代谢综合征患病风险判定用标记肽及其用图
【专利说明】代谢综合征患病风险判定用标记化及其用途
[0001] 本申请是基于W下中国专利申请的分案申请：
[0002] 原案申请日：2012年12月27日
[0003] 原案【申请号】CN201280067112.8(PCT/肝2012/083889)
[0004] 原案申请名称:代谢综合征患病风险判定用标记肤及其用途
技术领域
[000引本发明设及一种代谢综合征患病风险判定用标记肤及其用途。
【背景技术】
[0006] 现在，日本代谢综合征患者正在增加，加上代谢综合征预备军，总人数已上升至 2000万人。代谢综合征严重时会引起动脉硬化，导致屯、肌梗塞或脑梗塞，因此早期发现和预 防很重要。W早期发现为目的，从2008年4月起特定体检(代谢综合症体检)被义务化。作为 代谢综合征的预防策略，可列举食品的摄取，包含强调预防肥胖和/或代谢综合征的特定保 健用食品的功能性食品已推向市场。
[0007] 另一方面，生物体中包含的作为疾病诊断指标的各种标记物被报道。例如，非专利 文献1中记载了小儿1型糖尿病患者唾液中作为富含脯氨酸的肤的P-B肤主导性下降。非专 利文献帥记载了 GIPR基因的多态性与糖耐量试验中2小时的血糖值有相关性。
[0008] 现有技术文献
[0009] 非专利文献
[0010] 非专利文献l:Mol Cell Proteomics.2010 Oct:9(10) :2099-108
[0011] 非专利文献2:NaUire Genet.2010 Feb:42(2) :142-148
【发明内容】
[0012] 发明要解决的课题
[0013] 但是，功能性食品的代谢综合征预防效果难W见到实效，有难W维持消费者继续 使用的积极性的问题。能作为代谢综合征指标的标记物至今还没有被发现。
[0014] 本发明的目的是提供能高精度判定生物体内代谢综合征患病风险的标记物。
[0015] 解决课题的手段
[0016] 本发明人经过反复深入研究，结果发现:P-B肤和GIPR的氨基酸序列的一部分作为 判定代谢综合征患病风险的标记肤是有用的；通过判定唾液等生物样品中该标记肤的量， 可W判定代谢综合征的患病风险。本发明是基于该认识的发明。
[0017] 本发明提供从下的山~〔12)。
[001引〔1)一种代谢综合征患病风险判定用标记肤，其选自下述(A)~(J)组成的组，
[0019] (A)包含序列号1的氨基酸序列中的连续10个W上的氨基酸残基的多肤；
[0020] (B)包含在序列号1的氨基酸序列中的连续10个W上的氨基酸残基中缺失、附加、 置换或插入了 1个或多个氨基酸的氨基酸序列，能够作为代谢综合征患病风险判定用标记 使用的多肤；
[0021] (C)包含与序列号1的氨基酸序列中的连续10个W上的氨基酸残基有90% W上同 源性的氨基酸序列，能够作为代谢综合征患病风险判定用标记使用的多肤；
[0022] (D)包含在序列号1的氨基酸序列中缺失、附加、置换或插入了 1个或多个氨基酸的 氨基酸序列中的连续10个W上的氨基酸残基，能够作为代谢综合征患病风险判定用标记使 用的多肤；
[0023] 化)包含与序列号1的氨基酸序列有90% W上同源性的氨基酸序列中的连续10个 W上的氨基酸残基，能够作为代谢综合征患病风险判定用标记使用的多肤；
[0024] (F)包含序列号2的氨基酸序列中的连续10个W上的氨基酸残基的多肤；
[0025] (G)包含在序列号2的氨基酸序列中的连续10个W上的氨基酸残基中缺失、附加、 置换或插入了 1个或多个氨基酸的氨基酸序列，能够作为代谢综合征患病风险判定用标记 使用的多肤；
[0026] 化)包含与序列号2的氨基酸序列中的连续10个W上的氨基酸残基有90% W上同 源性的氨基酸序列的多肤；
[0027] (I)包含在序列号2的氨基酸序列中缺失、附加、置换或插入了 1个或多个氨基酸的 氨基酸序列中的连续10个W上的氨基酸残基，能够作为代谢综合征患病风险判定用标记使 用的多肤；W及
[0028] (J)包含与序列号2的氨基酸序列有90% W上同源性的氨基酸序列中的连续10个 W上的氨基酸残基，能够作为代谢综合征患病风险判定用标记使用的多肤。
