分，主要有=祗类、酱体类、黄酬类、香豆素类等化合物。目 前，研究人员已经从不同种属的夏枯草中分离并鉴定出众多化学成分。
[0004] 夏枯草煎剂、水浸出液、乙醇-水浸出液及乙醇浸出液均可明显降低实验动物血 压，茎、叶、穗及全草均有降压作用，但穗的作用较明显；夏枯草水煎醇沉液小鼠腹腔注射， 有明显的抗炎作用；夏枯草煎剂在体外对频疾杆菌、伤寒杆菌、霍乱弧菌、大肠杆菌、变形杆 菌、葡萄球菌及人型结核杆菌均有一定的抑制作用。
[0005] 正常人体细胞分裂的速度是在一定范围内进行的，当机体受到外在因素的影响或 内在环境的失衡，肿瘤细胞的分裂周期或细胞调亡速度改变，肿瘤细胞数量持续增加，肿块 增大。因此，抑制肿瘤细胞的增殖作用是抗肿瘤的一条重要途径。目前，研究证明夏枯草提 取物具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供一种从夏枯草的干燥成熟果穗中分离得到的一种具有治疗 神经胶质瘤作用的=祗类化合物及其制备方法。
[0007] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得W实现的：
[0008] 具有下述结构式的化合物（I)，
[0009]
[0010] 所述的化合物（I)的制备方法，包含W下操作步骤：(a)将夏枯草的干燥成熟果 穗粉碎，用75~85 %乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油酸、乙酸乙 醋和水饱和的正下醇萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；化） 步骤（a)中乙酸乙醋萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙 醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（C)步骤化） 中75 %乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1、45:1、25:1、12:1和1:1的二 氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（C)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次 用体积比为20:1、12:1和5:1的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中 组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70%的甲醇水溶液等度洗 脱，收集8~10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I)。
[0011] 进一步地，步骤（a)中，用80%乙醇热回流提取，合并提取液。
[0012] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0013] 药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的载体。
[0014] 所述的化合物（I)在制备治疗神经胶质瘤的药物中的应用。
[0015] 所述的药物组合物在制备治疗神经胶质瘤的药物中的应用。
[0016] 本发明化合物用作药物时，可W直接使用，或者W药物组合物的形式使用。
[0017] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0018] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料W及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物W单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0019] 图1为化合物（I)结构式；
[0020] 图2为化合物（I)理论ECD值与实验ECD值比较；
[0021] 图3为化合物（I)处理后U251细胞桐调亡率的变化。
【具体实施方式】
[0022] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可W对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[002引实施例1:化合物（I)分离制备及结构确证
[0024] 试剂来源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲烧为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[00巧]制备方法：（a)夏枯草的干燥成熟果穗（IOkg)粉碎，用80 %乙醇热回流提取 (2化X3次），合并提取液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋0LX3 次）和水饱和的正下醇（3LX3次）萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物（398g) 和正下醇萃取物；(b)步骤（a)中乙酸乙醋萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用10%乙醇 洗脱8个柱体积，再用75 %乙醇洗脱10个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75% 乙醇洗脱物浸膏（163g) ; (C)步骤化）中75%乙醇洗脱浸膏用200-300目正相硅胶分离，依 次用体积比为85:1 (8个柱体积）、45:1 (8个柱体积）、25:1 (8个柱体积）、12:1 (10个柱体 积）和1:1巧个柱体积）的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（C)中组分 4 (49g)用200-300目正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1 (8个柱体积）、12:1 (10个 柱体积）和5:1巧个柱体积）的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤（d)中 组分2 (30g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶ODS-C18分离，用体积百分浓度为70 %的甲 醇水溶液等度洗脱，收集8~10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I) (143mg)。
[0026] 结构确证：HR-ESIMS显示[M+Na]+为m/z525. 3210,结合核磁特征可得分子式 为〔3化6〇6,不饱和度为8。核磁共振氨谱数据5h(卵m，DMS0-de，500MHz) 31，m)， H-l(2. 17,m)，H-3(4. 16,s)，H-5(l. 31，dd，J= 13. 5,4. 1)，H-6(l. 81，m)，H-6(l. 62,br，t，J= 14. 7)，H-7(3. 16,d，J= 6. 5)，H-ll(1.78,m)，H-ll(1.94,m)，H-12(1.49,m)， H-12(1.91，m)，H-15(1.65,m)，H-15(1.27,ddd，J= 12. 5，12. 5,5. 3)，H-16(1.24,m)， H-16 (2. 03,m)，H-17 (I. 53,m)，H-18 〇). 91，s)，H-19 〇). 97,s)，H-20 (I. 32,m)，H-21 (0. 85， d，J= 6. 6)，H-22 (I. 17,m)，H-22 (I. 35,m)，H-23 (I. 79,m)，H-23 (I. 97,m)，H-24 巧.16， tt，J= 7. 1,1.4)，H-26(1.61，s)，H-27(1.63,s)，H-28(0. 91，s)，H-29(0. 89,s);核磁 共振碳谱数据 5c(卵m，DMS0-de，125MHz) :42. 1(CH2，1-C)，208. 2(C，2-C)，81. 5(CH，3-C)， 44. 9 (C，4-C)，41. 5 (CH，5-C)，21. 2 (邸2, 6-C)，71. 4 (CH，7-C)，82.I(C，8-C)，97. 2 (C，9-C)， 37.