[0029] 〔2)-种抗体或适体，其结合于上述〔1)所述的代谢综合征患病风险判定用标记 肤。
[0030] 〔3)-种微阵列，其是将结合于上述〔1)所述的代谢综合征患病风险判定用标记肤 的抗体或适体固定于载体而成的。
[0031] 〔4) 一种代谢综合征患病风险的判定方法，其测定从受试者采集到的生物样品中 的上述〔1)所述的代谢综合征患病风险判定用标记肤的量或其有无。
[0032] 〔5)上述〔4)所述的判定方法，当从受试者采集到的生物样品中的上述〔1)所述的 代谢综合征患病风险判定用标记肤的量高于从健康者采集到的生物样品中的该量时，判定 代谢综合征患病风险高。
[0033] 〔6)上述〔4)所述的判定方法，当从受试者采集到的生物样品中的上述〔1)所述的 代谢综合征患病风险判定用标记肤的量等同于或高于从代谢综合征患者采集到的生物样 品中的该量时，判定代谢综合征患病风险高。
[0034] 〔7)如上述〔4)~〔6)的任一项所述的判定方法，通过从质谱分析法、使用〔2)所述 的抗体或适体的免疫测定法和使用〔3)所述的微阵列的免疫测定法中选出的方法，进行上 述〔1)所述的代谢综合征患病风险判定用标记肤的量的测定。
[0035] 〔8)如上述〔4)所述的判定方法，将巧巾W上的代谢综合征患病风险判定用标记肤 的组合作为变量进行多变量分析。
[0036] 〔9)如上述〔8)所述的判定方法，其多变量分析为逻辑回归分析。
[0037] 〔 10)如上述〔4)~〔9)的任一项所述的判定方法，其生物样品为唾液。
[0038] 〔11) 一种代谢综合征患病风险判定用试剂盒，其包含上述〔2)的抗体或适体、或者 上述〔3)的微阵列。
[0039] 〔 12)如上述〔11)所述的试剂盒，其进一步包含口香糖。
[0040] 本发明也可应用于代谢综合征的诊断。作为代谢综合征的诊断方法，例如可列举 W下的方式。
[0041] 〔13)-种代谢综合征诊断用标记肤，其选自由上述(A)~(J)组成的组。
[0042] 〔14) 一种抗体或适体，其结合于上述〔13)所述的代谢综合征诊断用标记肤。
[0043] 〔15)-种微阵列，其将结合于上述〔13)所述的代谢综合征诊断用标记肤的抗体或 适体固定于载体而成。
[0044] 〔16)-种代谢综合征的诊断方法，测定从受试者采集到的生物样品中上述〔13)所 述的代谢综合征患病诊断用标记肤的量或其有无。
[004引〔17)如上述〔16)所述的诊断方法，其受试者为人。
[0046] 〔 18)如上述〔16)或〔17)所述的诊断方法，当从受试者采集到的生物样品中上述 〔13)所述的代谢综合征诊断用标记肤的量高于从健康者采集到的生物样品中的该量时，判 定患有代谢综合征。
[0047] 〔19)如上述〔16)或〔17)所述的诊断方法，当从受试者采集到的生物样品中上述 〔13)所述的代谢综合征诊断用标记肤的量等同于或高于从代谢综合征患者采集到的生物 样品中的该量时，判定患有代谢综合征。
[004引〔20)如上述〔16)~〔19)的任一项所述的诊断方法，通过从质谱分析法、使用〔14) 所述的抗体或适体的免疫测定法和使用〔15)所述的微阵列的免疫测定法中选出的方法进 行上述〔13)所述的代谢综合征诊断用标记肤的量的测定。
[0049] 〔 21)如上述〔16)或〔17)所述的诊断方法，将巧巾W上的代谢综合征诊断用标记肤 的组合作为变量进行多变量分析。
[0050] 〔22)如上述〔21)所述的判定方法，其多变量分析为逻辑回归分析。
[0051 ] 〔 23)如上述〔16)~〔22)的任一项所述的诊断方法，其生物样品为唾液。
[0052] 〔24) -种代谢综合征诊断用试剂盒，其包含上述〔14)的抗体或适体、或者上述 〔1引的微阵列。
[0053] 〔 2引如上述〔24)所述的试剂盒，其进一步包含口香糖。
[0054] 发明的效果
[0055] 根据本发明，能够高精度判定代谢综合征的患病风险。若在医生诊断前利用本发 明判定代谢综合征的患病风险，则可W及早采取代谢综合征的预防策略，能对代谢综合征 的患病防范于未然。
【附图说明】
[0056] 图1是表示各受试组的P-B肤片段(1)2744的峰强度的图。
[0057] 图2是表示各受试组的GIPR肤片段的峰强度的图。
[0058] 图3是表示各受试组的P-B肤片段(2)23-54的峰强度的图。
[0059] 图4是表示各受试组的P-B肤片段(3)55-79的峰强度的图。
[0060] 图5是表示各受试组的P-B肤片段(4)23^79的峰强度的图。
[0061] 图6是表示各受试组的P-B肤片段(5)23^35的峰强度的图。
【具体实施方式】
[0062] 本发明设及代谢综合征的患病风险判定。本发明中的代谢综合征的患病风险的判 定是指进行受试者是否患有代谢综合征、是否已经治愈或者今后是否有患病可能性的判定 (评价、判断、区别、推测），或者进行受试者有无代谢综合征的患病风险的区别(分类）。患病 风险的判定是指受试者代谢综合征是否发病、是否已经治愈W及是否有今后发病的可能性 的判定。患病风险的判定精度是能够正确判定受试者中通常具有统计学意义的比例的受试 者的代谢综合征患病风险的程度，例如，能够正确判断50% W上、60 % W上、70 % W上、80% W上、85% W上、90% W上的受试者的代谢综合征患病风险的程度。本发明的判定方法作为 医生诊断前的预备判定方法是有用的。
[0063] 本发明中的代谢综合征是指W内脏脂肪型肥胖为原因而引起高血糖、高血压或高 血脂的状态。根据日本肥胖学会W日本人为对象规定的基准(2005年），是指符合实施例所 示的项目a)~d)的任意1项W上。
[0064] 本发明中的受试者通常为动物，优选人、试验动物（小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、兔子 等），更优选人。
[006引（1)本发明的标记肤
[0066] 本发明的代谢综合征患病风险判定用标记肤为选自上述(A)~(J)组成的组中的1 种W上。
[0067] 使用本发明的代谢综合征患病风险判定用标记肤判定代谢综合征患病风险时，可 W使用选自（A)~(J)的1种，但巧巾W上组合时能进行更高精度的判定。巧巾W上组合的情 况，优选选自（A)~化)组成的组的1种W上的肤和选自（F)~(J)组成的组的巧巾W上的肤的 组合。巧巾W上的组合的优选例，列举于项目（4)中。
[0068] (1-1)关于(A)~（C)
[0069] (A)~（C)中，序列号1的氨基酸序列是编码人P-B肤（Submaxillary gland 曰ndrogen-regul曰ted protein 3B、Proline-rich peptide P-B、Proline-rich protein 3)的氨基酸序列(全长79个氨基酸）dP-B肤是属于包含较多脯氨酸(P)的富含脯氨酸的蛋白 (PRP)家族的肤。
[0070] (A)~(C)中，序列号1的氨基酸序列中的连续10个W上的氨基酸残基，优选序列号 1的氨基酸序列中的连续11个W上的氨基酸残基，更优选连续12个W上的氨基酸残基，进一 步优选连续13个W上的氨基酸残基。没有特别的上限规定，可W是序列号1的氨基酸序列的 全长(79个残基)或超过该全长，例如100个W下、90个W下、80个W下、70个W下、60个W下。
[0071] (A)~(C)中，序列号1的氨基酸序列中的连续10个W上的氨基酸残基中，优选在10 个W上的氨基酸残基中包含氨基酸残基号27位~54位的至少一部分、23位~54位的至少一 部分、55位~79位的至少一部分、23位~79位的至少一部分、或23位~35位的至少一部分。 更优选10个W上的氨基酸残基包含序列号1的氨基酸残基号27位~54位中的连续10个W上 的氨基酸残基、23位~54位中的连续10个W上的氨基酸残基、55位~79位中的连续10个W 上的氨基酸残基、23位~79位中的连续10个W上的氨基酸残基、或23位~35位中的连续10 个W上的氨基酸残基。进一步优选10个W上的氨基酸残基为序列号1的氨基酸残基号27位 ~54位的氨基酸序列、23位~54位的氨基酸序列、55位~79位的氨基酸序列、23位~79位的 氨基酸序列、23位~35位的氨基酸序列或序列号1的氨基酸序列。
[0072] (A)只要是包含序列号1的氨基酸序列中的连续10个W上的氨基酸残基的多肤即 可，优选是由序列号1的氨基酸序列中的连续10个